冬虫夏草对豚鼠心室肌细胞胞浆钙离子浓度及L-型钙电流的影响

目的　研究冬虫夏草 (Codycepssinensis,CS)水提液对豚鼠单个心室肌细胞胞浆内钙离子浓度 ([Ca2 ]i)及L 型钙电流 (ICa L)的影响。方法　酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测定豚鼠心室肌细胞 [Ca2 ]i以及ICa L的变化。结果　应用 0 1mg/mL (生药浓度 )冬虫夏草水提液 ,在静息状态下对 [Ca2 ]i 无影响 ;对 6 0mmol/LKCl诱导的胞浆 [Ca2 ]i升高有促进作用 ,峰值荧光强度在 12 0s时由12 0 4 3± 2 38 4增加至 185 5 2± 32 1 0 (n =6 ,P <0 0 5 )。膜片钳研究结果表明 ,冬虫夏草水提液可明显促进ICa L,使ICa L从 (- 15 1± 2 3)pA/ pF增加到 (- 19 7± 3 2 ) pA/pF (刺激电压为 10mV ,n =8,P <0 0 1)。 结论　冬虫夏草水提液促进心肌细胞钙内流 ,是该药治疗缓慢型心律失常的机制之一。     

PKA参与ATP对大鼠背根神经节神经元电压门控性钙通道的抑制

目的 探讨ATP对大鼠背根神经节(DRG)神经元的电压门控性钙通道(VGCC)的抑制效应及其信号转导途径.方法 在急性分离的大鼠DRG神经元上应用全细胞膜片钳技术记录ATP诱导的电流以及VGCC电流;应用钙离子成像技术检测胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化.结果 ATP能够可逆性地抑制DRG神经元的VGCC电流和VGCC介导的[Ca2+]i升高.用PKA抑制剂H-89预处理DRG神经元,ATP对VGCC电流及其介导的[Ca2+]i升高的抑制被反转;而用PKC抑制剂bisindolylmaleimide(Bis)预处理DRG神经元,ATP对VGCC介导的[Ca2+]i升高的抑制效应则无影响.结论 在大鼠DRG神经元中,PKA参与了ATP对该神经元VGCC的抑制.     

二甲基-氨氯吡咪和牛黄酸对大鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换电流的影响

利用全细胞膜片钳技术 ,采用胶原酶B急性分离的大鼠心室肌细胞 ,研究了牛黄酸和二甲基 -氨氯吡咪对心肌细胞膜Na /Ca2 交换电流的影响。结果表明 ,10 μmol,2 0 μmol和 4 0 μmol的二甲基 -氨氯吡咪可使Ni2 敏感电流浓度依赖性地增加 ;膜电位为 5 0mV时分别增加 ( 2 7± 7) % ,( 12 1± 4 3 ) % ,和 ( 173± 68) % ;膜电位为 - 10 0mV时分别增加 ( 110±5 2 ) % ,( 2 2 1± 88) %和 ( 2 81± 80 ) %。牛黄酸对Na /Ca2 交换的内向和外向电流均无影响     

期刊文摘

小鼠心室肌细胞分离方法的改进[徐明,周士胜,李龙天,迟庆.中国临床康复,2006,10(16):112-113]目的:探索更简单实用和重复性好的小鼠心肌细胞分离技术.方法:实验于200505/09在大连大学医学院医学研究中心完成.选择8～16周龄昆明小鼠150只,雌雄不拘,体质量30～40g,由大连大学医学院动物中心提供.采用原位主动脉插管和动脉夹固定法酶解分离小鼠心室肌细胞,并在室温下进行全细胞膜片钳记录.结果:可将主动脉插管的时间控制在1.5min内,所获心室肌细胞横纹清晰,一次性复钙可获得50%～60%的耐钙细胞,分离所得细胞可在全细胞膜片钳方式下记录到一过性…     

一种适用于膜片钳研究的豚鼠心室肌细胞急性分离方法

目的 获得适用于心肌细胞膜片钳研究的单个心室肌细胞.方法 应用酶消化和机械分离的方法分离出生25～30 d的豚鼠心室肌细胞,从形态学及电生理学方面鉴定急性分离的豚鼠心室肌细胞活性,在电镜下观察活性较好的豚鼠心室肌细胞形态学特点,并选用活性较好的单个心室肌细胞进行膜片钳钳制,记录心室肌细胞Ik电流.结果 形态学方面:活性...     

过氧化物诱导LO2细胞凋亡时Fas mRNA表达及Ca 2+ / 流变化的单细胞分析

目的　探讨过氧化物所致肝细胞凋亡时Fas基因表达与Ca2 流变化的相互关系。方法　应用全细胞膜片钳单细胞逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术进行H2 O2 诱导人类正常肝细胞LO2细胞FasmRNA表达的单细胞分析 ,应用全细胞膜片钳显微荧光单细胞胞浆游离钙浓度 ([Ca2 ]i)测量技术、流式细胞术、扫描电镜观察同期瞬时Ca2 流变化及早期凋亡 (Annexin V )细胞指数和细胞膜变化。结果　H2 O2 作用 2h单个LO2 细胞电泳图分析可见Fas1mRNA特异性扩增条带 ;单细胞Ca2 流测定R值明显增强 (P <0 .0 1,t=2 2 .2 42 4) ,[Ca2 ]i骤升为 1115nmol/L± 2 2 7nmol/L ,与对照组的149nmol/L± 2 3nmol/L比较差异有显著性意义 (P <0 .0 1,t=13.37) ,Annexin V 细胞指数亦明显上升 (P <0 .0 1,t=48.41) ,细胞膜起泡。结论　H2 O2 诱导LO2 细胞凋亡时细胞内Ca2 失衡可能导致Fas死亡基因的活化。     

适于膜片钳实验的心肌细胞分离方法及维拉帕米对钙电流的作用

目的：建立适应于膜片钳实验的大鼠单个心室肌细胞的分离方法,探讨L-型钙通道在大鼠心肌电活动中的作用.方法：采用改进Langendorff装置,酶解法分离单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞L-型钙电流及维拉帕米的作用.结果：该法分离到的心肌细胞存活率达80％～90％,高倍镜下细胞呈杆状,边缘清楚,表面光滑,纹理清晰;成功记录到典型L-型钙电流（Ica-L）,给予维拉帕米（0.3、3、30 μmol/L）后呈浓度依赖性抑制钙电流,其抑制率分别为（44.35±5.52）％,（61.06±2.99）％,（71.88±4.45）％.结论：改进心肌细胞的分离方法可获得大量耐钙心室肌细胞,这些细胞具有正常的电生理特性.     

降纤酶对大鼠急性心肌梗死后梗死周边区心室肌细胞动作电位和L型钙电流的影响

目的　探讨降纤酶对大鼠急性心肌梗死后梗死周边区心室肌细胞动作电位和 L型钙电流的影响。方法　制成大鼠急性心肌梗死模型, 分两组, 一组对照, 另一组腹腔注射降纤酶0. 2 U/ (100g·d), 共 7 d, 酶解分离梗死周边区心室肌细胞, 采用全细胞膜片钳技术记录其动作电位和 ICa,L。结果　降纤酶组梗死周边区心室肌细胞 ERP/APD90增大, 受抑制的 ICa,L有所恢复, 峰电流密度显著增大, I V曲线下移, 失活曲线右移, 失活后再恢复速度加快。结论　降纤酶使急性心肌梗死后梗死周边区心室肌细胞ERP/APD90增大, ICa,L有所恢复, 因此具有减少急性心肌梗死后室性心律失常和改善心功能的作用。     

柴胡皂苷元D对C6大鼠神经胶质瘤细胞内游离Ca2+浓度的影响

目的探讨柴胡皂苷元D (Saikogenin D, SGD)对C6大鼠神经胶质瘤细胞内游离Ca2 浓度[Ca2 ]i的影响.方法采用 Fura-2/AM荧光指示剂测定SGD引起的C6大鼠神经胶质瘤细胞[Ca2 ]i变化.结果 SGD(1×10-5～1×10-4 mol/L)剂量依赖性地升高[Ca2 ]i,其EC50为3.5×10-5 mol/L.SGD的升高[Ca2 ]i作用被Thapsigargin显著降低.2-aminoethoxydiphenylborate (2-APB, 1×10-4 mol/L) 和 U73122 (2×10-6 mol/L)显著降低组胺的升高[Ca2 ]i作用,但对SGD的升高[Ca2 ]i作用无影响.咖啡因和阿诺碱不影响SGD升高[Ca2 ]i.结论 SGD通过独立于肌醇三磷酸(IP3)受体系统和阿诺碱受体系统的机制,引起细胞内钙释放,导致[Ca2 ]i升高.     

甜菜碱对HepG2人肝癌细胞[Ca2+]i和细胞膜电位的影响

目的研究甜菜碱对肝癌HepG2细胞内游离Ca2 浓度([Ca2 ]i)和细胞膜电位的影响。方法Fluo-3/AM标记,激光扫描共聚焦显微镜观察HepG2细胞[Ca2 ]i,TMRE标记,激光扫描共聚焦显微镜测定细胞膜电位的影响。结果甜菜碱能够升高HepG2细胞[Ca2 ]i,降低细胞膜电位。升高[Ca2 ]i的强度具一定的剂量依赖性,随甜菜碱剂量的增大而升高。甜菜碱50、25mg/mL组与对照组比较差异非常显著(P<0.01),甜菜碱12.5mg/mL组与对照组比较差异显著(P<0.05)。给药48h时间段内细胞内的[Ca2 ]i升高的幅度较大,72h升高幅度相对较小。而降低膜电位上,在48h时间段内,甜菜碱50、25、12.5mg/mL各组膜电位均显著高于对照组(P<0.05),但在72h时间段内甜菜碱12.5mg/mL组与对照组比较没有显著性差异(P>0.05)。结论甜菜碱通过开放细胞膜上的通透性转换孔道(MPTP),从而升高HepG2细胞[Ca2 ]i,启动细胞凋亡机制,诱导HepG2细胞凋亡。     

碳酸钙对钙缺乏症的治疗意义

钙是人体内最重要的元素之一,参与一切生命活动过程.当钙摄人量不足,机体发生钙代谢异常或遗传、手术等原因引起的甲状旁腺功能低下均可导致低血钙的症状.长期极度的低血钙使牙齿、骨骼发育不良,使佝偻病、软骨病发生,而骨峰值偏低,则加速骨质疏松症的发生与发展而导致骨折.     

钙吸收利用与钙摄入量关系的动物实验研究

目的 :探讨钙吸收利用与钙摄入量间的关系。方法 :给初断乳Wistar大鼠喂饲 3周缺钙饲料后 ,按体重随机分为缺钙组、钙适宜组和高钙组 ,进行 12周喂养 ,并于实验第 5周进行 3天代谢试验。结果 :适宜补钙可明显增加骨钙、骨密度、骨矿物质含量和股骨的重量 (P <0 .0 5 ) ,加大补钙剂量 ,补钙效果未见增加。相关分析发现 ,摄入钙与骨钙、骨密度、骨矿物质含量呈正相关 ,而与吸收率、存留率呈负相关。量效研究发现 ,大鼠钙摄入量 (X)与吸收率 (Y)间的关系呈双曲线函数形式 ,所得回归方程为 :^Y =e6 .80 6 8×X- 0 .882 1 +2 0 ,(F =4 7.315 4 ,P <0 .0 0 0 1)。提示骨钙与骨矿物质含量具有良好的线性关系。结论 :钙吸收率与钙摄入量呈双曲函数关系 ,骨矿物质含量是评价大鼠钙补充效果的理想指标。     

Effect of Calcium Ionophore and Calcium Channel Blockers on Immediate Hypersensitivity Reactions

ＥｆｆｅｃｔｏｆＣａｌｃｉｕｍＩｏｎｏｐｈｏｒｅａｎｄＣａｌｃｉｕｍＣｈａｎｎｅｌＢｌｏｃｋｅｒｓｏｎＩｍｍｅｄｉａｔｅＨｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙＲｅａｃｔｉｏｎｓＨｕａｎｇＱｉｎｔｉａｎ（黄钦田）ＣｈｅｎＢｉｎｇｙｉｎｇ（陈丙莺）ＳｕｎＡｉｍ...     

Amino Acid Analysis of Astragalus Membranaceus (Fisch.)Bge

ＡｍｉｎｏＡｃｉｄＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｓｔｒａｇａｌｕｓＭｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ￥ＺｈａｏＦｕｚｈｏｎｇ；ＺｈｕａｎｇＢｉｎｉａｎ．ＡＣＴＡＡＣＡＤＥＭＩＡＥＭＥＤＩＣＩＮＡＥＮＡＮＪＩＮＧ．１９９５，１５（２）：２７０（Ｄｅ...     

心脏中的T型钙通道

T型钙通道被认为在心脏自律性、细胞生长和心血管重塑中起关键性的作用，一直是研究的热点。目前三种编码T型钙通道的基因已经被确定，但是这些T型钙通道的天然构型尚未被确定。文章从分子结构、功能及调控方面对心脏T型钙通道目前的研究作一综述。