用荧光原位杂交方法检测染色体结构异常患者的精子染色体

目的 通过检测染色体结构异常患者的精子染色体结构,分析其减数分裂中染色体分离规律。方法 用荧炮原位杂交方法,其中例1核型为45,XY,ter rea(15;18)(p13:p11),用CEP15,CEP18探针,例2核型为45,XY,（13;14）,用VysisLSI13q14,Tel Vysion14q探针,分别对他们的精子进行荧光原位杂交检测,结果 例1的2214条精子中,15/18占58.4%,15,15/18占5.28%,-/18占6.86%,15/18,18占7.77%,15/--占7.68%。例2的1524条精子中,13q/14q占49.67%,13我3我3我4ak 14我3q/14q,14q)分别占8.86%、8.27%,13q/--占7.68%,--/14q占5.18%。结论 通过荧光原位杂交方法检测染色体结构异常患者的精子,可以分析其减数分裂中染色体分离规律。     

染色体易位携带者的胚胎植入前遗传学诊断研究进展

染色体易位是常见的染色体结构异常。应用荧光原位杂交技术，染色体易位携带者可在胚胎植入前遗传学诊断的帮助下增加正常妊娠的机会。现就相互易位减数分裂的情况进行综述，并讨论应用荧光原位杂交技术对染色体易位携带者进行胚胎植入前遗传学诊断的策略。     

罗伯逊易位患者植入前胚胎染色体分析

目的　对罗伯逊易位患者的植入前胚胎进行染色体分析。方法　用荧光原位杂交方法对 5例患者植入前胚胎进行染色体分析。结果　分析的 5 2个胚胎中 ,染色体正常 9个 ,异常 4 3个 ,其中嵌合体9个 ,无规律分裂 1 9个。结论　用荧光原位杂交方法可对植入前胚胎进行染色体分析。     

一例嵌合型18三体少精子症患者精染色体分析及植入前遗传学诊断

目的 分析1例嵌合型18三体少精子患者精子18、X、Y染色体数目畸变并进行植入前遗传学诊断(preimplantation genetic djagnosis,PGD).方法 采用G带及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridjzation,FISH)对中期分裂相进行分析,应用三色探针CEP18、CEPY、Tel Xq/Yq对患者精子进行FISH分析,同时以1名染色体正常男性的正常精液作为对照,并对嵌合型18三体患者进行PGD.结果 患者精子18二体率、性染色体二体率和二倍体率分别为0.63%、0.94%和0.87%,与对照组相比(0.16%、0.35%、0.31%)差异有统计学意义.患者进行1个PGD周期的治疗、活检4个胚胎,移植正常的XY1818、XX1818各1胚胎后获得临床妊娠.结论 精子FISH分析可为其提供更准确的遗传咨询及指导植入前遗传学诊断,FISH-PGD可有效地应用于嵌合型18三体的植入前遗传学诊断.     

男性不育患者精子染色体畸变及精子DNA完整性分析

目的 探讨男性不育患者精子染色体和精子DNA完整性的改变.方法 精子染色质扩散(sperm chromatin dispersion,SCD)实验分析精子DNA碎片,正常生育男性(对照组)32名,特发性严重少弱精子症患者(idiopathic severe oligoasthenozoospermia,ISOA)19例,妻子不明原因反复自然流产(unexpbined recurrent miscarriage,URM)38例;多色荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)技术检测URM妇女丈夫(n=12)、ISOA不育者(n=10)及对照组(n=5)精子13、21、18、X和Y染色体畸变.结果 对照组、ISOA不育者及URM妇女丈夫精子13、18和21染色体数目总体异常的比率分别为1.29%、4.02%和3.91%,而X和Y染色体数目总体异常的比率分别为0.61%、2.03%和1.98%,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).SCD实验分析精子DNA碎片,ISOA不育患者(n=19)及URM妇女丈夫(n=38)精子DNA碎片比例平均为40.7%±17.8%和22.1%±10.3%,均显著性高于对照组(12.1%±5.2%,P＜0.01).FISH精子染色体(13、21、18、X和Y探针)数目畸变率与精子DNA碎片比率呈正相关(r=0.874,P＜0.01,n=27),精子DNA碎片比率与精子密度及前向运动精子率呈负相关(r=-0.571,P＜0.01,和r=-0.616,P＜0.01,n=89),与畸形精子比率呈正相关(r=0.637,P＜0.01,n=89).结论 精子染色体畸变率和精子DNA碎片比率增高,可能是ISOA和妻子URM不育男性的原因之一,精子DNA损伤筛查町能为特发性男性不育患者提供有用的信息.     

Inv(Y)患者精子染色体荧光原位杂交分析

目的 探讨Y染色体臂间倒位患者精子减数分裂形成中性染色体的分离规律.方法 采用G带、C带及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)对中期分裂相进行分析.应用三色探针CEPX、Tel Xp/Yp、Tel Xq/Yq对5例inv(Y)(p11.1q11.2)患者精子进行FISH,同时以染色体正常男性的正常精液作为对照.结果 5例inv(Y)(p11.1q11.2)精于性染色体数目及重组Y染色体异常率与对照组比差异无统计学意义.结论 inv(Y)(p11.1q11.2)患者精子无明显性染色体数目与结构异常,精子FISH分析可为其提供更准确的遗传咨询及指导植入前遗传学诊断.     

两条染色体复杂易位伴无精子症患者细胞与分子遗传学分析

目的 对1例46,XY,t(3;11)(q27;q13),ins(11;3)(q13;p26p13)伴无精子症患者进行细胞与分子遗传学研究.方法 采用外周血淋巴细胞培养、G显带制备染色体,应用多色荧光原位杂交技术进一步分析确定其核型,多重PCR检测Y染色体AZF微缺失.结果 该患者涉及3号、11号染色体相互易位,并伴有3号染色体的带插入到11号染色体的四断裂点的复杂易位.AZF所在区域的6个序列标签位点均无微缺失.结论 染色体复杂易位可导致男性不育,无精症的遗传因素分析可为其提供更准确的生育咨询.     

染色体病在胚胎植入前遗传学诊断中的研究与发展

随着辅助生殖技术的发展,越来越多的不孕患者通过这项高科技技术得到了自己的后代,但临床发现一部分患者在进行数次辅助生殖助孕后,仍然无法受孕;有的患者即使具有良好的内膜容受性及形态优质的胚胎仍然会发生反复流产.上世纪80年代末,植入前遗传学诊断的出现,使人们认识到这些问题很可能与胚胎染色体异常有关,并运用于临床,大大提高了IVF的植入率及临床妊娠率,使具有遗传缺陷的夫妇能生育健康的后代.因此,本文从分子细胞遗传学角度综述导致植入前胚胎染色体异常的机理与影响因素,荧光原位杂交技术在植入前胚胎染色体异常检测中发挥的作用,以及植入前遗传学诊断在染色体异常方面的研究进展,及其对辅助生殖技术的影响.     

荧光原位杂交同时检测精子X和Y染色体的方法

用实验手段分离X和Y染色体精子或富集特定性别染色体精子．对于预防性连锁遗传病具有潜在应用价值。建立精子X和Y染色体鉴定方法对于评估分离或富集特定性别染色体效果至关重要。本文介绍采用CY3TM和FlourXTM探针作荧光原位杂交（FISH），同时检测精子Y和X染色体。10份正常精液标本分析结果显示：X染色体精子为50．23％，Y染色体精子为49．77％；有效杂交率达91．99％。FISH方法比传统的精子染色体核型分析和奎纳克林染色检查Y荧光小体更具有简易、特异和快速的优点。     

X染色体异常的细胞分子遗传学研究

目的我们从细胞遗传学和分子遗传学方面研究X染色体异常,探讨这些异常与患者临床特征的关系。方法采集患者外周血进行培养,常规制片后G显带染色体核型分析和荧光原位杂交技术分析。结果筛选200余例遗传咨询者共有15例为X染色体异常,其中X染色体数目异常8例,X染色体结构异常6例,数目异常伴结构异常1例。结论体征、性腺发育、智力等都与X染色体异常有关系。     

全染色体涂抹探针在女性罗伯逊易位携带者植入前遗传学诊断中的临床应用

目的应用全染色体涂抹探针（whole chromosome painting probe，WCP）对女性罗伯逊易位携带者进行卵母细胞第一极体的植入前遗传学诊断（preimplantation genetic diagnosis，PGD）。方法应用全染色体涂抹探针进行第一极体荧光原位杂交，对4例女方罗伯逊易位携带者进行了4个周期的PGD。患者染色体核型均为45，XX，der（13；14），（q10；q10）。所有周期取卵后6h内通过活检取出第一极体，采用WCP探针进行荧光原位杂交，受精后第3天选择染色体组成正常或平衡的胚胎进行宫腔内移植。结果4个周期共获卵61个，其中54个成熟可进行活检，活检成功率92．6％（50／54），固定成功率90．O％（45／50）。40个获得明确诊断，总体诊断率为74．1％（40／54）。卵胞浆内单精子注射后受精率64．8％（35／54），优质胚胎率为65．7％（23／35）。获得2例临床妊娠。其中1例于孕9周胚胎停止发育，绒毛染色体分析核型为45，X；另1例产前诊断证实核型为46，XX。2006年6月足月分娩一正常活女婴。结论全染色体涂抹探针可准确区分正常、平衡以及异常卵子，从而可有效应用于女性染色体易位携带者的PGD。     

Turner综合征患儿标记染色体的来源研究

目的 了解Turner综合征患儿标记染色体的来源，以指导遗传咨询及治疗。方法 在染色体核型分析的基础上，对32例Turner综合征患者进行回顾性分析。对3例含有标记染色体的患儿进一步用荧光原位杂交技术研究标记染色体的来源。结果 3例含有标记染色体的Turner综合征患儿中，确定1例患儿的标记染色体来源于Y染色体，含有性别决定基因；1例来源于X染色体；另外1例未能确定其来源，该标记染色体可能来源于性染色体的其他片段或其他端着丝粒染色体。结论 Turner综合征患者的标记染色体大多来源于性染色体（X染色体、Y染色体），也可能来源于其他端着丝粒染色体。有必要同时应用X染色体和Y染色体特异性探针对Turner综合征患者进行标记染色体的荧光原位杂交分析，以明确标记染色体的来源。     

用染色体涂染技术分析五例染色体结构异常

目的 结合G－显带核型分析诊断染色体易位,并对G显带技术难以鉴定的微小易位进行分析。方法 采用生物素标记的显微切割备的X、Y、14q,10号染色体特异性探针,与患者外周血培养淋巴细胞中期染色体进行荧光原位杂交。结果 室温存放近10年的标本,－80℃冻存标本及新鲜标本均可看到清晰的杂交信号,染色体结构异常很清楚。结论 染色体涂染技术结合G显带核型分析,可以准确识别G显带技术难以鉴定的染色体微小易位。     

Molecular cytogenetic analysis of a familial pericentric inversion of chromosome 12

Speleman F, Van Roy N, De Vos E, Hilliker C, Suijkerbuijk RFS, Leroy JG. Molecular cytogenetic analysis of a familial pericentric inversion of chromosome 12
Clin Genet 1993: 44: 156–163. © Munksgaard, 1993
We describe the application of multi-color fluorescence in situ hybridization (FISH) in the characterization of a familial pericentric inversion. Using chromosome 12 short- and long-arm specific DNA probes, fast and reliable discrimination between normal and inversion chromosome 12 or recombinant inversion chromosome 12 was possible. FISH thus provides a reliable means for prenatal detection of balanced or unbalanced chromosome 12 rearrangements in this family. This approach is possible for identification of similar chromosome rearrangements provided that probes for the putatively involved chromosome region are available.     

Molecular analysis of Y chromosome long arm structural instability in patients with gonadal dysfunction

We have performed cytogenetic and molecular analyses of 45,X mosaics involving structurally abnormal Y chromosomes. Karyotypes were performed by standard cytogenetic methods and, in some cases, by fluorescence in situ hybridization, to distinguish monocentric and dicentric chromosomes. In addition, the deletions of Yq have been mapped using Southern blotting and polymerase chain reaction analysis. This paper provides additional information on the analysis of Y chromosome aberrations, and suggests that the stability of the Y chromosome in these instances is related to the site of the break point on Yq.     

A complex chromosome rearrangement with at least five breakpoints studied by fluorescence in situ hybridization

A newborn infant with multiple congenital anomalies was diagnosed with an unbalanced translocation of chromosomes 1 and 5. Studies of parental chromosomes revealed a complex rearrangement in the patient's mother involving the exchange of terminal long arms between chromosomes 1 and 5 and the insertion of an interstitial segment from the same chromosome 5q into chromosome 2q by high-resolution G-banding. Further study of the mother's chromosomes by fluorescent in situ hybridization (FISH) detected an additional insertion between the rearranged chromosomes 2 and 5, which was not revealed by G-banding. This led to the identification of a complex translocation-insertion between 3 chromosomes with at least 5 breaks [t(1;5;2)(1pter→1q42.3::5q23.2→5qter;5pter→5q21.2::2q33→2q35::1q42.3→1qter;2pter→2q33::5q21.2→5q23.2::2q35→2qter)] and illustrates the value of FISH as an adjunct to standard cytogenetics, particularly in cases of complex rearrangements. Am. J. Med. Genet. 68:417–420, 1997. © 1997 Wiley-Liss, Inc.     

Marker chromosome 21 identified by microdissection and FISH

A child without Down syndrome but with developmental delay, short stature, and autistic behavior was found to be mosaic 46,XX/47,XX,+mar(21) de novo. The marker was a small ring or dot-like chromosome. Microdissection of the marker was performed. The dissected fragments were biotinylated with sequence-independent PCR as a probe pool for fluorescence in situ hybridization (FISH). FISH results suggested an acrocentric origin of the marker. Subsequent FISH with α-satellite DNA probes for acrocentric chromosomes, and chromosome-specific 21 and 22 painting probes confirmed its origin from chromosome 21. © 1995 Wiley-Liss, Inc.     

一例21号环状染色体综合征的细胞遗传学和表型定位分析

目的通过对1例21号环状染色体综合征患者的细胞遗传学分析，探讨21号环状染色体的形成原因，临床表型与染色体区带的关系。方法应用染色体G带、C带、N带、高分辨显带和荧光原位杂交技术对21号环状染色体进行识别与定位。结果患儿双亲核型正常，患儿核型为46，XY，r（21）[91]／46，XY，r（21；21）（p11q22．3；p11q22．3）[5]／45，XY，-21[4]。结论21号环状染色体综合征的临床表现与21q末端缺失的多少相关，男性性别发育异常可能与21q22．3片段的缺失相关。