肺癌患者外周血Foxp3检测及临床意义

目的检测肺癌患者外周血中Foxp3以及化疗前后的变化,探讨肺癌患者的发病机制,为肺癌临床治疗和预后提供依据。方法利用流式细胞仪检测96例肺癌患者和51例健康对照者外周血Foxp3水平,并对49例肺癌患者进行化疗前后的动态观察。结果肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞显著增多,化学治疗后较治疗前明显降低。结论CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞的增多与机体的免疫力下降以及肿瘤的发生发展有一定关系,化学治疗后有一定程度的恢复,检测Foxp3对肺癌患者发病机制的探讨和治疗观察有一定意义。     

Graves病患者外周血中CD5+B淋巴细胞的变化

为观察Graves病患者外周血中CD5 B淋巴细胞在治疗过程中的变化,我们应用流式细胞术检测Graves病患者药物治疗前后外周血CD5 B淋巴细胞,以探讨CD5 B淋巴细胞与Graves病病情活动的相关性.     

乳腺癌100例患者肿瘤组织CD14+和CD8+/CD28+细胞的检测

单核－巨噬细胞（macrophage，MΦ）和细胞毒T细胞（cytotoxicTlymphocyte，CTL）是体内维持免疫状态稳定的重要细胞，不仅在肿瘤发生发展中有重要作用，而且对肿瘤预后估计方面也有一定的实用价值犤１犦。乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一，其很多临床生物学行为和细胞生物学特性都影响着肿瘤患者病情发展、恶性度和预后犤２犦。既往大多数研究都是关注患者全身免疫状态对恶性肿瘤的影响犤３犦，而肿瘤局部组织免疫状态以及和其它生物学指标间的关系等还没引起学者们的足够重视。１９９９年９月～２００１年９月，本院对１００例乳腺癌患…     

非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞分析

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞（Treg）占CD4^＋T细胞的比例变化,探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测32例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果健康对照纽外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（0．54±0．51）％;NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（1．40±0．98）％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例明显升高,提示与肺癌免l癌逃逸有美。     

胃癌手术前后外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的：检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）在胃癌手术前后外周血中的变化,探讨Treg在肿瘤免疫中的作用。方法：收集初治胃癌患者38例作为研究对象,同时收集20例健康人外周血作为正常对照组。检测手术前3d和手术后14d外周血中CD4^＋CD25^＋Treg比例及T细胞亚群,将各检测结果结合临床、病理指标进行统计学分析。结果：胃癌患者术前外周血中Treg比例显著高于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。胃癌患者术前外周血CD8^＋T细胞比例明显低于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。术前外周血CD8^＋T细胞比例与Treg比例呈负相关（P〈0．05）。胃癌患者术前外周血中Treg比例在不同淋巴结转移情况和TNM分期之间差异具有统计学意义（P〈0．05）,其与淋巴结转移和TNM分期呈正相关（P〈0．01）。胃癌患者手术后Treg比例较术前下降,且下降程度与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度、病理分型以及手术方式无相关性。结论：Treg可能通过抑制CD8^＋T细胞的增殖及功能,促进肿瘤细胞的生长和发展。Treg与肿瘤的侵袭、淋巴结转移有关,提示Treg在一定程度上可作为检测疾病进展的免疫学指标。     

ITP病人外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-调节T细胞的检测及临床意义

目的：探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）病人外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-调节T细胞（Tregulatory cells,Treg）表达水平的变化及意义。方法：观察32例ITP病人及20例正常对照,应用流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg细胞的表达水平。结果：ITP病人治疗前CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg细胞表达水平明显降低（2．90±1．00）,与治疗恢复期（7．36±1．46）及正常对照组（4．52±0．94）比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。治疗恢复期病人CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg细胞表达水平明显高于正常对照组（P〈0．05）。结论：ITP病人外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg细胞表达水平下降,激素的有效治疗能提高病人机体内CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg细胞表达水平。     

SLE患者外周血CD_4~+/CD_8~+比值与临床表现36例分析

<正> 系统性红斑狼疮(SLE)因其流行地区广,发生率高,通常导致多系统损伤而成为当今临床医学的重要课题之一。就近几年来的研究报道来看,一些权威性检索工具,诸如《INDEX MEDICUS》,《EXCERPTAMEDICA — section 13,16,31》以及《BIOLOGICALABSTRACT》等每年以“Systemiclupus erythematosus”为“Subject”著录的文献题录或/和摘要均在数百篇之多。对于SLE的有效防治最终有赖于其发病机理的阐明。八十年代初Morimoto等首先报道了采用单克隆抗体检测T淋巴细胞亚群的研究,指出SLE活动期Ts亚群明显降低。此后,有些学     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、CD95+表达及临床意义

T淋巴细胞亚群在调节机体免疫机能中发挥着重要作用,也在某些疾病的发生与发展中具有重要意义.本研究采用流式细胞术检测30例慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血CD2+、CD3+、CD4+、CD8+及CD95+水平,探讨其在COPD发生、发展中的作用.     

复发性生殖器疱疹患者外周血CD4+细胞内细胞因子的表达

目的通过检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者发病期及静止期外周血CD4+细胞IFN-γ,IL-2,TNF-α,IL-4等细胞因子的表达情况,探讨CD4+细胞内细胞因子水平与RGH的发病关系.方法利用流式细胞分析法对33例RGH发病期患者,16例静止期患者,15例健康志愿者外周血CD4+细胞表达的IFN-γ,IL-2,TNF-α,IL-4细胞因子进行检测.结果RGH患者发病期Th1细胞因子(IFN-γ,IL-2,TNF-α)的表达较正常人群组明显下降(P＜O.05),Th2细胞因子(IL-4)表达较正常组显著升高(P＜0.01).Th1与Th2细胞因子水平与RGH患者年复发次数有明显的相关性(P＜0.05).结论RGH患者发病期存在显著的细胞免疫功能低下,Th1与Th2细胞因子平衡失调是RGH反复发作的重要原因.     

烧伤血清对离体大鼠肺泡巨噬细胞CD14表达变化的影响

目的 :探讨烧伤血清对离体大鼠肺泡巨噬细胞 (AM )CD14的mRNA基因和膜蛋白 (mCD14 )表达变化及其对AM分泌细胞因子的影响。　方法 :分离并收集大鼠AM ,以烧伤血清及LPS刺激 ,再分别以抗CD14抗体作用后提取总RNA ,用RT PCR方法检测不同时相点CD14mRNA表达 ;用ELISA方法检测培养液中TNF α和IL 6浓度 ;免疫组化法检测AM膜CD14蛋白表达变化。　结果 :经烧伤血清和LPS刺激后 ,AM的CD14基因以及蛋白表达从 1h起就开始增加 ,2h达峰值 ,然后逐渐减弱。上述改变在伤后 12h内持续 ,细胞因子分泌相应增加 ;抗CD14抗体阻断CD14作用后 ,CD14的基因和蛋白表达显著降低 ,细胞因子分泌亦相应减少。　结论 :严重烧伤后可能随着LPS增加 ,通过激活内毒素信号传导通路 ,使AM分泌细胞因子增加。这种作用可以被抗CD14抗体所阻断 ,提示严重烧伤后可以通过调节CD14的作用而减少细胞因子的合成和分泌     

CD4+CD25+Treg细胞在复发性自然流产中的作用及意义

目的 探讨复发性自然流产患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达特点及其相关临床意义。方法 选取2015年3月至2017年7月在我院妇产科就诊的复发性自然流产妇女100例作为复发性自然流产组(RSA组),另选择同期在我院妇产科就诊的正常妊娠产妇50例作为对照组(正常妊娠组)。采用流式细胞术检测两组外周血CD4+CD25+Treg细胞表达水平,并对两组结果进行比较分析。结果 复发性自然流产组CD4+CD25+Treg细胞表达水平为(5.06±1.35)%,显著低于正常妊娠组的(10.43±2.59)%(P0.05)。结论 复发性自然流产患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达水平较正常孕产妇显著降低,提示CD4+CD25+Treg细胞参与了复发性自然流产的发生、发展过程。通过检测CD4+CD25+Treg细胞表达水平变化可为复发性自然流产的发病机制提供新的思路,为临床诊疗提供更多的治疗方法。     

流式细胞术检测单核巨噬细胞吞噬荧光素标记结核分枝杆菌的方法学探讨

目的：建立流式细胞术检测单核巨噬细胞吞噬荧光素标记结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）的方法。方法：用不同浓度荧光素（FITC）标记Mtb,流式细胞术检测FITC对Mtb的标记率。健康人外周全血与FITC标记Mtb（FITC-Mtb）于37℃共孵育10~120 min,溶解红细胞,洗涤后加台盼蓝淬灭未吞噬的FITC-Mtb的荧光,流式细胞术检测FITC阳性单核细胞的数值,计算单核细胞对Mtb的吞噬率。FITC-Mtb与佛波醇酯（PMA）激活分化的THP-1细胞以10∶1的比例共孵育1~6 h,或以1∶1~100∶1的比例孵育1 h和2 h,用同样的方法检测吞噬率。结果：FITC（50μg/ml）与Mtb作用2 h的标记率达92%。人单核细胞对FITC-Mtb的吞噬率从10 min的34.68%增加至120 min的79.90%。THP-1细胞对FITC-Mtb的吞噬率从1 h的30%增加至6 h的81%。FITC-Mtb与THP-1细胞以100∶1比例孵育1 h,吞噬率达平台（81%）;以50∶1的比例孵育2 h,吞噬率达平台（82%）。未加台盼蓝淬灭时,单核细胞在10 min和120 min对FITC-Mtb的吞噬率与加台盼蓝淬灭相比,分别增加29%和6%;而未加台盼蓝淬灭时,THP-1细胞在1 h和6 h对FITC-Mtb的吞噬率与加台盼蓝淬灭相比分别增加1%和7%。结论：流式细胞术检测人单核巨噬细胞吞噬FITC标记Mtb是测定单核巨噬细胞对Mtb吞噬活性的简便、快速和重复性好的方法。     

巨噬细胞趋化检测方法的建立及皮质酮对其趋化功能的影响

目的 建立改良Boyden趋化小室(Boyden chamber)法检测巨噬细胞趋化功能的方法,探讨皮质酮对大鼠腹腔巨噬细胞趋化功能的影响.方法 分离成年Sprague-Dawley(SD)大鼠腹腔巨噬细胞.应用48孔Boyden chamber趋化板检测趋化功能.下室加入27μL的10nM FMLP作为趋化剂或含1%牛血清清蛋白的RPMI-1640作为阴性对照,将50μL不同细胞密度的大鼠腹腔巨噬细胞悬液(3、6、12×106/mL)置于上室以确定最适细胞密度,将趋化装置置于5%CO2、37℃细胞培养箱内孵育2、3h以确定最适孵育时间.同时,以0、10、50、1 000ng/mL皮质酮处理大鼠腹腔巨噬细胞,应用Boyden chamber法检测巨噬细胞趋化功能.结果 巨噬细胞对10nM FMLP趋化剂呈细胞密度依赖性增加,上室巨噬细胞密度为6×106/mL时为最适细胞密度,并且最适孵育时间为3h.低浓度皮质酮(10、50ng/mL)处理大鼠腹腔巨噬细胞其趋化指数显著高于对照组(P＜0.01),而高浓度皮质酮(1 000ng/mL)处理后巨噬细胞趋化指数与对照组相比差异不明显.结论 成功建立了改良Boyden chamber法检测巨噬细胞趋化功能方法,皮质酮可呈剂量依赖性地影响巨噬细胞趋化功能,在无免疫刺激状态下,低浓度皮质酮能增强巨噬细胞趋化功能.     

类风湿关节炎患者外周血CD4+CD25+CD127-调节T细胞的检测及临床意义

目的探讨CD4＋CD25＋CD127-调节T细胞（Treg）在类风湿关节炎中的诊断价值及临床意义。方法选取42例类风湿关节炎（RA）患者和20正常健康者分为两组,采用流式细胞仪检测两组调节T细胞的表达频率,检测两组实验室指标,观察两组实验室指标与调节T细胞的关系。结果与正常对照组相比,RA组白细胞（WBC）、免疫球蛋白A（IgA）、抗链球菌溶血素O（ASO）、类风湿因子（RF）、糖酸蛋白（α1-AGP）、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）显著升高（P〈0.05或P〈0.01）;血红蛋白（Hb）、CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋CD127-T细胞的表达频率降低（P〈0.05）。Spearman相关分析显示,CD25＋T细胞与Hb、IgM、ESR呈正相关,CD4＋CD25＋CD127-T细胞与IgM呈正相关（P〈0.01或P〈0.05）;CD25＋T细胞与RBC、IgA呈负相关,CD4＋CD25＋T细胞与补体C4呈负相关,CD4＋CD25＋CD127-T细胞与ASO呈负相关（P〈0.05）。结论CD4＋CD25＋CD127-Treg在RA患者的外周血中显著降低,并且与疾病的活动性高度相关,说明调节T细胞可能参与了RA的发病,早期检测可能为RA的诊断及治疗提供依据。     

恶性肿瘤病人免疫治疗前后免疫功能的变化

目的探讨应用流式细胞术(FCM)检测恶性肿瘤病人外周血淋巴细胞多项免疫指标的变化及该指标对恶性肿瘤免疫治疗前后的临床价值。方法采用流式细胞术检测50例恶性肿瘤病人和31例健康人的外周血CD3、CD4、CD8等八项免疫指标变化,并且对其中10例病人应用免疫制剂治疗前后对抗原表达的结果进行比较。结果恶性肿瘤病人免疫功能紊乱:①细胞免疫和体液免疫功能低下;②活化T淋巴细胞明显增多(P<0.01);③接受免疫治疗的病人治疗前后差别有统计学意义(P<0.01)。结论用流式细胞仪检测淋巴细胞抗原为临床观察肿瘤病人的免疫状态提供有效的依据,免疫治疗可激活T淋巴细胞而改善免疫功能。     

放射损伤对恶性肿瘤外周血CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的:观察放射治疗过程中不同剂量时患者外周血T细胞亚群和CD4 CD25 调节性T细胞的变化.并探讨其临床意义.方法:用流式细胞仪检测放射治疗中不同剂量时患者外周血T细胞亚群和CD4 CD25 调节性T细胞的水平,并进行分层分析.结果:放疗剂量为30GY、50GY时,恶性肿瘤患者CD3 、CD4 、CD8 T细胞比例及CD4 /CD8 比值与放疗前相比,差异无统计学意义,而早期(Ⅰ、Ⅱ)、进展期(Ⅲ、Ⅳ)患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞的水平与放疗前相比,差异有统计学意义(F=4.66,P=0.041),且与剂量呈正相关.结论:放疗可能对恶性肿瘤患者的免疫功能有一定的损害,尤其是患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞水平升高,且它与剂量呈正相关;放疗后外周血CD4 CD25 调节性T细胞比例比CD4 /CD8 比值更能敏感反应免疫功能状态,可能成为恶性肿瘤患者的更敏感的免疫监测指标.     

大蒜素抗隐孢子虫的免疫机制观察

目的　研究大蒜素对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 ,观察大蒜素抗隐孢子虫的免疫机制。方法　采用大蒜素胶囊和注射液多次给药 ,观察小鼠巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数。结果　大蒜素胶囊 5 0mg·kg-1灌胃给药 4次 ,或大蒜素注射液腹腔注射给药 4次 ,均可明显提高小鼠吞噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数。结论　大蒜素制剂对小鼠巨噬细胞吞噬功能具有增强作用     

紫外线照射氧合疗法对淋巴细胞表面标志及其功能的影响

目的：探讨紫外线照射氧合(UBIO)疗法对淋巴细胞功能影响的机制。方法：①对紫外线照射及充氧前后血液中淋巴细胞的表面标志用流式细胞仪进行分析；②用淋巴细胞转化试验评估紫外线处理前后血液中淋巴细胞转化功能的变化情况。结果：①血液经紫外线照射及充氧后CD8^ 细胞数明显上升(P＜0．05)，HLA—DR^ 细胞数显著降低(P＜0.01)，CD4^ /CD8^ 比值降低(P＜0.05)；②血液中的淋巴细胞转化能力降低(P＜0.05)。结论：UBIO可能是通过破坏淋巴细胞的表面标志来发挥免疫调节作用的。