携带野生型PTEN基因的重组腺病毒治疗子宫内膜癌的体内研究

目的:探讨携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)进行子宫内膜癌基因治疗的可行性.方法:BALB/c裸鼠随机分3组,每组8只, 以空载体Ad-CMV转染或未转染作为对照组,观察Ad-PTEN体外转染后体内接种对子宫内膜癌细胞致瘤能力的影响.应用LacZ 作为报告基因,X-gal染色检测Ad-PTEN 体内转染效率.皮下荷人子宫内膜癌BALB/c裸鼠15只,随机分为对照组、Ad-CMV组及Ad-PTEN治疗组,每组5只,每只裸鼠皮下有2个移植瘤.待皮下移植瘤长至4～5 mm时,治疗组Ad-PTEN肿瘤内注射,每个移植瘤5×108 pfu/100 μl,隔日1次,共3次,观察裸鼠肿瘤体积的变化及有无不良反应,最后1次治疗后15 d处死裸鼠,取肿瘤组织及治疗组裸鼠肝脏病理检查.结果:Ad-PTEN体外转染子宫内膜癌RL 95-2细胞,子宫内膜癌细胞致瘤能力完全抑制,裸鼠成瘤率为0;而空载体转染组和PBS对照组裸鼠成瘤率均为100%.重组腺病毒在裸鼠体内具有较高的转染效率,Ad-CMV-LacZ肿瘤内注射后96 h,转染效率可达到80%. Ad-PTEN肿瘤内注射可使裸鼠皮下移植瘤生长速度显著减慢,肿瘤体积较对照组明显缩小(P<0.05),Ad-PTEN基因治疗未发现明显不良反应. 结论:PTEN基因治疗有可能成为子宫内膜癌非手术治疗的一个新方法,具有潜在的应用价值.     

PTEN基因重组腺病毒对人气道平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制

目的 观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染人气道平滑肌细胞(HASMC)后的表达,研究其对HASMC增殖的影响,并对其作用机制作初步的探讨.方法 利用pAdxsi载体系统构建携带PTEN基因的腺病毒载体,体外转染HASMC,荧光显微镜观察Ad-PTEN的转染效率.RT-PCR及Western blotting检测PTEN在HASMC中的表达.采用MTS/PMS法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期分布.Western blotting检测Akt及p-Akt的表达,RT-PCR检测P2lmRNA的表达.结果 外源性野生型PTEN基冈经腺病毒介导成功转入HASMC,当感染复数MOI为100时,体外转染效率高达98%以上.Ad-PTEN感染HASMC后,能有效地引起细胞内过度表达PEEN.上调PTEN表达能显著提高G0/G1期细胞的比例,抑制细胞的增殖.上调PTEN表达能显著降低p-Akt及提高P21的表达水平.结论 成功构建了过度表达PTEN的原代培养HASMC模型,该模型能有效地引起细胞内过度表达PTEN.上调PTEN表达能有效抑制HASMC的增殖,可能是通过对P13K/AKt信号通路的抑制及上调P21的表达而起作用的.     

PTENcDNA抑制子宫内膜癌细胞增殖作用的研究

【目的】研究外源性PTENcDNA对子宫内膜癌细胞生长增殖的影响,探讨子宫内膜癌治疗的新途径。【方法】经携带野生型VIENcDNA的重组腺病毒（Ad—PTEN）介导将PTENcDNA转入人子宫内膜癌细胞RL95—2,用反向聚合酶链反应（RT—PCR）检测出PTENeDNA在R195—2细胞中持续表达,X-gal染色方法测定腺病毒转染效率,台盼蓝染色活细胞计数绘制生长曲线,流式细胞分析仪（FCM）测定细胞周期。受试细胞随机分成（1）Ad—PTEN组：转染复制缺陷型腺病毒Ad—PTEN。（2）Ad—CMV组：转染空载体腺病毒Ad—CMV。（3）对照组：仅用培养基而不加腺病毒。【结果】Ad—PTEN感染RL95—2细胞后,RT—PCR方法检测PTENcDNA在RL95—2细胞中持续表达;X—gal染色方法测得Ad—PTEN最佳感染复数为100。经台盼蓝染色活细胞计数后绘制细胞生长曲线,见经Ad—PTEN感染的细胞生长速度明显低于空载体病毒Ad—CMV感染及未经病毒感染的RL95—2细胞（P〈0．01）,而空载体Ad—CMV感染后的细胞与未经感染的RL95—2细胞比较,生长速度无差异（P〉0．05）;细胞周期分析表明,感染Ad—tWEN后的R195—2细胞G1期细胞比例明显增多,而S期G2-M期的细胞减少（P〈0．05）。【结论】Ad—PTEN介导的PTENcDNA在子宫内膜癌细胞RL95—2中有表达。PTENcDNA在RL95—2的中表达能够抑制细胞的增殖,将细胞周期阻断在G1期。     

Ad-PTEN对人小细胞肺癌NCI-H446细胞生长的抑制作用

目的研究重组腺病毒第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因（PTEN）对小细胞肺癌的抑癌增效和化疗增敏效应及其分子机制。方法采用重组腺病毒载体PTEN（简称Ad-PTEN）感染QBI-293A细胞,并用该细胞进行病毒扩增和效价测定。将Ad-PTEN感染NCI-H446小细胞肺癌细胞。分为5组：PBS组、空载体Ad组、Ad-PTEN组、顺铂（DDP）组和Ad-PTEN＋DDP组,Western blot鉴定PTEN基因表达,MTT法和流式细胞仪（FCM）检测Ad-PTEN对NCI-H446小细胞肺癌细胞的生长抑制和诱导凋亡的增效作用,用RT-PCR检测细胞凋亡相关基因p53、bax、caspase-3、bcl-2、和survivin的转录。结果 Ad-PTEN可在QBI-293A细胞中增殖。Ad-PTEN感染NCI-H446细胞后,Western blot检测到了PTEN基因的表达。Ad-PTEN组、DDP组、Ad-PTEN＋DDP组体外能明显抑制人NCI-H446小细胞肺癌细胞的生长和诱导凋亡,且Ad-PTEN＋DDP组效应较Ad-PTEN组、DDP组更为显著（均P〈0.05）。Ad-PTEN组、DDP组、Ad-PTEN＋DDP组的NCI-H446细胞中的p53、bax及caspase-3基因表达均上调,而Bcl-2和Survivin基因表达均下调,这些凋亡相关基因的上调或下调的表达趋势以Ad-PTEN＋DDP组最显著（均P〈0.05）。结论 Ad-PTEN体外可抑制NCI-H446小细胞肺癌细胞生长,Ad-PTEN对DDP的细胞毒作用具有增敏效应,其机制可能与上调p53、bax及caspase-3基因表达和下调bcl-2和survivin基因表达有关。     

重组腺病毒Ad-PTEN对肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒Ad-PTEN介导786-O细胞中PTEN的表达,以探讨其对癌细胞增殖和迁移的抑制以及诱导细胞凋亡的作用。方法:将构建的重组腺病毒Ad-PTEN体外感染786-O细胞,荧光显微镜下观察感染效率;免疫印迹检测细胞中PTEN的表达;MTT实验观察其对细胞增殖的影响作用;细胞划痕实验观察其对细胞迁移的抑制;PI染色观察其对细胞凋亡的诱导作用。结果:以MOI为100的病毒量感染细胞后48 h,感染效率达到100%;感染病毒后,细胞可检测到PTEN蛋白的表达,细胞的增殖和迁移均受到抑制,细胞被诱导出现凋亡。结论:重组腺病毒Ad-PTEN可高效介导786-O细胞表达PTEN,并产生抑制细胞增殖和迁移以及诱导细胞凋亡作用,为肾癌的基因治疗提供理论基础。     

体外转染PTEN基因对人结肠癌细胞生长的影响

目的 探讨野生型PTEN基因表达对结肠癌细胞体外生长的影响.方法 应用脂质体转导技术,将含野生型PTEN基因重组真核表达质粒pBp-PTEN转染Lovo细胞并稳定表达.Western blotting鉴定后,观察Lovo细胞转染前后生长、细胞周期、凋亡的改变.结果 转染后细胞生长曲线提示转染组曲线平缓,无明显对数生长期,生长速度较对照组明显降低(P《0.01);细胞周期测定显示转染组细胞G1期比例上升,提示PTEN可能对G1/S期转换点起阻滞作用;转染组细胞凋亡比率增高(P《0.01),尤其是早期凋亡.结论 外源性PTEN基因的转染可以抑制结肠癌细胞的体外生长.     

重组腺病毒AD-PTEN转染肾脏成纤维细胞对其细胞周期的影响

目的 将携带有PTEN基因的重组腺病毒转染大鼠肾脏成纤维细胞,观察其过度表达PTEN对细胞周期的影响.方法 以免疫组化的方法确定PTEN在成纤维细胞中的亚细胞定位,以Ad-PTEN转染成纤维细胞,荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况及亚细胞定位,将转染的成纤维细胞及正常对数生长期成纤维细胞消化,流式细胞仪分别检测细胞周期.结果 免疫组化结果显示成纤维细胞的胞浆和胞核中均有PTEN的表达,在胞核中表达水平更高,荧光倒置显微镜下观察Ad-PTEN转染成纤维细胞后外源性PTEN其标志物绿色荧光蛋白(GFP)在胞浆和胞核中均表达,其中胞核表达水平更高,流式细胞仪检测在成纤维细胞中病毒转染组G1/S均明显高于对照组,提示Ad-PTEN转染组细胞存在明显的G1期细胞阻滞.结论 PTEN过度表达将引起肾脏成纤维细胞周期G1期阻滞,这一过程与PTEN在细胞核定位有关.     

磷酸酶基因PTEN对骨肉瘤细胞凋亡机制研究

目的 探讨肿瘤抑制基因PTEN对人骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋亡的影响及其分子作用机制。 方法 将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP),转染MG-63细胞系,流式细胞仪分析转染效率及细胞凋亡率,半定量RT-PCR检测PTEN mRNA水平变化,Western blot法检测PTEN蛋白表达,试剂盒检测caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性。 结果 以感染复数为100,转染MG-63细胞2天后腺病毒感染效率即达93.2%±4.7%。转染PTEN基因5天后,细胞凋亡率为29.8%,细胞形态出现明显凋亡改变。分子学检测结果显示转染PTEN基因后,PTEN mRNA及蛋白表达明显升高;caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性明显增加。 结论 PTEN基因可能通过提高caspase-3、caspase-7、caspase-9活性,诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡。     

体外转染PTEN基因对人结肠癌细胞生长的影响

目的探讨野生型PTEN基因表达对结肠癌细胞体外生长的影响。方法应用脂质体转导技术,将含野生型PTEN基因重组真核表达质粒pBp-PTEN转染Lovo细胞并稳定表达。Western blotting鉴定后,观察Lovo细胞转染前后生长、细胞周期、凋亡的改变。结果转染后细胞生长曲线提示转染组曲线平缓,无明显对数生长期,生长速度较对照组明显降低(P<0.01);细胞周期测定显示转染组细胞G1期比例上升,提示PTEN可能对G1/S期转换点起阻滞作用;转染组细胞凋亡比率增高(P<0.01),尤其是早期凋亡。结论外源性PTEN基因的转染可以抑制结肠癌细胞的体外生长。     

pten基因重组腺病毒对卵巢癌细胞生长的抑制作用

目的:观察携带野生型pten基因的重组腺病毒(Ad-pten)体外转染高转移卵巢癌HO-8910PM细胞后的表达,并研究其对卵巢癌细胞抑制增殖、诱导凋亡和抑制迁移的作用.方法:利用Ad-Easy腺病毒载体系统构建Ad-pten,体外转染高转移卵巢癌HO-8910PM细胞,荧光显微镜检测Ad-pten的转染效率. Western印迹检测pten在HO-8910PM细胞中的表达;MTT实验观察pten对细胞生长的影响;HE染色法观察外源性pten基因表达对细胞形态学的影响;细胞划痕实验观察pten对细胞迁移的抑制作用;Hoechest33258凋亡染色检测pten基因对HO-8910PM细胞凋亡的诱导作用.结果:外源性野生型pten基因经腺病毒介导成功转入HO-8910PM细胞,Western印迹检测出有PTEN蛋白的表达,当感染复数MOI为100时,体外转染效率高达90%以上. pten显著抑制HO-8910PM细胞增殖、诱导其凋亡并能抑制其迁移.结论:重组腺病毒是高效的基因转移系统,能将pten目的基因高效地转移到高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中,对细胞产生强有力的生长抑制及凋亡诱导作用,并能抑制其迁移.     

Adenovirus-mediated PTEN gene transfection suppresses growth and promotes chemosensitivity of endometrial carcinoma

Objective： To determine the potential of sustained transgene expression by intratumoral injection of Ad-PTEN in the nude mouse model of endometrial carcinoma. Methods and Results： We constructed recombinant adenovirus carrying the wild-type PTEN gene （Ad-PTEN）. RL95-2 cells, an endometrial carcinoma cell line lacking PTEN function, was infected with Ad-PTEN and showed increased expression of PTEN and chemosensitivity to doxorubicin, decreased proliferation rate, and elevated apoptosis and Go/G1 arrest. Furthermore, the tumorigenicity of these cells was also completely suppressed. These results indicated that gene therapy with Ad-PTEN could significantly inhibit the endometrial carcinoma xenografts growth in nude mice by intratumoral injection, induce apoptosis of tumor cells, and reduce expression of proliferating cell nuclear antigen （PCNA）. Immunohistochemistry analysis also showed that the expression of progesterone receptors （PR） in Ad-PTEN treated tumor cells were induced, while P-glycoproteins （P-gp） and estrogen receptors （ER） decreased significantly. Conclusion： PTEN may play an important role in the development of endometrial carcinoma. Our findings cast new lights for treatment ofendometrial carcinoma.     

肉桂醛促进子宫内膜癌RL95-2细胞凋亡的机制

【目的】探讨肉桂醛对子宫内膜癌RL95-2细胞凋亡的影响及其作用机制。【方法】选取肉桂醛作用子宫内膜癌RL95-2细胞,噻唑蓝（MTT）比色法检测子宫内膜癌RL95-2细胞的增殖活性和肉桂醛的IC50,Hoechst33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态学改变,流式细胞术检测RL95-2细胞的凋亡百分率,Western blot检测肉桂醛对RL95-2细胞Cleavedcaspase-3、Caspase-3、NF-κB、IL-6和IGF-R蛋白表达的影响。【结果】肉桂醛可降低子宫内膜癌RL95-2细胞的增殖率,与药物浓度和作用时间有关;与溶剂对照组比较,肉桂醛组（0.29、0.59和1.20mg/mL）作用48h后RL95-2细胞的凋亡百分率明显增高（P<0.01）,出现典型的凋亡小体,Cleavedcaspase-3蛋白的表达明显增加（P<0.01）,Caspase-3蛋白的表达无明显变化（P>0.05）,而NF-κBp65、IL-6和IGF-R蛋白的表达均明显降低（P<0.05）。【结论】肉桂醛可降低RL95-2细胞NF-κB·p65、IL-6和IGF-R蛋白的表达,促进RL95-2细胞的凋亡,从而起到抗子宫内膜癌作用。     

全反式维甲酸对人子宫内膜腺癌细胞增殖抑制作用的研究

目的:探讨全反式维甲酸(All trans retinoic acid,ATRA)对人子宫内膜腺癌细胞株(RL95-2)的增殖抑制作用.方法:用不同浓度ATRA处理体外培养的RL95-2,分别在处理后不同的时间点,以MTT法检测ATRA对RL95-2增殖活性的影响;用流式细胞术检测经ATRA处理后的RL95-2细胞周期的变化;免疫组化方法检测细胞周期素A(Cyclin A)的改变;扫描电镜和透射电镜观察ATRA处理后的细胞形态变化.结果:ATRA可抑制RL95-2的增殖,且这种作用呈时间及浓度依赖性.FCM分析发现RL95-2细胞增殖被ATRA阻滞于G0/G1期.电镜观察到用药后细胞恶性表型消失.免疫组化发现AT-RA处理后48h,Cyclin A蛋白表达降低.结论:ATRA对子宫内膜癌细胞系RL95-2的生长有抑制作用,且这种抑制作用与Cyclin A蛋白表达水平降低有关.     

miR-34c抑制人子宫内膜癌的机制分析

目的 MicroRNAs (miRNAs)是内源性表达长度约为22个核苷酸的小RNA分子,通过结合到靶mRNA上而抑制基因的表达。近年的研究表明某些miRNAs可以调节肿瘤细胞的增殖与迁移,然而miRNA在子宫内膜癌中的作用有待于进一步探索。本研究旨在探讨miR-34c在人子宫内膜癌中的表达规律、功能和分子机制。 方法 通过荧光定量PCR技术检测20例人子宫内膜癌组织标本中miR-34c的表达。通过阳离子脂质体介导的方法将miR-34c转染入人子宫内膜癌细胞RL95-2中,应用MTS法检测子宫内膜癌细胞的增殖,克隆形成实验检测子宫内膜癌细胞的生长,流式细胞术检测细胞周期,Transwell实验检测子宫内膜癌细胞的迁移。生物信息学和荧光素酶报告基因实验确认miR-34c作用的靶基因。RNAi技术下调c-Met的表达。通过蛋白印迹检测miR-34c对c-Met蛋白以及细胞内重要信号通路与细胞周期相关蛋白的影响。 结果 miR-34c在子宫内膜癌中表达明显降低。miR-34c能使子宫内膜癌细胞RL95-2细胞周期滞留在G₁期,显著抑制细胞的增殖。细胞移形实验发现miR-34c能够显著抑制RL95-2细胞迁移。生物信息分析表明c-Met是miR-34c作用的靶基因,进一步通过荧光素酶报告基因实验得以证实。蛋白印迹分析发现miR-34c能下调RL95-2细胞中的c-Met蛋白、p-Akt蛋白以及p-ERK1/2蛋白表达情况,同时还能够下调CDK4、CDK6蛋白以及p-Rb蛋白的表达水平。RNAi技术下调c-Met的表达能够明显抑制子宫内膜癌细胞的增殖与迁移。 结论 本研究结果证明miR-34c通过作用于靶基因c-Met而抑制子宫内膜癌细胞的增殖与迁移,说明miR-34c是子宫内膜癌中的重要抑癌基因。      

Effects of ATRA, Acitretin and Tazarotene on Growth and Apoptosis of Tca8113 Cells

Summary：To investigate the effects of ATRA, acitretin and tazarotene on the growth and apoptosis of human tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113. The effect of retinoids on growth of Tca8113 cells in vitro was examined by MTT assay and Trypan blue exclusion assay. Cell cycle analysis, early apoptosis analysis with double staining with Annexin V-FITC and PI, and active caspase-3 analysis with the staining of FITC-conjugated monoclonal rabbit anli-active caspase-3 antibody were made by flow cytometer. Streptavidin-biotin complex （SABC） immunocytochemical assays were employed for the detections of Bax/Bcl-2 proteins expressions. Our results showed that the retinoids inhibited growth of Tca8113 cells in a dose-and time-dependent manner with maximal inhibition 24 h after treatment of 10 5 mol/L. 10^-5 mol/L retinoids altered cell cycle distribution of Tca8113 cells, revealing an increase in G0/G1-phase population, a decrease in S-phase population and the inhibition of G1/S switching. 10^-5 mol/L retinoids significantly induced apoptosis of Tca8113 cells （all P〈0.05）, elevated the cells population with detectable active caspase-3 （P〈 0.05 for all）, increased the number of cells forming Bax and decreased the number of cells forming Bcl-2 significantly （all P〈0.05）. Acitretin played a most prominent role among the retinoids. It is concluded that the inhibition of cell cycle progress of Tca8113 cells by ATRA, acitretin and tazarotene is one of the possible mechanisms for proliferation arrest of TcaS113 cells elicited by the retinoids. The retinoids mediate apoptosis in TcaS113 cells that may be caspase-dependent through mitochondria pathway. High concentration retinoids inhibit growth of Tca8113 cells in vitro by interfering with proliferation and inducing apoptosis of cells. Acitretin may be an alternative medicine for the prevention and treatment of tongue squamous cell carcinoma.     

低氧培养对RL95-2细胞线粒体损伤及凋亡的影响

目的 探讨低氧培养对于人子宫内膜上皮腺癌细胞株（RL95-2）线粒体损伤及细胞凋亡的影响.方法 用含有不同浓度（0、10、30、62.5、125 μmol/L）氯化钴的培养液培养RL95-2细胞株.采用CCK-8法测定细胞增殖活性;JC-1荧光染色,流式细胞仪分析细胞线粒体膜电位变化;Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 随着氯化钴浓度升高或作用时间延长（62.5 μmol/L作用下）, RL95-2细胞增殖活性逐渐下降,线粒体膜电位去极化增加,细胞凋亡率升高.结论 缺氧造成子宫内膜上皮细胞增殖活性下降,线粒体损伤,凋亡率升高.     

低氧培养对RL95-2细胞线粒体损伤及凋亡的影响

目的 探讨低氧培养对于人子宫内膜上皮腺癌细胞株（RL95-2）线粒体损伤及细胞凋亡的影响。方法 用含有不同浓度（0、10、30、62.5、125 μmol/L）氯化钴的培养液培养RL95-2细胞株。采用CCK-8法测定细胞增殖活性;JC-1荧光染色,流式细胞仪分析细胞线粒体膜电位变化;Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 随着氯化钴浓度升高或作用时间延长(62.5 μmol/L作用下), RL95-2细胞增殖活性逐渐下降,线粒体膜电位去极化增加,细胞凋亡率升高。结论 缺氧造成子宫内膜上皮细胞增殖活性下降,线粒体损伤,凋亡率升高。     

Effects of insulin, insulin-like growth factor-I and -II on proliferation and intracellular signaling in endometrial carcinoma cells with different expression levels of insulin receptor isoform A

Background  Hyperinsulinemia, insulin-like growth factor (IGF)-I and -II (IGF-II) are associated with increased risk of endometrial carcinoma. Insulin receptor isoform A (IR-A) is more frequently expressed in endometrial carcinoma than in normal endometrial tissues. To better understand their roles in endometrial carcinoma, we investigated the effects of insulin, IGF-I, and IGF-II in endometrial carcinomas cells with different IR-A expression levels.

Methods  To explore the role of IR-A in mediating the activity of IGF-I, IGF-II, and insulin, we investigate the cellular proliferation of endometrial carcinoma cell lines RL95-2 and RL95-2-IR-A by MTS assays. Then we examined the protein kinase Akt phosphorylation and extracellular signal-regulated kinase (ERK) 1/2 phosphorylation in both cell lines by Western blotting. The effect of IGF-II and AG1024 on cell cycle progression and apoptosis was assessed by flowcytometry. To examine whether the effects of IGFs were mediated by IR-A, we blocked IGF-I receptor (IGF-IR) in both cell lines using AG1024, an IGF-IR-specific inhibitor.

Results  IGF-I and IGF-II significantly enhanced proliferation of both cell lines (P <0.05). By contrast, insulin significantly increased proliferation of RL95-2-IR-A cells only (P <0.05). IGF-I and IGF-II significantly increased pAkt levels in RL95-2 cells and pERK1/2 levels in RL95-2-IR-A cells (all, P <0.05). Insulin increased pERK1/2 levels in RL95-2–IR-A cells only (P <0.05). LY294002 and PD98059 inhibited the specific signaling activities and cellular proliferation. After AG1024 pretreatment, neither IGF-I nor IGF-II affected pAkt levels in RL95-2 cells. IGF-II, but not IGF-I, increased pERK1/2 levels in RL95-2-IR-A cells. After AG1024 pretreatment, the proliferation rate and DNA content corresponding to the S phase increased and apoptosis decreased significantly in IGF-II-treated RL95-2-IR-A cells only (P <0.05).

Conclusions  The proliferation effect of insulin is mediated by IR-A. When IR-A dominates in a cell line, IGF-II activated cell proliferation mainly through the ERK1/2 pathway. On the other hand, IGF-II activated cell proliferation mainly through the Akt pathway. IR-A can at least partly mediate the proliferative and anti-apoptotic effects of IGF-II through the ERK1/2 pathway.