维吾尔族血小板抗原1～5、15系统基因多态性分析

目的：调查研究与血小板输注无效关系密切的人类血小板抗原（human platelet antigen，HPA）1～5及15系统基因在维吾尔族人群中的遗传多态性；分析民族差异，确定各系统临床意义，从而建立已知基因型血小板供者库。方法：采用聚合酶链一序列特异性引物技术（PCR—SSP）对153例无血缘关系的纯维吾尔族血样进行了HPA基因分型。结果：维吾尔族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、15a基因频率分别是0．9118、0．8889、0．5458、0．9935、0．9216、0．4412，维吾尔族HPA-1b、2b、3b、4b、5b、15b基因频率分别是0．0882、0．1111、0．4542、0．0065、0．0784、0．5588，维吾尔族HPA基因频率与汉族人群相比，HPA-1a，1b、3a、3b、5a、5b基因频率差异具有统计学意义（P〈0．05）；与西藏藏族人群相比，HPA-3a、3b、5b基因频率差异具有统计学意义（P〈O．05）。结论：维吾尔族人群中HPA1～5、15系统12个等位基因都可以检测到。在不同的个体中它们以纯合子或杂合子状态表达，但未检测到纯合子1b或纯合子4b型个体。HPA-1、2、3、4、5、15系统均具有多态性，其中HPA-3、15系统具有高度多态性，这使免疫暴露的机会增加。维吾尔族人群与汉族人群的HPA-1a、1b、3a、3b、5a、5b基因频率存在明显差异，与藏族人群的HPA-3a、3b、5b基因频率存在明显差异。     

珠海市机采血小板捐献者血小板特异性抗原遗传多态性的初步调查

目的：了解珠海市机采血小板捐献者血小板特异性抗原（HPA）遗传多态性,以研究HPA同种免疫在进行随机血小板输注中的意义。方法：应用PCR—SSP方法对48名机采血小板捐献者的HPA1～5和15进行基因分型。结果：48名机采血小板捐献者HPA等位基因频率分别是：HPA—1a、-4a、-5a皆为1．000,HPA-1b、-4b、-5b皆为0．000,HPA-2a为0．9895,HPA一2b为0．0104,HPA-3a为0．6562,HPA-3b为0．3438,HPA-15a为0．5313,HPA-15b为0．4687。结论：中国人HPA-1a、2a-4a、-5a的基因频率很高,血小板随机输注时同种免疫概率较低,但同种免疫一旦发生,配合性输注的供者很少;而HPA-3和15却具有较高的遗传多态性,血小板随机输注时,HPA-3和15的错配概率为0．35和0．37,因此HPA基因分型在血小板配型和配合性输注中具有重要意义。     

血小板输注无效患者中人类白细胞抗原抗体和人类血小板抗原抗体分布情况及其基因频率分析

目的 分析血小板输注无效(platelet transfusion refractoriness,PTR)患者中人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)抗体和人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)抗体的分布情况以及PTR患者的HPA基因频率.方法 选取2020年1-12月北京市红十字血液中心86例因PTR进行血小板抗体检测的血液系统疾病患者,包括急性髓细胞性白血病(acute myelogenous leukemia,AML)、慢性髓细胞性白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)、急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)、慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphoblastic leukemia,CLL)、骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)、再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)、特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP),采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分析其血清中HLA抗体和HPA抗体,采用序列特异引物引导的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)对患者进行HPA-1～6、9及l5系统的基因分型.结果 86例患者中有33例的血清显示血小板相关抗体阳性,阳性率为38.4％,其中24例(27.9％)只表达HLA抗体,6例(7.0％)只表达HPA抗体,3例(3.5％)共同表达HLA抗体和HPA抗体.不同疾病之间血小板抗体的发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).HPA基因分型结果显示,HPA-3和HPA-15具有较高的多态性,HPA-3系统中a的基因频率高达61.5％,b为38.5％;HPA-15中a的基因频率为54.2％,b为45.8％.结论 HLA和(或)HPA抗体的产生是导致PTR的重要因素,其中HLA抗体占主要地位,这些患者的HPA基因多态性分布特征与中国北方汉族人群的HPA分布特征一致,确定PTR患者的抗体特异性及HPA基因分布特征将为血小板库的建立提供数据支持.     

血小板抗原基因分型在随机血小板输注中的意义

目的对海南岛黎族人群血小板-1-6、15抗原系统进行基因分型,探讨血小板抗原分布与随机血小板输注的关系以及血小板抗原分布与疾病的相关性。为黎族人群临床血小板输注提供实验依据。方法采用PCR—SSP方法对180名黎族人进行HPA-1—6、15抗原进行基因分型。结果本研究揭示了海南岛黎族人HPA-1～6、15抗原基因频率分布概况,证实黎族人HPA-2、-3、-5、-6、-15系统具有多态性。结论研究结果提示黎族人在随机血小板输注中,供受者HPA-3系统不配合的机会为37．49％,HPA-15系统不配合的机会为36．93％,是随机血小板输注的关注重点。HPA-5系统不配合的机会为6．23％,HPA-2、-6系统不配合的机会只有0．56％。而HPA-1、-4抗原未检出相应HPA—b基因。同种免疫发生的危险性会非常低。     

新疆柯尔克孜族人群血小板抗原1～6、15系统基因多态性分析

目的 探讨新疆柯尔克孜族人群人类血小板抗原HPA1-6,15(Gov)系统多态性,分析HPA基因在柯尔克孜族人群中的遗传多态性.方法 采用聚合酶链-序列特异性引物(PCR-SSP)法105例无血缘关系的新疆柯尔克孜族血样进行HPA基因分型.结果 新疆柯尔克孜族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、6a、15a基因频率分别是0.900 0、0.923 8、0.576 2、1、0.952 4、1、0.566 7;HPA-1b、2b、3b、4b、5b、6b、15b基因频率分别是0.100 0、0.076 2、0.423 8、0、0.047 6、0、0.433 3,新疆柯尔克孜族HPA基因频率与新疆汉族相比,HPA-1a、1b、2a、2b、15a、15b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05).与新疆维吾尔族相比,HPA-15a、15b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05).结论 新疆柯尔克孜族人群中HPA-1、2、3、5、15系统均具有多态性,其中HPA-3,15系统具有高度多态性,这使免疫暴露的机会增加.     

重庆汉族人群HPA1-7、15多态性分布

目的 了解重庆地区汉族人群人类血小板抗原(HPA)1-7、15抗原分布的多态性.方法 采用PCR-SSO技术对重庆地区无血缘关系的血小板无偿捐献者进行HPA1-7、15 HPA基因分型.结果 HPA各等位基因的频率分别为HPA-1a:0.995 3、HPA-1b:0.004 7;HPA-2a:0.936 2、HPA-2b:0.063 8;HPA-3a:0.575 0、HPA-3b:0.425 0;HPA-4a:0.996 2、HPA-4b:0.003 8;HPA-5a:0.941 8、HPA-5b:0.058 2;HPA-6a:0.985 9、HPA-6b:0.014 1;HPA-7a:1.000 0、HPA-7b:0.000 0;HPA-15a:0.541 3、HPA-15b:0.458 7.结论 重庆地区HPA基因频率呈现其自身的特点.应建立本地区的血小板供者分型数据库.     

广西瑶族人群血小板抗原1～17系统基因多态性研究

目的 研究广西瑶族人群血小板抗原HPA-1～17系统基因多态性分布特点.方法 采用PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)方法对48例广西瑶族健康人进行HPA-1～17系统基因分型,计算基因型频率、等位基因频率,并与其他种族、地区人群相关资料比较.结果 在17个HPA系统中,HPA-3基因型杂合频率最高,HPA 3a/...     

HPA基因分型与配型在临床的应用

目的:建立血小板捐献者基因库,开展血小板基因同型的交叉配型输注,预防并解决血小板输注无效。方法:1采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对长沙地区435名无血缘关系的18~45岁机采献血者和12名患者进行HPA1-17等位基因分型。2选取与患者ABO血型及HPA基因型相同的机采血小板,再用固相凝集法配型相合后输注,选取ABO同型原则进行随机机采血小板固相凝集法配合输注,并比较两种方法。结果:长沙地区人群HPA基因有地区特点,杂合度较高的基因依次为HPA-15、HPA-3、HPA-2。采用ABO血型和HPA基因同型加固相凝集法配合的血小板输注有效率为95.2%,采用ABO同型加随机血小板固相凝集法配合的有效率为78.2%。结论:长沙地区HPA基因具有多态性,采用ABO血型和HPA基因型均相同及固相凝集配合的机采血小板能有效提高血小板输注的有效性,防止血小板免疫性抗体产生及发生输注无效,此法值得在临床推广。     

血小板特异性抗体及HLA抗体引起血小板输注无效的研究

目的分析血小板输注无效(PTR)患者血小板同种抗体,并对其HPA及HLA-Ⅰ类抗原进行基因分型,探讨血小板输注无效与血小板同种抗原/HLA-Ⅰ类抗原相关性。方法应用ELISA方法对17例血小板输注无效患者血清中的血小板抗体进行检测;运用PCR-SSP方法,采用HPA分型试剂盒检测血小板同种抗原7个抗原系统HPA-1、2、3、4、5、6、15,以及HLA分型试剂盒对HLA-A/B抗原进行基因分型。结果6名患者单独表达HLA抗体,4名患者表达血小板特异性糖蛋白抗体,3例HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体共同表达,其中以GPⅡb/Ⅲa为主。对17例患者HPA系统和HLA-Ⅰ类抗原基因分型,发现HPA-3系统中a的基因频率高达0.676,b为0.324;HLA-A*02、HLA-A*24、HLA-A*11和HLA-B*60、HLA-B*13、HLA-B*46多见。结论HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体表达引起血小板输注无效,了解PTR与HPA/HLA-Ⅰ类抗原的相关性对指导临床血小板配合性输注具有重要意义。     

广州汉族配偶人类血小板抗原基因分型的调查

目的调查配偶之间人类血小板抗原(HPA)的不配合率并评估其在新生儿同种免疫性血小板减少症(NAIT)中的作用。方法采用SSP法对200对广州汉族配偶进行了HPA-1～-16基因分型。结果配偶双方HPA-1～-6及HPA-15均在同一HPA位点具有不同基因型,HPA-7～-14及HPA-16均为a/a纯合子。得到HPA-1～-16的等位基因频率,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6、HPA-5、HPA-1和HPA-4的不配合率为别为37.42%、37.02%、8.02%、3.84%、2.44%、0.75%和0.24%,其余HPA位点的不配合率为0。结论 HPA-5可能是广州汉族人群NAIT最重要的一个HPA系统,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6和HPA-4也分别具有其免疫学意义,这为HPA的抗体检测以及NAIT的诊断治疗提供了实验依据。     

广东地区汉族人群人类血小板特异性抗原HPA-15（Gov）基因多态性分析

目的研究广东地区汉族人群人类血小板特异性抗原HPA-15（Gov）系统多态性。方法用PCR-SSP方法对广州血液中心随机采集的500名汉族无偿献血者进行HPA-15系统基因分型。结果广东地区500名汉族无偿献血者HPA-15aa，HPA-15bb和HPA-15ab的基因型频率分别为25％、21％和54％。研究人群HPA-15的基因型分布与Hardy-Weinberg（HW）平衡法则吻合。与其他4个省份汉族人群中HPA-15基因频率的分布比较无显著性差异（P〉0．05）；在与其他种族人群HPA-15分布的比较，与南美洲的印地安人和非洲的贝宁人群有显著性差异（P〈0．05）。结论HPA-15系统具有多态性，且HPA抗原分布不配合比率较高，这对研究同种免疫血小板减少症和开展血小板同型输注的相关研究提供实验基础。     

海南地区黎族人类血小板抗原1～17系统基因多态性分析

目的研究海南地区黎族人群血小板特异性抗原1~17系统基因多态性区域分布特点,建立HPA基因型资料库。方法采用PCR-SSP技术对180名黎族人进行了HPA1~17系统基因分型,计算基因型频率、基因频率。结果黎族人HPA的基因频率分别为:HPA-2a0.9972、-2b0.0028、-3a0.4889、-3b0.5111、-5a0.9667、-5b0.0333、-6a0.9972、-6b0.0028、-15a0.4250、-15b0.5750;HPA-3、15系统表现出较高的杂合度,其中3a/3a、3a/3b、3b/3b基因型频率分别为0.2611、0.4556、0.2834;15a/15a、15a/15b、15b/15b基因型频率分别为0.2167、0.4167、0.3667;HPA-1、-4、-7~-14、-16、-17系统只检出a基因,呈单特异性。结论海南地区黎族人HPA-3、15系统具有多态性,是HPA配合性输注关注重点。在随机血小板输注中,供受者HPA-3系统不配合的机会为37.49%、HPA-15系统不配合的机会为36.93%。黎族人HPA-17系统均为a/a基因型。     

金华地区血小板献血者血小板基因的分型特点和基因库建设

目的研究金华地区血小板献血者人类白细胞抗原（HLA）-A、B位点和人类血小板抗原（HPA）-1~6、10、15、21位点的多态性分布特点并统计基因频率,初步建立起金华地区血小板基因库。方法对2020年1月至2021年2月金华市中心血站109名单采血小板献血者标本的HLA-A、B和HPA-1~6、10、15、21位点进行基因分型,计算基因频率,并与不同国家和地区进行比较,分析基因分布的差异性。结果109名金华地区血小板献血者共检出HLA-A位点等位基因14个,基因频率较高的等位基因分别是A*02、A*11、A*24、A*33;检出HLA-B位点等位基因24个,基因频率从高到低分别是B*40、B*15、B*46、B*58、B*55、B*39、B*13。金华地区的A*02、A*11、B*40、B*15、B*46等位基因的分布频率与西安、云南、河南、辽宁、淄博、广东等地相比,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。HLA-A、B位点基因分型结果均符合Hardy-Weinberg平衡（均P＞0.05）。HPA-4a、10a呈单特异性,杂合度最高的基因型是HPA-3和HPA-15,经Hardy-Weinberg遗传平衡检验,发现金华地区HPA-1~3、6、15、21的基因频率符合遗传平衡法则,基因具备恒定性。金华地区与英国、美国相比,HPA-1、HPA-2、HPA-5、HPA-15基因频率差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论金华地区血小板基因库的建立有助于为血小板输注无效的患者提供HLA和HPA相对匹配的血小板制品,提高血小板输注效率。     

血小板膜糖蛋白Ibα基因HPA-2、Kozak序列多态性与脑梗死的相关性研究

目的探讨血小板膜糖蛋白(platelet membrane glycoprotein，GP) Ibα基因HPA-2、Kozak序列多态性与脑梗死的相关性。方法选取316例经CT/MRI证实的脑梗死患者做病例组，209例与病例组年龄、性别相匹配的无脑血管病人群做对照组。采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）技术检测人类血小板抗原-2（human platelet antigen-2，HPA-2）及Kozak序列多态性在两组中的分布频率。结果病例组GPIbα基因HPA-2等位基因频率、基因型与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。病例组Kozak序列C等位基因频率为25.95%，对照组C等位基因频率为18.18%，两组间差异具有统计学意义（χ2=8.1323, P＜0.01）。结论GPIbα基因HPA-2序列多态性与脑梗死无相关性；Kozak序列多态性可能是脑梗死的遗传易感因素。     

GP IIb三种基因多态性之间的关系及GP IIb T13959 G在血小板输注耐受中的作用

目的:研究血小板膜糖蛋白Ⅱb (GP Ⅱb)三种基因多态性之间的关系及GP Ⅱb T13959 G在血小板输注耐受中的作用.方法:聚合酶链反应-单链构型多态性分析检测110例正常人GP Ⅱb基因第26和30外显子(Exon 26, Exon30)及21内含子(Intron21)基因多态性,进行基因序列分析,研究这些基因多态性是否存在连锁关系;应用Fok1酶切法对147例血液病人人类血小板抗原-3(human platelet antigen-3, HPA-3)基因进行分型,并与110例正常人进行比较;将接受单采血小板输注的44例血液病人随机分为HPA-3同型输注组和对照组,血小板输注3次以后检测血小板抗体.结果:正常人GP Ⅱb存在基因多态性,表现分别为gDNA 13 959位点T→G,16 977位点C→T,11 996～12 004位点9个碱基缺失,且三者具有同步性.Fox1酶切分析结果表明,正常人和血液病人的HPA-3a基因频率分别为83.6%(92/110)和81.9%(119/147),HPA-3b基因频率分别为16.4%(18/110)和19.1%(28/147),两者之间差异无统计学意义(P＞0.05).血液病人接受单采血小板输注后, HPA-3同型输注组血小板抗体阴性,而对照组有2例存在血小板抗体,其中1例为HPA-3a抗体.结论:(1)GP Ⅱb基因存在gDNA 13 959位点T→G,16 977位点C→T,11 996～12 004位点9个碱基缺失,这3个位点的多态性可能存在完全连锁关系;(2)血液病人与正常人的HPA-3基因频率相同;(3)HPA-3系统可能是我国人群产生血小板输注耐受的原因之一.     

多重PCR-CE用于血小板抗原HPA-2、-3、-15基因分型的研究

[目的]建立一个用于血小板抗原HPA -2、-3、-15基因分型的多重PCR和毛细管电泳(CE)方法,用其调查大连地区汉族人群HPA -2、-3、-15系统的基因频率.[方法]分别设计HPA -2、-3、-15等位基因序列特异性引物和一条公共引物,用荧光标记公共引物.多重PCR法扩增HPA -2、-3、-15.然后用毛细管电泳检测扩增产物,并根据产物片段长度的差异进行基因分型.将多重PCR-CE与常规PCR-SSP方法相比较.将获得的大连地区汉族人群HPA -2、-3、-15系统基因分型数据与国内其它地区比较.[结果]多重PCR-CE和PCR-SSP的基因分型结果完全一致.大连地区汉族人群HPA-2a、-2b、-3a、-3b、-15a、-15b基因频率分别为0.9200、0.0800、0.5750、0.4250、0.5800和0.4200;与国内山东、上海、浙江汉族人群相比,HPA -2、-3、-15等位基因频率差异无显著性意义(P>0.05);与新疆维吾尔族人群相比,HPA-2、-3等位基因频率差异无显著性意义(P>0.05),但HPA-15等位基因频率差异有显著性意义(P<0.05).[结论]HPA多重PCR-CE基因分型方法快速、简单、准确;国内HPA-15等位基因分布存在着种族差异.     

人类血小板同种抗原1-5和15系统的同步基因分型

目的：通过对人类血小板同种抗原(HPA)1-5和15系统进行基因分型分析,建立可靠的PCR-SSCP同步基因分型方法,为临床安全、有效输注血小板提供配型手段。方法：采用KI法制备基因组DNA模板,利用含有基因突变位点的等位基因特异性引物进行多聚酶链反应,利用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行分析。结果：检测的DNA样本HPA1系统中aa纯合子出现频率为85%,ab杂合子出现的频率是15%,未见bb纯合子;HPA2系统中aa纯合子出现频率最高为5%,bb纯合子出现的频率为30%,ab杂合子出现的频率是6%;HPA3系统中aa纯合子出现频率为47.5%,ab杂合子出现的频率为32.5%,bb纯合子20%;HPA4系统中全部是aa纯合子,未见ab或bb情况;HPA5系统中aa纯合子出现频率为52.5%,ab杂合子出现的频率是45%,bb纯合子是2.5%;HPA15系统中aa纯合子出现频率为35%,ab杂合子出现的频率是60%,bb合子是5%。结论：PCR-SSCP可快速准确地对HPA1-5和15系统进行同步基因定型。     

HPA1～6、15基因多态性与急性心肌梗死相关性研究

目的 研究贵州地区人类血小板抗原(HPA1 ～6、15)基因多态性与急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的相关性.方法 选择AMI患者86例(61.05 ± 10.27岁),符合1979年WHO诊断标准,并行冠脉造影证实;对照组85例(60.74±6.88岁),排除心脑血管疾病及血栓性疾病.采用序列特异性引物-聚合酶链反应(SSP-PCR)技术扩增目的基因,进行HPA基因分型,回归分析其在AMI中的危险因素.结果 ①与对照组比较,AMI组HPA2基因多态性差异有统计学意义(P ＜0.01,OR=34.169,95％ CI 14.553 ～80.221),而HPA1、3～6、15基因多态性差异无统计学意义(P＞0.05);②影响AMI发病的多因素回归分析显示:与对照组比较,AMI组中HPA1 ab基因型差异无统计学意义(P＞0.05),但其在AMI发病的危险度比HPA1 aa纯合子增加了4.256倍;HPA2aa基因型和HPA2b等位基因差异有统计学意义(P ＜0.01,OR =0.148,95％ CI 0.071 ～0.307;P ＜0.01,OR =6.221,95％CI3.201 ～ 12.091).结论 ①HPA1ab杂合子患AMI的危险度较HPA1aa纯合子增加;②HPA2aa纯合子可能是AMI发病的保护因子,而HPA2b等位基因可能是AMI 发病的独立遗传性危险因素.     

基于免疫性PTR的HPA基因交互作用研究

目的 探讨血小板特异性抗原(human platelet antigens,HPA)交互作用与免疫性血小板输注无效(platelet transfusion refractoriness,PTR)发生的相关性,建立免疫性PTR的多基因预测模型预测PTR风险.方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对190...     

GP IIb三种基因多态性之间的关系及GP IIbT13959G在血小板输注耐受中的作用

目的:研究血小板膜糖蛋白Ⅱb(GPIIb)三种基因多态性之间的关系及GPIIbT13959G在血小板输注耐受中的作用。方法:聚合酶链反应-单链构型多态性分析检测110例正常人GPIIb基因第26和30外显子(Exon26,Exon30)及21内含子(Intron21)基因多态性,进行基因序列分析,研究这些基因多态性是否存在连锁关系;应用Fok1酶切法对147例血液病人人类血小板抗原-3(humanplateletantigen-3,HPA-3)基因进行分型,并与110例正常人进行比较;将接受单采血小板输注的44例血液病人随机分为HPA-3同型输注组和对照组,血小板输注3次以后检测血小板抗体。结果:正常人GPIIb存在基因多态性,表现分别为gDNA13959位点T→G,16977位点C→T,11996～12004位点9个碱基缺失,且三者具有同步性。Fox1酶切分析结果表明,正常人和血液病人的HPA-3a基因频率分别为83.6%(92/110)和81.9%(119/147),HPA-3b基因频率分别为16.4%(18/110)和19.1%(28/147),两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。血液病人接受单采血小板输注后,HPA-3同型输注组血小板抗体阴性,而对照组有2例存在血小板抗体,其中1例为HPA-3a抗体。结论:(1)GPIIb基因存在gDNA13959位点T→G,16977位点C→T,11996～12004位点9个碱基缺失,这3个位点的多态性可能存在完全连锁关系;(2)血液病人与正常人的HPA-3基因频率相同;(3)HPA-3系统可能是我国人群产生血小板输注耐受的原因之一。