胎盘发育及功能评价的研究进展

胎盘对于妊娠期胎儿生长发育至关重要,胎盘功能障碍将导致胎儿生长受限,甚至引起胎儿死亡.滋养层细胞高效侵润、融合及母胎界面的血管构建有助于建立母-胎间物质交换.滋养层细胞增殖异常、滋养层细胞侵润子宫壁不完全、单核滋养层细胞融合为多核滋养层细胞功能紊乱等,将会影响胎盘发育和营养物质运输.胎盘分子标志物的早期诊断作为胎盘功能评价有助于改善妊娠结局,临床上主要以血管生成因子、胎盘激素、与胎盘功能有关的基因等作为检测指标.本文就滋养层细胞功能、胎盘分泌特异性激素、胎盘功能早期诊断标志物等最新研究进展做一综述.     

生殖周期中小鼠子宫生长抑素细胞的研究

为了解生殖周期中小鼠子宫生长抑素细胞分布及生长抑素含量的变化。采用免疫细胞化学技术观察小鼠子宫生长抑素细胞分布情况 ;以放射免疫方法检测生殖周期中小鼠子宫生长抑素的水平。结果显示 ,生殖周期中各期小鼠子宫内膜固有层均有生长抑素阳性细胞反应 ,多出现于子宫腺体周围或近肌层处固有层内 ,肌层间结缔组织偶见。妊娠第 17天 ,壁蜕膜内结缔组织及胎盘绒毛膜上皮下方胚性结缔组织 ,富含生长抑素阳性细胞。妊娠期小鼠子宫生长抑素水平明显下降 ,与间情期比较 ,有显著性差异 (P<0 .0 5)。结论 :生殖周期中各期小鼠子宫壁上有生长抑素阳性细胞分布 ;妊娠晚期壁蜕膜和胎盘绒毛膜上皮下方胚性结缔组织 ,含有相当数量生长抑素阳性细胞。妊娠期小鼠子宫生长抑素水平减少。生长抑素的细胞来源及其在生殖周期中对小鼠子宫的调节有待进一步研究     

C57Bl/6J小鼠妊娠早-中期子宫自然杀伤细胞研究

目的　C57Bl/6J小鼠妊娠早 中期子宫自然杀伤(UNK)细胞的数量和分布特征分析。　方法　应用 DBA组织化学染色技术和Optimas数字图像分析技术对小鼠正常妊娠 UNK细胞进行分析。　结果　C57Bl/6J小鼠在妊娠第 0、3 天未见DBA染色的UNK细胞,第6天子宫中膜区发现未成熟UNK细胞,第10天于子宫蜕膜区和中膜三角区 UNK细胞数量达峰值,第12天开始减少并伴有子宫螺旋动脉变粗等形态改变。　结论　UNK细胞作为一种大颗粒淋巴细胞,在小鼠正常妊娠过程中数量变化明显,组织分布发生变化。     

细胞表面半乳糖基转移酶介导外胎盘锥扩展和次生滋养层巨细胞迁？…

细胞表面半乳糖基转移酶是层粘连蛋白（ＬＮ）非整鸽纱类受体，能与其上寡糖链的Ｎ－乙酰葡糖胺残基识别和结合。作者从妊娠第８．５天雌鼠子宫蜕膜中剥离胚胎，显微分离外胎盘锥（ＥＰＣ）后进行体外培养，用（１）ＬＮ预先半乳糖基化；（２）外源ＧｌｃＮＡｃ底物竞争；（３）ＧａｌＴａｓｅ缺本阻断；（４）α乳肖蛋白处理等方法干扰滋养层细胞与ＬＮ的相互作用，均对ＥＰＣ粘附无影响，但抑制ＥＰＣ扩展和次一滋养层巨细胞（ＳＴ     

埃兹蛋白在早孕自然流产患者蜕膜、绒毛的表达

目的探讨埃兹蛋白在胎盘形成过程中是否有作用及其与自然流产的关系。方法采用免疫组织化学方法检测自然流产组及正常妊娠组蜕膜和绒毛中埃兹蛋白的表达。结果在蜕膜及绒毛组织的蜕膜细胞以及滋养层细胞的胞膜和胞浆内均可见深浅不一的棕黄色颗粒沉着。与正常妊娠组相比,自然流产组蜕膜组织中埃兹蛋白的表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与正常妊娠组相比,自然流产组绒毛组织中埃兹蛋白的表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论自然流产组较正常妊娠组蜕膜及绒毛组织中埃兹蛋白的表达减弱,推测埃兹蛋白低表达可能与胚泡植入过程中胚泡不易黏附、滋养层细胞侵袭力下降、胎盘形成不良有关,提示埃兹蛋白可能在胎盘形成及妊娠的维持过程中起作用。     

早早孕人子宫蜕膜及绒毛膜凝集素的组化分析

以凝集素作为组化探针研究早早孕期人子宫蜕膜、绒毛膜表面糖复合物的变化。结果表明：６种凝集素在早早孕期与子宫蜕膜及绒毛膜结合显示不同变化。其中刀豆凝集素（ＣｏｎＡ）、花牛凝集素（ＰＮＡ）、双花藕豆凝集素（ＤＢＡ）与子宫蜕膜结合随妊娠无数增加着色逐渐减弱。荆豆凝集素（ＵＥＡ－Ⅰ）与子宫蜕膜未见着色。麦胚凝集素（ＷＧＡ）、蓖麻凝集素（ＲＣＡ－Ⅰ）与子宫内膜在早早孕期着色程度未见有变化。ＰＮＡ、ＣｏｎＡ在与绒毛滋养层细胞结合随妊娠天数增加着色逐渐增强。ＵＥＡ－Ⅰ和ＤＢＡ与滋养层细胞在各期中未见结合。     

早期自然流产患者绒毛、蜕膜组织中血红素氧合酶-一氧化碳的表达

目的 探讨血红素氧合酶(HO)和内源性一氧化碳(CO)在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达情况及其相关性.方法 应用免疫组化法检测20例正常早孕和30例早期自然流产(SA)患者绒毛和蜕膜组织HO-1、HO-2的表达,双波长定量的方法测定两组碳氧血红蛋白(COHb)水平.结果 HO-1蛋白主要定位于蜕膜上皮细胞、蜕膜细胞、绒毛滋养层细胞和绒毛间质,HO-2蛋白主要定位于蜕膜上皮细胞、蜕膜细胞、绒毛滋养层细胞、绒毛间质和血管内皮细胞.SA组绒毛滋养细胞、绒毛间质HO-1、HO-2表达的水平均明显低于正常早孕组(P<0.01);SA组绒毛血管内皮细胞及蜕膜细胞、蜕膜血管内皮细胞HO-2表达的水平均明显低于正常早孕组(P<0.05);两组蜕膜腺上皮细胞HO-2的表达及HO-1在蜕膜组织的表达均无显著差异(P>0.05);SA组绒毛和蜕膜组织中的COHb含量明显低于正常早孕组(P<0.01,P<0.05).结论 HO-CO在母胎界面表达水平降低可能与早期自然流产的发病有关.     

胰岛素样生长因子结合蛋白1-3在人早孕期蜕膜和绒毛中的表达及其作用

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白1-3(IGFBP1-3)在早孕期蜕膜和绒毛中的表达及其作用。方法选取早孕5~7周行人工流产术的蜕膜和绒毛标本共48例,每一孕周分早、中、晚三个时期,每个时期5~6例,以分泌中期(周期第21天)子宫内膜标本为对照。采用免疫组织化学LsAB法和计算机图像分析法对IGFBP1-3在围着床期子宫内膜、蜕膜和绒毛滋养细胞的表达进行定位和定量分析。结果IGFBP1-3在子宫内膜腺、腔上皮、蜕膜细胞和绒毛滋养层中都有表达,其表达在孕5~6周达峰值,与对照的分泌中期内膜比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论IGFBP1-3在早孕期表达增强,推测可能参与了子宫内膜的蜕膜化、滋养层细胞侵袭性以及早期胚胎发育的调节过程。     

骨髓间质干细胞体外定向肌样分化的研究

目的 研究兔骨髓间质干细胞经5—氮杂胞苷诱导，在体外定向肌样分化的情况。方法 取兔胫骨骨髓，分离并培养骨髓间质干细胞，用5—氮杂胞苷苦(10μmol/L)定向诱导，分别在培养的第7、14、2l、28天用免疫组织化学的方法检测细胞中的肌球蛋白重链，取未经5—氮杂胞苷诱导正常培养的细胞为对照组。结果 兔骨髓间质干细胞经5—氮杂胞苷诱导，在其培养的第21、28天免疫组织化学染色方法检测细胞中的肌球蛋白重链呈阳性，而在其培养的第7、14天以及对照组，免疫组织化学染色方法检测细胞中的肌球蛋白重链呈阴性。结论 骨髓间质干细胞是骨髓来源的具有多向分化潜能的干细胞，在5—氮杂胞苷的定向诱导下，可以肌样分化。     

原因不明自然流产发病机制的研究

目的通过对正常妊娠模型小鼠CBA×BALB／c与自然流产模型小鼠CBA×DBA／2某些生物学特性对比研究,探讨胎盘单位免疫异常、细胞增生和凋亡失衡以及细胞的识别和黏附能力下降或缺陷等与原因不明自然流产之间的关系。方法建立正常妊娠小鼠模型CBA×BALB／c和自然流产小鼠模型CBA×DBA／2;采用免疫组化法检测两组模型绒毛滋养层和蜕膜组织中细胞因子与受体【（肿瘤坏死因子-a（TNF—a）及其受体（TNFR1）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP—1）、凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax、Fas、FasL和细胞增殖与黏附相关蛋白PCNA、OPN、Survivin）的表达;采用酶联免疫吸附试验（ABC—ELISA）测定两组模型血清sTNFR的表达,采用DNA缺口原位末端标记技术（TUNEL）测定两组模型绒毛滋养层和蜕膜组织细胞凋亡。结果自然流产模型蜕膜组织中TNF—a、MCP-1和TNFR1均显著高于正常妊娠模型,血清sTNFR亦显著高于正常妊娠模型;绒毛滋养层和蜕膜组织中细胞凋亡指数自然流产模型明最高于正常妊娠模型;自然流产模型绒毛滋养层和蜕膜组织中PCNA、OPN和Survivin表达均低于正常妊娠模型。结论原因不明自然流产的发生与胎盘单位免疫异常、细胞的增生和凋亡失衡以及细胞的识别和黏附能力下降缺陷有一定关系。     

Single lung allotransplantation of Japanese monkeys--an immunohistological appraisal of the acute rejection]

Eleven orthotopic single lung allotransplantations of Japanese monkeys (Macaca fuscata) were done without immunosuppression. In the 7 monkeys acute rejection was obvious on chest X-ray and hematoxyline-eosin (HE) staining of the biopsied specimen. On the chest X-ray film, progressive interstitial shadow of the grafts became apparent at the third postoperative day, and they turned out completely radiopaque at the 6th- or 7th postoperative day. The HE staining revealed prominent perivascular edema at the second postoperative day. Perivascular round cell infiltration appeared at the third day and the massive round cell infiltration was observed in the perivascular region, vascular wall and alveolar wall with the thickening of the alveolar wall. Immunostaining with human antilymphocyte monoclonal antibodies was also performed. CD8 positive cells (suppressor/cytotoxic T cell) were observed in the perivascular region at the second postoperative day, and CD8 positive cells and CD4 positive cells increased in number as the rejection progressed. Judging from the positive immunological cross reactivity between Japanese monkey and human, the early diagnosis of the acute rejection of the grafted lung may be possible by detecting the perivascular CD8 cells, even in the human-beings.     

Placenta percreta invading the urinary bladder

The placenta, normally confined to the decidual lining of the uterine cavity, can in some circumstances invade the muscular wall of the uterus, a condition known as placenta accreta. Less common is placenta increta, in which placental cotyledons become intertwined with the muscular stroma of the uterus. Placenta percreta, in which the trophoblastic tissues penetrate the serosa of the uterus and may extend directly to adjacent structures, is even more rare and is potentially life-threatening. There have been only 10 reports of direct invasion of placenta percreta into the urinary bladder. We review these cases and report 3 recent patients, one of whom was diagnosed pre-operatively by ultrasonography.     

T-cell mediated inflammatory pathway in osteoarthritis.

Osteoarthritis (OA) is not caused by a simple consequence of aging and cartilage degradation. Based on the conventional paradigm, OA has been considered a degenerative joint disorder. However, the dominant clinical symptom has been characterized by a non-infectious chronic inflammatory condition with infiltration of inflammatory cells in the synovial tissue or synovial fluid, especially in the early stage of the disease. The inflammatory process appeared to develop degeneration of chondrocytes and/or formation of osteophytes. Immunohistochemical staining of synovial tissue with OA in the early stage, suggests the presence of T-cell infiltration in the perivascular area, some of which were CD4 positive T cells. Among the T cells, we identified the clonality of restricted TCR usage of Vbeta chain by single strand conformation polymorphism (SSCP) method on T-cell repertoire. Therefore we address the immune response in primary OA.     

利用假孕小鼠建立小鼠行经模型的研究

目的利用假孕小鼠建立小鼠行经模型,并与以往的小鼠行经模型做对比。方法NIH雌鼠与输精管结扎的NIH雄鼠晚间合笼交配,翌日晨见阴栓为假孕第0天。第3.5天于左侧子宫角注射25μl花生油诱导蜕膜化,右侧子宫角为对照;第5.5天切除双侧卵巢(作为0 h),分别在0、8、12、16、24、32和48 h各时点行颈椎脱臼处死小鼠,收集子宫,观察组织形态学,阴道细胞学涂片观察出血情况。结果子宫在0 h可见广泛蜕膜化;8 h上皮有部分脱落,部分蜕膜化细胞出现核固缩;12 h子宫腔上皮基本脱落,核固缩凋亡坏死的区域继续扩大;1 6 h可见蜕膜化组织崩解;24 h崩解组织剥离;32 h组织开始修复;48 h组织修复完好。血清孕酮(P)浓度在切除卵巢后8 h开始快速下降,48 h降至0 h浓度的1/7。结论利用假孕小鼠人工诱导蜕膜化后,切除双侧卵巢可以模拟子宫内膜崩解脱落和再生。     

小鼠腹壁不同解剖层次丝线线结周围异物巨细胞浸润和纤维化程度的组织学比较

目的比较腹壁不同层次线结周围异物巨细胞浸润和纤维化程度,探索打结深度与线结炎症反应的相关性。 方法18只Balb/C小鼠在腹壁左向右分别纵向剪开3个皮肤切口,分别经切口用4-0带针慕斯线进针贯穿缝合腹壁至壁层腹膜不同层次,3个切口处分别打结于皮下、肌层内和腹膜外间隙。术后14和28 d取材打结部位腹壁标本,连续冰冻切片组织学观察。 结果HE染色显示各组线结位于腹壁不同解剖层次内（皮下、肌层和腹膜外间隙）。免疫组织化学和半定量检测显示皮下组线结周围异物巨细胞浸润和纤维化最显著,腹膜外间隙组线结周围异物巨细胞浸润和纤维化最轻微。 结论丝线用于腹壁打结深度与线结异物反应呈相关性;位于腹膜外间隙线结周围引起异物巨细胞浸润和纤维化程度轻微,皮下线结周围异物巨细胞浸润和纤维化程度明显。腹腔镜经皮腹膜外内环结扎术中将线结打在腹膜外间隙,有利于降低线结炎症反应和线结反应相关并发症的发生率,并为其提供理论依据。     

Tagln2在兔着床前子宫中的表达与调节

目的检测细胞骨架蛋白Tagln2mRNA在兔早期妊娠子宫中的表达与调节,以确定其是否与兔早期妊娠有关。方法采用原位杂交及Northern blot方法,检测Tagln2在早期妊娠、假孕及激素处理的兔子宫中表达部位及其表达的调控。结果Northern blot结果表明Tagln2mRNA高表达于兔早期妊娠的第2、3天及第7、8天的着床位点。原位杂交的结果表明Tagln2mRNA在早期妊娠子宫中呈时空特异性表达,高表达于第2至4天的子宫上皮及着床期第7、7．25、8天的着床位点,在妊娠第6至8天的非着床位点及假孕第6至8天的子宫中均没有检测到Tagln2mRNA的表达;在卵巢切除的子宫中,雌二醇及孕酮均可使Tagln2mRNA表达上调。结论结果表明Tagln2mRNA高表达于兔着床期的子宫内膜,而且表达受活性胚胎的诱导,并提示雌孕激素可上调其表达。     

肾盂恒压灌注下灌注时间对兔肾脏损伤的实验研究

目的探讨肾盂恒压灌注下灌注时间与兔肾脏损伤的关系。方法采用新西兰大白兔64只,随机建立肾盂灌注30min、60min、90min及假手术组动物模型,每组16只。灌注压力维持在100cmH2O,灌注液为生理盐水。分别于术后1d、5d留取灌注侧尿液,行24h尿蛋白测定,留取尿液后于术后1d、5d分批处死各组兔子,取灌注侧肾脏标本,行HE染色及透射电镜检查。结果各灌注组与假手术组相比均出现尿蛋白增高（P〈0.05）,且尿蛋白随灌注时间的延长而增加（P〈0.05）;各灌注组术后5d尿蛋白含量与术后1d相比降低（P〈0.05）;HE染色显示：术后第1天灌注30min组少数肾小球增大,囊腔及肾小管扩张,上皮细胞轻度水肿;随着灌注时间延长,扩张的肾小球增多且在灌注90min组时肾小管内出现大量蛋白管型。术后5d与术后1d各组比较,肾小球及肾小囊基本恢复正常,肾小管蛋白管型明显减少或消失。透射电镜下观察显示：术后第1天灌注30min组肾小球毛细血管管腔、肾小囊囊腔轻度扩张,随着灌注时间的延长,毛细血管腔及肾小囊腔扩张更加明显,灌注90min后可见部分细胞及细胞内线粒体出现空泡化。术后5d各组肾小球毛细血管管腔及肾小囊基本恢复正常或管腔扩张程度明显减轻。结论肾盂恒压灌注下灌注时间对肾脏损伤明显,且灌注时间越长肾脏损伤越严重,但在100cmH2O灌注压力下灌注时间在90min以内造成的肾脏损伤为可逆损伤。     

胚泡着床期碱性成纤维细胞生长因子在小鼠子宫内膜的转录和表达

为进一步阐明碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)在胚泡着床过程中的生物学作用。采用昆明小鼠 3 0只 ,随机分为 5组 ,分别于受精后 4～ 8天处死孕鼠。应用原位杂交和免疫组织化学的方法 ,检测了不同孕期的子宫内膜 b FGF的转录和表达状况。结果 :子宫内膜多种细胞可产生 b FGF,受精后第 4～ 5天 ,b FGF表达仅限于子宫腔上皮和腺上皮 ,b FGF在蜕膜细胞的转录则最早出现于受精的第 5天 ,随胚泡植入的进程 ,蜕膜细胞b FGF的转录和表达明显增加 ,但在胚泡着床部位周围蜕膜细胞转录和表达由有至无。表明 b FGF通过自或旁分泌的方式参与调节胚泡着床的生理过程     

Placental bed morphology in black women with eclampsia

Histopathological changes in the placental bed were studied in 7 primigravid patients with eclampsia and compared with those in 17 normotensive patients. Normal morphological changes, which included trophoblastic invasion of spiral arterioles of the decidual and myometrial segments, were noted in the biopsy specimens taken from normotensive patients but were not seen in the specimens obtained from patients with eclampsia.