周期蛋白D3异常表达使1例粒单系白血病原始细胞表达血小板特异性抗原

为探讨1例急性粒单核细胞自血病原始细胞表达血小板特异性抗原的机制，分离外周血或骨髓单个棱细胞，采用常规染色和普通细胞化学染色观察其形态学特性，采用流式细胞仪双荧光分析免疫表型，单荧光胞浆蛋白标记分析周期蛋白表达和免疫印迹进一步证实周期蛋白D3的表达情况，采用周期蛋白和DNA双标记分析周期蛋白Ds表达与细胞周期的关系。结果表明，在白血病原始细胞中CD13^ HLA-DR^ 细胞为94．69%，CD13^ CD34^ 细胞为96．86%，CD41a^ CD34^ 细胞为41．6%，CD13^ CD41a^ 细胞为40．0%,周期蛋白D3表达明显升高，大部分细胞表达周期蛋白D3,周期蛋白D3阳性细胞在细胞周期各时段所占的比例分别为。G1期52．1%，S期9．9％，G2 M期38.0%。结论：周期蛋白D3的异常表达导致此白血病细胞表达血小板特异性抗原，可能在白血病的发生中起重要的作用。     

生长抑素对人脐血CD34^＋细胞增殖能力的影响

目的探索生长抑素（SST）对造血干／祖细胞增殖能力的影响以及可能机制。方法采用免疫磁殊分选技术纯化人脐血CD34^＋细胞;SST孵育人CD34^＋细胞后,体外集落形成、扩增培养了解细胞增殖;ELISA测定细胞内外TNF-α、TGF-β水平;RT—PCR分析其受体亚型。结果在1×10^-6～1×10^-10mol／L浓度范围内,SST抑制人CD34^＋细胞集落形成及扩增倍数,其细胞集落形成抑制与SST浓度呈正相关（r=0．903,P〈0．01）。SST使CD34^＋细胞内、外TNF-α及TGF-β1浓度显著增加（P〈0．05）;人脐血CD34^＋细胞表达SST-3型受体。结论SST通过人脐血CD34^＋细胞上SST-3型受体介导,提高造血抑制因子TNF-α、TGF-β水平,抑制人CD34^＋细胞的增殖、维持其干细胞特性。     

脐血干细胞分化的巨核细胞信号转导基因表达的分析

目的研究脐血干细胞向巨核细胞分化后信号转导基因表达的改变。方法分别收集同一份脐血分化培养前CD34＋细胞和培养后CD41＋细胞,提取总RNA。用基因芯片技术比较两组之间的基因表达差异,并用RT-PCR技术验证芯片结果。结果芯片分析结果显示,共筛选出3522个差异基因,其中上调1705个,下调1817个。3522个差异基因中,与细胞信号相关的基因有343个,与转录调节相关的有150个,与分化相关的有21个。其中,CD61基因的表达增加了369.83倍,CD41基因的表达增加27.38倍,PF4基因的表达增加24.06倍;MAPKs、GPCRs（G蛋白偶联受体）、RAS家族相关的基因多数表达上调;与STAT通路相关的基因中,SOCS1、JAK2表达上调,STAT5A表达下调。结论TPO等造血生长因子可能主要通过GPCRs-Ras-MAPK途径,促进脐血干细胞向巨核细胞系增殖、分化。     

自身免疫病患者外周血CD34+细胞动员、采集和纯化研究

目的：探讨自身免疫病患外周血造血干细胞动员、采集和纯化的效果及安全性。方法：对17例确诊自身免疫病患予环磷酰胺＋粒细胞集落刺激因子（G－CSF）动员外周血干细胞，CliniMACS系统对其中11例患外周血单个核细胞进行CD34^ 细胞阳性分选，流式细胞仪检测分选前后CD34^ 细胞纯度及淋巴细胞各亚群。结果：1例动员中并发尿崩症，2例动员失败。11例分选后CD34^ 细胞纯度平均96．1％，回收率70．14％；CD3^ 、CD19^ 、CD14^ 细胞分别去除10^3/kg,10^2/kg,10^3/kg。结论：对自身免疫病患采用环磷酰胺＋G－CSF方案动员外周血干细胞方法可靠，安全性好；外周血干细胞的纯化方法可获得高纯度和高回收率的CD34^ 细胞，并极大限度的去除T、B等细胞。     

华蟾素对肺癌大鼠PI3K/AKT信号通路的抑制作用

目的探讨华蟾素对肺癌模型大鼠肿瘤标志物、免疫功能及PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响。方法将80只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、华蟾素组和环磷酰胺组,每组20只,采用气管内灌注致癌碘油液建立肺癌大鼠模型。分别于第4,8周比较组织病理形态、血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原-125(CA125)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平,T细胞亚群CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞及NKT细胞含量,AKT-1、Cyclin D1、NF-κB mRNA表达,PI3K、p-AKT蛋白表达。结果华蟾素组大鼠体质量先减少,3周后逐渐增加,环磷酰胺组大鼠的体质量先减少,4周后有所增加。与模型组比较,华蟾素组和环磷酰胺组的肿瘤体积、质量显著降低,抑瘤率显著增加(P<0.05);肺组织肿胀不明显,肺泡囊及上皮细胞结构基本清晰;华蟾素组和环磷酰胺组血清CEA、CA125、NSE水平显著降低,AKT-1、Cyclin D1和NF-κB mRNA表达显著降低,PI3K、p-AKT蛋白表达显著降低;华蟾素组CD3^+和CD4^+细胞含量显著升高,CD8^+和NKT细胞含量显著降低,且第8周与第4周相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论华蟾素可增加肺癌模型大鼠体质量,降低肿瘤体积和质量,增加抑瘤率,改善肿瘤标志物和免疫功能,其机制可能与降低AKT-1、Cyclin D1、NF-κB mRNA水平和PI3K、p-AKT蛋白表达有关。     

SIVmac239对猕猴B淋巴细胞增殖的抑制机制

目的：探讨SIVmac239感染CD4^＋T淋巴细胞后,能否产生某些可抑制B淋巴细胞生长的活性因子,及其抑制作用的机制,为HIV／AIDS进一步的病原学研究和控制提供有益的线索。方法：用MTT实验观察不同时间收集的SIVmac239感染的CD4^＋T淋巴细胞上清和未感染SIVmac239的CD4^＋T淋巴细胞的上清对猕猴B淋巴细胞生长的抑制作用,用3Hthymidine uptake ashy判断这些上清是否抑制B淋巴细胞的DNA合成,用凝胶电泳方法检测DNA合成被抑制是否为凋亡的机制,用Western blot方法检测Cyclin D1的表达情况。结果：SIVmac239感染的CD4^＋T淋巴细胞上清含有抑制猕猴B淋巴细胞生长的因子,并且,其抑制效果随着作用时间的延长而增加。这些因子可较强的抑制CD4;T淋巴细胞的DNA合成,最高抑制率可达81％。凝胶试验结果未见DNA梯状条带。Western blot试验发现CyclinD1表达被抑制。结论：SIVraac239感染CD4^＋T淋巴细胞可产生抑制B淋巴细胞生长的因子。此因子可较强的抑制猕猴B淋巴细胞DNA的合成,但并不引起B淋巴细胞凋亡。其主要机制为抑制猕猴B淋巴细胞的细胞周期蛋白D1的产生,使B淋巴细胞停止在G1期．即抑制作用的主要的机刺为细胞被捕获在细胞周期的G1期。本研究结果发现一个新的现象,即猕猴B淋巴细胞虽然不被SIVmac239感染．但可被SIVmac239感染的CD4^＋T淋巴细胞产生的细胞因子所捕获,抑制其细胞DNA合成,从而可导致该细胞的功能发生障碍和影响机体体液免疫作用。     

造血干/祖细胞移行能力及影响因素的实验研究

目的：研究纯化脐血CD34^ 细胞移行穿越血管内皮细胞能力及影响因素。方法：免疫微磁珠阳性选择法（MACs)纯化脐血CD34^ 细胞，流式细胞仪测定基质细胞衍生因子（SDF－1α）受体（CXCR4）表达率；与干细胞因子（SCF）、白介素（IL）－6，IL－3及flt3配体（FL）共同孵育12小时，静脉内皮细胞株（ECV）接种于transwell滤膜上层，研究CD34^ 细胞在SDF－1α作用下移行穿越ECV的能力，transwell滤膜孔径为8μm，并观察阻断其表面粘附分子（CD62L、CD62E和VLA－4）后对迁移的影响。结果：CD34^ 细胞在自然状态下也能少量通过ECV细胞层，SDF－1α可显提高CD34^ 细胞移行能力，通过率与CD34^ 细胞表面CXCR4表达相关；CD34^ 细胞与SCF与IL－6共同孵育后，可明显提高其穿越ECV细胞的能力（P＜0．01）；单独或联合应用抗粘附分子抗体显减少CD34^ 细胞的穿内皮细胞移行（P＜0．01）。结论：CD34^ 细胞可穿过ECV内皮细胞层向SDF－1α浓度高的一侧移行，与IL－6和SCF共同培养后可增强CD34^ 细胞的移行能力，抗粘附分子单抗显减少CD34^ 细胞的移行。     

千金藤素调控肝癌细胞 HepG2增殖和凋亡的实验研究

目的探讨千金藤素对肝癌细胞 HepG2增殖、凋亡的影响和机制。方法 2020年 1—6月,从上海通派生物科技有限公司购入肝癌细胞 HepG2,用千金藤素( 20 μmol/L)处理肝癌细胞 HepG2,MTT方法测定增殖活性, PI单染法检测细胞周期, Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法( Western blotting)检测细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、 p21、Bcl-2相关 X蛋白( Bax)、活化胱天蛋白酶 3(cleaved caspase-3)、核因子 κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。用 NF-κB信号激活剂和千金藤素联合处理肝癌细胞,检测细胞增殖、周期、凋亡变化。结果千金藤素处理后的肝癌细胞增殖活性下降,细胞 G0/G1期比例［(65.81±3.73)%比( 50.61±4.17)%］升高,细胞凋亡率［(13.47±1.58)%比( 2.18±0.12)%］升高,细胞中 p21、Bax、cleaved-caspase-3蛋白水平升高, cyclin D1蛋白水平下降, NF-κBp65蛋白水平( 0.19±0.02比 0.36±0.05)降低。 NF-κB信号激活剂处理可以提高千金藤素条件下肝癌细胞增殖活性( 0.46±0.03比 0.35±0.04)减少 G0/G1期比例,降低细胞凋亡率,降低细胞中 p21、Bax、cleavedcaspase-3蛋白表达水平,提高细胞中 cyclin D1和 NF-κBp65蛋,白水平。结论千金藤素抑制肝癌细胞增殖,阻滞细胞周期,诱     

二氢青蒿素对体外培养胃癌细胞株BGC-823周期蛋白D1 P16蛋白表达的影响

目的探讨二氢青蒿素(DHA)对人胃癌细胞BGC-823增殖的抑制作用及周期蛋白D1、P16蛋白表达的影响。方法以25～100μmol/L DHA干预人胃癌细胞株BGC-823细胞后通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖率,吖啶橙-溴化乙定(AO-EB)染色观察细胞凋亡情况、流式细胞仪检测细胞凋亡周期、蛋白质印迹法检测细胞中周期蛋白D1、P16蛋白表达情况。结果 DHA对人胃癌细胞具有时间、浓度依赖性抑制作用;且浓度依赖性阻滞细胞周期,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05)。DHA浓度依赖性下调cyclin D1蛋白,上调p16蛋白的表达(P<0.05)。结论 DHA通过下调cyclin D1蛋白,上调p16蛋白的表达,调节细胞周期调控通路,阻滞细胞于G0/G1期,有效抑制人胃癌细胞的增殖。     

高糖抑制内皮细胞增殖的细胞周期调控

目的 研究高浓度葡萄糖(HG)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖和细胞周期的影响.方法 以体外培养的HUVEC为模型,采用倒置显微镜观察细胞形态学;噻唑蓝比色法测定细胞的增殖与活性;流式细胞术检测细胞周期以及相关蛋白-增殖性细胞核抗原(PCNA)与细胞周期蛋白D1的表达.结果 HG(20mmol/L、40mmol/L)作用72h后,HUVEC的增殖受到了明显抑制(P＜0.01);48～72h后细胞周期中G0-G1期细胞的百分比增加,与对照组同期比较均有显著差异(P＜0.01);同时PCNA、周期蛋白D1的表达均明显低于对照组(P＜0.01).结论 HG可抑制体外培养的HUVEC增殖,使细胞阻滞于G1期,PCNA及周期蛋白D1表达的下调可能参与了此过程的调控.     

小白菊内酯抑制胎牛血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及信号转导机理

目的　探讨小白菊内酯的抗动脉粥样硬化机理与IκBα ,环氧合酶 2 (COX 2 ) ,p2 1,p2 7蛋白表达的关系。方法　培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC) ,Western印迹杂交法检测IκBα ,COX 2 ,p2 1,p2 7蛋白表达 ,流式细胞仪检测VSMC周期情况 ,[3H ]TdR参入测定VSMC的DNA合成。结果小白菊内酯 (30 μmol·L- 1)以时间依赖关系上调IκBα ,p2 1,p2 7蛋白表达和以时间依赖关系抑制COX 2蛋白表达 ,10～ 30 μmol·L- 1以剂量依赖关系使VSMC周期中的G0 /G1期细胞比例明显增多 ,S期细胞比例显著减少 ,同时抑制VSMC的 [3H]TdR参入。结论　①小白菊内酯可能通过上调IκBα蛋白表达抑制核因子 κB活性 ,从而抑制COX 2蛋白表达 ,通过抑制COX 2蛋白表达来抑制VSMC增殖 ;②小白菊内酯可能通过上调调控G1 S周期转换的p2 1,p2 7蛋白来抑制VSMC增殖。     

人脐带血造血干细胞体外分化为NK细胞的效率及功能检测

目的检测人脐带血造血干细胞(HSCs)体外分化为自然杀伤(NK)细胞的效率及功能。方法从人脐带血中分离CD34+HSCs,接种于含20μg/L FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)、干细胞生长因子(SCF)、白细胞介素(IL)-7、IL-15及IL-21的SCGM培养基中,定向诱导CD34+HSCs分化为NK细胞。观察细胞生长状态,在分化的第7、14、21及28天,采用流式细胞术检测各阶段CD56、NKG2D、NKp46、CD3、CD19及CD34等细胞免疫表型的表达变化;分化的第21、28天,以分化得到细胞为效应细胞,K562细胞作为靶细胞,设置8∶1、4∶1、2∶1和1∶1 4组效靶细胞比,分别采用乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测法和7AAD/CFSE标记法,检测分化得到的细胞杀伤功能。结果脐带血来源的CD34+HSCs在体外适宜的条件下可大量增殖;整个分化进程的不同阶段中,CD3和CD19表达量差异无统计学意义,CD56、NKG2D及NKp46的表达量逐渐增加,最高达(72.57±1.60)%、(32.83±1.29)%和(29.53±2.40)%,CD34的表达量逐渐降低,最低为(12.13±2.01)%。LDH毒性检测法和7AAD/CFSE标记法测得最大杀伤效率可达(49.91±2.76)%和(40.87±1.12)%,8∶1、4∶1、2∶1和1∶1组NK细胞杀伤能力均依次降低(P<0.05),诱导分化28 d的NK细胞杀伤能力与21 d差异无统计学意义。结论人脐带血HSCs在体外适宜的培养条件下,可定向分化为NK细胞,诱导分化得到的NK细胞具有杀伤功能。     

人骨髓间充质干细胞联合细胞因子的无血清培养体系体外扩增脐血干细胞研究

目的 探讨以人骨髓间充质干细胞(BM-MSC)为基质的无血清培养方法，体外扩增脐血造血干细胞(CBSC)，研究BM-MSC支持造血的功能和体外扩增时间的选择。方法 用含血小板生成素(TPO)、干细胞因子(SCF)、flt3／flk2配体(FL)和粒细胞-集落刺激因子(G-CSF)的无血清培养液，以人BM-MSC为基质，比较体外扩增脐血CD34^ 细胞7d及14d后总细胞(TC)、CD34^ 细胞和集落形成单位(CFU)数增加倍数。结果在以人BM-MSC为基质及TPO、FL、SCF和G-CSF这四种细胞因子作用下，经体外扩增7d后TC、CD34^ 细胞、CFU-GM和CFU-C数较起始分别增加了87、16、15和26倍；14d后较起始分别增加了427、38、125和104倍，与7d扩增倍数有显著性差异。结论以人BM-MSC为基质的无血清体外培养体系可以有效扩增CBSC，有潜在的临床应用价值，扩增时间应以14d为宜。     

人脂肪间充质干细胞分离培养及其生物学特性的实验研究

目的探索人脂肪间充质干细胞（adipose tissue—derived mesenchymal stem cells，ADMSCs）分离培养的方法及体外扩增的条件，观察ADMSCs的生物学特性。方法以腹部手术患者皮下脂肪组织为材料，采用I型胶原酶消化法及贴壁法分离培养ADMSCs，在含10％胎牛血清的低糖DMEM培养基中贴壁培养，倒置显微镜观察，流式细胞仪检测细胞表面标记CD29、CD44、CD105、CD31、CD34、CD106的表达，透射电镜及扫描电镜下观察ADMSCs超微结构，流式细胞仪测定细胞周期。结果原代和传代细胞呈梭形外观，生长增殖能力良好。CD29、CD44、CD105均呈阳性表达，阳性率分别为95.3％、98．6％和86．5％；而CD31、CD34、CD106阳性率分别为3．5％、2．6％、1．3％。透射电镜观察显示ADMSCs表现出早期幼稚细胞形态的特点，流式细胞仪检测显示84．8％的细胞处于G0/G1期。结论酶消化法能有效地从人脂肪组织分离培养人ADSCs，细胞生长稳定，增殖能力活跃，为今后ADMSCs的分离培养提供了更简单有效的方法。     

Apelin-13促血管平滑肌细胞增殖作用研究

目的研究G蛋白偶联受体APJ的内源性配体Ape-lin-13对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)生长增殖影响及其与细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的关系,发现Apelin-APJ新功能。方法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,噻唑蓝比色法(MTT)观察VSMC增殖;流式细胞仪分析细胞周期;Western blot检测cyclinD1的表达。结果Apelin-13能促进血管平滑肌细胞增殖,降低G0/G1期细胞百分比,升高S+G2+M期细胞百分比,并可剂量依赖性刺激细胞cyclin D1的表达增加。结论Apelin-13能通过推动细胞周期由G0/G1期进入S期而促进血管平滑肌细胞增殖,其作用机制与促进cyclin D1表达增高有关。     

STAT3shRNA增强胰腺癌细胞Panc-1对吉西他滨化疗敏感性

目的 观察shRNA下调胰腺癌Panc-1细胞STAT3 mRNA表达后对吉西他滨化疗敏感性的影响.方法 构建靶向STAT3 mRNA的shRAN和阴性质粒,分别转染Panc-1细胞(A组和B组);另将非转染的正常Panc-1细胞分为C组和D组.A,B,C三组细胞与吉西他滨共孵育.RT-PCR和Western blot检测Panc-1中STAT3 mRNA和蛋白的表达;MTT法检测Panc-1细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期.结果 A组STAT3 mRNA水平下降了61.9%,STAT3蛋白水平下降了85.7%(P＜0.01),细胞增殖能力低于B、C组(P＜0.01).与B、C组比较,A组G1期细胞比率增加(P＜0.05),细胞存活率降低(P＜0.01).结论 靶向STAT3 mRAN的shRNA可特异性降低Panc-1细胞中STAT3 mRNA及其蛋白的表达,抑制Panc-1细胞增殖,使其阻滞于G1期,从而增强吉西他滨对G1期细胞的细胞毒效应,增加吉西他滨的化疗敏感性.     

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对K562细胞分化和细胞周期的影响

目的本研究探讨新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinate,ATPR)对K562细胞株的抑制增殖和诱导分化活性并对其机制进行研究。方法ATPR作用于K562细胞3d后,通过MTT法检测细胞的增殖,NBT还原实验法分析细胞的分化指标,瑞氏染色法在油镜下观察加药前后细胞形态学变化,FCM检测分析细胞周期,RT-PCR法检测cyclinE、cyclinD1、CDK2、CDK4、CDK6、p21cip1、p27kip1、p57kip2和PCNA mRNA的变化情况。Western blot法检测cyclin D1和CDK4蛋白表达的改变。结果ATPR呈浓度依赖性抑制K562细胞增殖的作用。ATPR诱导分化活性表现为NBT阳性细胞率增加,油镜下观察K562细胞有分化成熟的改变,G0/G1期细胞表达量增加,S期细胞表达量减少,呈G1期阻滞。RT-PCR检测发现cyclin E、cyclin D1、CDK2、CDK4、CDK6表达减少,PC-NA、P21cip1、P27kip1改变不明显,P57kip2表达增加。Western blot检测cyclin D1和CDK4蛋白表达减少。结论ATPR有较强的抑制K562细胞增殖并诱导其分化的活性,并通过上调P57kip2的表达,抑制Cyclin-CDK激酶复合物,发挥细胞周期阻滞的作用。     

前列腺癌患者调节性T细胞的表达及意义

目的探讨CD4^＋CD25^high调节性T细胞在前列腺癌患者外周血及肿瘤组织中的存在及其意义。方法检测45例前列腺癌患者外周血及肿瘤组织中CD4^＋CD25^high调节性T细胞的表达，并进一步检测CD4^＋CD25high调节性T细胞胞内FoxP3的表达。同时检测肿瘤来源的CD4^＋CD25^high调节性T细胞在体外的抑制功能。结果前列腺癌患者外周血及肿瘤组织中存在大量CD4^＋CD25^high调节性T细胞，正常供者外周血中CD4^＋CD25^T细胞的比例仅为（0．5±0．1）％，患者外周血为（2．3±0．7）％，两者比较，P〈0．01；患者良性组织CD4^＋CD25^highT细胞的比例也显著低于恶性肿瘤组织[分别为（6．9±0．8）％和（11．3±1．3）％，P〈0．05].结论CD4^＋CD25^high调节性T细胞可能有助于肿瘤的生长，提示抑制或清除CD4^＋CD25^high调节性T细胞可能为前列腺癌的治疗提供新的途径。     

南瓜蛋白对B16细胞的诱导分化作用

目的测定南瓜蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用。方法以MTT法测定南瓜蛋白对B16细胞的增殖抑制作用,并以形态学、黑色素含量及细胞周期变化为指标,观察南瓜蛋白诱导B16细胞分化的作用。结果南瓜蛋白对B16细胞具有明显的增殖抑制作用,并阻止B16细胞由G1期向S期过渡从而停滞于G1期;细胞形态向正常上皮样细胞分化,生长缓慢,平铺不重叠,甚至形成网状结构,胞质内细胞器丰富,黑色素小体明显增多;黑色素含量增加。结论南瓜蛋白对B16细胞具有明显的诱导分化作用。     

吲哚-3-原醇对肝星状细胞凋亡及细胞周期的影响

目的：研究吲哚-3-原醇（13C）对肝星状细胞（HSC）凋亡及细胞周期的影响及其机制。方法：培养永生化肝星状细胞株HSC-T6，不同浓度13C（25、50、100μmol／L）处理细胞48h后，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞存活率；碘化丙啶（PI）染色测细胞周期；FITC-AnnexinV／PI荧光染色，流式细胞术观测细胞凋亡；荧光实时定量PCR法检测细胞凋亡相关蛋白FasL、bax、bcl-2、caspase-3及细胞周期调节蛋白CyclinD1、CDK4的mRNA表达；Western blot方法检测细胞磷酸化及非磷酸化p38信号分子的表达。结果：①MTT法显示，100mol／L及以下浓度的13C处理HSC-T6后，细胞的存活率在90％以上；②凋亡分析显示，对照组细胞没有发生凋亡，25～100mol／L13C组细胞的凋亡率分别为37．6％、64．2％和79．4％；③细胞周期结果显示，对照组细胞的S期为（58．7±4．7）％，25～100mol／L　13C使细胞的S期分别降低到（34．0±3．0）％、（26．3±3．3）％及（24．9±5．3）％，而G0／G1期细胞从（31．8±3．4）％（OM）升高到（54．6±3．0）％（100M），差异有显著性（P〈0．01）；④13C能剂量依赖性升高细胞Bax／Bcl-2及caspase-3的mRNA水平（P〈0．05），对Fas的mRNA表达无影响。同时能降低Cyclin D1和CDK4的mRNA水平（P〈0．05）；⑤13C能减少细胞内p38的磷酸化水平，呈剂量依赖性，对非磷酸化p38无影响。结论：13C可诱导体外活化的HSC凋亡，其机制与阻滞细胞周期进展、抑制p38信号途径及增加凋亡相关诱导因子的表达有关。