全自动毛细管电泳仪在珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用

目的评价法国Sebia公司Capillarys 2全自动毛细管电泳仪在珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用。方法采集2011年8～12月经血分析(红细胞平均体积小于80fL,红细胞平均血红蛋白浓度小于26pg的8岁以上患者)筛选后的292份标本用法国Sebia公司Capillarys 2全自动毛细管电泳仪对入选标本进行血红蛋白(Hb)毛细管电泳、血清铁、铁蛋白检查,同时作α-及β-珠蛋白生成障碍性贫血基因检查。结果 (1)共检测了292例临床标本,符合α-珠蛋白生成障碍性贫血表型者36例,β-珠蛋白生成障碍性贫血表型者135例。同时出现α-及β-珠蛋白生成障碍性贫血表型者2例。(2)高压毛细管电泳法用于α-珠蛋白生成障碍性贫血诊断的灵敏度为86.11%,特异度为98.37%,准确度为95.60%,阳性预测值为93.94%,阴性预测值为96.03%。(3)高压毛细管电泳法用于β-珠蛋白生成障碍性贫血诊断的灵敏度为97.04%,特异度为98.35%,准确度为97.66%,阳性预测值为98.50%,阴性预测值为96.75%。HbA2值大于4.0%时,β-珠蛋白生成障碍性贫血基因法检测阳性率达100.00%。结论法国Sebia公司Capillarys 2全自动毛细血管电泳仪对Hb区带分辨及定量准确度高,可为Hb病(包括珠蛋白生成障碍性贫血及异常Hb病)的初筛提供快速的诊断依据。     

全自动毛细管电泳仪在成人珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用评价

目的 探讨全自动毛细管电泳仪在成人珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用价值.方法 使用法国Sebia公司的Capillarys2全自动毛细管电泳仪对18 003例成人血标本进行血红蛋白电泳分析,检测HbA,HbF,HbA2和异常血红蛋白含量,对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析.结果 18 003例成人标本筛查出α珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者2 226例,筛查阳性率12.36％,其中召回1 070例行基因分析,626例为α珠蛋白基因缺失,符合率58.50％;β珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者1 329例,筛查阳性率7.38％,其中召回733例行基因分析,710例为β珠蛋白基因突变,符合率96.86％.结论 全自动毛细管电泳作为一种新型液相分离技术,具有快速、灵敏度高、分辨率高等优点,能对HbA2进行准确的定位及定量,可初步区分α,β珠蛋白生成障碍性贫血,有效筛出高危患者,全自动毛细管电泳分析技术与基因分析有良好的符合性,为珠蛋白生成障碍性贫血的诊断提供重要依据.     

全自动毛细管电泳仪筛查珠蛋白生成障碍性贫血应用研究

目的了解成都地区珠蛋白生成障碍性贫血(又称地中海贫血,简称地贫)患者的基因型,探讨全自动毛细管电泳仪在地贫筛查中的应用价值。方法以3 262例接受健康体检的成人为研究对象,以血常规检查进行初筛。对初筛阳性者和150例健康者进行血红蛋白(Hb)毛细管电泳检测。以基因检测结果确定地贫患者基因型。以基因检测结果为参比标准,计算毛细管电泳法检测在HbA2取不同截断值时对地贫的诊断效能。以受试者工作特征曲线(ROC曲线)确定最佳截断值。结果 3 262例体检者中,基因检测确诊地贫患者111例(3.40%),其中α地贫检出率为2.21%,β地贫检出率为1.19%,主要的基因型为--SEA/αα。以基因检测结果为参比标准,以试剂盒提供的HbA2参考区间作为诊断标准,则电泳法诊断β地贫的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值最高分别为100.00%、98.00%、92.86%、100.00%、98.41%,诊断α地贫分别为29.17%、97.33%、84.00%、74.11%、75.23%。在ROC曲线中,当截断值为HbA2≤2.5%时,诊断α地贫的灵敏度和特异度达到最佳值分别为48.61%、62.00%;当截断值未HbA2≥3.5%时,诊断β地贫的灵敏度和特异度则达到100.00%、99.33%。结论成都地区为地贫低发病率区域。全自动毛细管电泳仪可用于β地贫常规筛查,但对α地贫的筛查诊断效能较低。     

滤纸干血片毛细管电泳技术在新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用

目的探讨干血片毛细管电泳技术在新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血(以下简称α-地贫)筛查中的应用价值。方法使用干血片毛细管电泳仪对46 718例新生儿足跟血滤纸干血片标本进行血红蛋白(Hb)电泳分析,检测HbA、HbF、HbA2和异常Hb的水平,对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析。结果 46 718例新生儿足跟血滤纸干血片标本中检测出巴特血红蛋白(Hb Bart′s)阳性者2 598例,筛查阳性率5.56%(2 598/46 718);召回544例经基因分析确诊477例α-地贫基因携带者,故Hb Bart′s带筛查与基因确诊的符合率为87.68%(477/544)。进一步分析其临床表型与Hb Bart′s水平的关系可见,随着临床表型的加重,Hb Bart′s水平逐渐增加,且差异有统计学意义(P=0.000)。结论滤纸干血片毛细管电泳分析技术与基因分析有较好的一致性,可根据Hb Bart′s水平的多少初步判断α-地贫的临床分型。     

数学模型在α珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的价值

目的 探讨红细胞参数的数学模型在α珠蛋白生成障碍性贫血(旧称:α地中海贫血)筛查中区分α珠蛋白生成障碍性贫血合并缺铁与缺铁性贫血的价值.方法 利用红细胞参数进行逐步logistic回归模型分析,建立本实验室区分α珠蛋白生成障碍性贫血合并缺铁与缺铁性贫血的鉴别数学模型,并与国外6种红细胞参数的数学模型进行比较.结果 α珠蛋白生成障碍性贫血合并缺铁者7种红细胞参数的数学模型与缺铁性贫血者比较,差异均有统计学意义(P<0.01),鉴别数学模型在区分α珠蛋白生成障碍性贫血合并缺铁与缺铁性贫血时鉴别效果 (AUC=0.95)及一致性(Kappa=0.813)较其他数学模型高,Green指数的敏感度最高(96.7%),Shine and Lal指数特异度最好(94.7%).结论 红细胞参数的数学模型在区分α珠蛋白生成障碍性贫血合并缺铁与缺铁性贫血方面具有较高的鉴别价值.     

清远地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血筛查结果分析

目的分析清远地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)筛查和基因诊断情况,为早期治疗和遗传咨询等干预措施及地贫防治政策的制定提供依据。方法应用法国Sebia Capillarys全自动毛细管电泳仪对2015年5月至2016年3月清远地区出生的新生儿进行滤纸干血斑血红蛋白成分分析,初筛阳性者召回抽静脉血应用裂口-聚合酶链式反应(Gap-PCR)和聚合酶链反应(PCR)结合反向点杂交技术进行地贫基因确诊。结果 1 056例初筛阳性者标本中共检出地贫908例,符合率为85.90%。α-地贫确诊符合率为95.05%(691/727),β地贫确诊符合率为65.00%(208/320),α-地贫筛查符合率显著高于β地贫,筛查为HbE的13例新生儿中共召回9例,全部确诊为HbE杂合子,筛查符合率100.00%。确诊为α-地贫650例,检出率为61.60%,其中静止型210例(19.90%)、标准型408例(38.60%)、血红蛋白H病32例(3.00%);检出β地贫204例,检出率为19.30%;α-地贫复合β地贫41例(3.90%),重型β地贫4例(0.35%),异常血红蛋白9例(0.85%)。结论通过新生儿滤纸干血斑进行血红蛋白成分分析可有效筛查出地贫患儿,值得推广应用,清远地区属于地贫高发区,在该地区开展新生儿地贫筛查很有必要,从而提高出生人口素质。     

毛细管电泳仪检测 HbA2在珠蛋白生成障碍性贫血筛查诊断中的价值

目的：探讨全自动毛细管电泳系统检测 HbA2在珠蛋白生成障碍性贫血筛查诊断中的应用价值。方法对经基因检测确诊的249例珠蛋白生成障碍性贫血患者和142例健康体检者进行毛细管血红蛋白电泳检测。以基因检测结果将研究对象分组,比较珠蛋白生成障碍性贫血组及各亚组与健康对照组 HbA2浓度的差异性,计算毛细管电泳系统检测HbA2在不同截断值时诊断α,β及α复合β珠蛋白生成障碍性贫血的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值。结果健康对照组 HbA2均值为（3.03±0.27）％,α珠蛋白生成障碍性贫血组 HbA2均值为（2.38±0.55）％,其中静止型、标准型及血红蛋白 H病分别为（2.61±0.46）％,（2.47±0.32）％和（1.07±0.17）％;β珠蛋白生成障碍性贫血组为（5.65±0.47）％,其中β0杂合子和β＋杂合子分别为（5.71±0.48）％和（5.56±0.43）％;α复合β型 HbA2均值为（5.7±0.82）％。与健康对照组相比,α珠蛋白生成障碍性贫血及其静止型、标准型、血红蛋白 H 病亚组 HbA2浓度明显降低（t值分别为11.73,5.02,12.91和33.46,P均＜0.01）,血红蛋白 H病组较静止型和标准型 HbA2浓度明显减低（t值分别为15.62和21.31,P＜0.01）,但静止型和标准型亚组之间无明显差异（t＝1.50,P＞0.05）。β珠蛋白生成障碍性贫血组及β0,β＋亚组、α复合β珠蛋白生成障碍性贫血组 HbA2浓度明显升高（t值分别为55.12,44.33,38.94和9.10,P 均＜0.01）,β0,β＋亚组之间,HbA2浓度无明显差异（t＝1.79,P＞0.05）。124例β珠蛋白生成障碍性贫血,毛细管电泳系统全部检出;117例α珠蛋白生成障碍性贫血,毛细管电泳系统只检出57例。分别以2.5％,3.5％为截断值,毛细管电泳系统检测单纯α,β珠蛋白生成障碍性贫血的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为48.7     

河源市新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血筛查及基因型分析

目的分析河源市新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血筛查结果,探索该地区新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血基因型分布特征.方法采用毛细管电泳检测160 370例新生儿干血斑标本Hb Bart's水平;召回筛查阳性新生儿,检测珠蛋白生成障碍性贫血基因;随机同时检测202例标本的Hb Bart's水平与珠蛋白生成障碍性贫血基因.结果筛...     

全自动毛细管电泳法定量测定血红蛋白A2快速筛查β珠蛋白生成障碍性贫血的应用评价

目的 对全自动毛细管电泳(CE)分析仪定量检测血红蛋白A2(HbA2)用于筛查β珠蛋白生成障碍性贫血(β地贫)基因携带者进行方法学评价.方法 随机选择82对夫妇及150对地贫高危夫妇,采用全自动CE分析仪检测HbA2,计算批内、批间变异系数,评价精密度和稳定性;与高效液相色谱法(HPLC)进行比较;以基因诊断结果为金标准,评价CE检测地贫的准确性.结果 CE检测批内、批间精密度较好;与HPLC检测HbA2结果的相关系数为0.947;CE检测当地健康者HbA2的95%频数分布范围为2.2%～3.4%;CE诊断β地贫杂合子的HbA2临界值为4.05%;在基因诊断确诊的65例β地贫杂合子、10例αβ复合地贫、3例HbE病中,CE仅漏诊1例,无误诊.结论 全自动CE分析是一种快速直观、分辨率高、稳定性和精密度好的HbA2测定方法,适用于β地贫杂合子筛查.     

全自动血红蛋白电泳在珠蛋白生成障碍性贫血诊断中的临床价值

目的 探讨全自动血红蛋白电泳在珠蛋白生成障碍性贫血诊断中的应用.方法 收集696例受检者,应用法国西比亚公司(sebia)生产的全自动血红蛋白高效毛细管电泳仪进行血红蛋白电泳,同时分析其检测结果.结果 696例受检者中,检出α珠蛋白生成障碍性贫血41例,阳性为5.9%;β珠蛋白生成障碍性贫血146例,阳性为21.0...     

全自动毛细管电泳技术在筛查地中海贫血中的临床诊断价值

目的探讨全自动毛细管电泳技术在地中海贫血筛查中的临床诊断价值。方法选取2008年9月-2012年4月我院筛查的380例患者作为研究对象，分别采用琼脂糖凝胶电泳技术和全自动毛细管电泳技术对地中海贫血进行筛查，以通过PCR基因诊断技术进行确诊的结果为参照，比较两种筛查技术的检出率和血常规检查结果，以明确其临床价值。结果采用PCR基因诊断技术在380例患者中共有108例确诊为地中海贫血。对于α-地中海贫血，全自动毛细管电泳技术的检出率为90．91％，明显高于凝胶电泳技术的检出率65．91％；对于β-地中海贫血，毛细管电泳技术和凝胶电泳技术的检出率分别为94．23％和71．15％，全自动毛细管电泳技术检出率明显高于凝胶电泳技术；地中海贫血的MCV、CH均值相对于异常血红蛋白病HbE、HbCS值稍低，差异有统计学意义（P〈O．05）。结论全自动毛细管电泳技术在地中海贫血筛查中检出率高，具有显著的优越性，能够为我国地中海贫血诊断工作提供更有力的技术保障。     

全自动多通道毛细管区带电泳法在血清蛋白分析中的临床应用

目的用毛细管区带电泳(CE)技术进行血清蛋白检测结果与琼脂糖凝胶电泳(AGE)技术的检测结果进行比较分析以探讨CE的临床应用。方法使用全自动毛细管电泳仪(法国Sebia公司的4·51版本Capillarys电泳仪)及相应试剂,在7kV电压、35·5℃、pH10的缓冲液条件下,在15·5cm×25·0μm硅毛细管内进行血清蛋白电泳,用200nm波长检测各种蛋白质的百分比浓度。结果与AGE的结果比较相关性,进行CE的精密度、线性检测及干扰实验。CE和AGE比较,白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白及γ-球蛋白的相关系数分别为0·929、0·924、0·841、0·789和0·926,P<0·001相关性好,无统计学意义。蛋白质含量3个水平不同标本的批内、批间结果,白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白和γ-球蛋白的变异系数(CV)值均小于10·08%精密度好。血清总蛋白浓度在71·10~11·16g/L范围内各种蛋白线性关系良好,白蛋白最低检出量为6·87g/L,γ-球蛋白为1·78g/L。血清总胆红素含量≤144·7mmol/L、甘油三酯含量≤8·18mmol/L时对CE结果无干扰,纤维蛋白原和血红蛋白对CE结果有干扰。结论CE技术是一种灵敏度高、精确度好的血清蛋白检测技术,随着设备自动化的实现,分析操作将更简便、快速,适于临床化学实验室使用。     

Evaluation of a new capillary zone electrophoresis system for the identification and typing of Bence Jones Protein

OBJECTIVES: Capillary electrophoresis has recently emerged as a new sensitive technique for the separation of urinary proteins. We evaluated a new method for Bence Jones Protein (BJP) detection and characterization on native urine samples by the Paragon CZE 2000 system. To avoid interference in electrophoretic separation, urine samples were preliminarily treated for the selective removal of interfering salt particles. DESIGN AND METHODS: The evaluation was done on a total of 350 fresh 24-h urine samples. The salt particle removal consisted of a manual chromatographic separation, optimized in the course of our evaluation. Capillary zone urinary protein electrophoresis (CZ-UPE) was compared with conventional high-resolution electrophoresis on an agarose gel, while capillary immunosubtraction (CZU-IFE) was compared with agarose gel immunofixation. RESULTS: After finding a consistent protein loss in eluates, the preanalytical treatment was optimized by changing sample dilution and eluate collection. The within- and between-run imprecision values for monoclonal peaks corresponding to BJP ranged from 0.4-12.2% to 3.3-6.3%, respectively. The detection limit for BJP, defined as the lowest measurable monoclonal peak on CZ-UPE, was 0.0012 g/L for kappa BJP and 0.0007 g/L for lambda BJP. CZ-UPE and CZU-IFE sensitivities were significantly lower in urine samples with a total protein level < or = 100 mg/L (67% and 78%, respectively) compared to those with total protein >100 mg/L (92% and 94%, respectively). Comparison between BJP measurements obtained from densitometric scanning with those from absorbance tracing showed a correlation coefficient of 0.994 and a bias of 29.8 mg/L. CONCLUSIONS: Paragon CZE 2000 can be introduced in routine for screening and typing of BJP; in urine samples with a total protein level >100 mg/L, the performance is consistent with results from published validation studies on CZE applied to serum samples.     

利用毛细管电泳测定血清中维生素K的含量

目的 建立毛细管电泳定量检测血清中维生素K1和K2的方法。方法 利用固相萃取方法提纯血清中维生素K，将20mmol/L的四硼酸钠、10mmol/L的SDS加入到含有80％甲醇、10％去离子水、10％乙腈的溶液中配置成缓冲液，在254nm波长条件下对样本进行分离。结果 利用这种方法对血清中维生素K1和K2进行了有效的分离，该方法的线性低于病理状态下血清中维生素K的浓度，回收率为97％—103％，日内精密度(CVs)和日间精密度分别为7．16％—8．03％和10．08％—11．3％。结论 毛细管电泳方法测定血清中维生素K1和K2，具有快速、灵敏、定量检测等优点，可能成为测定人类血清中维生素K状态的有效检测方法。     

血清蛋白的毛细管电泳分析

采用毛细管电泳技术建立了血清蛋白毛细管自由区带电泳分析方法，并与醋酸纤维薄膜电泳法相比较。利用ｐＨ９．８、１００ｍｍｏｌ／Ｌ硼酸缓冲液作电泳缓冲液，未涂渍毛细管２１ｃｍ×５０μｍ（ｉ．ｄ），检测波长２００ｎｍ，当电压为０．５ｋＶ／ｃｍ时，在５分钟内可将血清蛋白分为五条蛋白区带。利用ｐＨ８．５、２５ｍｍｏｌ／ＬＳＤＳ、２０ｍｍｏｌ／Ｌ硼酸缓冲液作样品稀释液，未涂渍毛细管４５ｃｍ×５０μｍ（ｉ．ｄ），在电压２２．５ｋＶ条件下，可将血清蛋白分离１０条区带。该方法稳定、重复性好。结果表明毛细管自由区带电泳可作为临床实验室分析血清蛋白常规分析方法     

毛细管电泳法分析糖基化血红蛋白

目的：探讨毛细管电泳在分析糖基化血红蛋白水平方面的临床应用价值。方法该文利用长30 cm、内径25μm 的未涂层熔融石英毛细管,利用血红蛋白在415 nm 波长处的特异性吸收峰,二极管阵列（PDA）法检测健康人与糖尿病及高危人群中的糖基化血红蛋白（HbA1c）水平。在研究过程中,对精密度和准确度进行了精确分析。结果 HbAlc 和非 HbAlc 成功分离,峰型清晰锐利且能对 HbAlc 进行定量分析。结论毛细管电泳法具有特异性好、精密度和准确度高等优点,因此,该法应该在临床上被推广应用。     

全自动毛细管电泳检测11519例血红蛋白的结果分析

目的分析全自动毛细管电泳的血红蛋白电泳检测结果,并探讨血红蛋白电泳对血红蛋白病的筛查价值。方法收集2011年1月至2012年6月来自该院和外院1岁以上进行血红蛋白检测的患者资料,记录通过毛细管电泳检测的血红蛋白结果及基因检测结果,分析检出率和基因符合率。结果在此期间共检测11 519例血红蛋白电泳标本,筛查出1 193例疑似血红蛋白病患者,检出率10.36%,其中疑似α珠蛋白生成障碍性贫血(地贫)患者395例,占3.43%,疑似β地贫患者755例,占6.55%。HbE变异体检出18例,占0.16%,HbJ-K变异体检出20例,占0.17%,HbN带1例,HbD带4例。α地贫基因符合率75.07%,β地贫基因符合率达97.37%。HbE与基因符合率100%。结论毛细管电泳仪可有效地分离血红蛋白各组分,血红蛋白电泳可以较好的筛查血红蛋白病。