侵袭性垂体腺瘤与免疫相关分子的研究进展

侵袭性垂体腺瘤的诊断和治疗一直是神经外科的一个难题.近年来研究发现侵袭性垂体腺瘤与一些免疫相关分子关系密切.CD105对于侵袭性垂体腺瘤的侵袭性生长和丰富血供有很好标记作用;CD147在侵袭性垂体腺瘤中的表达明显升高,可以作为肿瘤侵袭性的一项指标;CD31在复发性垂体腺瘤中的表达强度明显升高,对侵袭性垂体腺瘤的预后评估及治疗方案的选择有重要指导意义;CD44s与血CD44V6浓度值与侵袭性垂体腺瘤密切相关.IL-17及其受体、IL-4Roα、IL-13Rα1、IL-2Rγ、IL-1Rα、IL-6、IL-2及趋化因子受体CXCR4都与垂体腺瘤侵袭性关系密切.这些免疫相关分子为侵袭性垂体腺瘤的诊断和治疗提供了更广阔的前景.     

外周血可溶性CD44V6测定用于侵袭性垂体腺瘤辅助性诊断

目的探讨测定外周血可溶性细胞粘附分子CD44变异体6sCD44v6)含量对侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤诊断的价值。方法酶联免疫吸附法测定68例侵袭性垂体腺瘤和100例非侵袭性垂体腺瘤患者外周血sCD44v6的含量。结果侵袭性垂体微腺瘤、大腺瘤和巨大腺瘤患者血清sCD44v6含量分别为44.63±7.21、(34.53±6.41)和(26.34±4.95)ng/ml,非侵袭性垂体微腺瘤、大腺瘤和巨大腺瘤患者分别为60.78±9.61、(57.78±10.00)和(37.22±5.17)ng/ml,均较对照组(68.73±6.00)ng/ml低(P<0.05)。侵袭性垂体微腺瘤、大腺瘤、巨大腺瘤患者外周血sCD44v6含量均较对应的非侵袭性垂体微腺瘤、大腺瘤、巨大腺瘤患者降低,组间差异具有显著意义(P<0.005)。外周血sCD44v6含量随着肿瘤体积增大而降低(P<0.01),尤以侵袭性垂体腺瘤显著,其诊断侵袭性垂体腺瘤符合率达89.71%。结论外周血sCD44v6含量与垂体腺瘤大小和侵袭性生长行为呈负相关,可能对侵袭性垂体大腺瘤、巨大腺瘤的诊断、治疗决策和判断预后具有一定的参考价值。     

血管内皮生长因子在侵袭性垂体腺瘤中的表达及其临床意义

【目的】探讨血管内皮生长因子(VEGF)在侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤中的表达及其临床意义。【方法】应用免疫组化法检测26例侵袭垂体腺瘤和20例非侵袭性垂体腺瘤中VEGF的表达,并结合临床资料分析。【结果】VEGF在侵袭性垂体腺瘤的表达明显高于在非侵袭性垂体腺瘤中的表达,VEGF的表达水平与垂体腺瘤的侵袭性呈正相关系。【结论】VEGF垂体腺瘤侵袭性生长及复发相关,是影响预后的重要因素之一,并为临床可靠的标记物。     

垂体腺瘤中血管生成及其与肿瘤侵袭性关系的研究

目的：研究CD34（Cluster of differentiation，白细胞分化抗原)蛋白在垂体腺瘤中表达，探讨抗CD34单抗标记肿瘤血管生成与腺瘤侵袭性的关系及其临床意义。方法：集近年我科经手术切除的44例垂体腺瘤标本及6例正常垂体组织，均经4％的福尔马林固定、石蜡包埋。回顾这些病例的详细临床资料，联合运用Knosp影像学标准及任祖渊标准，参考术中情况，将肿瘤标本分为侵袭组与非侵袭组；然后运用免疫组化的方法检到这50例标本中抗CD34单抗标记肿瘤血管生成(其指标为微血管密度—Microvascular Density,MVD)的情况；分析肿瘤血管生成与垂体腺瘤侵袭性的内在关系。结果：免疫组化实验结果显示既物蛋白在侵袭性垂体膝瘤组中显著高表达，在非侵袭性腺瘤组及正常垂体组中也有一定表达，抗CD34单抗标记的肿瘤血管生成情况与全体腺瘤侵袭性密切相关(P＜0．001)，非侵袭组及正常垂体组表达无统计学差异。结论：抗CD34单抗标记的肿瘤血管生成情况与垂体腺瘤侵袭性密切相关，可作为腺瘤侵袭性的分子标志。     

垂体腺瘤中六氧-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶的表达及其与垂体腺瘤侵袭性的关系

目的 通过检测垂体腺瘤中六氧-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)的表达,了解MGMT在不同类型垂体腺瘤中的表达水平及其与垂体腺瘤侵袭性的关系。 方法 收集2011年10月至2012年8月在我院经病理证实的垂体腺瘤患者。采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中MGMT的表达,并分析其在不同类型、不同功能垂体腺瘤中的表达差异。 结果 共138名患者纳入本项研究,其中大部分病变为无功能瘤(71%)和垂体大腺或巨大腺瘤(92.8%);43例(31.2%)病变为侵袭性垂体腺瘤,12例为复发性垂体腺瘤(8.7%)。79例病变判断为MGMT低表达,其表达与患者的性别、年龄,垂体腺瘤的大小、是否复发或侵袭生长无明显相关。MGMT在泌乳素瘤中低表达率明显高于无功能瘤组(P=0.025)和生长激素瘤组(P=0.043)。 结论 MGMT的表达与垂体腺瘤侵袭性、有无复发无明显相关;其在泌乳素瘤中的低表达率明显高于其它类型垂体腺瘤,提示替莫唑胺可能是难治性泌乳素瘤的另一治疗方案。     

增殖细胞核抗原在垂体腺瘤中的表达及其与复发的关系

目的通过检测增殖细胞核抗原（PCNA）在垂体腺瘤中的表达来探讨它与垂体腺瘤侵袭和增殖能力及复发的关系。方法收集垂体腺瘤标本60例，其中侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤分别为30例和25例，复发性垂体腺瘤（非侵袭性）5例。采用免疫组化方法检测PCNA在垂体腺瘤中的表达。结果PCNA在侵袭性垂体腺瘤中的表达水平显著高于非侵袭性垂体腺瘤；PCNA表达阳性率侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤分别为50％和16％，复发性与非复发性垂体腺瘤分别为80％和34．6％，差异均有显著性（P〈0．01，P〈0．05）。结论PCNA与垂体腺瘤侵袭、增殖能力及术后复发密切相关。     

侵袭性垂体腺瘤中cyclinE、cdk2和p27kip1的表达及其临床意义

目的:探讨cyclinE、cdk2和p27kip1在侵袭性垂体腺瘤中的表达情况及其与临床生物学行为的关系.方法:采用westernblotting法检测37例非侵袭性垂体腺瘤和21例侵袭性垂体腺瘤中eyelinE、cdk2和p27kip1蛋白的表达情况.结果:cyelinE和edk2在侵袭组中的表达均明显高于非侵袭组(P均＜0.01),而p27kip1在侵袭组中的表达明显低于非侵袭组(P＜0.01);cyclinE和edk2在垂体腺瘤中的表达呈正相关(P＜0.01),两者与p27的表达均呈负相关(P均＜0.01);cyclinE和cdk2的表达与垂体腺瘤的侵袭性均呈正相关(P均＜0.01),p27的表达与垂体腺瘤的侵袭性呈负相关(P＜0.01).结论:cyclinE和cdk2的过度表达和p27kip1的低表达与侵袭性垂体腺瘤的增殖、发生、发展显著相关,三者可能成为判断垂体腺瘤的侵袭性和预后的指标.     

nm23和Ki-67在垂体腺瘤中的表达与侵袭性的关系研究

目的探讨nm23(代表侵袭性指标)及Ki-67(代表增殖性指标)表达与垂体腺瘤生物学行为的关系。方法采用免疫组化法检测nm23及Ki-67在46例垂体腺瘤(其中32例侵袭性垂体腺瘤,14例非侵袭性垂体腺瘤)中的表达。结果nm23表达率在侵袭性垂体腺瘤组明显低于非侵袭组,两者之间差异有显著性(χ2=8.83,P<0.05);Ki-67指数平均值在侵袭性垂体腺瘤组明显高于非侵袭组(t=2.98,P<0.05);nm23与Ki-67的表达呈显著负相关(rs=-0.723,P<0.05)。结论侵袭和增殖在侵袭性垂体腺瘤的分子生物学演进过程中相互协同,共同促进;联合检测nm23和Ki-67的表达可作为客观评价垂体腺瘤生物学行为、预后复发的参考指标。     

Fascin和MVD的表达与垂体腺瘤侵袭性的关系

目的：检测Fascin及MVD在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达,探讨其与垂体腺瘤侵袭性的关系及它们之间的相关性。方法：采用免疫组织化学Envision法检测24例侵袭性和21例非侵袭性垂体腺瘤组织中Fascin蛋白表达水平,计数CD34标记的肿瘤微血管密度（MVD）。统计学分析两组之间Fasicn蛋白的表达、MVD计数的差异,以及侵袭性垂体腺瘤中Fascin的表达与MVD计数之间的相关关系。结果：侵袭性垂体腺瘤组Fascin蛋白表达及MVD计数均较非侵袭性垂体腺瘤组增高。侵袭组中Fascin蛋白表达与MVD计数呈正相关关系。结论：侵袭性垂体腺瘤的生物学行为与Fascin的高表达以及血管生成密切相关．二者可作为判断垂体瘤侵袭性及预后的生物学指标。     

白细胞介素-17及其受体在垂体瘤中的表达及临床意义

【目的】检测人垂体腺瘤组织中白细胞介素(IL-17)及其受体IL-17R的表达,并探讨其在垂体腺瘤侵袭性发病机制中的作用。【方法】收集85例人垂体腺瘤组织标本,分成2组：侵袭性垂体腺瘤组45例、非侵袭性垂体腺瘤组40例。采用免疫组化法检测各标本IL-17、IL-17R的表达。随机选取其中50例标本(分成2组:侵袭性组25例、非侵袭性组25例),采用RT-PCR法检测IL-17、IL-17R的mRNA表达水平。分析IL-17、IL-17R的表达与垂体腺瘤侵袭性的关系。【结果】 免疫组化结果显示:IL-17、IL-17R在侵袭性垂体腺瘤中的强阳性及总阳性表达率分别38.0%和83.0%、49%和86.7%,而非侵袭性垂体腺瘤中的强阳性及总阳性表达率分别20.0%和52.5%、20.0%和62.5%。IL-17、IL-17R在侵袭性垂体腺瘤中的表达率明显高于在非侵袭性垂体腺瘤中的表达率,统计学分析显示有统计学意义(P < 0.05)。RT-PCR结果显示：侵袭性垂体腺瘤中的IL-17、IL-17R mRNA的表达水平明显高于非侵袭性垂体腺瘤,差异有统计学意义(P < 0.05)。【结论】 IL-17、IL-17R在侵袭性垂体腺瘤组织中的表达明显升高,可能促进了垂体腺瘤侵袭性的发生。     

Association of expression of Leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains 2 gene with invasiveness of pituitary adenoma

The Leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains-2(LRIG2) gene expression in pituitary adenoma and its correlation with tumor invasiveness were studied.The expression of LRIG2 mRNA and protein in human pituitary adenoma obtained surgically was detected by RT-PCR(39 cases) and immunohistochemical staining(30 cases).It was found that LRIG2 was mostly localized at the nucleus of the pituitary adenoma cells.Its expression was significantly higher in the invasive cases than in the non-invasive cases.LRIG2 protein was positive in 14 cases out of 21 cases of invasive adenoma,but only 2 cases were positive in 9 cases of non-invasive adenoma.The positive expression rate of LRIG2 mRNA was 91.3% in invasive cases(total 23 cases) and 62.5% in non-invasive cases(total 16 cases),respectively.LRIG2 gene is overexpressed in invasive pituitary adenoma.It may play an important role in pituitary adenoma invasiveness and further studies are necessary to elucidate the mechanism under this phenomenon.     

Study on the Expression Levels of CXCR4, CXCL12, CD44, and CD147 and Their Potential Correlation with Invasive Behaviors of Pituitary Adenomas

Objective To evaluate the factors of CXCR4, CXCL12, CD44, and CD147 as early potential diagnostic biomarkers by determining their expression levels in invasive and non-invasive pituitary adenomas. Methods Fresh pituitary adenoma specimens were collected from 35 pituitary adenoma (21 invasive and 14 non-invasive) patients who underwent surgical treatment in our Neurosurgery Department between January and April of 2009. The expression levels of CXCR4, CXCL12, CD44, and CD147 were evaluated firstly by flow cytometry, fluorescence microscopy in single cell suspensions, and then by immunohistochemical staining of paraffin tissue sections. Results Flow cytometric analyses showed that the percentage of CXCR4-and CXCL12-positive cells from invasive pituitary adenomas (IPA) was significantly higher in the single cell suspensions than that from non-invasive pituitary adenomas (nIPA) (P<0.05). Immunohistochemical staining revealed that CXCR4 and CXCL12 staining index scores of the invasive pituitary adenomas were significantly higher than those of the non-invasive pituitary adenomas (P<0.05). In contrast, neither flow cytometry nor immunohistochemical staining demonstrated significant difference between CD44 and CD147 expression levels, respectively. Conclusion Expression levels of CXCR4 and CXCL12 are correlated with the invasiveness of pituitary adenomas. Therefore, rather than CD44 and CD147, CXCR4 and CXCL12 may potentially serve as biomarkers for early detection of pituitary adenomas.     

DJ-1和HSP27在侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤中的差异表达

目的: 研究垂体腺瘤中癌基因蛋白DJ-1、热休克蛋白27(HSP27)的表达是否与侵袭性相关。方法: 采用Western印迹法检测侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤各20例组织中DJ-1和HSP27蛋白的表达,并分析DJ-1和HSP27蛋白水平与侵袭性的关系。结果: 20例侵袭性垂体腺瘤中DJ-1和HSP27蛋白表达的强阳性率分别为70%(14/20)和80%(16/20),20例非侵袭性垂体腺瘤中DJ-1和HSP27蛋白表达的强阳性率均为10%(2/20),侵袭性垂体腺瘤明显高于非侵袭性垂体腺瘤(P<0.05)。DJ-1和HSP27的表达水平与垂体腺瘤侵袭性之间均呈正相关(分别r=0.350,P<0.05;r=0.400,P<0.05)。结论: DJ-1和HSP27在侵袭性垂体腺瘤中的异常表达可能在侵袭性垂体腺瘤的形成和发展中发挥重要作用,与垂体腺瘤的侵袭性密切相关。     

PTTG表达与垂体腺瘤侵袭性关系

目的 探讨垂体瘤转化基因(Pituitary tumor transforming gene，PTTG)表达与腺瘤侵袭性的关系及其临床意义。方法 回顾近年我科经手术切除的44例垂体腺瘤标本及6例正常垂体组织，均经10％的福尔马林固定、石蜡包埋。联合运用Knosp影像学标准及任祖渊标准，参考术中情况，将肿瘤标本分为侵袭组与非侵袭组；运用免疫组化的方法检测这50例标本中PTTG蛋白表达情况；分析PTTG表达与垂体腺瘤侵袭性的内在关系。结果 免疫组化实验结果显示PTTG蛋白在侵袭性垂体腺瘤组中显著高表达，在非侵袭性腺瘤组中有一定表达，在正常垂体组织中未见表达。结论 原癌基因PTTG表达水平和垂体腺瘤侵袭性密切相关，可作为腺瘤侵袭性的标志物。     

Ki-67抗原在侵袭性垂体腺瘤中的表达研究

目的　探讨垂体腺瘤中Ki- 6 7抗原表达与垂体腺瘤侵袭性的关系。方法　采用新一代鼠抗人Ki- 6 7单克隆抗体MIB - 1免疫组化LSAB法对 5 2例侵袭性垂体腺瘤和 35例非侵袭性垂体腺瘤中的Ki- 6 7抗原表达进行检测 ,以MIB - 1增殖细胞指数 (MIB - 1PCI)表示。对侵袭性腺瘤和非侵袭性腺瘤组间、有海绵窦侵袭腺瘤和无海绵窦侵袭腺瘤组间的MIB - 1PCI进行比较。结果　侵袭性垂体腺瘤组MIB - 1PCI为 (3.5 9± 2 .6 7) % ,非侵袭性垂体腺瘤组为 (2 .2 3± 2 .38) % ,2组间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;海绵窦侵袭腺瘤组MIB - 1PCI为 (5 .4 2±5 .87) % ,无海绵窦侵袭腺瘤组为 (2 .6 3± 2 .86 ) % ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　Ki - 6 7抗原表达可以作为反映垂体腺瘤增殖潜能、侵袭性和侵袭程度的标志物 ,具有较高的临床应用价值     

垂体腺瘤中CXCR4、VEGF的表达及其与侵袭性之间的关系

目的观察基质细胞衍生趋化因子-1（SDF-1）受体CXCR4及血管内皮生长因子（VEGF）在垂体腺瘤中表达水平,为侵袭性垂体腺瘤的治疗提供理论和实验依据。方法采用免疫组化SABC方法检测9例非侵袭垂体腺瘤及39例侵袭性垂体腺瘤（Ⅰ级15例,Ⅱ级14例,Ⅲ级10例）瘤组织中CXCR4及VEGF水平。采用多功能真彩色病理分析系统进行免疫组化分析。结果 39例侵袭性垂体腺瘤和9例非侵袭性垂体腺瘤均可见CXCR4和VEGF的表达。非侵袭性垂体腺瘤患者与侵袭性垂体腺瘤患者比较,CXCR4和VEGF的表达差异均有统计学意义（P〈0.05）,Ⅲ级侵袭腺瘤的CXCR4及VEGF表达均高于Ⅰ级与Ⅱ级侵袭性垂休腺瘤及非侵袭性垂体腺瘤,差异有统计学意义（P〈0.05）,Ⅱ级侵袭性垂体腺瘤表达高于非侵袭垂体腺瘤,差异有统计学意义（P〈0.05）。CXCR4的表达与VEGF的表达之间存在明显相关（r=0.653,P〈0.01）。结论 CXCR4及VEGF在侵袭性垂体腺瘤的表达明显高于非侵袭性垂体腺瘤,且随着侵袭程度的加剧而增高,与垂体腺瘤的侵袭性相关;CXCR4与VEGF呈正的直线相关关系,对垂体腺瘤的侵袭性生物学行为的评估有重要意义,并为临床制定合理的治疗方案、预后判断及疗效评定提供客观参考依据。     

PTTG、bFGF及PCNA在垂体腺瘤中的表达及其与侵袭性的关系

目的通过比较垂体腺瘤侵袭组与非侵袭组之间垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)、细胞增生核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)mRNA表达水平的差异来探讨它们和垂体腺瘤侵袭性之间的关系,为临床垂体腺瘤侵袭性判定及预后评估提供可能的生物学指标。方法选取首都医科大学附属天坛医院神经外科临床资料完整、行手术治疗并经病理证实为垂体腺瘤的肿瘤标本65例,分为侵袭组和非侵袭组,用实时定量反转录PCR(RT-PCR)方法检测肿瘤组织中PTTG、PCNA、bFGF 3者mRNA表达水平,3者间两两比较表达水平的差异。结果侵袭组与非侵袭组之间PTTG和PCNA的表达差异有统计学意义(P<0.05),而bFGF的表达在2组之间差异无统计学意义(P>0.05);PTTG和bFGF的表达呈正相关(r=0.26,P=0.038)。结论 PTTG和PCNA和垂体腺瘤的侵袭性生长有密切关系,可能作为垂体腺瘤侵袭性生长的重要标志物;PTTG和bFGF的互相诱导表达可能促进了人垂体腺瘤的形成、发展,并参与侵袭的发生。     

Beclin1和Bcl2在侵袭性垂体腺瘤中的表达及关系

目的检测Beclin1和Bcl2在侵袭性垂体腺瘤组织中的表达,探讨其与垂体腺瘤侵袭性的关系及2者之间的相关性。方法61例垂体腺瘤手术标本按侵袭性垂体腺瘤综合判定方法分为侵袭组（32例）和非侵袭组（29例）,采用免疫荧光检测Beclin1和Bcl2蛋白的表达,RT-PCR法检测Beclin1和Bcl2mRNA的表达,分析侵袭组和非侵袭组Beclin1和Bcl2表达水平的差异和相关性。结果侵袭组Beclin1蛋白和mRNA表达均低于非侵袭组（P〈0．01）;而Bcl2蛋白和mRNA表达均高于非侵袭组（P〈0．01）。Pearson相关分析显示：侵袭组中Beclin1和和Bcl2mRNA的表达呈负相关（r=-0．42,P=0．028）。结论Beclin1在侵袭性垂体腺瘤中的表达下降,垂体腺瘤的侵袭性与Bcl2蛋白及mRNA的高表达,Beclin1蛋白和mRNA的低表达密切相关;自噬活性的减低可能导致垂体腺瘤侵袭性增强,而其活性减低可能是Beclin1和Bcl2相互作用的结果。     

垂体肿瘤转化基因、内皮抑素和碱性成纤维细胞生长因子mRNA在侵袭性垂体腺瘤中的表达

目的:探讨垂体腺瘤组织中垂体肿瘤转化基因(PTTG)、内皮抑素(endostatin)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在侵袭性垂体腺瘤发生中的作用。方法:应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测非侵袭性和侵袭性垂体腺瘤组织标本中PTTG,endostatin和bFGF mRNA的表达水平。结果:侵袭性腺瘤较非侵袭性腺瘤PTTG和bFGF mRNA表达明显增高 (均P< 0.01)。侵袭性腺瘤较非侵袭性腺瘤endostatin mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论：垂体腺瘤侵袭性的发生可能与PTTG和bFGF表达增高及endostatin表达下调有关,其作用机制可能与PTTG高表达后改变了肿瘤血管的生成与抑制之间的平衡有关。