SP600125对大鼠脑缺血再灌注神经元的保护作用

目的探讨SP600125-JNK特异性抑制剂对大鼠脑缺血再灌注神经元损伤的保护性作用及其作用机制。方法雄性SD大鼠54只,体重230～250g,随机分成假手术组（SH组）,缺血再灌注组（IR组）和JNK抑制剂SP600125组（SP组）,每组根据再灌注时间分为30min、24h和72h3个亚组,每亚组6只动物。采用4-VO法建立SD大鼠脑缺血模型,三组于缺血前30min侧脑室注射DMSO,DMSO及JNK抑制剂SP600125（溶媒采用DMSO）,容积均为10μl;脑缺血再灌注后30min、24h、72h免疫组织化学方法测定各时间点海马CA1区Bcl-2和Bax蛋白表达阳性细胞数量,TUNEL法检测CA1区凋亡细胞。结果缺血再灌注使海马CA1区Bcl-2和Bax阳性锥体细胞数目表达增加,再灌注24h阳性锥体细胞数目表达至高峰（P〈0.01）,再灌注24～72h可见阳性锥体细胞数目表达减少（P〈0.05）。其中SP组Bcl-2阳性锥体细胞数目显著多于IR组（P〈0.05）,而Bax阳性锥体细胞数目显著小于IR组（P〈0.05）。脑缺血再灌注后海马CA1区神经元存活数目SP组高于IR组（P〈0.01）,凋亡细胞数目低于IR组（P〈0.01）。结论 SP600125对大鼠脑缺血再灌注神经元损伤具有保护作用。     

中药蒲黄提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的　观察蒲黄提取物对脑缺血再灌注损伤的保护作用 ;方法　采用大鼠脑缺血再灌注模型 ;取SD大鼠 4 0只 ,随机分为 4组 ,给药组分别给予蒲黄提取物 0 .2 g/kg ,0 .4 g/kg灌胃 15d ;另设对照组及假手术组 ;观察脑组织乳酸脱氢酶 (LDH)和超氧化物歧化酶 (SOD)活性及丙二醛 (MDA)含量变化。结果　蒲黄提取物 0 .2 g/kg ,0 .4 g/kg灌服 ,可显著提高脑组织LDH及SOD活性 ,明显降低MDA含量。结论　蒲黄提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用 ,其机制与其抗氧自由基损伤有关。     

复方降脂胶囊对高脂血症合并脑缺血损伤大鼠神经的保护作用

目的建立高脂血症合并脑缺血损伤模型,观察复方降脂胶囊对高血脂症合并脑缺血损伤的防治作用。方法本实验采用三氯化铁法制备大鼠脑缺血损伤模型,观察复方降脂胶囊对模型大鼠的神经症状、脑梗死范围及对大鼠脑组织中NF-κB、iNOS表达的影响。结果复方降脂胶囊高剂量组与高脂血症合并脑缺血损伤模型组比较,神经功能学评分显著降低;复方降脂胶囊中剂量、大剂量组和步长脑心通组大鼠的脑梗死体积显著低于高脂血症合并脑缺血症模型组;复方降脂胶囊对脑组织NF-κB及iNOS的表达具有抑制作用。结论复方降脂胶囊可改善大鼠的神经功能缺失症状,缩小脑梗死体积,对脑缺血损伤具有保护作用。     

高压氧对脑缺血再灌注致线粒体过氧化损伤的保护作用研究

目的 通过观察高压氧(HBO)对局灶性脑缺血再灌注(CI/R)所致脑组织细胞线粒体过氧化损伤及凋亡的影响,探讨HBO对抗CI/R损伤的作用及其机制.方法 将80只SD大鼠按随机数字表法分为4组:假手术对照组(假手术组)8只,CI/R组、CI/R后常压吸氧(CI/R+N)组、CI/R后HBO治疗(CI/R+HBO)组,每组24只.采用大脑中动脉内线栓阻断法(MCAO)制备大鼠局灶性CI/R模型.(假手术组)操作步骤相同,但仅将线栓插入大脑中动脉10 mm后退出.假手术组、CI/R组术后不予任何处理,CI/R+N组术后30 min常压下吸纯氧,CI/R+HBO组术后30 min行常规HBO处理,均为60 min/次,1次/12 h.每组于CI/R术后12、24、48 h各处死8只大鼠,取CI/R损伤灶脑组织,采用比色法检测脑组织内线粒体超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,流式细胞技术检测脑细胞凋亡率.结果 CI/R组术后12、24、48 h SOD活性持续下降,显著低于假手术组[(139.21±11.52与(214.13±13.76)、(127.41±12.36)与(214.13±13.76)、(112.33±11.69)与(214.33±13.76)×10-6U/g)](均P＜0.01);CI/R+N组12、24、48 h SOD活性[(157.16±8.91)、(146.33±9.93)、(133.49±10.21)×10-6 U/g)]明显高于CI/R组(均P＜0.05),CI/R+HBO组12、24、48 h SOD活性[(176.80±12.35)、(169.43±12.41)、(161.56±13.81)×10-6 U/g)]显著高于CI/R组和CI/R+N组(均P＜0.05),显示CI/R后HBO治疗能有效地保护线粒体SOD的活性.CI/R组MDA含量术后持续增高,12、24、48 h显著高于假手术组(均P＜0.01).CI/R+N组MDA含量术后12、24、48 h时均低于CI/R组,但差异均无统计学意义(均P＞0.05);CI/R+HBO组MDA含量术后24、48 h时均显著低于CI/R组(均为P＜0.01)和CI/R+N48 h组(均P＜0.05),显示HBO治疗可有效抑制MDA的产生.CI/R组术后12、24、48 h脑细胞凋亡率持续增高,均显著高于假手术组(均P＜0.01);CI/R+N组术后24、48 h组脑细胞凋亡率均低于CI/R组,但差异无统计学意义(均P＞0.05);CI/R+HBO组术后24、48 h脑细胞凋亡率均显著低于CI/R组(均P＜0.05)和CUR+N 48 h组时(均P＜0.05);显示HBO治疗能有效降低CI/R后脑细胞凋亡率.结论 HBO治疗可明显增强细胞线粒体的稳定性,有效保护CI/R后脑组织线粒体SOD的活性,减轻大鼠CI/R所致线粒体过氧化损伤及脑细胞凋亡,较常压吸氧具有更显著的脑保护作用.     

利用2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）测定细胞活力的方法与应用

目的：利用细胞内脱氢酶对2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）的催化作用建立比目前常用的3-（4,5-二甲基-2-噻唑）-2,5-二苯基溴化四氮唑（噻唑蓝,MTT）法更可靠的测定细胞活力的方法。方法使用不同浓度的TTC溶液测定细胞活力,并确定TTC的有效浓度范围。在计算所测定值与细胞数量函数关系的基础上,通过与传统测定细胞活力的MTT法进行比较,分析该方法的可行性。结果0．5％～1．0％浓度范围内的TTC溶液可用来测定细胞活力,测定值与细胞数量之间存在线性关系,与MTT法得到的结果基本一致,可避免MTT法测定过程中来自于细胞培养体系中其他抗氧化物质的非特异性干扰。结论 TTC可用于测定细胞活力,可替代常规的MTT法,具有操作简便,费用经济,结果可靠等优点。     

天麻素注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的研究天麻素注射液对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡、脑组织梗死体积的影响。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,TUNEL及TTC染色法分别检测凋亡细胞数目及脑梗死体积。结果天麻素注射液组再灌注后24h凋亡细胞数目明显低于对照组(P<0.05),主要出现于大脑皮质及尾壳核病变中心区的周围,且脑梗死体积较对照组明显缩小(P<0.05)。结论天麻素注射液能显著抑制缺血半暗带细胞凋亡的发生,阻止脑梗死范围进一步扩大,对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,可能的作用机制是通过拮抗谷氨酸而阻断缺血再灌注后细胞凋亡。     

心脑通口服液对全脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的探讨心脑通口服液抗脑缺血的作用。方法用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,观察心脑通口服液对脑缺血再灌注过程中脑电图及翻正反射恢复时间、脑含水量、脑指数的影响;对全脑缺血再灌注后脑组织匀浆丙二醛含量,超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶活性的影响。结果在全脑缺血再灌注大鼠模型上,心脑通口服液可以缩短翻正反射恢复时间,促进脑电的恢复;降低脑含水量和脑指数;提高脑组织超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶活性,降低丙二醛含量。结论心脑通口服液对缺血性脑损伤有一定的保护作用。     

罗布麻提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察罗布麻提取物（Aplocyilum venetum L Extract,AVE）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 将雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、AVE（高、低剂量）组和阳性对照组（银杏叶胶囊）,口服给药5d后,采用改良的Ionga法,建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。再灌注2,4h后对大鼠神经功能障碍进行评分,测量其脑梗死面积、脑含水量。结果 与模型组相比,AVE两个剂量组可以减轻神经症状,缩小缺血面积,并且可以减轻脑水肿。与阳性对照组对比,各指标无显著性差异。结论 AVE对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠具有保护作用。     

WIN 55,22-2对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨大麻素(CB)受体激动剂WIN55,212-2对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法:采用大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)致局灶性脑缺血模型。将50只雄性SD大鼠随机分为5组:对照组(Con组)于MCAO前30 min腹腔注射生理盐水0.3 ml;WIN55,212-2组(WIN1~3组)于MCAO前30 min腹腔注射WIN55,212-2 0.3,1和3 mg/kg;DMSO组于MCAO前30 min腹腔注射二甲基亚砜(DMSO)0.3 ml。观察MCAO120 min再灌注24 h后神经功能评分(NFS)和脑梗死容积百分比。结果:与DMSO组和Con组比较,WIN55,212-2组大鼠NFS明显升高(P<0.05),脑梗死容积百分比明显减小(P<0.05)。结论:CB受体激动剂WIN55,212-2对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,并具有一定的剂量相关性。     

尿苷三磷酸对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用观察

目的 观察并检验尿苷三磷酸(UTP)对在体大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 健康成年雄性SD大鼠100只,随机分为5组(n=20):假手术组、生理盐水组及G10、G30、G90组.除假手术组外,均采用线栓法制备大鼠中脑缺血再灌注损伤模型.G10、G30及G90组分别在大鼠大脑中动脉缺血30min后以微量输注泵通过尾静脉持续给予UTP 10、30及90μg/kg,输注速度为5ml/(kg·min),假手术组及生理盐水组给予生理盐水注射,各组总药液容量均为1ml/kg.再灌注24h后评定各组大鼠神经功能缺损评分(NDS),然后从每组中随机抽取8只大鼠测定大脑半球含水量;从假手术组、生理盐水组及G90组中各取2只大鼠脑组织标本用于电镜观察组织超微结构;每组另取10只大鼠,通过TTC染色观察脑梗死体积.结果 UTP对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,G90组的保护作用最明显,其NDS评分(0.7)明显低于生理盐水组(1.8,P<0.01),梗死侧大脑半球含水量(85%)明显高于生理盐水组(82.1%,P<0.01),梗死体积占整个脑组织的比例(16.9%)明显低于生理盐水组(30.5%,P<0.01).电镜观察显示,与生理盐水组比较,G90组的细胞凋亡明显减少.结论 UTP对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用.     

arcaine 对大鼠局灶性脑缺血损伤的神经保护作用

目的 观察N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体/通道复合物多胺位点拮抗剂arcaine对脑缺血损伤的神经保护作用.方法 将45只Wistar大鼠随机分为对照组、缺血模型组、术前24h组、术前1h组及术后1h组.后4组大鼠均采用线栓法阻断大脑中动脉制作急性脑梗死模型.缺血模型组在造模成功后1h给予生理盐水(0.4ml/kg),术前24h组、术前1h组和术后1h组分别在术前24、1h和术后1h给予3mg/kg areaine.检测大鼠神经功能行为、脑梗死体积,并观察光镜及电镜下脑组织损伤情况.结果 神经功能评分显示,术前24h组、术前1h组和术后1h组大鼠神经功能行为评分(1.25±0.46、1.33±0.50、1.40±0.58分)与缺血模型组(2.63±0.52分)相比有显著差异(P<0.05),且术后给药对神经运动功能障碍的改善效果较术前给药效果差(P<0.05).术前24h、术前1h组和术后1h组大鼠脑梗死体积百分比(分别为5.72%±2.91%、26.36%±5.30%、36.35%±6.66%)较缺血模型组(51.10%±3.86%)明显减少(P<0.05);术后1h组大鼠脑梗死体积百分比较术前24、1h组增加(P<0.05).除对照组外,各组光镜下病理分级结果 差异无统计学意义.电镜下观察各组大鼠皮层及海马神经元均有不同程度的变性坏死,其中缺血模型组病理损害最为严重.结论 arcaine能够显著减少脑梗死的体积、减轻梗死所致的神经功能损伤,且预防给药效果更佳,但是arcaine对缺血所致神经元超微结构的损伤无明显逆转作用.     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤大鼠神经细胞凋亡及炎性因子的影响

目的 探讨高压氧对缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)大鼠神经细胞凋亡以及炎性细胞因子水平的影响.方法 成年雄性SD大鼠42只,随机分为对照组(6只)、空气加压组(18只)和高压氧(hyperbaric oxyen,HBO)治疗组(18只).采用Pulsineli法制作脑缺血大鼠模型.HBO治疗组第1、3、5天分别给予HBO治疗,1次/d.应用TUNEL染色检测大鼠海马神经元数量,同时检测大鼠细胞因子TNF、IL-1β和IL-6水平.结果 HBO治疗能有效抑制脑缺血引起的细胞因子TNF、IL-1β、IL-6释放(P<0.05或0.01),并减轻大鼠海马区神经元损伤,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 HBO治疗可以有效抑制炎性细胞因子的释放,从而保护脑缺血后神经细胞.     

Characterization of neuronal damage by iomazenil binding and cerebral blood flow in an ischemic rat model

I-123-iomazenil is a SPECT probe for central benzodiazepine receptors (BZR) which may reflect intact cortical neuron density after ischemic insults. We evaluated whether neuronal damage in rats could be characterized by iomazenil as compared with cerebral blood flow (CBF). Serial changes in I-125-iomazenil for BZR and I-123-IMP for CBF were analyzed after the unilateral middle cerebral artery occlusion in rats by using anin vivo dualtracer technique. Uptake ratios of affected to contralateral regions were calculated. The iomazenil as well as IMP were decreased in all regions except for the cerebellum (remote area). Both iomazenil and IMP increased over time except in the temporal region (ischemic core). The iomazenil uptake was higher than IMP except in the ischemic core between 1 and 3–4 wk when iomazenil was lower than IMP. Iomazenil showed a moderate decrease in the proximal and middle parietal regions (peri-infarct areas) at 3–4 wk. The triphenyl-tetrazolium-chloride (TTC) stain at 1 wk demonstrated unstained tissue in the temporal region indicating tissue necrosis. With hematoxylin-eosin (HE) stain at 1 wk, widespread neuronal necrosis with occasional intact neurons were found in the proximal parietal region, and isolated necrotic neurons were represented in the distal parietal region. Iomazenil correlated well with the neuron distribution and the finding of a discrepancy between iomazenil and IMP might be useful in evaluating the neuronal damage.     

Histamine protects bone marrow against cellular damage induced by ionising radiation

Purpose:?Based on our previous data on the histamine radioprotective effect on small intestine, in the present work we aimed to determine whether histamine is able to protect bone marrow cells against ionising radiation damage.

Materials and methods:?56 mice and 40 rats were divided into four groups. Histamine and histamine-irradiated groups received a daily subcutaneous histamine injection (0.1?mg/kg) starting 24?h before irradiation. Irradiated groups received a single dose on whole-body using Cesium-137 source and were sacrificed three days after irradiation. We evaluated the number of medullar components, bone marrow trophism, oedema, vascular damage, and other histological characteristics and also proliferation markers by immunohistochemistry.

Results:?Histamine treatment substantially reduced the grade of aplasia, the oedema and vascular damage induced by ionising radiation on bone marrow of mice and rats. Additionally, histamine preserved medullar components increasing the number of megakaryocytes (14.0?±?1.0?vs. 7.3?±?1.0 in mice; and 9.9?±?1.3?vs. 4.1?±?1.0 in rats, P?<?0.01) and also myeloid (253.4?±?37.6?vs. 7.8?±?1.5 in mice; and 52.0?±?3.7?vs. 31.8?±?3.1 in rats, P?<?0.01), lymphoid (97.4?±?6.5?vs. 19.8?±?1.6 in mice; and 23.4?±?0.9?vs. 11.7?±?2.5 in rats, P?<?0.01) and erythroid cells (165.0?±?9.1?vs. 8.8?±?2.8 in mice; and 27.3?±?2.3?vs. 15.6?±?3.5 in rats, P?<?0.01) per mm². This effect was associated with an increased proliferation rate of bone marrow cells.

Conclusions:?Histamine reduces ionising radiation toxicity on bone marrow cells being a suitable candidate for use as radioprotector, especially for patients undergoing radiotherapy who are at the risk of bone marrow or small intestine damage.     

反复下体负压致脑缺血对大鼠脑组织离子含量ATP酶活性？…

为阐明多次发生了＋Ｇｚ致意识丧失对脑的影响及其机制，观察了反复下体负压（ＬＢＮＰ）致脑缺血对大鼠脑组织离子含量，ＡＴＰ酶活性及神经元形态的影响，雄性ＳＤ大鼠３０只，随机分为３组，将动物麻醉后置于－４．０ｋＰａ的下体负压舱内（下降速率为０．６７ｋＰａ／ｓ），至脑电波消失２ｍｉｎ后恢复常压。分别于一次和三次ＬＢＮＰ作用后１ｈ测定脑组织Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性，Ｋ＾＋，Ｎａ＾＋及水含量等。结果表明     

Comparison of changes in markers of muscle damage induced by eccentric exercise and ischemia/reperfusion

To examine the effects of eccentric exercise (EE) and ischemia/reperfusion (I/R) on the markers of muscle damage, 72 rats were randomly assigned to the EE group, I/R group and control group (C), respectively. The rats in EE ran downhill on a treadmill with a 16° inclination at a constant speed for 90 min, and the rats in the I/R group underwent 90 min of four‐limb ischemia, followed by 24, 48 and 72 h of reperfusion. Blood and tissue samples were collected immediately, 24, 48 and 72 h after exercise or reperfusion. Quantitative analyses showed that the I/R group had a significantly larger mitochondrial volume at 24 h after reperfusion compared with the C, and there were more disrupted Z‐lines in the EE group and more disrupted mitochondria in the I/R group at 24 h after exercise or reperfusion. When compared with the C, a significantly lower total antioxidant capacity and higher interleukin‐6 value were observed after exercise or reperfusion. Our data suggest that although EE and I/R result in some similar changes in the muscle damage markers, there are still some differences. The EE‐ and I/R‐induced muscle damage may be due to different mechanisms.     

AM-36对大鼠液压脑损伤的神经保护作用

目的研究1-[2-（4-氯苯基）-2-羟基]乙基-4-[3，5-双（1，1-二甲基）-4-羟苯基]甲基哌嗪（AM-36）对颅脑外伤后继发性脑损害的神经保护作用。方法将38只sD大鼠随机分成研究组、对照组和假手术组后制作中度液压颅脑伤模型，致伤后30min、24h和48h分别给予研究组大鼠AM-36（0．1mE／100g）和后两组大鼠等量等渗盐水腹腔注射。致伤后24h行脑组织含水量测定，致伤后24h和1周对大鼠脑组织进行HE染色和Fluoro-Jade（F—J）染色，着重观察致伤部位周围皮层、丘脑及海马等区域的组织病理学改变。结果研究组大鼠伤后24h脑组织含水量较对照组明显减少，致伤后24h和1周，皮层、丘脑及海马CA1和CA3区的组织病理学检查显示研究组大鼠变性的F—J阳性神经元明显减少（P〈0．05）。结论伤后早期系统应用AM-36能降低脑组织水含量，对大鼠液压颅脑伤有明显的神经保护作用。F-J染色能较准确地反映脑液压伤后的病理学改变，可用于组织病理学的定量分析。