Improved tissue repair in articular cartilage defects in vivo by rAAV-mediated overexpression of human fibroblast growth factor 2.

Therapeutic gene transfer into articular cartilage is a potential means to stimulate reparative activities in tissue lesions. We previously demonstrated that direct application of recombinant adeno-associated virus (rAAV) vectors to articular chondrocytes in their native matrix in situ as well as sites of tissue damage allowed for efficient and sustained reporter gene expression. Here we test the hypothesis that rAAV-mediated overexpression of fibroblast growth factor 2 (FGF-2), one candidate for enhancing the repair of cartilage lesions, would lead to the production of a biologically active factor that would facilitate the healing of articular cartilage defects. In vitro, FGF-2 production from an rAAV-delivered transgene was sufficient to stimulate chondrocyte proliferation over a prolonged period of time. In vivo, application of the therapeutic vector significantly improved the overall repair, filling, architecture, and cell morphology of osteochondral defects in rabbit knee joints. Differences in matrix synthesis were also observed, although not to the point of statistical significance. This process may further benefit from cosupplementation with other factors. These results provide a basis for rAAV application to sites of articular cartilage damage to deliver agents that promote tissue repair.     

几丁质凝胶与同种异体软骨细胞复合修复关节软骨缺损

背景:可注射性水凝胶-几丁质是国际上最新兴起的软骨组织工程材料,它提供了一类新的细胞固定机制.目的:实验拟观察采用同种异体软骨细胞复合几丁质凝胶修复关节软骨缺损的效果.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-11/2006-03在中国医科大学中心实验室完成.材料:2周龄新西兰白兔30只,体质量0.3kg左右,制备关节软骨缺损模型.方法:30只兔随机分为实验组:将体外培养的第2代软骨细胞与几丁质凝胶混合,最终细胞浓度为2.5×1011L-1,注射入所建立动物模型的关节囊内;软骨细胞悬液组:细胞浓度为2.5×1011L-1;对照组:不做任何处理.主要观察指标:分别于第4,8,12周取材,取膝关节外侧髁观察修复情况.苏木精-伊红染色后行大体、组织学及电镜检查.结果:①大体观察:各组动物膝关节未出现明显红肿等炎症迹象.②组织学观察:实验组术后12周时,缺损区可见新生透明样软骨组织,表面光滑,与周围软骨界面难以辨认.软骨细胞悬液组和空白对照组均未见明显修复.③透射电镜观察:实验组新生组织内软骨细胞呈圆形或椭圆形,胞质内含有丰富的粗面内质网、核糖体、高尔基复合体等细胞器;软骨细胞悬液组8-12周后新生组织以胶原纤维为主.空白对照组表现为大量胶原纤维.结论:同种异体软骨细胞复合几丁质凝胶修复关节软骨缺损效果明显,将几丁质凝胶作为移植载体是可行的.     

胰岛素样生长因子-Ⅰ对软骨细胞凋亡的抑制

目的:探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对软骨细胞增殖及白细胞介素-1(IL-1)诱导软骨细胞凋亡的影响,揭示其抗损伤作用机制,为关节软骨损伤治疗提供理论依据。方法:分离培养人胚胎关节软骨细胞,采用四氮甲基唑蓝(MTT)法测定不同含量软骨细胞增殖活性的变化,利用光镜、电镜、DNA电泳及流式细胞仪测定作为凋亡检测指标。结果:IGF-Ⅰ呈剂量依赖式促软骨细胞增殖,当IGF-Ⅰ含量达50μg/L时,促软骨细胞增殖作用达最大值。IL-1组光镜、电镜下可见典型的细胞凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳示特征性的DNA梯状条带,IGF-Ⅰ处理组未见明显凋亡征象。流式细胞仪检测发现,IGF-Ⅰ处理后软骨细胞凋亡率显著降低。结论:IGF-Ⅰ能促进软骨细胞增殖,对IL-1诱导的软骨细胞凋亡具有保护作用。     

多细胞生长因子联合作用软骨块修复关节软骨缺损的实验

目的:观察β-成纤维细胞生长因子、β1-转化生长因子和骨诱导形成蛋白-6多种细胞生长因子联合构建改良纤维蛋白胶支架软骨膜块修复关节软骨缺损的作用。方法:实验于2004-12/2005-06在南方医科大学附属珠江医院骨科医学中心及珠江医院中心实验室完成。采用健康新西兰大白兔49只,其中3周龄新西兰大白兔1只,余均为3个月龄左右。取3周龄新西兰大白兔自体软骨细胞进行体外培养后移植于改良纤维蛋白原支架上进行体外培养,分成生长因子培养组、单纯支架细胞组、单纯支架组及空白组;并将所培养的软骨细胞模块随机分布种植于48只3个月龄新西兰大白兔软骨缺损模型内,12只/组,进行动物体内培养2～12周;体外培养观察细胞生长情况,分别于体内培养2、6、12周处死大白兔,对软骨膜块进行组织学观察和组织工程学评分。结果:48只大白兔均进入结果分析。①体外培养:单纯细胞支架组细胞倍增时间为5.0d,多种细胞生长因子培养系统组为3.8d,两组细胞生长速度有明显差别。②体内培养:细胞生长因子组修复软骨与邻近软骨整合紧密、厚度较一致、细胞数量最多,具有良好的分泌基质能力;单纯细胞支架组细胞软骨与邻近软骨整合欠佳、厚度稍差、细胞数量较正常少,具有一定的分泌基质能力;单纯支架组为纤维组织覆盖;完全空白组内为一松散的纤维疤痕组织敷盖及部分炎性细胞的存在。组织工程学评分细胞生长因子组明显好于单纯细胞支架组[空白组(10.94±1.77)分,单纯支架组(9.38±1.89)分,细胞支架组(7.31±1.54)分,生长因子组(3.81±1.10)分,各组之间相比P<0.01]。多细胞生长因子用于构建软骨膜块修复关节软骨缺损模型可促进种子细胞增殖和组织工程软骨膜块的形成。结论:多细胞生长因子作用于改良纤维蛋白胶软骨膜块中可明显促进组织工程软骨膜块构建以及关节软骨缺损的修复。     

The reconstruction of defects in articular cartilage using autologous chondrocytes

A defect was artificially created on the joint surface of the distal ends of both femoral bones in 30 rabbits. After digestion of the cartilage fragment, the resulting cells were cultured in vitro and multiplied. The multiplied autologous chondrocytes were implanted at the point of the defect under a periosteum patch in the right knee (group I). The defect in the left knee was covered with periosteum alone (group II). The regenerates obtained in this way were evaluated at 4, 8, and 12 weeks after surgery, macroscopically for even coverage of the surface of the defect and the quantity of regenerate in proportion to the surrounding healthy tissue, microscopically with H + E stain for the nature of the prevalent tissue, integration with the environment, the presence of necrosis, the formation of isogenous groups of cells, and the formation of cracks.
In the macroscopic evaluations at weeks 4, 8, and 12, the presence of regenerate was discovered in group I in approximately the same quantities as in the surrounding cartilage. The group II joints were found to have less satisfactory repair of the lesion.
In the microscopic evaluation, group I was found histologically to have cartilage tissue well integrated with the environment and chondrocytes forming isogenous groups of cells. In group II most of the joints were found to have incomplete or no integration with the surrounding tissue, with necrosis and cracking.
The reconstruction of defects in articular cartilage using autologous chondrocytes and periosteum produced a regenerate macroscopically similar to the surrounding articular cartilage. The results obtained by regeneration of articular cartilage using autologous chondrocyte grafts and periosteum were superior to those obtained with isolated periosteum grafts.     

关节软骨缺损修复研究进展

各种原因引起的关节软骨缺损在临床工作中非常常见,而软骨损伤后修复能力有限,因此如何解决软骨缺损的修复有着重大意义。本文就关节软骨缺损的治疗方法作一综述,并指出存在和需要解决的问题。     

点种法移植软骨细胞修复关节软骨缺损

背景：生物性的重建虽能达到修复缺损,重建关节面的目的,但功能上难以与正常软骨一致。应用可降解的聚合物把移植的软骨细胞包埋起来进行移植,可能获得真正意义上的透明软骨。目的：观察以同种异体兔软骨细胞胶原包埋后,点种法移植软骨细胞修复关节软骨缺损的效果。方法：新西兰纯种兔制备膝关节全层软骨缺损后分为3组：分别进行胶原包埋软骨细胞点种法移植、单纯软骨细胞点种法移植和仅在大面积软骨缺损的软骨下钻孔。结果与结论：术后2,4,12,24周观察组织学动态变化,发现胶原包埋软骨细胞点种法移植组能获得透明软骨修复,而软骨细胞点种法组和单纯软骨下骨钻孔组缺损区仅为纤维组织填充,并且胶原包埋软骨细胞点种法移植组兔各期平均组织学和组织化学得分均高于其他两组（P〈0.01）。说明胶原包埋点种法软骨细胞移植能获得透明软骨修复,尤其适用于大面积软骨缺损。     

点种法移植软骨细胞修复关节软骨缺损

背景:生物性的重建虽能达到修复缺损,重建关节面的目的,但功能上难以与正常软骨一致。应用可降解的聚合物把移植的软骨细胞包埋起来进行移植,可能获得真正意义上的透明软骨。目的:观察以同种异体兔软骨细胞胶原包埋后,点种法移植软骨细胞修复关节软骨缺损的效果。方法:新西兰纯种兔制备膝关节全层软骨缺损后分为3组:分别进行胶原包埋软骨细胞点种法移植、单纯软骨细胞点种法移植和仅在大面积软骨缺损的软骨下钻孔。结果与结论:术后2,4,12,24周观察组织学动态变化,发现胶原包埋软骨细胞点种法移植组能获得透明软骨修复,而软骨细胞点种法组和单纯软骨下骨钻孔组缺损区仅为纤维组织填充,并且胶原包埋软骨细胞点种法移植组兔各期平均组织学和组织化学得分均高于其他两组(P<0.01)。说明胶原包埋点种法软骨细胞移植能获得透明软骨修复,尤其适用于大面积软骨缺损。     

转化生长因子β与关节软骨损伤的组织工程化修复

目的：各种生长因子与软骨细胞再生的关系引起了学者们的重视，并开始进行生长因子与关节软骨缺损修复的研究，总结转化生长因子β在关节软骨修复中的最新进展，为其在软骨组织工程中的应用提供理论依据。资料来源：应用计算机检索http：//www．ncbi．nlm．nih．gov／PubMed 1995—01／2004—12与关节软骨损伤的机制和类型、转化生长因子β、转化生长因子β与关节软骨修复的研究有关的文章。检索词“TGF—β，articular cartilage”限定语言种类为English，同时检索http：//www．zglckf．com及相关连接的数据库中1999—01／2004—12与转化生长因子β、关节软骨修复的研究有关的文章，检索词“转化生长因子β。关节软骨”，限定语言种类为中文。资料选择：对资料进行初审。并查看每篇文献后的引文。纳入标准：文章所述内容应为与转化生长因子β修复软骨损伤有关的文章。排除标准：重复研究及Meta分析类文章。未排除文章中是否应用随机设计、对照、盲法。资料提炼：收集到有关转化生长因子β以及转化生长因子β修复软骨损伤的文章95篇。15篇文献符合纳入标准。排除56篇内容陈旧的文章及24篇重复性研究。15篇文献中3篇涉及关节软骨损伤的机制和类型。6篇涉及转化生长因子β的生物学功能，6篇涉及转化生长因子β与关节软骨损伤修复。资料综合：①超过关节软骨生理耐受限度的撞击、剪切、扭曲和摩擦等外力都可致关节软骨损伤，关节软骨缺损分为部分厚度和全层关节软骨缺损两种类型，关节软骨自身修复能力很差。②转化生长因子β是多种功能的多肽生长因子，通过自分泌和旁分泌途径均能产生转化生长因子β，并与靶细胞的细胞膜上转化生长因子口受体结合，开始信息传递。③转化生长因子β通过刺激骨、软骨细胞合成胶原和基质蛋白，快速形成细胞外基质，达到其促进骨、软骨损伤修复的作用。结论：转化生长因子β在关节软骨损伤的组织工程化修复中发挥重要作用。转化生长因子β通过发挥软骨诱导作用，促进干细胞分化为软骨；或促进软骨特异性基质的合成，如Ⅱ型胶原、蛋白多糖。在当前各种软骨缺损修复方法都存在缺陷的情况下，转化生长因子β作为具有良好软骨诱导作用的细胞因子，将在软骨组织工程中有广阔应用前景。     

组织工程化软骨细胞和骨髓间充质干细胞用于修复同种异体关节软骨缺损

背景:关节软骨几乎没有自身修复的能力,目前临床大多采用自体或异体软骨移植修复、软骨膜或骨膜移植修复、软骨细胞移植修复。由于自体软骨来源有限,异体软骨又存在慢性免疫排斥反应,最终可能导致预后不佳;软骨膜或骨膜移植修复的软骨易于退化,导致修复效果不佳。目的:总结组织工程化软骨细胞、骨髓间充质干细胞及两者共培养对同种异体软骨缺损修复作用的研究现状。方法:应用计算机检索PubMed数据库及中国期刊网全文数据库1994-01/2012-01有关组织工程化软骨细胞和骨髓间充质干细胞用于修复同种异体关节软骨缺损方面的文章,英文检索词为"cartilage defect,allograft,chondrocyte,mesenchymal stem cells,bone marrow mesenchymal stem cells",中文检索词为"软骨缺损,同种异体移植,软骨细胞,骨髓间充质干细胞"。排除重复性及非中英文语种研究,共保留35篇文献进行综述。结果与结论:随着体外细胞培养方法的不断改进,现已能够把软骨细胞从坚韧的软骨中分离出来,并获得大量高纯度的软骨细胞并繁殖出新生软骨细胞。软骨细胞培养增殖能力低,传代培养容易引起老化和去分化;而成体骨髓中骨髓间充质干细胞含量少,随传代次数的增多成软骨潜能明显降低。骨髓间充质干细胞和软骨细胞共培养,两种细胞相互促进增殖和分化,作为种子细胞可减少软骨细胞增殖传代次数并节省软骨细胞数量,与组织工程支架材料复合能有效修复关节软骨缺损。     

转化生长因子β与关节软骨损伤的组织工程化修复

目的各种生长因子与软骨细胞再生的关系引起了学者们的重视,并开始进行生长因子与关节软骨缺损修复的研究,总结转化生长因子β在关节软骨修复中的最新进展,为其在软骨组织工程中的应用提供理论依据.资料来源应用计算机检索http∥www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed 1995-01/2004-12与关节软骨损伤的机制和类型、转化生长因子β、转化生长因子β与关节软骨修复的研究有关的文章,检索词"TGF-β,articular cartilage"限定语言种类为English,同时检索http∥www.zglckf.com及相关连接的数据库中1999-01/2004-12与转化生长因子β、关节软骨修复的研究有关的文章,检索词"转化生长因子β,关节软骨",限定语言种类为中文.资料选择对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文.纳入标准文章所述内容应为与转化生长因子β修复软骨损伤有关的文章.排除标准重复研究及Meta分析类文章.未排除文章中是否应用随机设计、对照、盲法.资料提炼收集到有关转化生长因子β以及转化生长因子β修复软骨损伤的文章95篇.15篇文献符合纳入标准.排除56篇内容陈旧的文章及24篇重复性研究.15篇文献中3篇涉及关节软骨损伤的机制和类型,6篇涉及转化生长因子β的生物学功能,6篇涉及转化生长因子β与关节软骨损伤修复.资料综合①超过关节软骨生理耐受限度的撞击、剪切、扭曲和摩擦等外力都可致关节软骨损伤,关节软骨缺损分为部分厚度和全层关节软骨缺损两种类型,关节软骨自身修复能力很差.②转化生长因子β是多种功能的多肽生长因子,通过自分泌和旁分泌途径均能产生转化生长因子β,并与靶细胞的细胞膜上转化生长因子β受体结合,开始信息传递.③转化生长因子β通过刺激骨、软骨细胞合成胶原和基质蛋白,快速形成细胞外基质,达到其促进骨、软骨损伤修复的作用.结论转化生长因子β在关节软骨损伤的组织工程化修复中发挥重要作用.转化生长因子β通过发挥软骨诱导作用,促进干细胞分化为软骨;或促进软骨特异性基质的合成,如Ⅱ型胶原、蛋白多糖.在当前各种软骨缺损修复方法都存在缺陷的情况下,转化生长因子β作为具有良好软骨诱导作用的细胞因子,将在软骨组织工程中有广阔应用前景.     

Differential effects of insulin-like growth factor I and growth hormone on developmental stages of rat growth plate chondrocytes in vivo.

Skeletal growth depends upon enchondral ossification in growth plate cartilage, within which chondrocytes undergo well defined stages of maturation. We infused IGF-I or growth hormone (GH), two key regulators of skeletal growth, into hypophysectomized rats and compared their effects on growth plate chondrocyte differentiation using qualitative and quantitative autoradiography, stereology, and incident light fluorescence microscopy. Stem cell cycle time was shortened from 50 to 15 and 8 d after treatment with IGF-I and GH, respectively. Proliferating cell cycle time decreased from 11 to 4.5 and 3 d, and duration of the hypertrophic phase decreased from 6 to 4 and 2.8 d. Average matrix volume per cell at each differentiation stage was similar for normal, hormone-treated, and untreated hypophysectomized groups. Mean cell volume and cell height were significantly reduced by hypophysectomy at the proliferative and hypertrophic stages, but were restored to physiological values by IGF-I and GH. In contrast, cell productivity, i.e., increases in cell volume, height, and matrix production per unit of time, did not reach normal values with either IGF-I or GH, and this parameter was inversely proportional to cell cycle time or phase duration. IGF-I and GH are thus capable of stimulating growth plate chondrocytes at all stages of differentiation, albeit to variable degrees with respect to individual cell activities. Although it is generally accepted that GH acts at both the stem and proliferating phases of chondrocyte differentiation, our data represent the first evidence in vivo that IGF-I is also capable of stimulating stem cells.     

关节软骨缺损修复的基因治疗实验人胰岛素样生长因子Ⅰ基因转染软骨细胞及其在软骨细胞中的表达

目的探讨胰岛素样生长因子Ⅰ基因转染人软骨细胞的可能性及其在软骨细胞中的表达,并初步判断转基因细胞的生物学功能变化.方法实验于2002-07/2003-06在中山大学附属第二医院医学研究中心完成.①构建pcDNA3.1-胰岛素样生长因子I/GS质粒,将构建质粒在大肠杆菌DH10B中大量扩增后,抽提纯化质粒,并对质粒进行测序鉴定.②将鉴定的质粒用阳离子脂质体转染人关节软骨细胞,通过逆转录-聚合酶链反应、Westren-blot等方法检测胰岛素样生长因子Ⅰ基因在人关节软骨细胞中的表达.③分别将同代软骨细胞与转基因细胞的培养液、软骨细胞与转基因细胞裂解液和二甲基亚甲蓝共孵育后,检测各混合液的吸光度,以此判断同代软骨细胞、转基因细胞、软骨细胞培养液、转基因细胞培养液中的蛋白多糖含量.结果①质粒鉴定结果质粒抽提纯化后电泳可见3条DNA条带,符合质粒的电泳图谱;质粒的测序结果和胰岛素样生长因子Ⅰ基因序列完全吻合.②胰岛素样生长因子Ⅰ基因在软骨细胞中的表达质粒转染软骨细胞后,反转录-聚合酶链反应能见到298 bp的胰岛素样生长因子ⅠmRNA片断的表达;Western-blot可见7.6 ku的胰岛素样生长因子Ⅰ蛋白表达条带.③转胰岛素样生长因子Ⅰ基因对软骨细胞分泌蛋白多糖的影响转基因软骨细胞裂解液和同代的软骨细胞裂解液的蛋白多糖含量分别是(5.23±0.62)mg/L和(2.47±0.31)mg/L,两组比较,差异有显著性意义(t=2.88,P＜0.05);转基因软骨细胞培养液和同代非转染软骨细胞培养液中的蛋白多糖含量分别为(9.92±1.04)mg/L和(4.56±0.51)mg/L,两组比较,差异有显著性意义(t=6.47,P＜0.05).结论胰岛素样生长因子Ⅰ基因转染人关节软骨细胞后能在软骨细胞中表达,并能促进软骨细胞分泌软骨基质蛋白多糖,具有促DNA合成和维持软骨细胞表型稳定的能力.转胰岛素样生长因子Ⅰ基因软骨细胞的研究为体外软骨组织工程和关节软骨病的基因治疗提供了直接的实验依据.     

生物材料复合支架与运动性关节软骨缺损的修复

目的：探讨复合支架的组织工程学特性及其修复关节软骨缺损的性能评价。方法：以＂关节软骨、生物材料、工程软骨、复合材料、复合支架＂为中文关键词,以＂tissue enginneering,articularcartilage,scaffold material＂为英文关键词,采用计算机检索中国期刊全文数据库、PubMed数据库（1993-01/2010-11）相关文章。纳入复合支架材料-细胞复合物修复关节软骨损伤相关的文章,排除重复研究或Meta分析类文章。结果：共入选18篇文章进入结果分析。复合支架是当前软骨组织工程中应用较多的支架,它是将具有互补特征的生物相容性可降解支架,按一定比例和方式组合,设计出结构与性能优化的复合支架。较单一支架材料具有显著优越性,具有更好的生物相容性和一定强度的韧性,较好的孔隙和机械强度。复合支架的制备不仅包括同一类生物材料的复合,还包括不同类别生物材料之间的交叉复合。可分为纯天然支架材料、纯人工支架材料以及天然与人工支架材料的复合等3类。结论：复合支架使生物材料具有互补特性,一定程度上满足了理想生物支架材料应具有的综合特点,但目前很多研究仍处于实验阶段,还有一些问题有待于解决,如不同材料的复合比例、复合工艺等。     

生物材料复合支架与运动性关节软骨缺损的修复

目的:探讨复合支架的组织工程学特性及其修复关节软骨缺损的性能评价.方法:以"关节软骨、生物材料、工程软骨、复合材料、复合支架"为中文关键词,以" tissue enginneering,articular cartilage,scaffold material"为英文关键词,采用计算机检索中国期刊全文数据库、PubMed数据库(1993-01/2010-11)相关文章.纳入复合支架材料-细胞复合物修复关节软骨损伤相关的文章,排除重复研究或Meta分析类文章.结果:共入选18篇文章进入结果分析.复合支架是当前软骨组织工程中应用较多的支架,它是将具有互补特征的生物相容性可降解支架,按一定比例和方式组合,设计出结构与性能优化的复合支架.较单一支架材料具有显著优越性,具有更好的生物相容性和一定强度的韧性,较好的孔隙和机械强度.复合支架的制备不仅包括同一类生物材料的复合,还包括不同类别生物材料之间的交叉复合.可分为纯天然支架材料、纯人工支架材料以及天然与人工支架材料的复合等3类.结论:复合支架使生物材料具有互补特性,一定程度上满足了理想生物支架材料应具有的综合特点,但目前很多研究仍处于实验阶段,还有一些问题有待于解决,如不同材料的复合比例、复合工艺等.     

Mecasermin (recombinant human insulin-like growth factor I)

Growth hormone (GH) exercises its growth effects by stimulating insulin-like growth factor I (IGF-I) synthesis in the liver (endocrine IGF-I) and by inducing chondrocyte differentiation/replication and local production of IGF-I (paracrine/autocrine IGF-I). Injectable recombinant human (rh)IGF-I (mecasermin) has been available for nearly 20 years for treatment of the rare instances of GH insensitivity caused by GH receptor defects or GH-inhibiting antibodies. Full restoration of normal growth, as occurs with rhGH replacement of GH deficiency, is not seen, presumably because only the endocrine deficiency is addressed. RhIGF-I has also been effective as an insulin-sensitizing agent in severe insulin-resistant conditions. Although the insulin-sensitizing effect may benefit both type 1 and type 2 diabetes, there are no ongoing clinical trials because of concern about risk of retinopathy and other complications. Promotion of rhIGF-I for treatment of idiopathic short stature has been intensive, with neither data nor rationale suggesting that there might be a better response than has been documented with rhGH. Other applications that have either been considered or are undergoing clinical trial are based on the ubiquitous tissue-building properties of IGF-I and include chronic liver disease, cystic fibrosis, wound healing, AIDS muscle wasting, burns, osteoporosis, Crohn’s disease, anorexia nervosa, Werner syndrome, X-linked severe combined immunodeficiency, Alzheimer’s disease, muscular dystrophy, amyotrophic lateral sclerosis, hearing loss prevention, spinal cord injury, cardiovascular protection, and prevention of retinopathy of prematurity. The most frequent side effect is hypoglycemia, which is readily controlled by administration with meals. Other common adverse effects involve hyperplasia of lymphoid tissue, which may require tonsillectomy/adenoidectomy, accumulation of body fat, and coarsening of facies. The anti-apoptotic properties of IGF-I are implicated in cancer pathogenesis—a concern for long-term therapy. It is unlikely that mecasermin will be useful beyond the orphan indications of severe insulin resistance and GH insensitivity.     

骨形态发生蛋白与碱性成纤维细胞生长因子联合修复软骨缺损的效果评价

背景:多种细胞生长因子在骨软骨代谢过程中的协同作用越来越受到重视,但目前复合细胞生长因子修复软骨缺损报道较少,且修复效果尚无定论。目的:探讨骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子联合应用修复关节软骨缺损的效果。方法:24只日本大耳白兔建立骨软骨缺损模型后随机等分为4组,对照组缺损处仅填塞明胶海绵,其他3组在对照组基础上,缺损处分别注射骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白、碱性成纤维细胞生长因子。结果与结论:大体观察显示联合应用2种细胞因子后,软骨缺损面基本修复但稍不平整,单独使用其中1种细胞因子缺损面未完全修复,对照组无明显修复。联合应用2种细胞因子缺损部位软骨细胞数多于其他3组(P<0.05),且Ⅱ型胶原免疫组化染色深于其他组。提示联合应用骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子可以促进关节软骨损伤的修复,疗效优于单独应用骨形态发生蛋白或碱性成纤维细胞生长因子。     

骨髓基质细胞源性软骨细胞复合聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物修复兔关节软骨缺损

背景:作为软骨组织工程的基质材料在体内降解过快或过慢,影响组织再生及塑形改建,是长期困扰学者们的难题之一.目的:在体外将骨髓基质细胞扩增、诱导为软骨细胞后,探讨以聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物为载体修复兔关节软骨缺损的可行性.设计、时间及地点:同体对比观察实验,于2002-06/2008-06分别在解放军第四军医大学全军骨科研究所及解放军空军总医院中心实验室完成.材料:选取2月龄新西兰兔36只,自双侧股骨转子处抽取骨髓4-6 mL,行原代及传代培养,传代培养时培养液中含骨形态发生蛋白2(100 μg/L),培养瓶底预涂高分子透明质酸诱导为软骨细胞.调整第3代细胞浓度为2.0×10~(10)L~(-1),与聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物共培养24 h,即制成聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物-细胞复合物.方法:在36只兔髌股关节股骨髁部造成直径4mm,深达髓腔的缺损,在右侧36个膝关节植入聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物-细胞复合物,为实验组,左侧18膝植入聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物,为单纯载体组,另18膝造成缺损后作为空白对照.主要观察指标:术后4,8.12,24周取材,行大体及组织学观察,组织学评分.结果:单纯载体组与空白对照组在各时间点大体及组织学表现相似,故一并描述,统称为对照组.24周时实验组缺损内充填白色半透明新生软骨组织,色泽与正常软骨相似,质韧,表面平整,与正常软骨界限消失,表面细胞平行于关节面,深层细胞排列紊乱,有柱状排列的趋势,基质异染广泛,软骨下骨形成及潮线恢复正常,与周围正常软骨连接良好.对照组缺损边缘细胞呈团块状增生,底部为纤维组织.组织学评分经统计学分析,24,12周分别与8,4周时比较差异具有显著性意义(P<0.01),各时间点实验组与对照组比较差异具有显著性意义(P<0.01).结论:用骨形态发生蛋白2和高分子透明质酸成功地在体外将骨髓基质细胞诱导为软骨细胞;聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物在新生软骨形成的同时,逐渐降解吸收,是组织工程修复关节软骨缺损适宜的支架材料.     

同种异体骨软骨移植修复关节软骨缺损的实验与应用

目的:关节软骨多处于人体骨骼的重要功能部位,在临床上由于各种原因所导致的关节软骨缺损或变性坏死很常见。目前,使损伤的骨软骨修复至正常骨软骨,许多学者进行了有益的探索。将国内外同种异体骨软骨移植的研究和应用进展,从关节软骨的基础研究、同种异体骨软骨移植的发展概况、取材制备、保存、免疫原性、临床应用等方面做以分析。资料来源:应用计算机检索Medline1980-01/2004-05关于同种异体骨软骨移植的文章,检索词为“Osteochondralallograft”,限定文章语言种类为“English”;同时计算机检索CNKI1994-01/2004-05关于异体骨软骨移植的文章,检索词为“骨软骨,移植,软骨缺损”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,纳入标准:①有关骨软骨保存方法的实验研究。②有关同种异体骨软骨移植的基础及临床研究。排除标准:文献中重复研究。未排除非随机、对照、盲法文章。资料提炼:共收集到59篇相关文献,追朔法查找文献12篇,29篇符合纳入标准,排除30篇文献,其中8篇重复研究,22篇为异体骨软骨移植在口腔颌面部整容中的应用。资料综合:29篇文章中6篇通过实验方法进行异体骨软骨保存方法的比较研究。10篇通过动物实验或临床研究,以对照研究方法证实同种异体骨软骨移植修复关节软骨缺损的可行性,与自体骨软骨移植相比较的优越性。13篇通过基础或临床研究,证实软骨自身修复能力有限,异体骨软骨移植后的免疫排斥反映对移植的影响。结论:在探索应用何种材料能更有效地治疗关节软骨缺损的过程中,人们一直把希望寄托在比自体骨软骨更理想的替代材料上,在众多的替代材料中,同种异体骨软骨有其独特的优势和应用价值,尤其对大块及特定形态结构部位缺损的替代作用。随着同种异体骨软骨移植的免疫排斥、软骨保存、软骨退变等问题的进一步解决,必将使关节软骨缺损的治疗学产生革命性的发展。