霉酚酸酯对大鼠糖尿病肾病及CD2相关蛋白表达的影响

目的研究霉酚酸酯（MMF）对大鼠糖尿病肾病（DN）及CD2相关蛋白（CD2AP）表达的影响。方法纯种雄性SD大鼠24只,分正常对照（A）组、DN模型（B）组和MMF干预DN（C）组。饲养8周后行有关血尿生化指标和光镜组织学、透射电镜、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）CD2AP mRNA表达检测。结果MMF明显减少DN大鼠24h尿蛋白的排泄,预防血肌酐的升高。组织学显示C组大鼠肾小球面积明显减少,系膜增宽及细胞外基质积聚明显改善。电镜下B组大鼠足细胞足突增宽,部分融合,肾小球毛细血管袢基膜增厚,系膜区增宽,系膜基质增多,C组大鼠以上病变都明显减轻。CD2AP mRNA表达在B组显著高于A组和C组。结论MMF具有治疗SD大鼠DN的作用,并且在转录水平逆转肾皮质CD2AP表达上调。     

霉酚酸酯对糖尿病肾病大鼠肾足细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的研究霉酚酸酯(MMF)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾足细胞损伤的保护作用及其机制。方法用腹腔注射链脲佐菌素联合高脂饮食喂养建立DN大鼠模型。根据血糖值将大鼠随机分为模型组和实验组;另取正常大鼠作为正常组,每组10只。实验组灌胃MMF 15 mg·kg^-1,正常组和模型组给予等剂量0. 9%Na Cl,持续给药8周。检测大鼠血糖与尿肌酸酐,用免疫印迹法检测大鼠肾组织足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)与Bcl-2相关的X蛋白(Bax)的表达水平。结果正常组、模型组和实验组大鼠血糖值分别为(5. 0±0. 4),(26. 8±3. 2),(21. 7±2. 6) mmol·L^-1,组间两两比较差异有统计学意义(P <0. 05);这3组的尿肌酸酐含量分别为(7218. 9±1471. 4),(2280. 7±469. 1)和(4031. 4±641. 7)μmol·L^-1,组间两两比较差异有统计学意义(均P <0. 01);这3组的Nephrin相对表达量分别为2. 81±0. 70,0. 48±0. 21和2. 14±0. 45;这3组的Bax相对表达量分别为0. 21±0. 06,1. 71±0. 56和0. 63±0. 32,组间两两比较差异均有统计学意义(均P <0. 01)。结论 MMF能通过上调Nephrin、同时抑制凋亡蛋白的表达,从而保护DN大鼠肾足细胞损伤。     

霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的探讨霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法将实验动物分为正常对照组、糖尿病组及霉酚酸酯治疗组。霉酚酸酯组给予霉酚酸酯(15mg·kg-1·d-1)治疗。13周后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率、内生肌酐清除率、血糖、血脂、血胰岛素;HE及PAS染色观察肾脏病理改变;免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)及胶原(ColI、ColⅢ)的表达。结果霉酚酸酯可降低尿白蛋白排泄率、内生肌酐清除率、减轻早期肾小球肥大,且不同程度降低肾组织CTGF表达及ColI、ColⅢ的沉积。结论霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏有保护作用,此作用可能与霉酚酸酯降低肾组织中CTGF的表达,减少系膜外基质的沉积有关。     

霉酚酸酯对肾病综合征大鼠肾组织白细胞介素8的影响

目的 探讨白细胞介素8(IL-8)在肾病综合征大鼠蛋白尿形成中的作用及霉酚酸酯(MMF)对其的影响。方法 应用阿霉素肾病模型，用MMF对肾病形成过程进行干预。采用放射免疫法测定血清及肾组织IL-8含量。结果MMF可减轻肾病蛋白尿，降低肾组织IL-8含量。结论 MMF降低肾组织IL-8含量，可能是其对肾病综合征大鼠保护作用的机制之一。     

糖尿病大鼠肾组织nephrin podocin的表达及来氟米特对其的影响

目的研究糖尿病大鼠肾脏损伤时nephrin、podocin的表达变化以及应用来氟米特和氯沙坦对其表达的影响。方法将48只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为4组:单肾切除对照组(N组),模型组(D组),来氟米特治疗组(LEF组),氯沙坦治疗组(L组)。分别于糖尿病成模后8、12周处死,观察24h尿微量白蛋白排泄量、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、肾脏病理组织学改变,应用免疫组织化学方法检测肾脏皮质nephrin、podocin蛋白的表达水平。结果与N组比较,D组出现①进行性微量白蛋白尿,BUN、SCr增高(P<0.05);②肾组织内nephrin、podocin表达下调(P<0.05)。与D组比较,各干预组(LEF组、L组)①24h尿微量白蛋白排泄量、BUN、SCr均降低(P<0.05);②nephrin、podoin表达增加(P<0.05)。两组药物之间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论来氟米特和氯沙坦均对糖尿病大鼠肾脏损害有保护作用,其机制可能是通过增加nephrin、podocin表达而实现。     

白藜芦醇及SRT1720对2型糖尿病大鼠肾小球足细胞裂孔隔膜分子表达的影响

摘要：目的 研究白藜芦醇和SIRT1激活剂SRT1720对糖尿病大鼠肾功能以及足细胞损伤的干预作用,探讨SIRT1活化改善肾损害的作用和机制。方法 采用高脂饮食联合单侧肾切除和链脲佐菌素诱导方法建立2型糖尿病大鼠模型,用白藜芦醇和SRT1720等进行干预治疗。留取血清和肾脏,分析肾重及肾重/体重,检测空腹血糖、血肌酐、尿素氮等,采用免疫组化、逆转录-实时荧光定量PCR技术检测肾皮质中足细胞裂孔隔膜分子Nephrin和Podocin等蛋白原位表达和基因表达水平。结果 与正常组相比,模型组大鼠单侧肾重及肾重/体重比显著增高,空腹血糖、血肌酐和尿素氮均显著增高,肾皮质中Nephrin和Podocin蛋白表达和基因表达丰度显著降低。白藜芦醇和SRT1720治疗组各项检测指标均较模型组有所改善,白藜芦醇组肾重/体重指数、空腹血糖、Nephrin和Podocin表达等与模型组有统计学差异,SRT1720组空腹血糖、血肌酐、尿素氮、Nephrin和Podocin表达等与模型组均有统计学差异。结论 白藜芦醇、SRT1720 等SIRT1激活剂可显著改善糖尿病大鼠肾功能和足细胞损伤,在糖尿病肾病的防治方面具有重要价值和应用前途。 关键词：糖尿病肾病;白藜芦醇;SRT1720;Nephrin;Podocin     

糖尿病肾病与Nephrin蛋白

<正>糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)是糖尿病(DiabetesMellitus,DM)代谢异常引发的肾小球硬化症,它是DM全身微血管病的组成。由糖尿病肾病造成的肾功能衰竭比非糖尿病者高17倍,是糖尿病患者的主要死亡原因之一[1]。尿白蛋白排泄率是目前早期发现     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾组织巨噬细胞浸润的影响

目的探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾组织巨噬细胞浸润的影响。方法建立STZ诱导的单侧肾切除糖尿病模型,随机分:对照组、模型组、灯盏花素给药组与MMF给药组。8wk末检测尿白蛋白排泄率(AER)、肾组织蛋白激酶C(PKC)活性,应用免疫组化方法检测肾组织ED1及单核细胞趋化蛋白1(MCP1)与细胞间黏附因子1(ICAM1)表达。结果灯盏花素或MMF给药组大鼠肾重、肾重/体重、AER明显低于模型组(P<0.05)。模型组肾组织细胞浆、细胞膜及细胞总PKC活性明显高于对照组(P<0.01),灯盏花素给药组肾组织PKC活性明显低于模型组(P<0.05),MMF给药组肾组织PKC活性与模型组相比无差异。模型组肾小球ED1阳性细胞数及MCP1、ICAM1表达明显高于对照组(P<0.01),灯盏花素或MMF给药可明显缓解这些变化(P<0.05)。结论灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏有明显保护作用,其机制可能部分与抑制肾组织巨噬细胞浸润有关。     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾脏足细胞相关蛋白Nephrin表达的影响及机制

目的探讨白芍总苷对糖尿病大鼠肾脏足细胞相关蛋白Nephrin蛋白表达的影响及机制。方法建立链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病模型,将模型大鼠随机分糖尿病组与TGP(50,100,200mg·kg-1.d-1灌胃)给药组,另设正常对照组。8wk末检测大鼠血糖、24h尿白蛋白排泄率(AER)变化,应用间接免疫荧光法检测肾组织Nephrin分布、West-ern杂交检测肾组织Nephrin、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与NF-κB-p65蛋白表达。结果模型组大鼠24hAER明显高于给药组,TGP治疗组大鼠24hAER明显减低。免疫荧光显示对照组肾小球Nephrin呈线状均匀分布;糖尿病组表达明显减少、呈颗粒状不均匀分布;TGP治疗组Nephrin表达增加,呈线状及颗粒状分布。Westernblot显示模型组肾组织Nephrin蛋白表达明显低于对照组,TGP治疗组表达增加;模型组肾组织TNF-α与NF-κB-p65蛋白表达明显高于对照组,TGP治疗组呈剂量依赖性降低它们的表达。结论TGP降低糖尿病大鼠尿蛋白机制可能部分与增加肾小球Nephrin表达有关。     

复肾汤对糖尿病肾病大鼠足细胞Nephrin和Podocin的影响

目的 观察复肾汤（FST）对糖尿病肾病（DN）大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 正常对照组为雄性Wistar大鼠8只,常规饲养。雄性Wistar大鼠24只,正常饲养1周后大鼠ip链脲佐菌素（STZ）和弗氏完全佐剂（CFA）建立糖尿病模型。造模成功后分为模型组、FST大剂量组（L1）、FST小剂量组（L2）。L1、L2组分别给予复肾汤32、8 g/kg;模型组给予生理盐水。每天ig给药1次,给药体积1 mL/100 g,连续8周,定期测血糖。实验结束后,收集24 h尿液,采集血清,检测胰岛素（INS）、肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、尿蛋白（UP）等生化指标;轻取肾脏,光镜下观察肾脏组织病理变化;免疫荧光法检测肾组织nephrin和podocin的表达,RT-qPCR法检测肾组织nephrin、podocin的基因表达。结果 与模型组比较,L1、L2组的INS、SCr、BUN、MDA、UP明显降低（P<0.05、0.01）,SOD明显升高（P<0.05）,病理学评分明显降低（P<0.05）,nephrin、podocin的免疫荧光表达明显上调,RT-qPCR基因表达明显上调。结论 复肾汤可以有效改善DN大鼠足细胞nephrin和podocin的表达,对DN的发展具有一定的延缓作用。     

大豆异黄酮对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制

目的探讨大豆异黄酮(SI)对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制。方法建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型,将模型大鼠随机分为糖尿病组(DM组)、大豆异黄酮低[40 mg/(kg·d),SI1组]、中[120mg/(kg·d),SI2组]、高[360 mg/(kg·d),SI3组]及正常对照组(NC组)。8周末检测大鼠血糖、24 h尿蛋白、肾指数、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平;Western blot检测肾组织nephrin表达。结果 SI3组尿蛋白(0.88±0.15)mg·d-1、肾指数(4.16±0.36)mg·g-1与DM组尿蛋白(1.26±0.45)mg·d-1、肾指数(6.13±0.76)mg·g-1比较明显降低(P<0.05);SI2组TC(2.07±0.52)mmol·L-1、TG(0.99±0.07)mmol·L-1、LDL-C(0.75±0.03)mmol·L-1和BUN(13.37±5.393)mmol·L-1与DM组TC(2.75±0.47)mmol·L-1、TG(1.36±0.35)mmol·L-1、LDL-C(0.83±0.01)mmol·L-1、BUN(24.32±6.31)mmol·L-1比较亦有明显降低(P<0.05);Western blot结果显示DM组nephrin蛋白表达较NC组显著降低(P<0.05),但SI使nephrin蛋白表达增加(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论 SI保护糖尿病大鼠肾脏的机制可能部分与增加nephrin表达有关。     

依普利酮联合替米沙坦对自发性高血压大鼠肾脏足细胞Nephrin表达和肾脏保护作用的影响

目的：研究依普利酮、替米沙坦对自发性高血压大鼠肾脏保护作用和足细胞Nephrin蛋白表达的影响。方法：5只12周雄性Wistar-Kyoto（WKY）大鼠为对照组（A组）、20只自发性高血压大鼠（SHR）随机分为高血压组（B组）和替米沙坦治疗组（C组）,依普利酮治疗组（D组）,替米沙坦、依普利酮联合治疗组（E）。A、B组用等量饮用水灌胃,C组用替米沙坦[10mg/（kg·d）]灌胃,D组用依普利酮[100mg/（kg·d）]灌胃,E组依普利酮[100mg/（kg·d）]＋替米沙坦[10mg/（kg·d）]灌胃8周。测定治疗前后24h尿蛋白量,肌酐,尿素氮水平,并观察肾脏病理改变;免疫组化法检测肾脏nephrin表达变化。结果：B组血压和尿蛋白较A组逐渐升高（P〈0.05）。B组肾小球硬化指数和间质纤维化指数均明显高于A组（P〈0.05）,nephrin蛋白表达较A组降低。C、D和E组血压、尿蛋白和病理损伤较B组减轻,nephrin表达显著高于B组（P〈0.05）。结论：依普利酮联合替米沙坦通过上调足细胞nephrin表达,减轻自发性高血压大鼠肾损伤。     

CE抑制剂对糖尿病大鼠早期肾脏肥大的抑制作用及机制

目的　研究ACE抑制剂对糖尿病大鼠早期肾脏肥大的抑制作用及机制。方法　大鼠随机分单侧肾切除对照组、糖尿病组及糖尿病苯那普利治疗组。应用Northern杂交检测各组肾皮质TGFβ1mRNA表达 ,Western杂交检测各组肾皮质TGFβ1和 p2 1CIP1蛋白表达 ,荧光分光光度法测定血浆、肾皮髓质ACE活性。结果　糖尿病大鼠 1wk后体重下降(P <0 0 5 )伴肾重 /体重增加 (P <0 0 5 ) ,血浆ACE活性有所下降而肾皮质ACE活性却有所上升。Northern杂交表明糖尿病组肾皮质TGFβ1mRNA表达比对照组增加 1 3倍 ,Western杂交表明糖尿病组肾皮质TGFβ1和p2 1CIP1蛋白表达增加 ;苯那普利治疗 1wk对糖尿病肾脏肥大有抑制作用 ,对血浆、肾皮髓质ACE活性抑制分别达 89 0 %、70 0 %与70 5 % ,对肾皮质TGFβ1mRNA及TGFβ1和p2 1CIP1蛋白表达抑制分别达 4 7 7%、4 9 5 %与 6 0 0 %。结论　ACE抑制剂对糖尿病肾脏肥大的抑制作用机制可能部分与抑制肾组织TGFβ1和p2 1CIP1蛋白表达有关     

初诊2型糖尿病患者尿PCX和Nephrin及单核细胞趋化蛋白-1联合检测对早期糖尿病肾病的预测价值

目的:通过对初诊2型糖尿病患者尿PCX,Nephrin及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)进行检测,探讨三者对早期糖尿病肾病的预测价值。方法:选择2011年5月—2011年12月住院初诊2型糖尿病患者132例,正常对照(N)组36例,尿白蛋白/尿肌酐(UAlb/UCR)<30 mg/g为糖尿病(DM)组56例,UAlb/UCR≥30 mg/g为糖尿病肾病(DN)组76例。检测尿PCX(UPCX),Nephrin(UNephrin),MCP-1(UMCP-1),白蛋白(UAlb)及尿肌酐(UCR)。比较各组UPCX/UCR,UNephrin/UCR,UMCP-1/UCR的差异及2型糖尿病患者上述各指标间的相关性及与UAlb/UCR的相关性,计算糖尿病患者UMCP-1/UCR,UNephrin/UCR,UPCX/UCR及三者联合检测的阳性率,并与UAlb/UCR的阳性率进行比较分析。结果:UPCX/UCR,UMCP-1/UCR水平糖尿病组分别为(37.37±22.83)μg/g和(47.19±29.98)ng/g,比正常对照组明显升高(P<0.05);UAlb/UCR,UPCX/UCR和UMCP-1/UCR水平DN组比DM组和正常对照组明显升高(P<0.05);UNephrin/UCR水平DN组较DM组明显升高(P<0.05)。2型糖尿病患者UPCX/UCR,UMCP-1/UCR和UNephrin/UCR水平与UAlb/UCR呈正相关(r=0.619;0.568;0.535)(P<0.05);UPCX/UCR水平与UMCP-1/UCR和UNephrin/UCR呈正相关(r=0.799;0.718)(P<0.05),UNephrin/UCR水平与UMCP-1/UCR水平呈正相关(r=0.635,P<0.05);UMCP-1/UCR,UNephrin/UCR and UPCX/UCR的阳性率较UAlb/UCR显著升高(χ2=9.818,6.673,5.395,P<0.05)。结论:尿PCX,Nephrin和MCP-1单独或联合检测在早期糖尿病肾病诊断中具有重要的应用价值。     

苯那普利对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达的影响

目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对糖尿病肾脏细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响。方法 单侧肾切除大鼠腹腔注射STZ(65mg/kg)诱发糖尿病模型，每日灌胃给予ACEI苯那普利(10mg/kg)，共12周。采用原位末端标记法检到肾脏细胞凋亡情况，流式细胞术和免疫组化检到肾皮质Fas和Fas-L表达。结果 糖尿病组较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多，Fas和Fas-L的表达亦显著增强，苯那普利治疗组较糖尿病组凋亡细胞数减少，Fas和Fas-L的表达减弱。结论 苯那普利可能通过影响凋亡相关蛋白Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡，从而发挥肾脏保护作用。