实验性高度近视眼巩膜胶原及弹性模量的变化

目的探讨实验性高度近视眼巩膜组织的胶原及弹性模量的变化,进一步明确高度近视眼的发生机制。方法 1月龄新西兰大白兔20只随机单侧眼球眼睑缝合建立高度近视眼动物模型,另一侧眼球为正常对照眼,建模60 d后,测量眼轴长度确定建模成功;获取不同部位巩膜组织(前部、赤道部和后部巩膜),一部分巩膜制成巩膜条带,用Instron 5544试验机检测巩膜的弹性模量,一部分巩膜组织固定后进行HE染色观察巩膜结构,一部分巩膜组织固定后通过电镜观察胶原原纤维,一部分巩膜组织匀浆检测羟脯氨酸浓度,确定胶原含量。结果随着月龄增加,巩膜组织弹性模量和胶原含量不断增加,胶原原纤维的直径不断增大。高度近视眼后部巩膜的弹性模量、羟脯氨酸含量明显小于正常眼,且胶原原纤维的直径小于正常眼,而前部和中部巩膜未见明显差异。结论在高度近视发生过程中,后部巩膜发生重塑,胶原原纤维的排布和胶原含量发生变化,导致后部巩膜生物力学性能降低,容易发生扩张和变形,进而引起近视。研究结果为后续以胶原为靶点,在生长发育早期防治高度近视眼奠定基础。     

细胞外基质组份研究进展

细胞外基质包括胶原蛋白、弹力纤维、非胶原糖蛋白、糖胺多糖和蛋白聚糖、与基质代谢相关的酶及细胞因子等主要成分。本文重点介绍基质金属蛋白酶（ Ｍ Ｍ Ｐ１ ～１５） 及其抑制剂（ Ｔ Ｉ Ｍ Ｐ１ ～４） 、Ⅰ～ⅩⅨ型胶原蛋白、部分非胶原糖蛋白（ 腱蛋白、血栓粘合素、 Ｓ Ｐ Ａ Ｒ Ｃ、骨桥素、波浪状蛋白） 以及基底膜这一特化了的基质的结构特征、主要组成（ 如 Ａｇｒｉｎ） 和功能。     

肺癌细胞外基质的表达与临床病理的关系

目的探讨原发性肺癌层粘蛋白（Ｌａｍｉｎｉｎ,ＬＮ）、纤维连接蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ,ＦＮ）和Ⅳ型胶原的表达与临床病理的关系。方法采用免疫组化ＬＳＡＢ法检测１８４例肺癌标本中ＬＮ、ＦＮ和Ⅳ型胶原的表达。结果ＬＮ及Ⅳ型胶原在中、高分化的肺鳞癌中的表达均明显强于低分化组（Ｐ＜００１）,在有无淋巴结转移两组间的表达差异均具显著性（Ｐ＜００５）;肺鳞癌５年以上生存组ＬＮ、Ⅳ型胶原的表达明显高于０５年内死亡组（Ｐ＜００１）,ＦＮ的表达亦有差异（Ｐ＜００５）。肺腺癌的５年以上生存组中ＦＮ、Ⅳ型胶原的表达均强于０５年内死亡组（Ｐ＜００５,００１）。结论ＬＮ和Ⅳ型胶原的表达与肺鳞癌的组织学分级和淋巴结转移有关;ＬＮ、ＦＮ、Ⅳ型胶原的表达均可作为评估肺鳞癌预后的指标,而腺癌的预后仅与ＦＮ、Ⅳ型胶原的表达有关。     

组织细胞中的蛋白的提取及ECL—Western blot分析

目的 建立一种可简便、有效的胶原蛋白提取、纯化及型别分析的测定方法。方法 用破碎、酶解和盐析3步法提纯胶原,用ECL－Western blot测定细胞基质胶原（200例）、正常组织及工程化修复组织中的胶原（30例）。结果 该法提取胶原的时间周期短,得率高于传统方法的2．5倍,纯度达到了PAGE纯化的水平。结论 该法具有简便、快速、灵敏和无放射性污染等特点,为组织工程胶原的深入研究提供了有价值的测试手段。     

Ⅳ型胶原等几种细胞外基质在腮腺血管瘤中表达的研究

通过检测 型胶原、层粘连蛋白及纤维粘连蛋白等细胞外基质在腮腺血管瘤中的表达 ,探讨它们与血管瘤发生、发展的关系。方法 :采用高敏感 SP免疫组化定位及计算机图像定量分析方法 ,观察它们在腮腺血管瘤的表达变化。结果 :三者主要位于小血管及增生的腺管周围 ,连续线状分布 ;且三者在血管瘤组织中均呈高表达。结论 :细胞外基质与腮腺血管瘤的发生、发展密切相关     

细胞外基质的新成员--皮肤桥蛋白

皮肤桥蛋白是新近发现的分子量为22kD的富含酪氨酸的蛋白质,由氨基末端酪氨酸富集区及随后三个相同的结构域构成.它在细胞外基质中分布广泛,具有结合蛋白聚糖、细胞、胶原蛋白及促进细胞粘附、胶原纤维合成的性质,是细胞外基质中的一种多功能蛋白质,在细胞、基质之间的相互作用及基质组装过程中具有重要作用.     

补阳还五汤及有效组分对大鼠增生血管内膜细胞外基质蛋白表达的影响

目的:探讨补阳还五汤有效组分生物碱和苷对大鼠主动脉球囊损伤后增生内膜中细胞外基质(ECM)及其调节因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,揭示该方作用的物质基础及其机制。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组、生物碱治疗组、苷治疗组、补阳还五汤原方治疗组和阿托伐他汀治疗组,以球囊导管损伤主动脉内膜后第2d开始灌胃给药,连续14d,未次给药后第2d(术后第16d)取胸主动脉损伤段,以免疫组化法测定增生内膜中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)和MMP-9、TIMP-1的表达。结果:(1)模型组Col-Ⅰ表达增强(P0.01);补阳还五汤原方治疗组、生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组Col-Ⅰ表达显著低于模型组(P0.01)。模型组FN表达增强(P0.01);生物碱治疗组和阿托伐他汀治疗组FN表达强度显著低于模型组(P0.01)。而各组LN表达强度的变化差异均无显著(P0.05)。(2)模型组TIMP-1表达增强(P0.05);生物碱治疗可使TIMP-1表达降低(P0.05);而原方、苷和阿托伐他汀对TIMP-1表达的增强无显著影响(P0.05)。模型组MMP-9表达无显著变化(P0.05);生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组MMP-9表达强度显著高于模型组(P0.05);而补阳还五汤原方治疗组MMP-9表达无显著变化(P0.05)。结论:补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可抑制增生内膜中Col-Ⅰ的表达,生物碱还可抑制FN的表达。生物碱和苷可增强MMP-9的表达,生物碱还可抑制TIMP-1的表达。提示补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可能通过抑制增生内膜中ECM的合成,促进ECM成分的清除和降解以对抗血管内膜增生。     

组织细胞中胶原蛋白的提取及ECL-Western blot分析

目的建立一种可简便、有效的胶原蛋白提取、纯化及型别分析的测定方法.方法用破碎、酶解和盐析3步法提纯胶原,用ECL-Western blot测定细胞基质胶原(200例)、正常组织及工程化修复组织中的胶原(30例).结果该法提取胶原的时间周期短,得率高于传统方法的2.5倍,纯度达到了PAGE纯化的水平.结论该法具有简便、快速、灵敏和无放射性污染等优点,为组织工程胶原的深入研究提供了有价值的测试手段.     

细胞外基质代谢与肾小球病变研究进展

细胞外基质（ECM）的代谢紊乱及异常沉积是影响肾小球病变发生发展的重要环节．各种肾小球病变中的ECM合成与分泌均有增加，但在不同病理发展阶段及组织学类型中其成分和分布并不一致，不同结构的Ⅳ型胶原纤维α链分布与各类肾炎肾小球病理改变密切相关。此外，在肾病变中ECM代谢受基质金属蛋白酶及其组织抑制因子等各种因素的调节。     

Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶-Ⅰ在烧伤修复过程中的表达

目的　研究深Ⅱ度烧伤的患者经MEBO治疗后 ,Collagenα1(Ⅰ )、MMP Ⅰ在烧伤部位的表达及意义。　方法　HE染色 ,天狼星红染色 ,免疫细胞化学 ,原位杂交 ;　结果　Collagenα1(Ⅰ )在烧伤修复过程中持续性表达 ,在新生表皮下的真皮中表达较强 ,新生汗腺、毛囊中也有表达 ;MMP Ⅰ表达的峰值是在烧伤后第 4d ,在新生表皮前沿下的真皮中较强 ,在新生汗腺中有表达。　结论　Collagen Ⅰ、MMP Ⅰ在烧伤修复 (包括毛囊、汗腺再生 )中具有重要的作用     

Caveolae在高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质合成中的作用

 目的：探讨胞膜小凹(caveolae)在高糖(HG)诱导大鼠肾小球系膜细胞(MCs)细胞外基质(extracellular matrix,ECM)表达过程中的作用。方法：传代培养的大鼠MCs同步化后分为：(1)正常糖组;(2)HG组;(3)HG+甲基-β-环糊精(β-MCD)组;(4)HG+β-MCD+胆固醇组。用Western blotting检测小凹蛋白1(Cav-1)、磷酸化小凹蛋白1(p-Cav-1-Y14)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白的表达水平,用实时定量PCR检测细胞中Cav-1 mRNA表达变化,用ELISA方法检测上清中纤维连接蛋白(FN)的蛋白含量。结果： (1)高糖状态下, 系膜细胞 FN和ColⅠ 蛋白表达水平均显著增加(均P<0.05)。(2)高糖培养显著增加p-Cav-1-Y14水平(P<0.01),而对Cav-1 mRNA及蛋白表达无明显影响(P>0.05)。(3)β-MCD预处理抑制了高糖诱导的 p-Cav-1-Y14升高(P<0.01)及FN表达(P<0.05),但对高糖诱导的Col I表达无影响;β-MCD的作用可被胆固醇抑制。结论：高糖可显著增加系膜细胞1型胶原及纤维连接蛋白的合成。高糖诱导的纤维连接蛋白合成与Cav-1磷酸化水平增加有关。     

透明质酸在去细胞异体神经移植中对瘢痕的影响

BACKGROUND:In terms of the histocompatibility, immune rejection and scar formation after repair, acellular nerve allograft is closer to autologous nerve cells. At present, hyaluronic acid has been applied for autologous peripheral nerve repair; however, research on the nerve allograft is rarely reported. OBJECTIVE: To explore the effect of hyaluronic acid on the anastomotic scar in acellular nerve allograft repair of rat sciatic nerve defect. METHODS: Thirty-six Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups (n=12 per group). The rat model of nerve defect of 10 mm was established by cutting the sciatic nerve of the left hind leg and then given nerve allograft combined with the injection of hyaluronic acid at anastomosis (experimental group), only nerve allograft (control group) and autologous nerve graft (nerve autograft group), respectively. Afterwards, the healing of the proximal anastomosis was observed and scar components were assessed. RESULTS AND CONCLUSION:Gross observations showed that the rat skin and muscle fascia had no significant differences in healing among groups, while the surrounding tissue adhesion in the experimental group was milder than that in the control group (P < 0.05). Masson staining found that collagen deposition in the epinerium could be observed in each group. In the experimental group, a small amount of collagen fibers arranged orderly in the epineurium; in the control group numerous collagen fibers accumulated and arranged irregularly; in the nerve autograft group, sparse epineurial collagen fibers appeared in an order arrangement. The gray value of collagen type I in the experimental group was higher than that in the control group (P < 0.05), while the gray value of collagen type III was lower than that in the control group (P < 0.05). No significant differences were found in the sum gray values of collagen type I and III among groups (P > 0.05). These findings indicate that in the peripheral nerve repair, hyaluronic acid abrogates the scar formation by increasing the deposition of collagen type III and reducing the deposition of collagen type I. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

p38促进尼古丁诱导的大鼠血管平滑肌细胞的细胞外基质表达

目的 探讨尼古丁对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)的细胞外基质(ECM)表达的影响及可能的机制.方法 用终浓度为100μmol/L的尼古丁作用于体外培养的大鼠VSMCs 24 h,以不加尼古丁的细胞为对照组,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫印迹(Western blotting)方法检测ECM包括Ⅰ型胶原、纤维黏连蛋白和膜受体整合素表达的差异,以及可能参与信号转导的蛋白激酶p38的活性变化.结果 与对照组相比,尼古丁刺激组细胞的两种细胞外基质包括I型胶原和纤维黏连蛋白及膜受体整合素β1的表达均升高,分别为对照组的1.8倍、1.7倍和1.6倍,差异显著(P<0.05);尼古丁刺激组的蛋白激酶p38的活性比对照组高1.95倍,差异极其显著(P<0.01);p38的活性被特异抑制剂SB202190抑制后,尼古丁诱导的I型胶原的表达也随之下降.结论 p38参与尼古丁诱导的细胞外基质的高表达.     

疡愈涂剂对糖尿病大鼠创面Ⅰ、Ⅲ胶原合成及MMPs、TIMP-1表达的影响

目的：观察疡愈涂剂促进糖尿病迟缓愈合伤口的修复作用及其分子机制。 方法： 实验分为对照组、模型组、疡愈涂剂高、中、低剂量组。除对照组外，大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)55 mg/kg，造成实验性高血糖。30 d后，各组动物复合背部全厚皮切除直径为1.6 cm的伤口。分别观察疡愈涂剂对创面愈合时间、愈合率的影响；天狼星红染色法以及免疫组化法观察Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原比值，并观察金属蛋白酶-1、-13(MMP-1、-13)、金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平及MMP-1、-13 与TIMP-1比值。 结果： 疡愈涂剂各剂量组创面愈合时间明显短于模型组(P<0.01)，愈合率明显高于模型组(P<0.01,P<0.05)。在伤口用药的第3、7、11 d，高、中剂量组创面Ⅰ型胶原含量以及Ⅰ、Ⅲ型胶原比值显著高于模型组(P<0.01)。在伤口用药第3 d疡愈涂剂中剂量、第7、11 d各剂量组创面Ⅲ型胶原显著高于模型组(P<0.01)。各剂量组在第7 d创面MMP-1、-13均高于模型组(P<0.01,P<0.05)，而MMP-1 在第11 d与模型组趋于一致且MMP-13明显低于模型组(P<0.01,P<0.05)。各剂量组在3、7、11 d创面TIMP-1均明显高于模型组(P<0.01,P<0.05)，在第11 d各剂量组MMP-1、TIMP-1比值明显低于模型组(P<0.01)，在第3、7 d高、中剂量组创面MMP-13、TIMP-1比值高于模型组(P<0.01)，而到第11 d高、中、低各剂量组均明显低于模型组(P<0.01)；第11 d高、中剂量组MMP-13、TIMP-1比值低于低剂量组(P<0.05)。 结论： 疡愈涂剂可能通过调节影响胶原代谢的MMPs、TIMPs表达平衡，促进胶原的合成和沉积，从而加速创面的愈合。     

缺血缺氧时新生大鼠脑微血管基膜细胞外基质与脑细胞线粒体钙 …

本文用６０只新生大鼠随机分为空白对照组，假手术对照组，缺血缺氧组，复氧２４ｈ 复氧４８ｈ组。对每事的４例大脑用抗Ⅳ型胶原抗体和抗层粘连蛋白抗体进行免疫组织化学反应；每组中的８例测定脑细胞线粒体钙浓度。用方差分析Ｓｔｒｄｅｎ－Ｎｅｗｍｅｎ－Ｋｅｕｌｓ法检测所得数值的差异显著性，Ｐ〈０．０５。     

胶原-纤维蛋白胶膜复合脐带间充质干细胞修复小鼠全层皮肤创面的实验研究

目的制备胶原-纤维蛋白胶双层复合材料,评估其作为皮肤组织工程材料复合人脐带间充质干细胞(h UCMSC)修复小鼠全层皮肤创伤的效果。方法制备胶原-纤维蛋白双层材料,扫描电镜检测双层支架材料表面结构。24只小鼠建立全层皮肤创面模型后,随机分为3组:空白组用无菌纱布处理伤口、h UCMSC复合胶原组和h UCMSC复合胶原-纤维蛋白胶组,分别采用各组敷料处理创面。治疗后5、10、15 d,观察创面愈合情况,计算3组创面愈合率并进行对比。治疗后15 d,取小鼠创面新生皮肤组织苏木精-伊红染色,观察新生皮肤组织结构。结果扫描电镜结果显示:双层材料胶原层横断面呈现出高孔径结构并且互相连通,纤维蛋白胶层横断面显示紧密的三维网状结构;创面愈合结果显示:h UCMSC复合胶原-纤维蛋白胶组治疗5、10、15 d创面愈合率分别达到(62.62±6.27)%、(88.47±7.14)%、(96.14±4.56)%,优于空白组(t=17.03、16.22、15.69,P均<0.01),同时也优于h UCMSC复合胶原组(t=2.71、5.60、5.28,P均<0.05)。h UCMSC复合胶原-纤维蛋白胶组组织学检查新生皮肤组织结构良好。结论胶原-纤维蛋白胶双层支架具有较好的三维空间结构,复合h UCMSC后有利于促进皮肤创面愈合。     

高水平胰岛素对大鼠系膜细胞NF-κB活化及细胞外基质合成的影响

探讨高水平胰岛素对系膜细胞NF-κB p65活化及细胞外基质合成的影响。用高水平的胰岛素刺激系膜细胞后,用免疫组化染色观察系膜细胞NF-κB p65活化,放免法测定系膜细胞培养上清液中Ⅳ型胶原及层粘蛋白(LN)水平。并以无胰岛素刺激为正常对照组。结果显示胰岛素刺激后,系膜细胞内NF-κB p65核移位阳性率(PR)、平均光密度(ALD)以及上清液中Ⅳ型胶原、LN在一定浓度范围内呈剂量和时间依赖性增加,表明胰岛素可促进系膜细胞的NF-κB p65活化和细胞外基质的合成。     

组织工程中生物合成性细胞外基质的研究进展

通过组织工程构建出一种全新组织,移植或植入后替代丢失的或者功能不正常器官和组织.由生物可降解性、相容性细胞外基质为新组织的生长和构建提供支架,并通过多种途径调节、促进和保持细胞的粘附、生长增殖、分化和特异性基因的表达,在新组织的功能中发挥重要的作用.组织攻程细胞外基质的研究在组织发生生物学机制研究、组织器官移植和基因治疗等领域具有重要意义.     

组织蛋白酶B对动脉粥样硬化细胞外基质的影响

<正>目的:观察动脉粥样硬化(AS)患者血管中胶原含量和组织蛋白酶B的表达水平,探讨其对AS的作用。方法:9例AS患者(AS组)和5例正常成人(对照组)动脉血管标本,采用Van Gieson法染色检测胶原含量,应用免疫组化染色测定细胞浆内平均积分吸光度值,运用Western Blotting法检测组织蛋白酶B的光密度比值。结果:Van Gieson法染色观察到AS组胶原不同程度断裂、分布不均,并有大量炎性细胞浸润;对照组血管壁胶原分布均匀,排列整齐,无明显炎症细胞浸润。与对照组胶原含量(5.10±1.10%)相比,AS组(7.80±1.60%)明显升高(P<0.05)。     

STAT1 ASON对肺纤维化大鼠BALF细胞因子和肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的:观察信号转导子与转录活化子1(STAT1)反义寡核苷酸(ASON)雾化吸入对博莱霉素(BLM)致肺纤维化大鼠肺泡灌洗液(BALF)PDGF-BB(血小板衍生生长因子-BB)、 TNF-α(肿瘤坏死因子-α )、 TGF-β1(转化生长因子-β1)、 IFN-γ(干扰素-γ)表达及肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响.方法:取45只健康雌性Wistar大鼠随机分成ASON组、 BLM组和生理盐水(NS)组各15只, 气管内分别灌注BLM(ASON组、 BLM组)和NS(NS组)复制肺纤维化模型和空白对照, ASON组于第0、 2、 4、 6天雾化吸入STAT1 ASON, BLM组和NS组雾化吸入NS, 各组分别于第7、 14、 28天均处死动物5只.观察肺泡炎和肺纤维化改变;收集BALF测定PDGF-BB、 TNF-α、 IFN-γ、 TGF-β1的水平;测定肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达.结果:ASON组第7、 14、 28天肺泡炎和肺纤维化程度明显低于同时间点BLM组( P <0.05).BLM组各时间点BALF中PDGF-BB、 TNF-α、 TGF-β1表达水平较NS组升高( P <0.05), ASON组较BLM组各时间点均降低( P <0.05);BLM组BALF中IFN-γ表达水平各时间点均低于NS组( P <0.05) , 但ASON组各时间点均较BLM组高( P <0.05).ASON组和BLM组第7、 14、 28天Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达高于NS组( P <0.05);ASON组第7、 14、 28天Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达均较同时间点BLM组降低( P <0.05).结论:STAT1 ASON雾化吸入能够减轻BLM诱导的肺泡炎和肺纤维化程度, 其机制可能与抑制BALF中TGF-β1、 PDGF-BB、 TNF-α的表达, 抑制IFN-γ下降而减少肺组织胶原的沉积有关.