正反义人端粒酶RNA组分(hTR)逆转录病毒真核表达载体的构建

端粒的功能是完成染色体末端的复制,防止染色体免遭融合、重组和降解,其长度的维持是细胞永生化及恶性转化的重要分子基础,而调控端粒长度的关键分子则是端粒酶.端粒酶的重新表达在细胞永生化及癌变过程中起着重要的作用.端粒酶RNA(hTR) 作为端粒酶的组成部分决定着端粒的重复序列并参与端粒酶的活化.本研究将反义端粒酶RNA基因插入到逆转录病毒质粒载体PLXSN中,构建真核表达重组质粒PLXSN-hTR,以期重组质粒表达反义端粒酶RNA,从复制、转录、及翻译三个水平发挥作用,调控肿瘤细胞的端粒长度和端粒酶的活性,抑制或逆转肿瘤细胞的恶性表型,为研究和探索基因治疗肿瘤奠定基础.     

新型肿瘤生物标记端粒酶研究进展

端粒酶是一种能延长端粒末端的核糖核蛋白酶,主要成分是RNA和蛋白质,含有引物特异识别位点,能以自身RNA为模板,合成端粒DNA并加到染色体末端,使端粒延长,从而延长细胞的寿命甚至使其永生化.自从1989年Morin[1]首次在人的癌细胞系中发现端粒酶以来,肿瘤细胞永生化的"端粒-端粒酶"假说已为越来越多的研究结果所证实.以端粒酶为靶点研究开发新的抗肿瘤药,以端粒酶活性水平作为肿瘤诊断的生物标记和愈后指标,越来越受到人们的关注.     

端粒酶与肿瘤关系的研究进展

端粒(telomereTLM)、端粒酶(telomeraseTLMA)与肿瘤的关系近年来受到国际医学界的高度重视。永生性(Immortality)的获得是恶性肿瘤细胞的一个显著生物学特性,也是肿瘤组织具有无限增殖能力的基础,而肿瘤细胞无限增殖能力的维持则依赖于端粒酶的激活。大量的研究表明,在各?..     

端粒酶——肿瘤治疗的新靶点

细胞端粒ＤＮＡ序列的丢失和细胞的寿命控制有关，端粒酶的激活可以维持端粒的长度并使细胞获得无限增殖能力，从而逃避死亡，肿瘤细胞为维持其生长可能也依赖于端粒酶激活，本文就对端粒酶认识的基础上阐述它们和肿瘤的关系，并探讨了端粒酶和为一个新的肿瘤治疗靶点的可行性。     

端粒和端粒酶与肿瘤干细胞的研究现状

目的:总结国内外对端粒、端粒酶与肿瘤起源、肿瘤干细胞的病理研究现状。方法:应用检索MED-LINE及CHKD期刊全文数据库检索系统,以"端粒、端粒酶和肿瘤干细胞"为关键词,检索1997-2008年有关文献。纳入标准:端粒、端粒酶与肿瘤干细胞的论著性文章。根据标准,纳入分析24篇参考文献。结果:端粒酶激活和端粒稳定对肿瘤干细胞演进是必需的,端粒酶激活是肿瘤干细胞自我更新和不定向分化的必要条件,端粒的动力学代表肿瘤干细胞恶性来源和有丝分裂历史,分析肿瘤干细胞端粒长度,端粒酶活性和细胞遗传学特性有助于揭示肿瘤干细胞起源和肿瘤形成历史,从而深化对肿瘤病理的认识,为恶性肿瘤治疗提供依据。结论:端粒和端粒酶在肿瘤干细胞中表达,是消灭肿瘤理想的靶标,有待进一步研究总结。     

端粒酶与肿瘤的研究现状

 端粒酶 -维持端粒功能的酶 ,已成为对肿瘤药物研究及开发极有吸引力的靶。人的大多数体细胞端粒酶活性被抑制 ,且随着细胞的分裂端粒进行性缩短。大多数人的肿瘤细胞表达端粒酶且它们的端粒相对稳定 ,导致肿瘤细胞的永生化。理论上如果肿瘤细胞的端粒酶活性被抑制 ,那么这种细胞将停止增殖。尽管过去的几年里对端粒酶进行了密集性的研究 ,仍几乎没有强有力的端粒酶抑制剂被确认 ,也没有进入临床试验。端粒酶是否愧对于早期人们对它的期望呢 ?回答是否定的 ,Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ[1] 这位 195 8年从原生动物中发现端粒酶的学者 ,明确指出在过去的几年里端粒酶的研究取得了很大的进步 ,在细胞内搞清楚了端粒酶的作用机制和功能、端粒酶催化亚单位ＴＥＲＴ的克隆、新的端粒酶抑制研究和开发、端粒酶疫苗的发现、端粒酶活性在肿瘤临床诊断和预后的应用等 ,显示了端粒酶与肿瘤的研究以及运用的广泛前景。1　端粒、端粒酶与肿瘤的发生和发展　　“端粒 端粒酶假说”认为端粒酶的再激活与细胞的永生化和恶性肿瘤的发生和发展密切相关。染色体末端的端粒ＤＮＡ进行性的缩短是限制人细胞寿命的先决条件。相对的 ,端粒酶的激活 ,合成端粒的ＤＮＡ被认为是细胞永生化和癌症...     

端粒及端粒酶与肿瘤增殖

染色质末端端粒的丢失可阻止细胞的增殖。端粒酶的活化又可以自身ＲＮＡ为模板合成端粒ＤＮＡ加到染色质末端上，阻止端粒的丢失，使细胞发展成为永生化细胞或无限增殖的癌细胞。本文主要介绍端粒及端粒酶与肿瘤的形成及发展的关系。     

端粒酶研究进展及肿瘤学意义

端粒是真核线性染色体的末端结构，端粒酶是合成端粒DNA重复序列的反转录DNA合成酶。目前检测端粒酶方法分二大类；端粒重复序列延伸法和端粒重复序列扩增法及其改良方法。人体细胞端粒酶一般附件阴性，而大部分恶性肿瘤细胞阳性。端粒酶可能是研究治疗肿瘤的理想靶点。检测端粒酶活性不但是进一步研究的手段，而且有一定的诊断及预后意义。     

端粒酶研究进展及肿瘤学意义

端粒是真核线性染色体的末端结构,端粒酶是合成端粒DNA重复序列的反转录DNA合成酶。目前检测端粒酶方法分二大类;端粒重复序列延伸法和端粒重复序列扩增法及其改良方法。人体细胞端粒酶一般附件阴性,而大部分恶性肿瘤细胞阳性。端粒酶可能是研究治疗肿瘤的理想靶点。检测端粒酶活性不但是进一步研究的手段,而且有一定的诊断及预后意义。     

端粒,端粒酶的研究及其在妇科肿瘤中的应用

自从 198 5年Ｇｒｅｉｄｅｒ等从四膜虫中发现了端粒酶以来 ,人们渐对其结构 ,功能及重要性有了较深的了解。特别是 1989年Ｍｏｒｉｎ首先在人宫颈癌Ｈｅｌａ细胞中检测到端粒酶活性后 ,越来越多的学者报道称端粒酶与恶性肿瘤相关。因此端粒酶作为广谱的肿瘤特异性标记物用以肿瘤的诊断 ,以及其抑制剂用以肿瘤的治疗已成了近来肿瘤分子生物学领域中最热门的研究课题之一。本文就端粒 ,端粒酶的研究及其在妇科肿瘤中的应用作一综述。一、端粒与端粒酶(一 )端粒和端粒酶结构和功能　端粒 (Ｔｅｌｏｍｅｒｅ)是真核细胞内由ＤＮＡ序列和结合蛋…     

端粒酶逆转录酶及其基因表达与调控

人染色体端粒由串联排列的 TTAGGG重复片段所构成。正常体细胞端粒序列不能完全复制，因而随着细胞分裂将导致端粒重复片段的丢失，使端粒缩短，最终导致细胞老化死亡 [1]。目前研究认为，恶性肿瘤增殖失控的关键在于端粒酶的激活，永生化细胞和恶性肿瘤细胞通过激活端粒酶活性来维持端粒长度并阻止细胞死亡 [2]。端粒酶是一个核糖核蛋白复合体，由 450 bp的 RNA和至少 2个蛋白亚单位组成。许多学者发现，大部分肿瘤细胞表达端粒酶活性，而正常细胞大都没有端粒酶活性表达，因而端粒酶已成为新的肿瘤标志物，也可能成为肿瘤基因治疗新的突破口 [3]。目前，有关端粒酶的研究已广泛开展，尤其是对端粒酶活性表达起限速作用的端粒酶逆转录酶的研究已成为热点，对其表达和调控作用亦有许多新的认识。本文仅将端粒酶逆转录酶的表达及其调控研究作一综述。     

端粒酶活性在消化道肿瘤组织中的异常表达及其检测

1989年Morin等首先在人宫颈癌细胞系(Hela细胞)发现活化的端粒酶,1994年Kim首创高度敏感特异的PCR—TRAP法检测端粒酶活性,自此,端粒酶与肿瘤关系的研究方兴未艾。越来越多的研究表明,端粒酶与肿瘤的发生发展关系密切。利用端粒酶作为肿瘤的特异性标志物用于诊断和评估预后,是当前肿瘤研究的新热点之一。本文拟介绍端粒酶与消化道肿瘤的最新研究进展,并对其在消化道肿瘤的检测及其应用作如下综述。1 端粒及端粒酶结构、功能及其调控 端粒是真核细胞线形染色体末端的一种特殊结     

端粒酶在妊娠绒毛及滋养细胞疾病中的表达及其临床意义

端粒是真核生物细胞染色体末端的一种特殊结构,含有许多简单重复的DNA序列及相关蛋白。端粒的长度决定细胞的寿命,随着细胞分裂的进行,端粒的长度逐渐缩短,当端粒缩短到一定程度即不能维持染色体的稳定,使细胞最终死亡。端粒酶是维持端粒长度的逆转录酶,以自身RNA为模板,反转录合成端粒重复单元,加到染色体末端以防止端粒缩短,使细胞具有继续增殖的能力,引起细胞的永生化。而永生化是细胞恶变的必经步骤,因此端粒酶与肿瘤     

端粒与端粒酶研究在肺癌中的临床应用前景与挑战

肺癌是世界范围内发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一。端粒和端粒酶与肺癌的发生发展密切相关。虽然端粒酶可能不是导致细胞癌变的直接原因,但在维持端粒长度和肿瘤生长方面起到关键作用。包括肺癌在内的大部分肿瘤端粒长度缩短。端粒长度的变化与肺癌发生风险相关,并可能成为肺癌的治疗靶标和预测指标。针对端粒和端粒酶信号通路的靶向治疗药物正在探索中,以端粒酶抑制剂为代表的小分子药物有希望应用于肺癌的临床治疗中。但是,人们对于端粒和端粒酶的研究还远远不够,端粒长度维持的旁路作用机制可能是下一步需要深入研究的方向。     

端粒酶亚单位调控端粒酶活性与肿瘤细胞凋亡的研究

 作为维持染色体两端端粒 (Telomere)长度的端粒酶 (Telomerase)与细胞永生化、恶性变有密切关系。在人体绝大多数恶性肿瘤细胞中端粒酶活性增高 ,而在正常体细胞中一般为阴性。端粒酶活性受包括 5种端粒酶亚单位在内的体内外多种因素的调控。端粒酶活性下调 ,可诱导恶性肿瘤细胞出现凋亡。这为以端粒酶为靶点的肿瘤基因治疗提供了新突破点。近年发现 ,端粒酶活性下调诱导的凋亡调控机制涉及体内更为复杂的因素。本文就该领域内最新研究作一综述。     

端粒酶的分子生物学研究进展

端粒酶的活性往往伴随着培养细胞的永生化 ,也是肿瘤细胞中的一个普遍的特征。自Ｃｏｕｎｔｅｒ等人在人类卵巢癌中检出端粒酶活性和Ｋｉｍ创建了端粒酶活性的ＴＲＡＰ ＰＣＲ检测方法以来 ,端粒酶的研究已成为人类肿瘤诊断和治疗的新热点。1　端粒酶的发现真核细胞线状染色体更具生物学优势 :能快速重组、分配 ,从而导致生物物种的多样性。然而线状染色体比环状染色体更不稳定 ,为了解决这一问题 ,真核生物染色体在进化过程中形成了一种包含ＤＮＡ和蛋白质的结构———端粒 ,在染色体末端形成“帽状”结构从而保护染色体不被降解和末端融合…     

端粒酶与衰老及肿瘤

端粒是染色体末端由DNA和蛋白质组成的特异结构,是细胞的“分裂时钟”。端粒酶是维持端粒长度的反转录DNA聚合酶,在细胞的增殖、衰老及永生化和癌变中起重要作用。端粒酶的调节可为抗衰老、抗肿瘤的研究提供一条新途径。本文就端粒、端粒酶及其与衰老和肿瘤的关系作一综述...     

泌尿系统疾病端粒酶活性及临床意义

目的　检测泌尿系统疾病尿脱落细胞和相关肿瘤组织端粒酶活性 ,了解泌尿系统肿瘤发生可能的分子生物学基础。方法　应用TRAP -PCRELISA法对 5 4例膀胱癌 ,15例肾癌肿瘤组织和尿脱落细胞及非癌患者和尿脱落细胞进行端粒酶活性测定。结果　 90 2 % (5 0 /5 4)膀胱癌组织 ,93 3% (14/15 )肾癌组织端粒酶呈阳性 ,相应尿脱落细胞端粒酶阳性率分别为 90 1%、2 0 0 % ,其它疾病和尿脱落细胞均未检出端粒酶。结论　端粒酶活性与肿瘤的发生有关 ,并可为某些肿瘤的早期诊断与治疗提供可靠的指标与新的线索。     

端锚聚合酶1 在肿瘤演进及治疗领域研究进展

由于端粒酶是永生化细胞和绝大多数肿瘤细胞持续分裂增殖的必要条件，因此阻滞端粒酶表达及其活性成为肿瘤治疗的作用靶点，但研究证实仅阻滞端粒酶的活性还不能达到抗肿瘤的理想效果。近期研究发现了肿瘤端粒长度的正调控因子-Tankyrase 1（TANK 1），它与端粒延长的抑制因子—端粒结合蛋白Ⅰ（TRF 1）共同作用使端粒维持在一特定长度，保证了肿瘤细胞持续生长繁殖。TANK 1 的发现成为联系端粒酶与TRF 1 作用的桥梁，由于该酶是调控端粒复制中最为明确的一环，因此成为细胞癌变、肿瘤演进及癌症靶标治疗的新热点。现对TANK 1 作为分子靶器在肿瘤发生、演进中的作用机制及其在肿瘤治疗领域中的研究进展进行综述。