微量核酸样品的双重限制性荧光标记技术

目的 采用双重限制性荧光标记技术(double restriction fluorescent labeling,DRFL),标记微量核酸样品,探索提高基因芯片用于病原体检测的灵敏度.方法 以限制性显示技术处理SARS-CoV核酸样品,分别采用传统限制性荧光标记技术(直接采用荧光标记的通用引物标记)和双重限制性荧光标记技术(荧光标记的通用引物和荧光标记的dNTP的双重荧光标记)进行处理,并进一步与基因芯片进行杂交,在同等条件下进行杂交、清洗和进行基因芯片的扫描检测.通过对杂交结果的分析,比较两种标记方法的标记效果.结果 以DRFL方法标记SARS基因片段,其荧光强度均值提高了3.5835倍,但互相对应的每个探针之间的荧光信号提高程度存在差异.结论 DRFL技术能有效地提高单位分子标记片段的荧光强度值,并进一步提高了检测的灵敏度,可用于微量病原体核酸样品的基因芯片检测.     

微量核酸样品的双重限制性荧光标记技术

目的采用双重限制性荧光标记技术(doub le restriction fluorescent labeling,DRFL)标记微量核酸样品,提高基因芯片用于病原体检测的灵敏度。方法以限制性显示技术处理SARS-CoV核酸样品,分别采用传统限制性荧光标记技术(直接采用荧光标记的通用引物标记)和双重限制性荧光标记技术(荧光标记的通用引物和荧光标记的dNTP的双重荧光标记)标记,进一步在同等条件下与基因芯片进行杂交、清洗和芯片扫描检测。通过对杂交结果的分析,比较2种标记方法的标记效果。结果以DRFL方法标记SARS基因片段,其荧光强度均值比传统荧光标记方法提高了3.5835倍。结论DRFL技术有效地提高单位分子标记片段的荧光强度值,提高了检测的灵敏度,可用于微量病原体核酸样品的基因芯片检测。     

免疫组化双重标记联合特殊染色技术应用于胶质瘤血管新生的分析

正胶质瘤是好发于成人的原发性中枢神经系统肿瘤,约占恶性脑肿瘤的81%[1]。血管新生化是胶质瘤,尤其是胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)的突出组织病理学特征,且与其侵袭性和临床不良预后密切相关[2]。因此,探寻胶质瘤中特殊的促血管新生因子,对于研发阻断肿瘤源性血管发生的精准治疗策略,改善这类血管化肿瘤的临床疗效,显得尤为重要。本实验联合应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)双重标记和过碘酸雪夫(periodic acid-Schiff,PAS)     

大鼠视交叉上核至视上核的纤维联系—免疫组化双重标记法研究

为了观察视交叉上核（SCN）的传出纤维，本实验采用兔抗VIP及AVP血清作为一抗对大鼠下丘脑SCN与视上核（SON）进行免疫组化双重染色研究，结果观察到在SCN尾段，位于腹侧份的VIP样神经纤维走向SON，而在SON的腹侧份的VIP样神经纤维走向SON，而在SON的腹侧份及背侧份可见VIP样纤维分布，并明显可见该纤维包绕AVP样神经元周围,由此本推测在SCN至SON之间可能存在直接的纤维联系，它可能是体内血浆和神经垂体的加压素（VP），催化素（OT）水平呈现24小时节律的又一原因。     

鲤鱼脊髓的上行通路与脑至脊髓的下降通路

应用赖氨酸钴复合物顺行、逆行标记方法,分别研究了鲤鱼脊髓上升的和下降至脊髓的纤维联系。把赖氮酸钴复合物注入脊髓第1——3节段,然后分别观察标记纤维与标记细胞。标记纤维主要在三叉神经脊剩束、网状结构、迷走神经运动核和半圆隆起。发现标记细胞主要于脊髓的前角和后角、脑的迷走神经运动核、网状结构和内耳侧线区等部位。本文与其他鱼类、其他脊椎动物及哺乳类动物进行了比较。     

免疫荧光双重染色的激光共聚焦显微镜样品制备及观察

目的 详尽介绍免疫荧光双标染色方法,为激光共聚焦显微镜观察提供理想的样品.方法 大鼠腹腔注射Brdu,40g/L多聚甲醛灌注固定,取脑组织冰冻切片,用抗GFAP多克隆抗体孵育和FITC荧光标记二抗染色,再用抗Brdu单克隆抗体孵育和Cy3荧光标记二抗染色,在激光共聚焦显微镜下连续断层扫描,图像叠加.结果 清晰可见处于增殖期(S期)细胞胞核呈红色荧光,星形胶质细胞胞质呈绿色荧光.结论 影响免疫荧光双重标记样品效果的环节和因素很多,其中最重要的因素是2个一抗的搭配和协调.     

环境监测中的化学发光探测

环境监测中的化学发光探测ＥｕｇｅｎｅＨＪＭＪａｎｓｅｎ，ＲｉｊｋＨＶａｎｄｅｎＢｅｒｇ（ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈａｎｄＥｎｖｉｒｏｍｅｎｔａｌＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，...     

^125I标记激素与蛋白质类物质的标记率测定方法探讨

我们在研究＾１２５Ｉ标记胰岛素、超氧化和岐化酶（ＳＯＤ）和牛血清白蛋白（ＢＳＡ）等一些激素、蛋白质类物质的同时，对４种测定方法进行实验比对，提出采用简单、方便、省时的ＴＣＡ沉淀法测定标记率较为适宜。标记率是评价一个标记方法好坏和标记条件选择是否恰当的重要指标＾［＾１］，通过它还能较为简便地计算出被标记物的比活度＾［２］。通常，＾１２５Ｉ标记物的标记率测定采用淋洗分离时标记产品峰计数率与诸峰计数率之     

量子点荧光标记应用于生物学的研究进展

量子点标记作为一种新型的荧光标记方法，应用于生物学领域的研究有其不可比拟的优势，短短数年在生物化学、细胞生物学、免疫化学等学科的研究中显示了它的巨大发展潜力。本就量子点优于传统有机荧光染料的性质、量子点标记近年来在生物领域中的研究进展和应用前景作一阐述。     

关于辐射损伤的生物学指标研究进展

本综述了近年来国内外在辐射损伤中遗传研究方面的有关内容,重点介绍了经典遗传标记淋巴细胞微核、染色体畸变以及ＤＮＡ标记淋巴细胞ｈｐｒｔ基因、Ｔ细胞受体、人白细胞抗原Ａ和红细胞的镰刀贫血症血红蛋白Ｓ,血型糖蛋白Ａ等基因方面的现状和展望。     

关于辐射损伤的生物学指标研究进展

本文综述了近年来国内外在辐射损伤中遗传研究方面的有关内容 ,重点介绍了经典遗传标记淋巴细胞微核、染色体畸变以及 DNA标记淋巴细胞 hprt基因、T细胞受体、人白细胞抗原 A和红细胞的镰刀贫血症血红蛋白 S,血型糖蛋白 A等基因方面的现状和展望     

CFSE标记技术的研究进展

羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE)标记细胞与流式细胞仪相结合的技术在免疫学领域应用越来越广泛。该技术已经由淋巴细胞扩展到应用于肿瘤细胞、干细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)甚至是细菌的研究,由检测细胞增殖拓展到体内示踪等研究。此外,对于该项技术的热点还集中在对其数据的分析、与传统方法的比较以及标记的方法的研究。尤其是对细胞增殖的结果的定量分析已经成为生物数学领域的一个热点,也为机制研究提供了更丰富的信息。羧基荧光素乙酰乙酸具有动态检测细胞增殖动力学,在单细胞水平上供信息等优势,有替代传统方法(如~3H掺入法、MTT法等)的趋势。     

表皮干细胞鉴别与分离的研究进展

近年来，对干细胞的深入研究揭示了表皮主要由三种细胞成分组成：表皮干细胞(epidermal stem cells，ESCs)及其子代细胞——短暂增殖(transit amplifying，TA)细胞、有丝分裂后(post—mitotic differentiating，PMD)细胞。但由于尚未找到能够有效区别ESCs与TA细胞的方法，限制了以ESCs的分离及体外培养为基础的研究工作与临床应用。本就ESCs的鉴别、分离方法的研究进展进行综述。     

标记免疫分析的质量控制和标准化(二)

二标记免疫分析的标准化问题几十年来,免疫学从多克隆抗体发展到单克隆抗体的应用,标记方法从放射性核素、酶、胶体金标记的显色反应到荧光、化学发光标记测量荧光或化学发光等,形成了“标记免疫分析”这一独立学科。在应用方面,不断更新的商业化试剂盒,同时由于标记免疫分析的     

量子点荧光标记应用于生物学的研究进展

量子点标记作为一种新型的荧光标记方法,应用于生物学领域的研究有其不可比拟的优势,短短数年在生物化学、细胞生物学、免疫化学等学科的研究中显示了它的巨大发展潜力。本文就量子点优于传统有机荧光染料的性质、量子点标记近年来在生物领域中的研究进展和应用前景作一阐述。     

一种用于微阵列分析的通用引物U2联合标记方法

目的报告一种新的用于微阵列研究的荧光标记技术：通用引物U2联合标记技术(UPL);比较UPL与随机引物等其他标记方法的效率和可重复性。方法分别用4种标记方法标记流感病毒RNA样品,与流感病毒寡核苷酸检测芯片杂交后,用Spss10．0软件对杂交结果进行分析。结果UPL方法在标记物杂交的荧光强度、信噪比、探针真阳性率和可重复性等方面均高于随机引物逆转录掺入标记法,而与其他两种RD标记方法相当,但标记过程相对更加简单。结论UPL方法是一种新颖而有效的标记方法,在微阵列技术研究方面具有广泛的应用价值。     

胶体金标记术的原理与应用

胶体金标记术是Faulk同Taylor在1971年创立的。10多年来胶体金标记术由于其有许多优点而在免疫细胞化学方面受到了重视与广泛应用。为了使这一新技术得到推广与发展。本文将收集到的资料及点滴经验汇总如下。一、胶体金的特性胶体金是指金的一种存在状态,即金的粒子大小约为1—100nm之间,存在于溶液中。胶体金属悬胶液,为带负电的胶体。胶金粒同其它胶一样也具有双层电结构,中心为许多金分子构成的胶金核,其外为AuO_2~-及部分反离子形成的吸附层。胶金核同吸附层放在一起叫胶金粒。把     

表皮干细胞鉴别与分离的研究进展

近年来,对干细胞的深入研究揭示了表皮主要由三种细胞成分组成表皮干细胞(epidermalstemcells熏ESCs)及其子代细胞——短暂增殖(transitamplifying熏TA)细胞、有丝分裂后(post鄄mitoticdiffer鄄entiating熏PMD)细胞。但由于尚未找到能够有效区别ESCs与TA细胞的方法,限制了以ESCs的分离及体外培养为基础的研究工作与临床应用。本文就ESCs的鉴别、分离方法的研究进展进行综述。     

B细胞的双重抗原识别

经补体降解产物调理后的外来抗原可能结合于B细胞抗原识别受体及CR2-CD19复合物.这种情况下CD19长的胞浆内尾端使B细胞抗原识别受体具有酪氨酸激酶活性并为其提供与细胞信号传导有关的分子的结合位点.作者在文章中提出B细胞抗原识别受体和CR2-CD19在细胞内、外的协同作用保证了抗原识别及细胞内产生的信号的放大.