高效液相色谱-串联质谱法测定奶粉中的维生素A、维生素D、维生素E

目的建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定奶粉中维生素A、维生素D、维生素E的分析方法。方法样品中的维生素经皂化反应后,正己烷提取,旋蒸至近干后氮气吹干,流动相溶解后分析,采用HPLC-MS/MS选择反应监测(SRM)正离子模式测定。结果维生素A、维生素D、维生素E在各自浓度范围内线性关系良好。方法的相对标准偏差(RSD)为4.8%~16.7%(n=6),奶粉中维生素A、维生素D、维生素E的回收率为76.4%~95.9%,7种维生素的检出限分别为:维生素A:5.0μg/L;维生素D2:1.0μg/L;维生素D3:1.0μg/L;α-维生素E:0.1μg/L;β-维生素E:0.5μg/L;γ-维生素E:0.5μg/L;δ-维生素E:0.1μg/L。结论本法可同时对奶粉中的维生素A、维生素D、维生素E进行定性和定量分析,方法的精密度、回收率和检出限能满足实际检测要求,可用于奶粉等食品中维生素A、维生素D、维生素E含量的日常监测。     

快速溶剂萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定竹笋中的百草枯残留

目的运用快速溶剂萃取和超高效液相色谱串联质谱技术,建立竹笋中百草枯残留的检测方法。方法选择合适的溶剂和萃取条件,采用甲醇-盐酸快速溶剂萃取提取竹笋中的百草枯,提取液经Oasis WCX固相萃取柱净化浓缩后,依次用水和甲醇清洗,乙腈-水-甲酸溶液洗脱,浓缩定容后以p H=3.7的20 mmol/L甲酸铵溶液-乙腈为流动相,在Waters ACQUITY UPLC BEH HILIC柱上进行分离,采用正离子扫描多反应监测模式测定,外标法定量。结果百草枯在10μg/L~500μg/L时线性良好,相关系数为0.998 7,检出限为2μg/kg,定量限为5μg/kg。回收率为80.9%~95.6%,相对标准偏差为7.2%~11.4%。结论该方法灵敏、准确,可对竹笋中百草枯残留进行快速检测分析。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定血清中25-羟基维生素D和维生素K_1

目的建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时测定血清中25-羟基维生素D_2[25-hydroxyvitamin D_2, 25(OH)D_2]、25-羟基维生素D_3[25-hydroxyvitamin D_3,25(OH)D_3]和维生素K_1(vitamin K_1,VK_1)的方法,并用此方法诊断维生素缺乏症,评估人群营养状况。方法血清标本采用乙腈沉淀血清蛋白,正己烷提取。采用BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)进行分离,以甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱。质谱采用电喷雾正离子模式和多反应监测检测。以稳定同位素标记的d_6-25(OH)D_3、d_7-维生素K_1作为内标定量。结果 25(OH)D_2、25(OH)D_3和维生素K_1分别在浓度为5.0～75.0 ng/mL、2.0～81.5 ng/mL和0.3～12.0 ng/mL的范围内呈良好线性关系,相关系数r0.995;检出限分别为1、0.25和0.1 ng/mL,定量限分别为3、0.75和0.3 ng/mL;血清基质中3种维生素高中低3个浓度水平的精密度均5.0%、加标回收率为98.5%～104.3%(n=6)。结论本研究建立的UPLC-MS/MS方法检测血清中25(OH)D_2、25(OH)D_3和维生素K_1灵敏度高、准确性好,适用于人群维生素D及维生素K_1营养状况的监测。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定茶叶中儿茶素和茶黄素

目的 建立绿茶、红茶和乌龙茶中8种儿茶素（没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯、儿茶素没食子酸酯）和4种茶黄素（茶黄素、茶黄素 - 3 - 没食子酸酯、茶黄素 - 3,3’ - 没食子酸酯、茶黄素 - 3’ - 没食子酸酯）的超高效液相色谱 - 串联质谱（UPLC - MS/MS）测定方法。方法 样品采用70%甲醇水在70℃水浴提取过滤后,经Eclipse Plus C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）分离,以0.1%甲酸 - 0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,柱温40℃,流速为0.3 ml/min,采用电喷雾离子源正离子模式,多反应监测（MRM）模式检测。结果 8种儿茶素和4种茶黄素在优化的色谱质谱条件下,分离度良好,且分别在浓度0.60～16.7 μg/ml和1.0～16.7 μg/ml范围内线性关系良好。对3种不同茶叶2个加标水平下的平均加标回收率范围为 71.5%～118.3%,相对标准偏差（RSD）为2.0%～5.9%,检出限范围为0.10～16.10 ng/g。结论 该法操作简便、灵敏度高,适用于茶叶中8种儿茶素和4种茶黄素的日常测定。     

快速萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定香菇中四种水溶性维生素

目的建立同时检测香菇中多种水溶性维生素的快速萃取-超高效液相色谱串联质谱技术。方法样品采用40～50℃纯水快速提取,调节pH后,以乙酸铵水溶液和甲醇为流动相梯度洗脱,在电喷雾离子源正离子(ESI~+)多反应监测(MRM)模式下,采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱超高效液相分离,串联三重四级杆质谱快速检测。结果一次进样分析时间仅为5.5 min。维生素B_1在1～500μg/L呈线性关系,维生素B_2、B_3和C在10～5 000μg/L呈线性关系,相关系数均0.99。维生素B_1的检出限为3μg/L,维生素B_2、B_3和维生素C的检出限均为30μg/L(S/N=3)。加标回收率为86.5%～102.0%,相对标准偏差为8.2%～11.2%(n=7)。应用该方法检测丽水市50份本地香菇,显示维生素B_1、B_2、B_3和C的含量分别为0.030～0.044 mg/kg、23.35～30.68 mg/kg、0.62～1.30 mg/kg和0.70～1.12 mg/kg。结论本法前处理过程简便有效,结果准确可靠,可快速、同时检测大批量香菇中四种水溶性维生素。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水果中杀菌剂和植物生长调节剂

目的建立超高效液相色谱-串联质谱方法同时测定水果中多效唑、赤霉素、噻苯隆等6种植物生长调节剂和甲基硫菌灵、甲霜灵、烯酰吗啉等8种杀菌剂残留。方法样品经含1%乙酸的乙腈溶液提取,无水硫酸镁-醋酸钠盐析,分散固相萃取吸附剂(C18粉末和无水硫酸镁)净化,采用ZORBAX XDB C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)进行分离,流动相为乙腈-0.1%甲酸+10 mmol/L乙酸铵水,梯度洗脱,电喷雾正离子和负离子模式进行质谱测定。结果 8种杀菌剂和6种植物生长调节剂在2.0~100.0 ng/m L范围线性关系均良好,相关系数(r)0.999 0;方法的检出限为0.5~3.0μg/kg,定量限为1.5~9.0μg/kg;空白样品的加标浓度为10.0、50.0和100.0μg/kg时,回收率为79.5%~93.0%,相对标准偏差为2.1%~8.7%。结论该方法适用于同时检测水果中8种杀菌剂和6种植物生长调节剂残留。     

同位素稀释-超快速液相色谱-串联质谱法测定血清中25-羟基维生素D

目的建立一种快速、准确测定血清中25-羟基维生素D_2、25-羟基维生素D3和3-epi-25-羟基维生素D3的同位素稀释-超快速液相色谱-串联质谱法。方法血清样品经甲醇-乙腈沉淀蛋白后,采用正己烷萃取,萃取液利用氮气吹扫浓缩并以初始流动相为溶剂进行定容,以含0.1%甲酸的水溶液(V/V)和含0.1%甲酸的甲醇溶液(V/V)为流动相,采用梯度洗脱方式在Phenomenex Kinetex F5色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm)上实现快速分离,采用多反应监测正离子模式检测,同位素内标法定量。结果差向异构体25-羟基维生素D_3和3-epi-25-羟基维生素D_3在6 min内可达基线分离,并可准确定量测定25-羟基维生素D_2、25-羟基维生素D_3和3-epi-25-羟基维生素D_3。3种目标物在0.5～50.0μg/L范围内均呈良好线性关系(相关系数r>0.9995),方法检出限为0.15μg/L,定量限为0.5μg/L。在3个加标水平(1.0、10.0和30.0μg/L)下,回收率为84.3%～109.0%(n=11),相对标准偏差(RSDs)为0.8%～6.8%。采用美国国家标准与技术研究院(NIST)的有证标准物(SRM 972a)的Level 1、Level 2、Level 3和Level 4进行方法验证,测定结果与标准参考值的相对偏差均小于5%。结论建立的方法具有简便、快速、灵敏和准确的特点,适用于血清中25-羟基维生素D_2、25-羟基维生素D_3和3-epi-25-羟基维生素D_3的同时测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定人血清中甲硝唑和氯霉素

目的 建立同时测定人血清中甲硝唑和氯霉素的超高效液相色谱-串联质谱法。方法 血清样品经乙腈沉淀、离心、过滤后进样,以甲醇-0.05%氨水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用Waters BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm)分离,在电喷雾离子源、多反应监测模式下检测,同位素内标法定量。结果 在2.20 ng/ml～1 100 ng/ml浓度内,甲硝唑和氯霉素线性关系良好,相关系数均>0.998,方法检出限为0.55 ng/ml,平均回收率为94.0%～109.0%,相对标准偏差为2.3%～9.2%。血清样品中待测物的短期、长期和冻融稳定性良好。样品基质对氯霉素的基质效应可忽略,而对甲硝唑具有基质抑制作用。结论 该方法操作简便、快速、灵敏度高、准确性好,符合生物样品测定的技术要求,适用于同时测定人血清中甲硝唑和氯霉素。     

超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法测定血清中维生素A和维生素E

目的 建立一种超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法测定血清中维生素A(视黄醇)和4种具有活性的维生素E(α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚)含量的方法.方法 血样经甲醇沉淀蛋白后,用正己烷萃取,吹干后用甲醇复溶,使用C30色谱柱(3 mmx150 mm,2.6 μm)分离,以0.1％甲酸甲醇和0.1％甲酸-...     

超高效液相色谱-串联质谱法测定干血点中25-羟基维生素D

目的建立干血点中25-羟基维生素D2[25(OH)D2]和D3[25(OH)D3]的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)同时测定方法。方法干血点经过定量取样,加水超声提取后加乙腈沉淀蛋白,再使用乙酸乙酯:正己烷(2:1,V/V)萃取,氮气吹干后加PTAD试剂衍生,氮吹干后用流动相复溶,使用Waters BEH C18柱分离、电喷雾正离子(ESI+)模式和多反应监测(MRM)检测,同位素内标法定量。结果 25(OH)D2和25(OH)D3分别在全血浓度为5~167ng/m L和1.7~167ng/m L的范围内呈良好的线性关系,相关系数r0.999;检出限(LOD)分别为1.5ng/m L和0.25ng/m L,定量限(LOQ)分别为5ng/m L和1.7ng/m L;样品高低两水平的加标回收率均80%,日内精密度均9%,日间精密度均10%。结论该方法需血量少、灵敏、快速、准确,适用于人群维生素D营养状况的监测。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定鸡肉、鸡蛋中氯霉素和甲硝唑残留

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定鸡肉、鸡蛋中氯霉素(CAP)和甲硝唑(MNZ)的检测方法。方法以氘代氯霉素(D5-CAP)和氘代甲硝唑(D4-MNZ)为内标,样品采用乙酸乙酯提取,氮气吹干后用0.1 mol/L HCl复溶,正己烷脱脂,MCS固相萃取柱净化处理。在ACQUITY BEH-C18色谱柱中分离,以0.05%氨水-乙腈做流动相,梯度洗脱,氯霉素采用ESI-监测模式、甲硝唑采用ESI+监测模式,均采用同位素内标法定量。结果鸡肉、鸡蛋样品中氯霉素和甲硝唑的检出限均为0.01μg/kg;氯霉素的回收率为101.4%~104.3%,相对标准偏差为3.0%~9.1%;甲硝唑的回收率为101.0%~104.9%,相对标准偏差为4.4%~8.8%。结论本法具有良好的选择性、灵敏度和准确度,满足鸡肉、鸡蛋样品中痕量氯霉素、甲硝唑药物残留的高灵敏分析。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定咖啡中丙烯酰胺

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定咖啡中丙烯酰胺。方法 用乙腈提取样品中丙烯酰胺,提取液用GCB/SCX/PSA小柱净化,在电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式下,用超高效液相色谱-串联质谱法进行检测,内标法定量。结果 丙烯酰胺在10.0～500μg/L浓度范围内线性关系良好,r为0.9998,方法检出限和定量限分别为3.0μg/kg和10.0μg/kg,平均加标回收率在87.0%～95.1%之间,相对标准偏差(RSD)在3.8%～8.9%之间。结论 该方法样品前处理简单、速度快、灵敏度高、重现性好,可用于咖啡中丙烯酰胺的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水果中8种杀菌剂残留

目的建立水果中甲基硫菌灵、甲霜灵、烯酰吗啉、嘧霉胺、三唑酮、苯醚甲环唑、咪鲜胺、多菌灵8种杀菌剂的超高效液相色谱-串联四级杆质谱(UHPLC-MS/MS)检测方法。方法样品采用含有1%乙酸的乙腈溶液提取,无水硫酸镁-醋酸钠盐析,提取液1∶9稀释后,采用Agilent ZORBAX XDB C18色谱柱(100 mm×2. 1 mm,1. 8μm),梯度洗脱,采用MRM模式测定,外标法定量。结果 8种目标物质在给定的浓度范围内具有良好的线性关系(r≥0. 999 0),方法定量限为0. 000 6 mg/kg～0. 006 mg/kg,加标回收率为84. 6%～104. 2%,相对标准偏差(RSD)均5. 4%。结论本方法改良了QuRCh ERS的样品前处理技术,操作简单,定量准确可靠,具有良好的灵敏度、回收率和重复性,适合水果中杀菌剂的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定膨化食品中10种工业染料

目的建立超高效液相色谱-电喷雾四级杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定膨化食品中10种工业染料(罗丹明B、苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ、碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22、酸性橙Ⅱ、红2G)的分析方法。方法样品分别用丙酮和丙酮∶水(6∶4,V/V)提取,涡旋振荡1 min,超声20 min,10 000 rpm冷冻离心5 min,混合2次提取液,10 000 r/min冷冻离心3 min,0.2μm微孔滤膜过滤,梯度洗脱条件下经ACQUITY UPLC BEH C_(18)柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离后,采用超高效液相色谱-串联质谱法多离子反应监测模式(MRM)检测。结果各种工业染料的质量浓度为5 ng/ml~50 ng/ml时,线性关系良好(相关系数r均0.995 0),检出限为0.01μg/kg~1.0μg/kg,定量限为0.03μg/kg~3μg/kg。3种加标水平下的平均回收率为85.1%~118.3%,相对标准偏差(RSD)为2.4%~12.1%。结论该法具有前处理简单、灵敏度高、准确性强等特点,能够满足膨化食品中10种工业染料同时检测的要求。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定果蔬中6种植物生长调节剂

目的建立果蔬中6-苄基腺嘌呤、赤霉素、氯吡脲、噻苯隆、4-氯苯氧乙酸和2,4-二氯苯氧乙酸的超高效液相色谱-串联质谱测定方法(UPLC-MS/MS)。方法样品经1%(V/V)乙酸-乙腈提取后加入脱水试剂脱水,取上清液加入基质分散固相萃取试剂净化,过膜后以乙腈与0.1%甲酸-5 mmoL/L甲酸铵溶液梯度洗脱,经Waters Acquity HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱分离,最后在质谱多反应监测(MRM)模式下分析,6种植物生长调节剂均用负离子(ESI-)模式检测。结果 6种植物生长调节剂在1～200μg/L范围内,线性关系良好(r≥0.9913),各组分检出限为0.242～0.508μg/kg,回收率为69.1%～105.0%,RSD为1.04%～5.06%。结论 UPLC-MS/MS法简便、快速、准确,可用于食品中果蔬中6种植物生长调节剂的检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中残留青霉素

目的建立1种超高效液相色谱-串联质谱联用法测定乳制品中8种青霉素类抗生素残留的确证方法。方法乳制品样品用水提取后,经乙腈沉淀蛋白,正己烷液液萃取除去脂肪,用氮气吹至近干,用乙腈＋水（10＋90）复溶后,经0.22μm微孔滤膜过滤,经Endeavorsil C18柱分离,选用乙腈（含0.1%甲酸）-水（含0.1%甲酸）为流动相,13 min内梯度洗脱分离8种青霉素;在优化的质谱条件下,采用ESI源、正离子模式、多反应监测方式、外标法定量。结果在浓度范围1.0～100.0μg/kg,8种青霉素类药物在各种乳制品基质中均有良好的线性关系,相关系数为0.999 2～0.999 8,方法最低检测限为0.03～0.15μg/kg,方法回收率为91.0%～102.3%,相对标准偏差为1.02%～6.13%。用本研究建立的方法检测78份奶粉、液体牛奶、鲜奶、奶饮料样品,其中3份样品检出青霉素G,含量为0.2～1.6μg/kg。结论该方法测定牛奶中8种青霉素药物的残留量简便、快速、准确,可以满足对牛奶中青霉素残留的检测要求。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定水体中微囊藻毒素

目的建立测定水体中微囊藻毒素的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。方法通过固相萃取富集净化,采用超高效液相色谱-串联质谱测定水中微囊藻毒素-LR。结果该方法检出限为0.04μg/L;线性定量范围为10～1 000μg/L,平均回收率为97.20%,平均相对标准偏差为4.71%。结论本文建立的超高效液相色谱-串联质谱法为水质微囊藻毒素监测提供了一种快速、准确、灵敏的分析方法。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时快速检测微量血清中6种脂溶性维生素

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）同时快速检测微量血清中维生素A、维生素D（25-OH-VD2 、25-OH-VD3 ）、维生素E（α-、β-和γ-生育酚）的方法。方法 血清中脂溶性维生素经甲醇-乙腈（50:50, v/v)沉淀蛋白、正己烷萃取,以Phenomenex Kinetex F5色谱柱为分离柱,2.5 mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相,梯度洗脱,电喷雾电离（ESI+ ）、多反应监测（MRM）模式下检测,同位素内标法定量。结果 血清中6种脂溶性维生素线性范围内线性关系良好,相关系数 r >0.995;6种脂溶性维生素的检测限为0.20~1.25 ng/ml,定量限为0.39~3.88 ng/ml;加标回收率为86.6%~107.7%,日内精密度<9.6%,日间精密度<9.3%。NIST标准参照品SRM 968f验证方法准确度,结果偏差均在5%以内。结论 本方法准确度高、重现性好、用血量少,适于婴幼儿等采血困难者微量血样中多种脂溶性维生素的同时快速检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中氯霉素和甲硝唑残留

目的建立同时检测蜂蜜中的氯霉素和甲硝唑的超高效液相色谱-串联质谱法。方法样品经乙酸乙酯提取后,采用Eclipse Plus-C18(2.1 nm×100 nm,1.8μm)色谱柱进行分离,流动相为0.05%氨水-乙腈,梯度洗脱,用超高效液相色谱-串联质谱仪进行分析。结果氯霉素和甲硝唑在0.50~10.0 ng/mL范围线性关系良好,相关系数0.999;氯霉素和甲硝唑的检出限分别为0.007和0.002μg/kg;在0.20、20.0μg/kg两个水平条件下,回收率为86.2%~95.6%,相对标准偏差(RSD)为1.2%~3.4%。在10份蜂蜜产品检测中,均未检出氯霉素和甲硝唑。结论本方法具有良好的选择性、灵敏度和准确度,适用于蜂蜜中氯霉素和甲硝唑的同时检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛奶中19种β-内酰胺类抗生素

目的:建立应用超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱仪(UPLC-ESI-MS/MS),多离子反应监测(MRM)法测定牛奶中19种β-内酰胺类抗生素(包括阿莫西林、氨苄西林、美洛西林、派拉西林、青霉素G、甲氧西林、青霉素V、非奈西林、苯唑西林、双氯唑西林、氯唑西林、奈夫西林等12种青霉素类和头孢匹林、头孢氨苄、头孢拉定、头孢唑啉、头孢派酮、头孢噻呋、头孢噻吩等7种头孢类)的快速确认方法。方法:使用青霉素G-D7为内标,样品经沉淀蛋白、离心后,用HLB-SPE柱富集、净化处理,在ACQUITY UPLCTMBEH SHELD RP18色谱柱(2.1×100 mm,粒径1.7μm)中分离,以0.1%的甲酸水溶液/乙腈为流动相,经梯度洗脱将19种β-内酰胺类抗生素完全分离;采用正离子扫描或负离子扫描的方式确定丰度比最高的2对离子作为监测离子,进行MRM模式定性定量分析。结果:上述19种β-内酰胺类抗生素的最低检出限(LOD)为0.01~0.3μg/L,定量限(LOQ)为0.034~1.144μg/L,在0.01~200μg/L的线性范围,相关系数r均大于0.99。低、中、高三水平(μg/L)加标回收率分别为73.4%~112.7%、75.7%~103.1%、80.0%~103.6%,相对标准偏差分别为4.3%~17.4%、2.9%~15.2%、1.8%~9.2%。结论:本法操作简单,灵敏度高,可用于牛奶中19种β-内酰胺类抗生素残留的测定。