肝癌组合单抗─阿霉素结合物的体外细胞毒实验

本文为探索克服肿瘤抗原表达异质性对肝癌导向治疗效果影响的可能途径，将本室制备的两种特异性高、亲和力强，针对肝癌细胞膜不同抗原决定簇的单克隆抗体ＨＡｂ１８和ＨＡｂ２５以葡聚糖（Ｄｅｘ）作为连接臂与阿霉素（ＡＤＲ）偶合，制备出ＨＡｂ１８－ＡＤＲ和ＨＡｂ２５－ＡＤＲ结合物，并将二者组合起来联合应用进行体外细胞毒实验，其对靶肿瘤细胞人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１的杀伤效应显著强于单用其中任何一种抗体与ＡＤＲ的结合物（Ｐ＜０．０１）．说明组合单抗联合应用是克服肿瘤细胞抗原表达异质性对导向治疗的影响，增加免疫结合物与肿瘤细胞结合位点，提高导向治疗效果的一种有效途径．     

两株新的抗肝细胞肝癌单克隆抗体的制备及特异性鉴定

以外科手术切除的肝癌标本制备的细胞悬液和新建株的肝癌细胞为免疫原。籍多重免疫途经致敢ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经２０次融合，从近１０，０００个融合孔中，筛选出两株（ＨＡｂ２５，ＨＡｂ２７）肝癌单克隆抗体，在９４例肝癌、１４１例其他肝病组织，２６种正常组织，１２９例各组织系统的肝外恶性肿瘤组织上做了交叉反应。除ＨＡｂ２７与毛细胆管有弱的反应外，两株抗体与肝癌组织结合的阳性率高（８３．１５％，８５．１１％），仅与少数消化道肿瘤有交叉．１３１Ⅰ标记抗体进行放射免疫显像，最佳显像时间为７２ｈ，瘤／肝、瘤／血比值分别为５．０７～６．８４、１．２６～２．１３，可望为肝癌导向药物研究，提供新的载体。     

抗人肝癌单克隆抗体HCD78的制备及免疫组化定位

原发性肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，具有发病隐袭、病死率高的特点，早期诊断对预后的意义重大。单克隆抗体（ｍＡｂ）技术问世后，人们试图通过应用抗肝癌ｍＡｂ提高肝癌的早期诊断率。然而目前获得的抗肝癌ｍＡｂ识别的抗原都不是肝癌特异性抗原，而且由于肿瘤异质性的存在，又使其临床应用受到一定影响。本研究应用自建的人肝癌细胞株ＨＣ１０８免疫小鼠，制备了１株能稳定分泌抗人肝癌ｍＡｂ的杂交瘤细胞。免疫组化证实，该ｍＡｂ具有较好的特异性，其识别的肿瘤抗原主要定位于细胞膜。现将建株过程和初步鉴定的结果报道如下：１…     

两种不同抗体双弹头标记物导向治疗肝癌的比较

在动物实验的基础上，比较了抗ＡＦＰ单克隆抗体（ｍＡｂ）和抗ＡＦＰ多克隆抗体（ｐＡｂ）两种不同抗体双弹头标记物在肝癌患者体内的生物代谢情况。结果显示，两种抗体标记物的血浆清除半衰期均在２４ｈ左右，ｍＡｂ标记物的清除较ｐＡｂ标记物略慢。尿清除的半衰期，ｍＡｂ标记物约为１２０ｈ，而ｐＡｂ标记物则约为１８ｈ，表明二者的体内生物代谢不同，疗效可能不一。     

三株肝癌单克隆抗体的Western免疫印迹实验

Ａ１０、Ｅ５和Ｆ１１是３株抗人肝细胞癌的单克隆抗体（ｍＡｂ）。经ＡＢＣ免疫组化染色法证实，这些ｍＡｂ针对的抗原在８例肝癌组织中呈高表达，Ａ１０、Ｅ５和Ｆ１１分别为６／８，５／８和６／８；而在肝炎中呈低表达，分别为２／１１、０／１１和１／１１［１］。故这几株ｍＡｂ所针对的相应抗原可能是肝癌相关抗原。作为筛选肝癌细胞表达文库的候选抗体，通过Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹反应可了解其相应抗原的一些性质及确定ｍＡｂ对变性抗原的识别能力。１　材料和方法１－１　细胞株和ｍＡｂ　肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１与ＨＨＣＣ…     

两株新的抗肝细胞肝癌单克隆抗体的制备及特异性鉴定

以外科手术切除的肝癌标本制备的细胞悬液和新建株的肝癌细胞为免疫原。籍多免疫除经致敢ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经２０次融合，从近１０，０００个融合孔中，筛选出两株（ＨＡＢ２５，ＨＡｂ２７）肝癌单克隆抗体，在９４例肝癌１４１例其他肝病组织，２６种正常组织，１２９例各组织系统的肝外恶性肿瘤组织上做了交叉反应，除ＨＡｂ２７与毛细胆管有弱的反应外，两株抗体与肝癌细胞结合的阳性率高（８３．１５％，８５．１１％），仅与     

标记抗人肝癌单克隆抗体SPIO对荷瘤裸鼠的定位诊断作用

目的：探讨标记抗人肝癌单克隆抗体超顺磁性氧化铁粒子（ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ）对荷瘤裸鼠模型的诊断作用。材料和方法：用过碘酸盐法将Ｈａｂ－１８ 抗人肝癌单抗标记到ＳＰＩＯ粒子;建立裸鼠载瘤模型（ｎ＝１２ 只）。结果：实验组（ｎ＝ ８）从尾静脉注入０．３ ｍ ｇ Ｆｅ／２０ｇ 的ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ,给药后２４ 小时成像观察到裸鼠瘤结均有选择性信号下降,对照组（ｎ＝ ４）在注射ＬｇＧ－ＳＰＩＯ后未见明显信号改变。结论：ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ磁共振免疫成像对肝癌的早期定性诊断有较高价值。     

~（131）I标记肝癌单克隆抗体HAb18F（ab＇）_2的NBS法研究

本文研究了以溴代琥珀酰亚胺（ＮＢＳ）为氧化剂的（１３１）Ⅰ标记肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）２的方法。探讨了反应体系中ＮＢＳ的用量，Ｆ（ａｈ’）２的用量及Ｎａ（１３１）Ⅰ活度三个因素对标记率的影响，并从反应机理上予以解释。     

人肝癌细胞GHC－3表面抗原性质的研究

以人肝庙细胞株ＧＨＣ－３细胞为抗原，免疫制备获得抗人肝癌细胞膜单克隆抗体ＨＬＭ＿３（ＨＬＭ＿３－ＭｃＡｂ）．应用ＨＬＭ＿３－ＭｃＡｂ研究分析肝瘤细胞表面抗原性质及其对ＧＨＣ－３细胞的生物效应，结果表明：ＨＬＭ＿３－ＭｃＡｂ可抑制已铺展的ＧＨＣ－３细胞生长；辣根过氧化物酶结合法探测受ＭｃＡｂ作用的细胞ＣｏｎＡ受体和ｒａｓ瘤基因产物ｐ２１．反应均明显减弱；交叉－阻断测试抗原及ＣｏｎＡ受体发现，无论是细胞先与ＭｃＡｂ结合后再与ＣｏｎＡ反应，抑或先与ＣｏｎＡ反应后再与ＭｃＡｂ结合，都显示ＧＨＣ－３细胞的膜抗原与腹表面的ＣｏｎＡ受体有密切关系。进一步作糖化学分析，从高效薄层色谱（ＨＰＴＬＣ）区带和扫描初步显示为不完全分化的中性糖脂。     

^131I标记肝癌单克隆抗体HAb18F（ab‘）2的NBS法研究

本方研究了以溴代琥珀酰亚胺为氧化剂的＾１３１Ｉ标记肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ‘）２的方法，探讨了反应体系中ＮＢＳ的用量，Ｆ（ａｂ’）２的用量及Ｎａ＾１３１Ｉ活度三个因素对标记率的影响，并从反应机理上予以解释。     

抗乙型肝炎病毒X蛋白单克隆抗体导向治疗肝癌

抗乙型肝炎病毒Ｘ蛋白单克隆抗体导向治疗肝癌上海医科大学肝癌研究所为探讨抗乙型肝炎病毒Ｘ蛋白（抗ＨＢｘ蛋白）单克隆抗体（单抗）作为原发性肝癌（ＨＣＣ）导向治疗载体的可能性。方法用分子量为１７０００乙型肝炎病毒Ｘ蛋白免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，制备抗ＨＢｘ单克...     

肝癌相关抗原基因的筛选和阳性克隆的序列分析

克隆肿瘤相关抗原基因,从分子水平上研究其结构与功能,对于深入了解肿瘤的发生机制很有帮助。本研究利用自制的肝癌特异性单克隆抗体（ｍＡｂ） Ｆ１１,筛选肝癌细胞ｃＤＮＡ表达文库,获得１个阳性克隆,并对其进行了序列测定及同源性比较分析。１材料和方法１． １材料抗肝癌ｍＡｂ Ｆ１１［１］为本室制备、纯化。肝癌细胞ｃＤＮＡ表达文库（载体为 λｇｔ１１）由本室构建。测序用试剂ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ ＢｉｇＤｙｅＴＭ Ｔｅｒｍｉｎａｔｏｒ为ＰＥ公司产品。测序仪为ＡＢＩ ＰＲＩＳＭＴＭ ３３７ＸＬ型。１．２方法克隆的筛选按…     

抗胶质瘤单克隆抗体SZ－39及其阿霉素交联物在靶细胞内化作用的研究

抗胶质瘤单克隆抗体ＳＺ－３９及其阿霉素交联物在靶细胞内化作用的研究兰青，黄强（苏州医学院附属二院脑外科，苏州２１５００４）抗原抗体复合物在靶细胞的内化作用对单克隆抗体（ＭＡｂ）导向治疗效果具有决定意义，单抗导向治疗所携弹头种类往往由此而决定。一般认为...     

胃癌单克隆抗体偶合物导向化疗的实验研究

胃癌单克隆抗体偶合物导向化疗的实验研究祝金泉王崇文张昆和谢勇胡伟（江西医学院消化内科研究所，南昌３３０００６）本文采用Ｂ淋巴细胞杂交瘤方法制备的鼠抗人胃癌单克隆抗体（代号８７１１Ｃ１ＭｃＡｂ），经盐析和ＤＥＡＥ－５２离子交换层析法纯化后，以Ｉｏｄｏｇ...     

两种免疫方法用于制备抗肝癌NMPmAb的比较

核基质（ｎｕｃｌｅａｒｍａｔｒｉｘ，ＮＭ）是真核细胞核内的非组蛋白网架结构，与肿瘤的发生密切相关〔１〕。肿瘤细胞具有特异性核基质蛋白（ｎｕｃｌｅａｒｍａｔｒｉｘｐｒｏｔｅｉｎ，ＮＭＰ），因此，制备肿瘤特异性ＮＭＰ的ｍＡｂ具备潜在的应用价值〔２〕。但ＮＭＰ的提取较为复杂，且得率较低，对抗ＮＭＰｍＡｂ的制备带来一定的难度。为提高抗ＮＭＰｍＡｂ制备的成功率，本文用两种免疫方法制备抗肝癌ＮＭＰ的ｍＡｂ，发现用肝癌细胞纯核做基础免疫效果较好。１材料和方法１．１主要材料肝癌组织由本校肿瘤医院提供。正常肝组…     

rHuIFN-γ对裸鼠异种移植物人结肠癌导向治疗的促进作用

本文应用１３１Ｉ标记的抗人结肠癌单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｓｃ３Ａ及其Ｆ（ａｂ′）２作为导向治疗剂，加ｒＨｕＩＦＮ－γ治疗荷人结肠癌裸鼠获得明显的抑瘤效果。结果表明，ｒＨｕＩＦＮ－γ＋１３１Ｉ－Ｓｃ３ＡｍＡｂ或１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２的抑瘤作用分别为８４．５％和９１．９％，明显优于ＰＢＳ＋１３１Ｉ－Ｓｃ３ＡｍＡｂ或１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２治疗组（分别为６９．６％或６０．５％）；Ｆ（ａｂ′）２组优于完整的ｍＡｂ组，提示ＩＦＮ－γ具有良好的导向辅佐作用。上述结果可为临床应用提供重要的实验依据。     

酸性同功铁蛋白单克隆抗体免疫学特性的研究

目的：探讨抗不同组织酸性同功铁蛋白（ＡＩＦ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的免疫学特性。方法：和聚焦层析技术分别从人胎盘和原发性肝癌组织中分离出低ｐＩ值的ＡＩＦ,常规制备ＭｃＡｂ和进行免疫组织化学测定。结果：共筛先到５株抗人胎盘ＡＩＦ和２株抗人原发性肝癌（ＰＨＣ）ＡＩＦ）的ＭｃＡｂ即２ｆ８、４ｇ７、４ｇ８、５ｃ３、７ａ９和４ｃ９、４ｅ２。抗ＡＩＦ ＭｃＡｂｓ ５ｃ３和４ｅ２作用于同一抗株决定簇。使用ＭｃＡ     

~（131）I－抗AFPMcAb－MMC“双弹头”导向药物对荷瘤裸鼠的放射免疫显像和治疗

应用双弹头免疫导向治疗药物１３１Ｉ－抗ＡＦＰＭｃＡｂＭＭＣ进行荷人原发性肝癌棵鼠的体内放射免疫显像（ＲＩＩ）及放射免疫治疗（ＲＩＴ）研究。药物经腹腔给予后，第３ｄ即能选择性的定位于肿瘤；第１３ｄ抑瘤率高达８１．５％，远高于单纯１３１Ｉ－抗ＡＦＰＭｃＡｂ组和ＭＭＣ组（分别为２９．６％和１１．１％），提示该药物对人原发性肝癌细胞的亲和力好、杀伤力强，为其进入临床治疗提供了依据。     

rHuIFN—γ对裸鼠异种植物人结肠癌导向治疗的促？…

本文应用＾１３１Ｉ标记的抗人结肠癌单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｓｃ３Ａ及其Ｆ（ａｂ′）２作为导向治疗剂，加ｒＨｕＩＦＮ－γ治疗荷人结肠癌裸鼠获得明显的抑瘤效果。结果表明，ｒＨｕＩＦＮ－γ＋＾１３１Ｉ－Ｓｃ３Ａ ｍＡｂ或＾１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２的抑瘤作用分别为８４．５％和９１．９％，明显优于ＰＢＳ＋＾１３１Ｉ－Ｓｃ３Ａ ｍＡｂ或＾１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２治疗组（分别为６９．６％或６０．５％）；Ｆ（ａｂ′）     

抗HEL抗独特型抗体制备及酶功能模拟初探

根据Ｊｅｒｎｅ的免疫网络理论，具有抗原内影像的抗独特型抗体（Ａｂ２或Ａｂ２β）可以模拟抗原诱发机体产生免疫应答，而这种模拟作用多属分子构象上的模拟。本研究选择鸡卵清溶菌酶（ＨＢＬ）作为研究模型进行了这方面的探索。通过对制备的鼠抗ＨＥＬ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ１）分析，发现Ｂ７、Ｂ１０是针对ＨＥＬ活性中心的，Ｂ８是远离活性中心的。用这三株ＭｃＡｂ１作免疫原分别免疫同系ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，按常规方法进行融合、筛选，共获得７１株稳定分泌Ａｂ２的单克隆抗体（ＭｃＡｂ２）细胞株，每组选二株ＭｃＡｂ２进行鉴定。…