猴小肠结肠炎耶尔森氏菌实时荧光PCR快速检测方法的建立

目的 建立一种能快速检测猴小肠结肠炎耶尔森氏菌实时荧光PCR方法.方法 以小肠结肠炎耶尔森氏菌耐热肠毒素基因的保守区为靶区域设计特异引物和探针,建立一种能快速检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的实时荧光PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、线性相关性、重复性等因素进行试验.结果 建立的荧光PCR法对小肠结肠炎耶尔森氏菌具有特异的反应性,最低检出限为3.3×10 cfu/ml,菌液浓度在3.3×10〈＇7〉cfu/ml至3.3×10cfu/ml时与Ct值有较好的线性关系,试验重复性良好.结论 建立的小肠结肠炎耶尔森氏菌实时荧光PCR检测方法适用于猴小肠结肠炎耶尔森氏菌的快速检测.     

广东省鼠疫静息期小肠结肠炎耶尔森氏菌分布调查

目的 查明广东省鼠疫疫源地静息期小肠结肠炎耶尔森氏菌在啮齿动物感染和自然环境中分布情况。方法 采集鼠回盲部内容物378份、菜市摊位污水200份和猪场猪粪200份各分别放入改良PBS缓冲液中，置4℃增菌3周，经KOH溶液处理后，涂布IN培养基；蚤类直接拉胃接种IN培养基。置28℃24h，挑取可疑菌落鉴定。结果 从鼠、猪粪、蚤分别检出小肠结肠炎菌9、50和1株。结论 广东省鼠疫疫源地内静息期啮齿动物小肠结肠炎耶尔森氏菌携带率偏低，而在局部地区猪携带率很高，已造成流行。     

云南省西部地区5岁以下腹泻儿童感染致病性小肠结肠炎耶尔森菌调查

目的 了解云南西部地区≤5岁腹泻儿童小肠结肠炎耶尔森菌的感染水平及病原学特征，为儿童感染性腹泻防治提供依据。方法 采集2020—2021年在大理大学第一附属医院就诊的≤5岁腹泻儿童粪便标本，同时收集病例临床特征信息，标本冷增菌后利用耶尔森菌选择培养平板分离小肠结肠炎耶尔森菌，通过生物分型、血清学分型及毒力基因检测分析菌株病原学特征。结果 共采集397份腹泻粪便标本，在3份标本中检出7株耶尔森菌，耶尔森菌感染率为0.76%(3/397)。3份耶尔森菌阳性标本中，第212号标本检出2株弗氏或中间型耶尔森菌，第24号和第226号标本中检出5株的耶尔森菌均为小肠结肠炎耶尔森菌，其中第24号标本检出2株小肠结肠炎耶尔森菌，为生物1A型，毒力基因检测为：ail-、ystA-、ystB+、yadA-、virF-，为非致病性小肠结肠炎耶尔森菌；第226号标本检出3株小肠结肠炎耶尔森菌，为生物3型、血清O∶3型（rfbc+），毒力基因检测为：ail+、ystA+、ystB-、yadA+、virF+，为致病性小肠结肠炎耶尔森菌。小肠结肠炎耶尔森菌感染率为0.50%(2/397),致病性小肠结肠炎耶尔森菌检...     

耶氏菌和耶氏菌病的部分研究近况

小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia Enterocoliti-ca,以下简称耶氏菌)为新近发现的人类肠道致病菌,由其引起的疾病称耶尔森氏菌病(Yensiniosis,以下简称耶氏菌病)。耶氏菌病临床症候主要表现为胃肠炎和小肠结肠炎等,因而常被误诊为急性胃肠炎等病症。自从 Carlsoon 等证实该菌对人的致病性以来,世界上已有80多个国家先后报道了本病的     

从粪便标本中分离一株小肠结肠炎耶尔森氏菌

本文报告1983年从粪便标本中分出一例小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)该菌在SS 琼脂平板上,以普通培养法发现生长出无色透明,大小一致,直径约0.5mm 的菌落。与沙门氏菌属因子血清及志贺氏菌属诊断血清等均无凝集,而与小肠结肠炎耶尔森氏菌0:3因子血清发生较强的凝集,经形态学、培养特性、生化试验、噬菌体裂解试验等鉴定,结果属小肠结肠炎耶尔森氏菌生物3型。表明在本地区成人中有耶氏菌存在。该菌的分离在感染腹泻的粪便常规病学检查中应予重视。     

耶氏菌检查法

当前已有40多个国家发现耶氏菌病。1970年国际细菌学分类命名委员会将耶氏菌划归肠杆菌科。现该菌属有4个种。1.小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)。2.鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis)。3.假结核耶尔森氏菌(Yersinia pseudotubercu-     

自猪盲肠检出一株小肠结肠炎耶尔森氏菌的报告

小肠结肠炎耶尔森氏菌是人畜共患的病原菌,能引起小儿腹泻、急慢性胃肠炎、败血症和类阑尾炎等。在猪体分离耶氏菌阳性率较高。我区卫生防疫站已在人和猪体中分别检出此菌。我们为了解我县家畜猪体携带耶氏菌的情况,于1984年8月间采集标本72份,结果检出一株小肠结肠炎耶尔森氏菌,现报告如下。     

广东省鼠类耶尔森氏菌现状分析

目的 了解广东省鼠疫疫源地和非鼠疫疫源地鼠类耶尔森氏菌的分布和相互抑制的情况。方法 分别采用间接血球凝集试验（IHA）、放射免疫沉淀试验（RIP）进行鼠疫耶尔森氏菌特异性F1抗体检测，并分别对鼠类回盲部内容物和肝、脾、舌进行冷增菌后，以选择培养基分离。结果 广东省鼠疫疫源地未检出任何一种耶尔森氏菌，而非鼠疫疫源地区检出小肠结肠炎耶尔森氏菌2株，中间型耶尔森氏菌1株。结论 广东省鼠疫疫源地处于静息期，在鼠疫疫源地区和非疫疫源地区耶尔森氏菌存在互相抑制现象。     

散装生肉中小肠结肠炎耶尔森氏菌的污染状况分析

目的:分析市面上所销售的散装生肉中小肠结肠炎耶尔森氏菌的污染状况。方法:分别从超市,农贸市场采集散装的生肉样本,包括生鲜的猪,羊,牛,鱼肉,分理培养其中的耶尔森氏菌,检测其中的检出率并进行相应的生化鉴定。结果:在本次研究中,我们在生肉样本中共分离出小肠结肠炎耶尔森氏菌共计17株菌株,共占样本总数的11.2%,其中致病菌株仅有两株,是总样本数的2%。结论:在市售的散装生肉中,小肠结肠炎耶尔森氏菌的含量较低,较少有被污染,并且致病菌株含量极微。     

丽江市家犬中致病性耶尔森菌流行病学调查

目的 了解丽江市鼠疫疫源地内家犬中携带致病性耶尔森菌的流行情况及其病原学特征。方法 选择丽江市古城区和玉龙县各2个乡镇,逐户采集犬肛拭子及血液标本。肛拭子经4 ℃冷增菌后,采用耶尔森选择培养基对小肠结肠炎耶尔森菌、鼠疫耶尔森菌和假结核耶尔森菌三种致病性耶尔森菌进行分离;对所分菌株再进行生化鉴定、生物分型、血清分型和毒力基因型检测;对血液标本进行鼠疫F1抗体的检测。结果 共采集467份肛拭子,分离到4株小肠结肠炎耶尔森菌,未分离到鼠疫耶尔森菌及假结核耶尔森菌;4株小肠结肠炎耶尔森菌中,2株为O∶3血清型和非1A生物型,毒力基因齐全为致病株;另2株为1A生物型血清型未定,毒力基因阴性为非致病株;467份血液标本中26份为F1抗体阳性,其中1份阳性标本与1份分离到小肠结肠炎耶尔森菌的肛拭子来自同一只家犬。结论 丽江市家犬中携带小肠结肠炎耶尔森菌,且有致病性菌株;此外,在一只家犬中,发现存在着鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌共感染的现象。     

耶尔森菌选择培养基在鼠疫耶尔森菌分离培养中的应用

目的了解大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鼠疫耶尔森菌等实验菌株在不同培养基上的生长情况。方法将9种实验菌株分别接种营养琼脂培养基、赫氏培养基、耶尔森菌选择培养基进行分离培养。结果 9种实验菌株在营养琼脂培养基、赫氏培养基上生长良好,而在耶尔森菌选择培养基上只有鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌、假结核耶尔森菌生长,其它实验菌株受到抑制未生长。结论耶尔森菌选择培养基在鼠疫耶尔森菌的分离培养中优于营养琼脂培养基和赫氏培养基。     

南宁市分离的耶尔森氏菌的质粒研究

在有毒力的小肠结肠炎耶尔森氏菌(简称Y.e.)中有40～48M道尔顿的质粒,这一质粒对耶尔森氏菌的毒力表达是必须的.本文对南宁市从病人和猪分离的小肠结肠炎耶尔森氏菌菌株64株的自凝性和血凝性进行了检测.这些病株均带有质粒.64株菌株中,有57株自凝试验阳性.其他7株阴性菌株中,有2株在26℃、37℃培养物表现混浊,无凝集现象.有5株菌株在26℃、37℃均表现有自凝现象.同时,在64株Y.e.菌株中,26℃培养对豚鼠的红细胞     

利用环介导等温扩增技术检测鼠肠中的致病性小肠结肠炎耶尔森菌

目的利用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification method,LAMP)检测鼠肠中致病性小肠结肠炎耶尔森菌,为基层现场检验工作提供依据。方法利用PCR法检测致病性小肠结肠炎耶尔森菌的ail毒力基因;根据致病性小肠结肠炎耶尔森菌的ail毒力基因设计4条环状引物,并应用LAMP技术对样本进行检测;利用生化鉴定验证实验的准确性。结果 PCR法共检出10株菌具有ail毒力基因; LAMP技术检测出10株菌结果阳性;生化鉴定有114株小肠结肠炎耶尔森菌,其中10株为O∶3或O∶9血清(为致病株)。结论 LAMP技术可以应用于小肠结肠炎耶尔森菌的检测,与PCR等传统方法检测结果高度吻合;此法可用于接受过培训的基层开展工作。     

云南省梁河县家鼠鼠疫疫源地中致病性耶尔森菌的调查

目的对梁河县家鼠鼠疫疫源地鼠疫、假结核及小肠结肠炎3种致病性耶尔森菌分布情况调查分析并研究其病原学特征。方法选择梁河县5个鼠疫常规监测的乡镇,采集鼠盲肠标本,4℃冷增菌后采用耶尔森菌选择培养基进行致病性耶尔森菌的分离;对所分菌株进行生化鉴定、生物分型、血清分型和毒力基因(ail、yst A、yst B、yad A、vir F及rbfc)检测。结果共捕鼠533只,主要是黄胸鼠、臭鼩鼱、斯氏家鼠等;自鼠肠道中分离到2株小肠结肠炎耶尔森菌,分离率为0.4%(2/533),皆分离自黄胸鼠;2株小肠结肠炎耶尔森菌均为生物1A型,且毒力基因检测均为阴性;未检测到鼠疫耶尔森菌和假结核耶尔森菌。结论梁河县家鼠中少量携带非致病性小肠结肠炎耶尔森菌,未发现鼠疫耶尔森菌与假结核耶尔森菌的相关线索。     

建立环介导等温扩增方法检测腹泻患者中小肠结肠炎耶尔森菌

目的建立快速的检测方法对腹泻患者中的小肠结肠炎耶尔森菌进行快速检测。方法利用析因设计试验方法建立并优化检测小肠结肠炎耶尔森菌的环介导等温扩增技术（LAMP）,并与普通PCR法对临床腹泻标本进行检测比较。结果析因设计试验确定LAMP最佳反应体系：Mg2＋＋为2．0mmol,内引物FIP／BIP为1．6umol,dNTPs为1．6mmol,时间为60rain,反应温度为63℃。对12种细菌进行LAMP扩增,仅小肠结肠炎耶尔森菌获得阳性扩增结果,小肠结肠炎耶尔森菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别为38．05fg和15CFU／ml。对腹泻样本进行直接检测,检测限为150CFU／g。539例腹泻患者粪便标本中,LAMP成功检出13例样本中含有小肠结肠炎耶尔森菌,普通PCR检出11例,灵敏度为100％,特异度为99．62％。结论本方法检测小肠结肠炎耶尔森菌特异性强、灵敏度高．且操作简单、快速、检测成本低．适合基层单位及现场廊用．     

汕头市首次检出小肠结肠炎耶氏菌1例

小肠结肠炎耶尔森氏菌(简称耶氏菌),是一种人畜共患的病原微生物,它可以引起人类急性胃肠炎等多种疾病。近年我国北京,山西、福建等地已分离到本菌。1985年2月我市首次从腹泻病人检出耶氏菌0∶3型一株。现将病例及分离鉴定情况报告如下:     

广州铁路地区饮食从业人员小肠结肠炎耶尔森菌带菌情况调查

广州铁路地区饮食从业人员小肠结肠炎耶尔森菌带菌情况调查傅宜方梁春霞卢国钧（广州铁路中心卫生防疫站广州５１００１０）自１９６４年Ｃａｒｌｓｏｎ等和Ｍｏｌａｒｅｔ等证实小肠结肠炎耶尔森菌（以下简称Ｙｅ菌）对人的致病性以来，不少国家均有关于Ｙｅ菌的报道。...     

多重聚合酶链反应检测食品中致病性小肠结肠炎耶尔森菌和伤寒沙门氏菌

[目的 ]快速准确地检测致病性小肠结肠炎耶尔森菌和伤寒沙门氏菌 .[方法 ]根据小肠结肠炎耶尔森菌的ail基因和ST的H1 d基因顺序设计二对引物 ,通过聚合酶链反应检测食品中的小肠结肠炎耶尔森菌和伤寒沙门氏菌 ,扩增产物经电泳 ,分别出现与已知阳性对照细菌条带大小一致的 170和 4 5 8bp的ail和H1 d基因片断的条带时即判定该样品为阳性 .[结果和结论 ]本法特异性强、灵敏度高 ,能在60h内出结果 ,适用于食品中小肠结肠炎耶尔森菌和伤寒沙门氏菌的快速检验 .     

RT-PCR法应用于50例小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)检验的临床价值

[背景]探讨RT-PCR法应用于小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)检验的临床价值.[病例报告]采用随机的原则选取行小肠结肠炎耶尔森菌检验的腹泻患者100例(2017年4月—2018年4月),按照随机等量原则分为培养法组和RT-PCR法组,每组各为50例.两组分别应用相应方法进行检验,比较两组腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的检查率.RT-PCR法组腹泻粪便中耶尔森菌的检查率显著高于培养法组(P<0.05).[讨论]RT-PCR法检验小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)的临床价值较高,效果满意.     

三种细菌HPI核心区ybtE基因核苷酸序列及推导氨基酸序列的比较研究

目的比较三种肠聚集性大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌和鼠疫耶尔森菌HPI毒力岛核心区ybtE基因的同源性。方法PCR扩增肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)17-2ybtE基因的完整序列,克隆后测序。用ABIPRISM软件对该ybtE基因序列与已知的鼠疫耶尔森菌HPI的ybtE基因以及小肠结肠炎耶尔森菌HPI的irp5基因进行核苷酸序列和推导氨基酸序列比较。结果核苷酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和98.2%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为98.2%;推导氨基酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和97.6%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为97.8%。结论ybtE基因作为HPI的功能基因高度保守,EAEC中的HPI可能来源于YpsHPI。