金蒲抑瘤片的药效和毒理研究

目的：评价金蒲抑瘤片对小鼠药效及毒性研究。方法：用NIH小鼠分组试验，接种瘤株为肉瘤S180和肝癌H22，灌胃给药，观察相关指标，结果：金蒲抑瘤片能制小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌癌H22实体瘤的生长，平均抑瘤率分别为43．6％和26．2％；能延长腹腔积液型肝癌和S180腹腔积液上的生存时间，平均生命延长率分别为60．9％和29．7％，并能增强免疫功能低下的荷瘤小鼠的碳粒廓清指数和半数溶血值，升值荷瘤小鼠的白细胞数，减轻环磷酰胺对小鼠白细胞的毒性，提高热板致痛小鼠的痛阈值，急性毒性和长期毒性试验，表明毒性反应低，使用安全，结论：本品具有活血祛阏，行气止痛，抑痛减毒，增强免疫功能等作用。     

Changes in Blood Constituents in Rats\= after Benzene Inhalation

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＢｅｎｚｅｎｅｉｓａｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｓｏｌｖｅｎｔｉｎｉｎｄｕｓ－ｔｒｙ．Ｃｈｒｏｎｉｃｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏｂｅｎｚｅｎｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｌｅｕ－ｃｏｐｅｎｉａ,ａｐｌａｓｔｉｃａｎｅｍｉａｏｒｌｅｕｋｅｍｉａ．Ｆｏｒｍ...     

CD44v6、ki-67在宫颈癌的表达及临床意义

目的：探讨CD44v6、Ki-67在宫颈癌中的表达情况及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法检测63例宫颈癌和正常宫颈组织中CD44v6、Ki-67的表达情况并分析其与有关的临床病理因素间的关系。结果：CD44v6的着色部位主要在细胞膜和细胞质;而Ki067主要在胞核。CD44v6在正常宫颈上皮、宫颈原位癌和宫颈浸润癌性表达率显著升高（P＜0．01）。CD44v6阳性表达与宫颈癌的盆腔淋巴结转移、脉管浸润和Ki－67的表达情况有关（P＜0．05）;而与临床分期、分化程度、组织学类型、间质浸润和癌灶大小无关（P＞0．05）。有淋巴结转移、脉管浸润和Ki-67过表达者CD44v6的阳性表达率显著高于无淋巴结转移、脉管浸润和ki－67低表达者。结论：CD44v6的阳性表达可能在宫颈癌的发生发展、淋巴结转移、脉管浸润和癌细胞增殖过程中起着重要的作用,但非唯一决定因素。CD44v6的检测对于了解宫颈癌的生物学行为和判断宫颈癌患者的预后有一定的实用价值。     

结直肠癌中CD_(44) V_6 PCNA的表达及其与浸润转移的关系

目的　探讨CD44V6和PCNA在结直肠癌中的表达及其与肿瘤浸润转移的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 87例结直肠癌组织中CD44V6和PCNA的表达情况。结果　 87例结直肠癌组织中CD44V6蛋白的表达阳性率为 5 8.6 % ,PCNALI为 5 6 .5 1± 18.82。CD44V6阳性表达率和PCNALI在侵及浆膜层者明显高于侵及肌层者 ,淋巴结转移阳性组高于淋巴结转移阴性组 ,DukesC、D期明显高于A、B期 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。PCNA高LI者CD44V6阳性率明显高于PCNA低LI者 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　CD44V6和PCNA在结直肠癌浸润转移过程中发挥重要作用 ,可作为反映结直肠癌恶性程度的生物学标记物。     

P_(16)蛋白和增殖细胞核抗原在子宫内膜癌中的表达及意义

目的 :探讨 P1 6 蛋白在子宫内膜癌发生中的作用及与细胞增殖的关系。方法 :采用免疫组化方法对 33例子宫内膜癌 P1 6 蛋白和增细胞核抗原 (PCNA)进行检测。结果 :P1 6 蛋白在子宫内膜癌的阳性率为 6 0 .6 % ,显著低于正常子宫内膜 (10 0 % ,P<0 .0 1) ,且随组织学分级增加而逐渐降低。 PCNA在子宫内膜癌中阳性率为 81.8%。结论 :P1 6蛋白与子宫内癌的发生发展相关 ,测定子宫内膜癌 P1 6 蛋白的表达有助于确定肿瘤的分化程度。     

CD154反义RNA诱导Jurkat细胞的凋亡

目的 探讨CD154反义RNA诱导Jurkat细胞凋亡的作用。方法 应用RT－PCR扩增人CD154膜外段基因，以及T－A克隆技术和亚克隆技术构建CD154反义RNA的真核表达载体，并将其转染入Jurkat细胞中。应用电镜及流式细胞仪（FCM）检测观察Jurkat细胞的凋亡指标。结果 电镜观察CD154反义RNA转染的Jurkat细胞内可见凋亡小体，并且FCM检测显示一明显的凋亡峰。结论 CD154反义RNA可诱导Jurkat细胞凋亡。     

胰岛素对NIH3T3细胞生长和Ras-MAPK信号途径的影响

目的 探讨胰岛素激活的Ras-MAPK信号途径对鼠成纤维细胞（NIH3T3细胞）生长的影响。方法 藉四唑蓝比色法（MTT法）和蛋白免疫印迹试验分别观察胰岛素对NIH3T3细胞生长和胞内丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）活性的影响。结果 胰岛素对NIH3T3细胞的促增殖作用呈时间和浓度依赖性，10mU/ml胰岛素对NIH3T3细胞的促增殖作用效果最佳，对NIH3T3细胞作用的EC50是0.2mU/ml(48h);0.14mU/ml(72h)。MAPK在10mU/ml胰岛素刺激1min后即出现酪氨酸磷酸化，10min达到高峰。胰岛素作用10min，MAPK酪氨酸磷酸化程度随浓度增高（0.1,1.0,10mU/ml)而递增。结论 胰岛素对NIH3T3细胞促增殖作用与激活Ras-MAPK信号途径相关。     

急性白血病患者P~(170)糖蛋白过度表达的临床意义

为探讨多药耐药基因的表达产物P170 糖蛋白在急性白血病异常表达的临床意义 ,用免疫细胞化学间接免疫荧光法 (APAAP法 )检测 30例急性白血病 (AL)患者。结果 :P170 糖蛋白在 30例急性白血病患者中有 9例表达 ,其中15例难治复发性白血病患者有 10例表达 ,其阳性表达率明显增高 ,化疗缓解率较阴性者明显减低 (P <0 0 5 )。表明P170 糖蛋白异常表达与肿瘤生物学行为关系密切 ,已成为提示急性白血病患者预后的有用指标之一。     

白消安诱发造血功能障碍小鼠模型的建立及淋巴细胞转化功能的测定

目的　建立白消安诱发急性造血功能障碍的动物模型 ,探讨淋巴细胞在骨髓再生障碍中发生变化的基础和意义。　方法　采用白消安悬液 (2 m g/ml)每天两次胃饲小鼠 ,每次 0 .2～ 0 .3ml,胃饲 7～ 10天 ,观察其外周血和骨髓液中细胞数量和形态的变化 ,并检测外周血淋巴细胞转化功能。　结果　用该方法诱导小鼠后 ,其红细胞、白细胞、血小板、网织红细胞及骨髓有核细胞计数均明显减少 (P<0 .0 1) ,骨髓象检查显示骨髓正常造血组织被脂肪细胞等替代。外周血淋巴细胞转化率明显升高 (P<0 .0 1)。　结论　白消安诱导小鼠急性造血功能障碍结果稳定 ,发生率高 ,方法简单 ,各项指标与人的再生障碍性贫血相似 ;淋巴细胞增殖转化功能的异常与骨髓造血障碍有一定关系     

人外周血树突细胞的分离与提纯

目的 从人外周血中分离、培养及鉴定树突细胞（ＤＣ）。方法 从正常人外周血分离获得单个核细胞,培养２小时后,取会细胞,在无血清培养基中加入不同的细胞在子,于２的第１,６,８天对形态,表型和功能分擀行测定,并在光镜、电镜下观察ＤＣ的纯度与得率。结果 体外培养６～８天可获得高纯度大量的ＤＣ,较高表达ＨＬＡ ＤＲ、ＣＤ４０、ＣＤ８３和ＣＤ８６,能强烈激发同种慢体Ｔ淋巴细胞增殖。结论 上述方法可以从人外周血     

人转铁蛋白-甲氨喋呤结合物对人肝细胞、人肝癌细胞体外细胞毒的作用特点

目的 了解人转铁蛋白（Tf）与甲氨喋呤（MTX）结合物（Tf-MTX)对人肝细胞和人肝癌细胞体外细胞毒的特点。方法 采用氧化葡聚糖（Dex)T－40作为中介,联结Tf与MTX制备人转铁蛋白－甲氨喋呤结合物（Tf-MTX),用四甲偶氮唑蓝法与比较结合物对人肝细胞L－02及人肝癌细胞Bel7404的体外杀伤强度。结果 体外细胞毒试验显示,Tf－MTX对人肝细胞L－02作用48h的TC50是对人肝癌细胞Bel7404的3．36倍,而TX对上述细胞作用1h的IC50是Tf-MTX的3．22倍。结论 Tf-MTX对肿瘤 细胞Bel7404的杀伤作用有选择性。     

大肠癌及癌旁粘膜p21~(ras)表达及意义

应用免疫组织化学方法对 12 8例人大肠癌及 32例不同距离癌旁粘膜进行研究。探讨 p2 1ras检测的临床病理学意义。结果 ,正常大肠粘膜、大肠癌、近癌旁粘膜、癌旁 1cm、2 cm、3cm及 5 cm粘膜 p2 1ras阳性率分别为 5 .0 % (1/ 2 0 )、5 2 .3% (6 7/ 12 8)、2 4.7% (18/ 73)、18.8% (6 / 32 )、15 .6 (5 / 32 )、9.4% (3/ 32 )及 9.4% (3/ 32 )。癌旁 3cm、5 cm粘膜的p2 1ras阳性率、阳性强度及分布均与正常粘膜相似 ,但癌旁 1cm、2 cm粘膜 p2 1ras阳性率较高且其中 5 0 %表达强度为(+ + )、(+ + + ) ,提示有 p2 1ras过表达现象。 p2 1ras表达与大肠癌临床病理因素无关。结论 :大肠癌中存在 p2 1ras过表达 ,且在癌旁 1cm、2 cm以内粘膜也存在 p2 1ras过表达可能 ,因此建议 ,在临床行大肠癌切除时 ,安全切缘至少在 3cm以上。     

一氧化氮对人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2生长增殖的影响

目的：应用两株人肝癌细胞（SMMC-7721和HepG2）为实验模型，以硝普钠（SNP）为NNO供体，探讨NO对人肝癌细胞生长增殖的影响。方法：应用MTT、荧光染色技术和电子显微技术、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术定性和定量地检测SMMC-7721和HepG2细胞凋亡情况。结果：NO供体SNP能抑制人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2的生长增殖，并诱导其凋亡，在一定范围内呈时间-剂量依赖关系，同时也引起细胞坏死；SMMC-7721细胞对NO作用的敏感性较HepG2高。结论：NO可抑制人肝癌细胞生长增殖，诱导细胞凋亡，并引起死亡，且两株细胞对其敏感性不同。     

p21~(ras) p53 PCNA蛋白在胃癌组织中的表达

应用免疫组化Ｓ Ｐ法,检测５５ 例胃癌组织中ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３、ＰＣＮＡ 蛋白的表达,结果发现：ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３、ＰＣＮＡ 阳性率分别为３８－２％ 、２９－１％ 、８３－６％ 。ｐ２１ｒａｓ、ＰＣＮＡ过表达与胃癌浸润深度有关,ｐ５３、ＰＣＮＡ 过表达与胃癌淋巴结转移有关;在不同分化程度胃癌组间ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３、ＰＣＮＡ表达均无显著差异。ＰＣＮＡ和ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３ 表达组间均呈正相关,且ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３ 协同表达可能在胃癌发生、发展中起重要作用。     

五种多药耐药性基因在正常人体组织的表达

目的：观察五种多药耐药性（MDR）基因在正常人体组织中的表达。方法：采用二重RT-PCR法及免疫组织化学SP法，分别从mRNA和蛋白质表达水平检测（90例，共15种）正常人体组织中5种MDR基因的表达。结果：五种MDR基因在人体不同器官和组织中均有表达。同时表达5种MDR基因的器官和组织有肝脏、肺脏、肾脏、食管、结肠、小肠、胰腺、甲状腺、前列腺及胎盘。皮肤组织中未发现LRP基因表达（0/5）。乳腺和卵巢组织未发现MRP基因表达（0/5）。不同MDR基因在各种组织中的表达存在差别。结论：正常情况下，五种MDR基因的mRNA和蛋白质在人体组织中广泛表达，以在肝脏、肺脏、肾脏、结肠、小肠和胰腺组织中表达较强。     

二乙酰二脱水卫矛醇（DADAD）的稳定性研究

目的 将临床多年使用的抗癌新药卫康醇（DAD）的前体药物DADAD进行稳定性研究，预测贮存期。方法 将DADAD置于强光、高湿、高温条件下进行影响因素的测定、室温3年留样观察试验和“简便加速试验法”的研究。结果 各项指标基本保持不变。结论 3年留样试验结果表示其贮存期可定为3年；在规定的强光、高温、高湿条件下，显示出其不敏感的特性；当其采用“简便加速试验法”，经85℃和60℃恒温的简便加速试验，用Q10法回归处理实验数据，求得室温（25℃）贮存期为22年，显示出其较稳定，与上述是相一致的。     

克隆测序技术在小鼠心肌炎实验中的应用

目的 :应用克隆测序技术结合观察急性病毒性心肌炎模型的发病过程及病理改变 ,从病原学及病理学角度鉴定柯萨奇病毒B3 亲心肌株 (CVB3m)诱导BALB/c小鼠急性病毒性心肌炎 (VMC)模型 ,为VMC模型提供科学的鉴定方法。方法 :以CVB3m腹腔注射诱导BALB/c小鼠心肌炎 ,分别于 3、5、7、10、14天取心肌 ,以RT -PCR法检测CVB3m,并通过质粒克隆测定cDNA序列 ;同时观察小鼠心肌病理组织学变化。结果 :感染小鼠心肌组织中RT -PCR扩增产物与已知CVB3mcDNA序列相应片段吻合度 >99 3% ;小鼠心肌病变从心肌细胞肿胀、少数淋巴细胞浸润到坏死和炎性病变随病程发展逐渐增多 ,第 10天达高峰 ,至第 14天炎症逐渐恢复 ,出现不同程度的纤维化。结论 :提示用克隆测序法鉴定为VMC发病机理及药物防治研究提供了稳定可靠的动物模型 ,并为研究CVB3m病毒感染小鼠后基因变异提供了参考依据。     

端粒酶逆转录酶基因在口腔癌前病变及鳞癌的表达

目的：观察端粒酶催化蛋白基因（hTRT）在口腔癌前病变及鳞癌中的表达，探讨其与口腔鳞癌（OSCC）发生发展及临床病理特征之间的关系。方法：用原位杂交技术检测54例标本，其中正常口腔粘膜6例、上皮非典型增生15例、口腔粘膜鳞癌33例。结果：正常口腔粘膜组织中hTRT的mRNA表达较弱，阳性信号仅局限于上皮基底层及副基底层间，阳性率16.67％（1/6）；上皮非典型增生中hTRT的mRNA阳性表达见于多层上皮细胞，并随细胞异形性增高而表达增强，阳性率60％（9/15）；口腔粘膜鳞癌组织中hTRT的mRNA有较强阳性表达，阳性率87.88％（29/33）；OSCC组织中hTRTmRNA的表达与肿瘤临床病理分化无关，与淋巴结转移密切相关。结论：端粒酶hTRT基因的表达在OSCC的发生发展和转移过程中起着重要作用。     

脑出血后继发血管源性脑水肿的机制研究

目的　研究自发性脑出血 (Intracerebralhemorrhage,ICH)后血管源性脑水肿 (vasogenicbrainedema ,VBE)的发生机制。方法　采用立体定向技术制作实验性ICH模型 ,免疫组化、组化染色和HE染色分别观察血肿周围脑组织的内皮细胞粘附因子 (CD3 4 )、小胶质细胞、白细胞的动态变化。结果　①假手术组大鼠脑组织未见白细胞浸润及小胶质细胞染色 ,而CD3 4 阳性微血管数最多 ;ICH 12h见血肿周围CD3 4 有所下降 ,72h达最低 ,7天后缓慢恢复到假手术组水平 ;②于ICH 6h血肿周围开始表达小胶质细胞 ,至 4 8h达高峰 ,持续 2周仍可见其少量表达 ;③ICH 12h可见白细胞浸润 ,4 8h数量最多 ,以后逐渐减少 ,2周时基本消失。各组之间及各组与假手术组之间比较差异显著 (P <0 .0 1) ;④ICH后小胶质细胞和CD3 4 表达呈负相关关系 (r =- 0 .770 ,P <0 .0 5 )。结论　ICH后血肿周围的炎症细胞介导的炎症反应参与了继发性血管源性脑水肿的形成。     

辛伐他汀对自发性高血压大鼠左室舒张功能的影响

目的　观察辛伐他汀对自发性高血压大鼠 (SHR)左室舒张功能的影响。方法　采用Bergman法和心导管技术 ,测定大鼠用药 [2mg/ (kg·d) ,连续 12周灌胃 ]后的心肌胶原含量和左室舒张功能。 结果　辛伐他汀治疗组能明显降低SHR心肌胶原含量 ,改善左室舒张功能 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。对血压、心率虽有所降低 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　辛伐他汀能在一定程度上改善SHR左室舒张功能和心肌纤维化。