大黄素及番泻甙和大黄素多糖对培养大鼠肝细胞内游离钙…

应用钙荧光指示剂及乙酰羟甲酯研究大黄素（ＥＭＤ），番泻甙（ＳＥＮ）和大黄多糖（ＲＰＰ）对大鼠肝细胞内游离钙（Ｃａ＾２＋）ｉ）浓度的影响，结果表明，在静息状态下肝细胞内（Ｃａ＾２＋）ｉ）为１３１．６０±３７．７９ｎｍｏｌ／Ｌ。依次加入ＣａＣｌ２（２ｍｍｏｌ／Ｌ）ＫＣｌ（１２０ｍｍｏｌ／Ｌ）后，肝细胞内（Ｃａ＾２＋）ｉ较静息时显著增加（Ｐ＜０．０１），预先经ＥＭＤ（０．０３７ｍｍｏｌ／Ｌ）作用的肝细胞     

大黄素和大黄多糖对小鼠脾淋巴细胞内游离钙浓度的影响

应用最新一代钙离子荧光指示剂ｕｒａ－２／ＡＭ测定小鼠脾淋巴细胞内游离钙浓度，探讨大黄有效成分蒽醌类中大黄素和大黄多糖对脾淋巴细胞内游离钙的影响。实验表明：大黄素（终浓度１８．５μｍｏｌ／Ｌ）对淋巴细胞外钙内流有明显促进作用（Ｐ＜０．０１）；大黄多糖则有抑制内钙释放和外钙内流（Ｐ＜０．０１），且抑制程度与剂量相关。本文为大黄双向调节作用提供理论依据。     

大黄素对培养大鼠心肌细胞游离钙浓度的影响

采用新型荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ观察大黄素对培养大鼠心肌细胞游离钙浓度的影响，结果大黄素（１８．５ｕｍｏｌ／Ｌ）对静息状态下心肌细胞游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）无明显影响，但对ＣａＣｌ２所引起（［Ｃａ２＋〕ｉ）的增加则有明显的促进作用，而且这种作用的强弱与所加入ＣａＣｌ２的剂量相关，和对照组比较Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１。     

番泻甙对大鼠心肌收缩性能的影响

麻醉大鼠实验结果表明，番泻甙（７．４ｕｍｏｌ·Ｌ－１·Ｋｇ－１）ｉｖ具有正性肌力作用。给药后ＨＲ加快，ＳＰ、ＭＡＰ和ＬＶＰＳ较对照组明显升高（Ｐ＜０．０５）。ｔ－ｄｐ／ｄｔｍａｘ缩短，与ｄｐ／ｄｔｍａｘ、ＶｃＥ－ＣＰＩＰ和Ｖｍａｘ增加相一致。反映心肌消耗能量与耗氧的ＴＴＩ．ＨＲ在给药后５ｍｉｎ时较对照组增加５６％，１０ｍｉ。时增加８０％，说明番泻甙升压增加左室作功，从而使心肌耗氧耗能增加。     

大黄总甙、大黄素、番泻甙对不全梗阻后小鼠离体小肠葡萄糖-钠转运电位的影响

本实验采用记录翻转小鼠离体小肠囊葡萄糖－钠转运电位的方法，观察大黄总甙、大黄素、番泻甙对在全梗阻后小肠葡萄糖－钠吸收的影响。结果发现大黄有效成分对葡萄糖－钠转运电位产生明显抑制作用。表明这些成分可阻止不全梗阻后小肠葡萄糖－钠的吸收，并伴随水的吸收减少，使肠腔容积增大，进而使肠蠕动增强，亦可产生通里攻下的作用。这一结果可为进一步阐明大黄治疗不完全性肠梗阻的机理提供新的理论依据。     

大黄素对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

以ＣＣｌ４体外损伤的原代培养大鼠肝细胞为实验模型，通过测定培养液中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＭＤＡ水平和ＭＴＴ法检测细胞增殖活性，观察ＥＭＤ对急性肝细胞损伤的影响。结果表明：ＥＭＤ和ＣＣｌ４损伤的原代培养大鼠细胞有显著保护作用；对ＣＣｌ４引起的ＡＬＴ、ＡＳＴ和ＭＤＡ水平的升高有显著抑制作用，并显著改善受损肝细胞的增殖活性。     

黄芩甙对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞内游离钙浓度的影响

采用Ｃａ２＋指示剂Ｆｕｒａ２作为细胞内钙离子的荧光探针，用荧光分光光度计检测了黄芩甙对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞内游离钙浓度Ｃａｉ＋２的影响。结果表明，随黄芩甙浓度的增加，可剂量依赖性地显著降低平滑肌细胞静息Ｃａｉ＋２，并显著抑制去甲肾上腺素和高Ｋ＋引起的细胞Ｃａｉ＋２的升高，提示黄芩甙可通过阻断平滑肌细胞膜上的电压依赖型钙通道和受体操纵型钙通道，抑制细胞Ｃａｉ＋２的增高，这可能与其降压作用机制有关。     

大黄素和大黄多糖对铜负荷模型大鼠脂质过氧化的影响

目的 探讨大黄素(EMD)和大黄多糖(RTP)对铜负荷模型鼠体内脂质过氧化以及肝功能的影响. 方法 将60只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和给药组,每组20只,以铜负荷饮食法造模8周,造模第4周后给药组给予EMD、RTP各200mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组给予等量生理盐水,各组共灌胃4周.观察各组大鼠血清和肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平和肝功能指标的变化.结果 与对照组比较,模型组血清和肝组织中MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px水平显著下降(P＜0.05或P＜0.01);模型组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBiL)水平较对照组显著升高,白蛋白(ALB)水平显著下降(P＜0.01).给药组较模型组血清和肝组织中MDA水平显著下降,SOD、GSH-Px水平显著升高(P＜0.05或P＜0.01);给药组ALT、AST和TBiL水平较模型组显著下降(P＜0.05或P＜0.01)、ALB水平无显著变化(P＞0.05).结论 EMD联合RTP能抑制铜负荷模型鼠体内脂质过氧化,改善其肝功能水平.     

芦荟大黄素对CCl4损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

目的：研究芦荟大黄素(AE)对原代培养大鼠肝细胞的保护作用。研究拟探讨AE对肝细胞的保护作用，以CCL4体外损伤的原代培养大鼠肝／细胞为实验模型，通过测定培养液中谷丙转氨酶(ALT)、谷胱甘肽-S转移酶(GSH)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平和MTT法检测细胞增殖活性，观察AE对急性肝细胞损伤的影响。并探讨其作用机理。方法：以CCL4体外损伤的原代培养大鼠肝细胞为实验模型，通过测定培养液中谷丙转氨酶(ALT)、谷胱甘肽-S转移酶(GSH)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平和MTT法检测细胞增殖活性，观察AE对急性肝细胞损伤的影响。结果：AE浓度为10^-4mol／L-106-7mol／L时能显著抑制CCL4所致ALT和MDA水平的上升。提高GSH水平及细胞存活率，并呈一定的浓度一效应关系。结论：AE能有效保护CCL4所致肝细胞损伤。     

大黄素治疗高脂饮食诱发的大鼠非酒精性脂肪肝的实验研究

目的探讨大黄素对高脂饮食诱发的大鼠非酒精性脂肪肝的治疗作用。方法高脂饮食饲养12周诱导SD大鼠非酒精性脂肪肝模型,肝脏病理切片证实造模成功,造模大鼠4|D只随机分为5组,大黄素(低、中、高剂量)组给予相应剂量的大黄素灌胃,每日1次,饮食治疗组及模型对照组灌服蒸馏水,除模型组外,其余各组均进食普通饮食。4周后分别检测各组的肝指数、肝功能、血脂、肝脂及肝组织学改变。结果模型对照组体重、肝指数、肝酶活性、血脂、肝脂显著升高(P＜0．05,P＜0．01),高密度脂蛋白胆固醇明显降低(P＜0．01),肝脏呈中、重度脂肪变；与模型对照组比较,不同剂量大黄素治疗能显著降低血脂、肝脂,改善肝功能(P＜0．05,P＜0．01)；而饮食治疗仅使肝组织学有改善,但血清谷丙转氨酶、血清甘油三酯和胆固醇增高持续存在。结论大黄素合并饮食治疗高脂饮食诱发的大鼠非酒精性脂肪肝有效。     

积雪草总苷对大鼠系膜细胞游离钙的影响

目的:观察积雪草提取物对大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖和钙离子的影响。方法:将血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用于肾小球系膜细胞,加入不同浓度的积雪草提取物,采用MTT法和Fura-2/AM荧光指示剂负载测定MC增殖和细胞内[Ca2 ]I的变化。结果:MC一经AngⅡ刺激后增殖显著,并且Ca2 浓度明显升高,而积雪草提取物对AngⅡ刺激下的MC增殖和Ca2 水平有抑制和降低作用,并呈一定的剂量依赖性。结论:积雪草提取物可能通过降低MC内Ca2 的水平,从而达到抑制MC增殖的目的。     

生脉散皂苷部位对大鼠培养心肌细胞内游离钙的调节作用

目的：研究生脉散皂苷部位对培养的大鼠单个心肌细胞内Ca^2+浓度的影响。方法：以Fluo-3AM负载心肌细胞，采用激光扫描共聚焦显微镜检测单个细胞内Ca^2+浓度的变化，结果：生脉散皂苷部位10μg/ml可明显增加心肌细胞内Ca^2+浓度，并使其持续在高水平（P＜0．01），，随后加入高Ca^2+和高K^+，对细胞内Ca^2+浓度无明显影响。生脉散泉苷部位100μg/ml诱导心肌细胞内Ca^2+浓度迅速明显增加后又迅速下降至静脉水平（P＜0．01），外加Ca^2+高K^+，不能刺激细胞内Ca^2+浓度明显增加，结论：生脉散皂苷部位对心肌细胞内Ca^2+浓度变化的影响与其浓度有关。     

丹皮酚对钙反常培养心肌细胞的保护作用

丹皮酚能显著抑制正常心肌细胞快相(5min)和慢相(120min)⁴⁵Ca摄取及搏动频率,显著抑制钙反常心肌细胞⁴⁵Ca摄取和降低胞内过氧化脂质含量,且呈剂量依赖性。表明丹皮酚减轻钙反常损伤与阻止Ca²⁺内流及抗氧化有关。     

大黄素对肝癌细胞SMMC-7721抑制作用及P53、C-myc蛋白的表达

目的 研究大黄素对肝癌细胞 SMMC-7721 的生长抑制作用和 P53、C-myc 蛋白的表达。方法 应用 MTT法观察大黄素、5-FU 对 SMMC-7721 的生长抑制作用,免疫组化法染色(SP 法)测定细胞凋亡时 P53、C-myc 蛋白的表达情况。结果 大黄素对肝癌细胞 SMMC-7721 有明显的生长抑制作用,其 IC50为 21.6 mol/L。大黄素对 SMMC-7721的抑制作用优于 5-FU(P<0.05);大黄素作用于细胞后,P53、C-myc 蛋白均有一定程度下调,而 C-myc 下调较 P53明显。结论 大黄素对 SMMC-7721 有明显的生长抑制作用,作用于 SMMC-7721 后 P53、C-myc 蛋白的表达均有下调。     

大黄素对肝脏疾病的防治作用与安全性研究进展

大黄素是一种蒽醌类衍生物,是从何首乌、大黄等中药中提取得到的主要活性单体.现代药理研究证明,大黄素具有广泛的药理活性,其中对于肝脏疾病如肝脏炎症、肝癌、肝纤维化以及对各类肝损伤等均有良好的防治作用.然而在研究过程中,大黄素对肝细胞的潜在毒性作用也逐渐显现.因此,本研究综合近年来大黄素在肝脏上的研究,对其药理作用、机制及...     

大鼠离体肾灌流技术评价尿肝型脂肪酸结合蛋白在马兜铃酸致肾损伤中的价值

目的:探讨大鼠离体肾灌流体系中尿肝型脂肪酸结合蛋白与马兜铃酸(AA)肾损伤的关系。方法:建立大鼠离体肾灌流模型,按5 mL.min-1恒速灌流,空白组给予正常灌流液,马兜铃酸组给予7 mg.(50 mL)-1,灌流给药10 min后,不同时间点收集灌流液和尿液,分别检测钾、钠、氯离子浓度,计算离子清除率,ELISA方法检测尿液肝型脂肪酸结合蛋白浓度。结果:马兜铃酸组钾、钠离子清除率在给药后0.5h明显下降,分别从给药前的(99.54±14.55)%和(27.93±6.66)%下降至(33.16±9.59)%和(9.70±2.62)%,与空白组相比差异显著;尿肝型脂肪酸结合蛋白在给药灌流后即刻明显升高,从给药前(7.42±0.12)ng.L-1升高至(8.18±0.47)ng.L-1,与空白组相比差异显著。结论:尿肝型脂肪酸结合蛋白在评价马兜铃酸致急性肾小管损伤方面优于传统指标离子清除率,是一个早期且敏感的肾小管损伤生物标志物。     

大黄素和环孢素A在抗大鼠肝移植排斥反应中的协同作用

目的 探讨大黄素与环孢素A合用对大鼠肝移植排斥反应的影响。 方法 以LEW→BN大鼠原位肝移植为模型,随机分为4组,每组12只,术后每天分别腹腔注射生理盐水0.5 mL 、环孢菌素A(CsA) 10.0 mg/kg、大黄素50.0 mg/kg和大黄素50.0 mg/kg+ CsA10.0 mg/kg。给药7天,于术后第8天每组随机取6只鼠处死,取肝脏组织观察排斥活动指数（RAI）和肝细胞凋亡指数（AI）;剩余大鼠停止用药,观察存活时间。 结果 CsA组、大黄素组、大黄素+ CsA组的存活天数、RAI及AI优于生理盐水组（P<0.01）,其中大黄素+ CsA组优于CsA组、大黄素组（P<0.05）,CsA组和大黄素组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 大鼠肝移植术后给予大黄素与环抱素A联用,对于抑制排斥反应有协同作用。     

大黄素对小鼠缺血再灌注肠黏膜肥大细胞活性的影响

目的:研究大黄素对小鼠肠缺血再灌注肠黏膜肥大细胞活性的影响。方法:28只昆明种小鼠随机均分为4组,假手术组(A组)、模型组(B组)、模型+大黄素60 mg.kg-1组(D1组)及模型+大黄素120 mg.kg-1组(D2组)。采用肠系膜上动脉夹闭法建立小肠缺血再灌注模型,观察肠黏膜病理结构变化、肠黏膜肥大细胞超微结构变化及类胰蛋白酶表达、比较计算肥大细胞数量,测定小肠组织组胺、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度。结果:与假手术组比较,模型组Chiu’s评分、肥大细胞数量、组胺及TNF-α浓度显著增加(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,大黄素60,120 mg.kg-1组的肥大细胞数量明显减少(P<0.05),大黄素120 mg.kg-1组的小肠组织TNF-α浓度明显降低(P<0.05)。假手术组肥大细胞超微结构正常,模型组肥大细胞颗粒包膜相互融合形成细胞内空泡等脱颗粒现象,大黄素60,120 mg.kg-1组肥大细胞形成空泡较少。结论:大黄素能减少小鼠小肠黏膜结构破坏,抑制小肠肥大细胞活化及脱颗粒,从而起到防治肠缺血再灌注损伤的作用。