不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELlSA检测的影响

目的 评价不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测结果的影响,特别是加样量属微量的试验.方法分别用300μl和800μl的一次性加样针分配纯水10μl、50μl和100μl,称重并计算相对误差和精密度;各选一份HBsAg、抗-HBs、 抗-HCV、 抗-HEV IgM以及抗-HEV IgG室内定值弱阳性质控品,在全自动Addcare ELISA 600分析系统分别用300μl和800μl一次性加样针进行检测,计算该五个项目各孔间S/CO值和CV值,并进行统计学分析.结果两种容量加样针分配10μl、50μl和100μl纯水的相对误差E和精密度CV均达到移液器国家计量基准,使用300μl容量加10μl和50μl的准确度明显优于800μl(P<0.05),加100μl差异无统计学意义(P>0.05),使用300μl容量三种加样量的CV值均小于800μl;两种容量加样针检测抗-HBs、抗-HCV和抗-HEV IgM的S/CO值有显著差异(P<0.05),HBsAg和抗-HEV IgG无显著差异(P>0.05),使用300μl容量加10μl项目各孔间S/CO值的CV值明显小于800μl.结论不同容量一次性加样针对加样量10μl和50μl的检测项目影响较为明显,在使用全自动Addcare ELISA检测时,应当选择适当容量的加样针以满足微量样本分配准确度和精密度的要求.     

不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测的影响

目的评价不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测结果的影响,特别是加样量属微量的试验。方法分别用300μl和800μl的一次性加样针分配纯水10μl、50μl和100μl,称重并计算相对误差和精密度;各选一份HBsAg、抗-HBs、抗-HCV、抗-HEV IgM以及抗-HEV IgG室内定值弱阳性质控品,在全自动Addcare ELISA 600分析系统分别用300μl和800μl一次性加样针进行检测,计算该五个项目各孔间S/CO值和CV值,并进行统计学分析。结果两种容量加样针分配10μl、50μl和100μl纯水的相对误差E和精密度CV均达到移液器国家计量基准,使用300μl容量加10μl和50μl的准确度明显优于800μl(P0.05),加100μl差异无统计学意义(P0.05),使用300μl容量三种加样量的CV值均小于800μl;两种容量加样针检测抗-HBs、抗-HCV和抗-HEV IgM的S/CO值有显著差异(P0.05),HBs Ag和抗-HEV Ig G无显著差异(P0.05),使用300μl容量加10μl项目各孔间S/CO值的CV值明显小于800μl。结论不同容量一次性加样针对加样量10μl和50μl的检测项目影响较为明显,在使用全自动Addcare ELISA检测时,应当选择适当容量的加样针以满足微量样本分配准确度和精密度的要求。     

全自动加样仪混匀参数对质控品检测结果的影响

目的 探讨在酶联免疫吸附试验(ELISA)加样过程中，全自动加样仪对室内质控品进行混匀处理的实验意义。方法 质控品在加样前均进行漩涡震荡混匀，后在相同的检测条件下经STAR全自动加样仪加至同1块酶免板中进行检测，比较质控品在加样针混匀与不混匀情况下S/CO值的差异以及2种情况下质控品检测值的频数分布，受混匀参数影响较大的质控品用同厂家不同批号试剂进行同样的试验并分析结果是否一致。结果 全自动加样仪不对质控品进行混匀处理时，抗-HCV质控品S/CO值明显低于混匀质控品的检测值(P<0.000 1)。部分检测系统所测不混匀抗-TP质控品以及抗-HIV质控品的S/CO值与该项目混匀质控品检测值也有差异(P<0.05)。未经加样针混匀的抗-HCV质控品有部分S/CO值分布在<2的区间。同厂家不同批号试剂分别检测抗-HCV质控品，混匀与不混匀处理的质控品检测值之间均存在差异(部分P<0.05)。结论 尽管加样前质控品均进行漩涡震荡混匀，如果STAR全自动加样仪不设置质控品混匀参数，部分质控品的检测结果依然会受到影响。     

加样针污染致不同项目拖带情况分析

目的探讨不同项目、不同值域的拖带规律,为制订拖带克服措施和献血者(血液)保留淘汰策略提供依据。方法各个项目均用RSP100(4针型)全自动加样仪加样,用同样的冲洗程序和冲洗量进行加样针冲洗,用FAME16/20全自动酶免分析仪进行后处理,从第2列开始,以列为序,阳性孔后每间隔3孔有1孔有反应,取原标本和重采标本经手工加样复检阴性即纳入拖带污染统计。将阳性孔按S/CO值进行分组,对不同阈值造成拖带的情况进行评价。结果不同项目的拖带程度和频率有明显差异,抗-HIV项拖带最为严重,抗-HCV项次之,TP和HBsAg最低,拖带率随着S/CO值的升高而升高,当样本测定值在Cut off值的20倍以上时,抗-HIV项可有80%的样本发生拖带,抗-HCV项可有40%的样本发生拖带。结论加样针老化是造成拖带率逐年上升的主要原因,各项目拖带情况不一与样本的阳性程度、试剂灵敏度、加样量有关,拖带的预防应从做好仪器维护保养、加大加样针的洗涤时间和洗涤量、推广使用一次性加样针、献血前进行快速检测筛除阳性程度较高的标本等方面进行考虑。     

全自动酶免分析系统的应用分析

目的评价全自动酶免检测与手工检测的效果,探索全自动酶免检测中所遇问题的解决办法。方法利用HBsAg质控血清0．5、1ng／ml和抗-HCV质控血清1NCU／ml进行两种检测方法的孔间、板间精密度分析;采用HBsAg血清盘进行两种检测方法的特异性、灵敏度分析;采用加样间只用水冲针2次和加样间洗液冲针后再用水冲洗针内外壁的办法,探索消除携带污染问题的解决方法。结果全自动酶免检测的孔间、板间精密度均高于手工检测,二者检测的特异性、灵敏度均佳;但使用永久性加样针的样本处理器存在携带污染,可通过洗液冲洗后加水冲洗针内外壁或进一步调整冲洗液量、强度、次数来解决,同时对样本的稀释效应不应忽视。结论ELISA全自动酶免检测分析提高了血液检测的精密度水平,可确保血液检测质量和安全。     

STAR超细加样尖在抗-HCV ELISA检测中的应用

目的探讨分析STAR超细加样尖（300μl SLIM Tips）在抗-HCVELISA检测中加样的可靠性。方法全自动加样器利用STARSLIM超细加样尖吸取混合浆10μl，称重并计算精密度和偏差范围；分配1NCU／ml抗-HCV血清1份为16孔（A组），用正常样本血浆倍比稀释1NCU／ml抗一HCV血清为1；2、1：4及1：8各1份并均分配为16孔（A1-A3组）；1份抗-HCV可疑样本分配为16孔（B组）及1份抗-HCV阴性样本分配为8孔（C组），然后用FAME24／20全自动酶免分析仪进行检测并分析。结果加样的精密度和偏倚范围均可满足检测要求，所有样本符合率100％，重复性和均一性满足试验要求。结论STAR全自动加样仪可以使用300μl超细加样尖进行抗-HCVELISA检测。     

小型血站实验室设备性能比对方法探讨

目的探讨小型血站血液检测实验室设备性能比对的方法。方法比较2台不同型号的全自动加样仪、2台同系列全自动酶免后处理系统检测性能的一致性:使用4种ELISA检测试剂,分别检测HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、梅毒定值质控品和20份常规献血者标本,应用χ2检验和Kappa检验,比较上述2组设备检测结果的一致性。结果1)2台全自动加样仪抗-HCV、抗-HIV定性检测加样的一致性较好。2)2台同系列全自动酶免后处理系统,4种试剂一致性均为100%(40/40),经χ2检验一致性无统计学差异(P0.05)。结论小型血站实验室可以通过对定值质控品,和常规献血者标本的检测结果进行处理分析,比对酶免检测设备之间的性能是否一致。     

影响FAME全自动酶免分析系统检测因素探讨

目的　探讨 3种常见的影响全自动酶免分析系统检测结果的因素 ,提高 ELISA法检测结果的准确性。方法　 ( 1 )随机选择对照组和实验组各 44份无偿献血者血样 ,分别进行两种不同方式的抗凝 ,应用 FAME全自动酶免分析系统进行 HBs Ag、抗 -HCV、抗 -HIV、TP4个项目检测 ,比较两组检测结果。 ( 2 )在全自动加样仪的加样高度设置中 ,不断增加加样高度 ,观察 FAME对 4个质控血清平行孔的检测效果。( 3 )在不同温度的 FAME洗液下 ,对 88份正常的无偿献血者血样进行 4个项目检测 ,观察不同温度的洗液对检测结果的影响。结果　 ( 1 )除抗 -HCV外 ,实验组中其他 3项检测结果均有假阳性出现 ,且阴性标本的 S/CO值明显高于对照组 ( P<0 .0 0 1 )。( 2 )当加样高度低于 9.1 mm时 ,抗 -HCV有假阴性出现 ,4项检测的 CV值均较高 ,均一性差。 ( 3 )洗液温度低于 1 4℃时 ,除抗 -HCV外 ,其他 3项检测结果有假阳性出现 ,CV值较高 ,均一性差。结论　标本的抗凝效果、全自动加样仪的加样高度和洗液温度对全自动酶免检测结果均有影响 ,只有在血样充分抗凝、加样高度和洗液温度适当等条件下 ,才能获得准确的检测结果     

检测抗-HIV1标准物时样品针加样先后顺序的改变对S/CO值的影响

目的 全自动酶免分析仪酶联免疫吸附试验法检测人类免疫缺陷病毒抗体1型(抗-HIV1)标准物.方法 检测石景山医院患者血清样本带抗-HIV1标准物时,先加标准物后加患者血清与先加患者样本血清后加标准物这种加样针次序的改变分析对标准物血清S/CO值的影响.结果 检测过程中,仪器样品针对抗-HIV1标准物与患者血清标本加样的...     

全自动加样仪使用一次性加样针的必要性

近年来,全自动加样仪在血站血液标本检测中被广泛应用,全自动加样仪避免了检验人员手工加样易出现的错加,漏加样本、试剂以及加样精度不够而导致的差错和误差,确保了加样的准确性,大大提高了血站检测工作的效率,得到检验人员充分认可。但日常工作中,我们发现使用永久性钢针会造成拖带现象的发生,拖带现象不但会造成假阳性,更可怕的是造成假阴性,引起输血传播疾病。为彻底解决拖带现象,我们建议全自动加样仪使用一次性加样针。     

对抗-HCV阳性标本的结果分析

目前血站对抗-HCV检测主要是用ELISA法[1]检测抗-HCV。由于在工作中存在着许多影响ELISA法检测结果的因素,从而经常导致检验结果出现误差。笔者从7860份无偿献血的标本中初检出现-HCV阳性标本86份,对每一份阳性标本用两种不同试剂做双孔复试,结果及分析报告如下:1资料方法1.1标本来源本市无偿献血者。1.2试剂丙肝病毒抗体酶联免疫疫试剂盒厂家:(1)北京万泰;(2)北京金豪。以上试剂均经中国药品生物制品检定所鉴定合格,并在有效期内使用。1.3仪器(1)“AT”全自动加样系统;(2)“FAME”全自动加样系统。1.4方法及操作“ELISA’’法,严格按照试剂操说明书在仪器上编辑工作程序。用“AT”加样器对标本进行加样处理,用“FAME”全自动酶免系统进行试验操作。初检试剂为万泰试剂,复检试剂为金豪试剂。用两种试剂各双孔进行检测。2结果初检:以临界值(CO)为界判定抗-HCV阳性标本86份。复检:以CO值为界值,两种试剂检测,只要有一种检测结果呈阳性反应判为阳性。结果判定阳性标本25份(OD值见附表),阴性标本61份,初筛和复检结果符合率为29.1%。经信反馈,电话随访,25份抗-HCV检测阳性献血...     

全自动加样仪加样监控及样本漏加的预防

建立全自动加样仪漏加样本的判别方法及漏加样本的预防措施,对于提高检测质量具有重要意义。本文利用酶标仪对全自动加样仪加样结果进行监控,并对全自动加样漏加原因进行初步分析,以期避免因加样过程的漏加而引起非试剂因素的血液筛查的漏检。现报告如下。     

加样时差对不同试剂检测乙肝病毒标志物的影响

目的探讨加样时差对不同ELISA一步法试剂检测乙肝病毒标志物的影响。方法用上海科华及厦门新创公司生产的试剂盒测定患者及质控样本。样本加入反应孔后分别于0、30和60s后加入酶标记物（新创HBeAb还要同步加HBeAg中和试剂）．余下步骤均按说明书严格操作。结果对于HBsAg、HBsAb、HBeAg测定,加样时差对较高浓度样本的吸光度A值影响较小,而较低浓度样本的吸光度A值均随加样时间的延长而增高。两种试剂检测HBeAb的吸光度A值均随加样时间的延长而下降。科华试剂检测HBeAb时吸光度A值随加样时闯的延长而下降。新创试剂检测HBeAb时由于酶标试剂及中和试剂同时加入,故受影响较小。结论加样时差导致的不公平竞争可对ELISA一步法检测试剂的结果产生影响。实验室应尽可能实现自动化,或在手工加样时对不同项目尽可能分别加样以减少时差的影响。     

全自动加样器STAR加样编程的优化

我们根据采供血系统血液检测的特点[1],结合全自动加样器,对原有的加样程序进行了优化,在同一块微孔板上对HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP日常样本作单孔分配和再检样本的双孔分配,解决了长期以来再检标本手工加样的缺点,减少了单独检测再检标本造成的试剂浪费,且实现了条码的自     

献血者血液样本手工检测与全自动酶免分析系统操作结果比较

目的：献血者血液样本手工检测与全自动酶免分析系统操作结果分析比较。方法：对全自动酶免分析系统测定HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、TP抗体结果为阳性的样本进行留样。再次分别用全自动酶免分析系统和手工法同种试剂双孔检测，确认结果后进行分析比较。结果：全自动酶免分析系统FAME（24／20）测定结果：HBsAg阳性率99．8％；HCV抗体阳性率99．5％；HIV抗体阳性率100％；TP抗体阳性率98．8％，手工法测定结果HB8鲰阳性率90．8％；抗-HCV阳性率93．1％；抗-HIV阳性率97．3％；TP阳性率92％。全自动酶免分析系统以其高灵敏度和精密度更加适合采供血机构大批量样本的检测。结论：全自动酶免分析系统检测结果符合预期值，避免了手工操作的误差，实验重复性好。但因全自动酶免分析系统灵敏度较高，假阳性出现频率略高于手工法。     

丙型肝炎病毒抗体筛查阳性结果确证方案的探讨

目的明确抗-HCV酶免检测结果与确证阳性结果之间的相互关系,以期建立简便、经济的血液筛查实验室抗-HCV确证试验方案。方法使用重组免疫印迹试验结合核酸检测方法对134份酶免抗-HCV阳性样本确证,初步探讨2或3种抗-HCV酶免试剂(Ortho、Murex和科华联合复检的S/Co值与阳性预期值的关系及不同试剂组合检测的阳性预期值。结果134份样本中,92份真阳性,5份可疑,其余均为阴性。Ortho和Murex试剂的S/Co与阳性预期值呈正相关,当S/Co≥3.8时,阳性预期值分别可达98.33%和97.78%。Murex联合科华、Ortho联合科华以及3种试剂同时检测为阳性时的阳性预期值为100%;Ortho联合Murex的阳性预期值为98.48%,与上述其它2或3种试剂组合比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论2种或3种酶免试剂联合复检的确证方案优于美国CDC推荐的S/Co≥3.8方案。在常规血液筛查实验室,可以选择3种抗-HCV试剂中的任2种同时复检,先行对抗-HCV阳性标本确证,对无法确证的样本再作重组免疫印迹试验分析。     

2种不同ELISA试剂检测抗-HCV结果比较

目的探讨不同ELISA试剂在实际血液检测抗-HCV中存在的差异。方法使用STAR全自动加样仪和FAME全自动酶免分析仪，分别用不同厂家的ELISA试剂对2006年1月-2007年6月年无偿献血者标本检测抗-HCV。结果75295份标本中共检出HCV阳性835份，阳性率为1．11％，其中厦门新创试剂检出329份．检出率为0．44％．上海科华试剂检出604份，检出率为0．8％，经统计2种不同抗-HCV ELISA试剂阳性检出率存在显著性差异。厦门新创试剂共检测8批次，其中8批次阳性符合率均为30／30；阴性符合率5批次为30／30，3批次为29／30。上海科华试剂共检测9批次，其中9批次阳性符合率均为30／30：阴性符合率4批次为30／30，5批次为29／30。厦门新创试剂孔间变异系数为9．53&#177;2．31％和上海科华试剂孔间变异系数为7．90&#177;1．86％．经统计无显著性差异。8批次厦门新创试剂盒和9批次上海科华试剂盒的稳定性和最低检出量都能符合血清盘试剂盒的要求。结论2种不同ELISA试剂的抗-HCV检测结果存在差异．单独使用一种试剂都有可能漏检，在实际工作中应重视抗-HCV检测试剂的选择和质量控制。     

全自动酶免疫分析系统加样容量的双波长比色校正

实验室徽容量器具的校正大多采用经典的水银重量法,其结果准确可靠但操作繁琐[1,2]．千分尺校正法又只能校正刻度吸管[3],且需要特定仪器。对于微量加样器的校正则采用22℃蒸馏水称重法（国际标准ISO／DIS865－1）,该法对环境条件和称星条件要求极高。这些方法均不适合校正全自动酶免疫分析系统的加样针及试剂加注部分。本文在参考文献[4,5]的基础上,在微孔板上加注液体,应用酶标仪双波长比色进行间接校正,经在全自动加样仅加样针、酶免疫仪的试剂加注部件上应用,获得良好结果,现报道如下。1材料1．1试验仪器瑞士Megalkx－ID智…     

不同加样方式对酶联免疫吸附试验检测抗-HBc的影响

目的探讨不同加样方式对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎(乙肝)病毒核心抗体(抗-HBc)的影响。方法采用4种不同加样方式对92例初检抗-HBc阳性的样本进行复检,观察样本在不同检测组中的光密度(OD值)变化。结果第3种方法由于模拟同时对乙肝5项进行加样,加样时间最长,第1种方法时间次之,第2种和第4种方法耗时相差不大,第4种方法略长。4种不同加样方式对92例样本进行检测的OD值与加样时间成反比,第3种方法OD值最低,即阳性率最高。结论样本加入后立即加入酶标抗体(加样时间短)可减少加样时差对检测结果的影响。     

2种不同ELISA试剂检测抗-HCV结果比较

目的探讨不同ELISA试剂在实际血液检测抗-HCV中存在的差异。方法使用STAR全自动加样仪和FAME全自动酶免分析仪，分别用不同厂家的ELISA试剂对2006年1月-2007年6月年无偿献血者标本检测抗-HCV。结果75295份标本中共检出HCV阳性835份，阳性率为1．11％，其中厦门新创试剂检出329份．检出率为0．44％．上海科华试剂检出604份，检出率为0．8％，经统计2种不同抗-HCV ELISA试剂阳性检出率存在显著性差异。厦门新创试剂共检测8批次，其中8批次阳性符合率均为30／30；阴性符合率5批次为30／30，3批次为29／30。上海科华试剂共检测9批次，其中9批次阳性符合率均为30／30：阴性符合率4批次为30／30，5批次为29／30。厦门新创试剂孔间变异系数为9．53±2．31％和上海科华试剂孔间变异系数为7．90±1．86％．经统计无显著性差异。8批次厦门新创试剂盒和9批次上海科华试剂盒的稳定性和最低检出量都能符合血清盘试剂盒的要求。结论2种不同ELISA试剂的抗-HCV检测结果存在差异．单独使用一种试剂都有可能漏检，在实际工作中应重视抗-HCV检测试剂的选择和质量控制。