艾滋病并口腔白念珠菌感染及药物敏感试验

目的 了解艾滋病并口腔白念珠菌感染与CD4关系及药物敏感试验研究。方法 对24例艾滋病并发口腔白念珠菌感染者分析其药敏试验结果及CD4T淋巴细胞计数。结果 白念珠菌的药敏依次为5-氟胞嘧啶（24/24），两性毒素B（23/24），制霉菌素（19/24），氟康唑（4/6），咪康唑（10/24），益康唑（8/24），酮康唑（7/24），经血液途径比经性途径感染者更易合并口腔白念珠菌感染。结论 口腔白念珠菌感染是艾滋病患者常见的并发症，且耐药情况严重，是艾滋病病情严重的标志。     

结核杆菌对常见抗结核药物的体外敏感性测定

目的了解江汉油田矿区结核杆菌对抗结核药物的敏感性。方法对本区220株结核杆菌采用改良罗氏培养基绝对浓度法试验。结果我区初始耐药率为42.7%;其中耐2药及2药者分别占38.3%和14.9%;耐药种类最多达7种。结论应加强抗结核药物的耐药性监测,根据药敏试验选择科学有效的化疗方案。     

应用酵母双杂交系统筛选E2F1相互作用蛋白

目的:应用酵母双杂交系统从人正常胃黏膜细胞的cDNA文库中筛选E2F1转录因子的相互作用蛋白。方法:以pGBKT7-E2F1为诱饵质粒筛选人正常胃黏膜细胞的cDNA文库,得到阳性克隆,反复验证,并对验证后的阳性克隆进行测序及同源性分析。结果:从人正常胃黏膜细胞的cDNA文库中筛选得到20个阳性克隆,经测序和同源性分析,筛除假阳性克隆,最终得到18个不同的候选基因序列。其中,17个为可知基因序列,它们分别是:组织蛋白酶B、SIVA1、干扰素调节因子7、鸟苷酸激酶1、ATP酶抑制因子1、核糖体蛋白SA、纤溶酶原激活物抑制剂1 mRNA结合蛋白、精氨琥珀酸合酶1、卵泡抑素类似物3、金属硫蛋白2A、内质网钙结合蛋白1、WNT1可诱导信号通路蛋白2、CDC42 效应蛋白1、可溶性半乳糖凝集素结合蛋白1、中胚层发育候选2、外切酶体成分7和含EGF腓骨蛋白样胞外基质蛋白 1,尚有一未知基因片段。结论:应用酵母双杂交系统成功筛选出18种E2F1相互作用蛋白,为进一步探讨E2F1影响胃癌细胞生物学行为的分子机制奠定了基础。     

流式细胞术快速检测假丝酵母菌药物敏感性方法的建立及应用北大核心CSCD

目的：建立基于流式细胞分析技术快速检测假丝酵母菌临床菌株药物敏感性或耐药性的方法。方法以碘化丙锭（ PI）为荧光染料,采用白假丝酵母菌ATCC90029株确定流式药敏试验门设置及最佳实验条件。采用所建立的真菌流式药敏试验检测110株假丝酵母菌临床菌株对氟康唑和伏立康唑的敏感性或耐药性并经典的M27-A3常量稀释法进行比较。结果调整电压可将白假丝酵母菌ATCC90029株活菌与死菌在流式细胞仪SS/log（ FL3）门中分为边界清晰的两群细胞,不同比例死菌与活菌混合液与流式药敏试验检测值之间有高度相关性（r＝0．999）。流式药敏试验30 min内可出结果,其最适菌液浓度为1．0×106/ml、药物与真菌最适孵育时间为3 h、最佳染色方法及时间为脱氧胆酸钠预处理后PI染色5 min。流式药敏试验与M27-A3常量稀释法对110株假丝酵母菌临床菌株对氟康唑和伏立康唑敏感或耐药总符合率分别为98．2％和87．3％。结论较之经典的常量稀释法,流式药敏试验用于检测真菌对药物的敏感性或耐药性具有快速、准确、敏感等优点,具有临床应用前景。     

正交试验在人乳头瘤病毒16型E2蛋白原核表达优化中的应用

鉴定人乳头瘤病毒(HPV)16型E2蛋白的重组表达菌株,通过正交试验快速优化诱导表达条件,增加目的蛋白的表达量。应用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达后的蛋白。选取诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度OD600和诱导温度共4个主要外部因素。采用四因素两水平正交试验设计,以单位体积内HPV16 E2目的蛋白含量作为检测指标,结果用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果表明,HPV16 E2菌株鉴定正确。HPV16 E2蛋白表达主要以不溶性蛋白为主,主要影响因素是诱导剂浓度和诱导温度,最佳诱导条件为37℃、1.0 mmol/L IPTG和OD600为1.0的条件下诱导7 h,正交试验对分子生物学反应的影响因素分析和条件优化有借鉴意义。