虫草多糖药理学研究进展

虫草多糖是虫草中的主要活性成分之一,是虫草中含量最高的药理活性物质,具有多种药理功效.本文主要针对虫草多糖的免疫调节、抗肿瘤、保护肾脏、保护肝脏、抗氧化、延缓衰老、降血糖、降血脂、抗放射等作用进行了较全面的综述.     

酶法提取蛹虫草中虫草素的研究

目的 研究UPLC浏定虫草素的方法及酶法提取蛹虫草中虫草素的工艺条件.方法 对酶种类、酶用量、酶解温度、酶解时间、酶解pH值进行考察,确定最佳提取工艺.结果 中性蛋白酶提取蛹虫草中虫草的最佳工艺为:酶用量1.5%,酶解温度50℃,酶解pH值5.5,酶解时间60 min.结论 该工艺条件下,虫草素提取得率为0.732%,与未加酶的热水浸提相比,虫草素提取得率增加6.2倍.     

天然虫草和人工虫草体外免疫活性的初步评价

目的:考察天然虫草和人工虫草体外免疫活性的差异,为虫草质量的生物评价与控制提供参考.方法:采用MTT比色法,考察天然虫草和人工虫草对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响,并对实验结果进行聚类分析.结果:虫草在0.36～11.52 mg/mL范围内对小鼠脾淋巴细胞无毒性,高浓度(＞0.72 mg/mL)时对淋巴细胞的增殖作用明显(P＜0.05);免疫活性为:天然虫草＞人工虫草,青海虫草＞西藏虫草.结论:体外免疫活性评价方法可以初步区分天然虫草和人工虫草.     

RP-HPLC法测定北虫草中腺苷、虫草素含量

目的:采用RP-HPLC法测定不同基地、不同批次的北虫草子实体中腺苷、虫草素含量。方法:Agela-C18色谱柱,流动相为Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液(pH=6.5)-甲醇(17∶3),流速1.0 ml/min,检测波长260 nm,柱温20℃。结果:小麦基质培养的北虫草中腺苷平均含量最高,虫草素含量二者相差甚微。结论:以小麦为基质培养的北虫草质量较好。     

蛹虫草化学成分研究

从蛹虫草菌丝中分离出六种化学成分。经结构鉴定为β-谷甾醇,麦角甾醇,D-甘露醇,腺嘌呤,腺苷及虫草素(3′-脱氧腺苷)。从蛹虫草菌丝中分离出虫草素、腺嘌呤及麦角甾醇尚属首次。     

蛹虫草中虫草素分离纯化工艺研究进展

本文介绍了蛹虫草和虫草素的性状功效以及检测和提取工艺,主要综述了虫草素的分离纯化工艺的研究进展。离子交换树脂法是目前分离纯化虫草素的常用方法,超临界CO2萃取在分离蛹虫草中核苷类成分方面也取得了进展,并提出大孔吸附树脂技术可能会成为虫草素分离纯化新的手段。     

北虫草的化学成分及药理作用

北虫草是一种药食两用真菌,在保健食品和药品行业日益成为热点。近10年研究表明,北虫草主要含有虫草素、腺苷、乙酰基虫草素等多种核苷、虫草多糖、氨基酸和无机元素的化学成分;药理研究显示北虫草中核苷和多糖类成分在抗肿瘤、抗炎、抗老化、免疫调节等方面有较为明显的作用。但有效成分的分离纯化制约着产业化的发展,北虫草有效成分药理作用机制研究也有待补足。     

高速逆流色谱法分离制备蛹虫草发酵液中虫草素

目的 以蛹虫草发酵液虫草素粗提物为原料,对高速逆流色谱(HSCCC)分离制备虫草素条件进行研究.方法 利用HPLC测定分配系数法结合分析型HSCCC对分离虫草素的溶剂体系进行筛选,确定虫草素分离的最佳溶剂体系为醋酸乙酯-正丁醇-0.5％氨水(2∶3∶5),并运用此溶剂体系,上相作为固定相,下相作为流动相,利用制备型HSCCC分离制备蛹虫草发酵液中虫草素.结果 400 mg虫草素粗产品通过制备型HSCCC一次分离制备获得质量分数为98.7％的虫草素产品43.8 mg.结论 该法效率高,操作简单,为虫草素的大量制备提供了重要参考.     

新疆虫草与冬虫夏草中腺苷和虫草素的HPLC法测定比较

目的：建立测定虫草类药材腺苷和虫草素含量的HPLC方法,比较新疆虫草和不同地区冬虫夏草中腺苷和虫草素的含量差异。方法：采用反相高效液相色谱法,色谱柱：DikmaTM C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：甲醇-水（15：85）;柱温为30℃,流速：1.0ml/min;检测波长：260nm。结果：新疆虫草和冬虫夏草中均含有腺苷和虫草素,其中新疆虫草中腺苷含量为237.7μg/g,介于3个冬虫夏草样品（145.2～307.4μg/g）之间;虫草素含量为38.9μg/g,明显高于冬虫夏草（4.2～11.3μg/g）的3～10倍左右。结论：本方法具有简便、快捷、准确等特点,适用于虫草类药材中腺苷和虫草素含量的测定,本研究提示新疆虫草可作为冬虫夏草新资源。     

HPLC法测定蛹虫草子实体及其培养基的虫草素含量

目的:建立蛹虫草子实体及其培养基中虫草素(Cordycepin)含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,选用YMC-PackC18色谱柱(250×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(20:80),流速为1mL/min,检测波长为260nm,柱温为30℃,分析时间为20min。结果:蛹虫草子实体中虫草素含量为0.503mg/g,平均加样回收率(n=9)为100.8%(RSD=1.33%);蛹虫草培养基中虫草素含量为0.118mg/g,平均加样回收率(n=9)为101.7%(RSD=1.82%)。结论:本方法分离度好、精密度高、专属性强、灵敏度高,可用于蛹虫草子实体及其培养基的质量评价。     

虫草多糖的研究进展

目前世界上已发现虫草属真菌350多种,其中我国记录有70余种[1,2]。野生的冬虫夏草主要产于四川、西藏、云南、青海等海拔3 000 m以上的寒冷地带,由于其生长条件的限制及过度采挖,产量很低,所以价格昂贵。近年来,随着人们逐渐发现和认识虫草的滋补疗效和提高人体免疫功能,虫草的     

人工蛹虫草子实体中虫草素的含量测定

人工蛹虫草子实体为天然蛹虫草（Ｃｏｒｄｙ－ｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ（Ｌ．ｅｒＦｒ．）Ｌｉｎｋ）中分离的菌种拟青霉（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ）采用人工培养基培养所获得的子实体，经鉴定为麦角菌科虫草属植物。通过大量实验证明，具有同天然...     

RP-HPLC法测定不同北虫草子实体和培养基中腺苷和虫草素含量的比较

目的:比较九种北虫草子实体以及3种培养基中腺苷和虫草素的含量。方法:超声水提法提取样品中腺苷和虫草素,用RP-HPLC法测定其含量。结果:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量都存在差异,腺苷含量为(1.054±0.259)-(2.931±0.356)mg·g-1;虫草素含量差异较大,为(0.435±0.016)-(4.981±0.212)mg·g-1。3种不同培养基中虫草素和腺苷也存在差异,其中3号培养基虫草素含量最高,达1.046 mg·g-1,1号培养基腺苷最高,为0.612 mg·g-1。结论:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量差异较大;三种培养基中腺苷和虫草素含量也存在差异。     

工业化培育北虫草生物活性成分含量变化的研究

目的:明确工业化培育北虫草的主要生物活性成分在不同生长时期含量变化的规律.方法:采用HPLC和苯酚硫酸法,分别对不同生长时期的工业化培育的北虫草的虫草素、腺苷和虫草多糖含量的变化进行了跟踪.结果:培养周期内虫草素含量随生长期增长而不断增高,而腺苷和虫草多糖含量均在第40d达到最高值.结论:本研究结果对工业化生产,合理有效地控制北虫草产品生物活性成分的含量,具有一定指导意义.     

正交实验优化蛹虫草培养成分提高虫草菌素含量

目的 通过正交实验优化蛹虫草培养成分,提高虫草菌素含量.方法 以蛹虫草的无性型Peacilomyces militaris 08-03为材料,进行正交实验.结果 通过正交实验优选出的最佳培养基成分为:蛋白胨2%、酵母膏3%、麦牙糖3%、蔗糖4%、KH2PO4 0.1%、NaNO3 0.1%、NH4Cl 0.2%,140 r/min,27℃,摇瓶发酵8 d;虫草菌素含量为(0.98±0.08) mg/g.结论 优化的培养基比用查氏液体培养基培养的虫草菌素产量[(6.51±0.22) mg/g]提高了近6.6倍.     

用蛹虫草固体发酵法高效生产虫草素的研究

目的：研究并建立用蛹虫草固体发酵方式高效生产虫草素的最佳方法。方法：通过对不同菌株在固体发酵过程中各生长期的虫草素含量变化进行跟踪测定以及正交旋转组合设计、正交试验设计等方法，对影响虫草素产量和含量的各影响因子(包括菌种、生长期、培养基配方和环境条件等)进行系统优化。结果：JF-1是虫草素生产的最佳菌株，现蕾期是收获提取虫草素的最佳时期；最佳的培养基配方为水料比1.1∶1(mL·g^-1)，营养水中酵母膏、蛋白胨、葡萄糖的用量分别为22.6，6.0，25.4 g·L^-1，营养水pH 6.6；最佳的环境条件为：光照强度4 400 lx，每日光照时间18 h，温度18～22 ℃。结论：用以上方法固体发酵生产虫草素，经过约13 d的培养，培养基中虫草素达到0.60%，比传统液体发酵方法的最高产量高近2倍，并且培养时间缩短2 d。     

储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响

目的:研究储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响。方法:采用RP-HPLC法分别测定柞蚕蛹虫草子实体、菌核及整草中腺苷和虫草素含量,并与相同储存时间的米饭虫草进行比较。结果:储存1年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素的含量顺序为子实体菌核;总量顺序为菌核子实体。储存2年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素含量有所降低,其分布规律以及总量顺序没有明显变化。储存1年的柞蚕蛹虫草中腺苷总含量高于2年的,差异有统计学意义(P0.05),但其虫草素的含量差异无统计学意义(P0.05)。米饭虫草中腺苷含量是柞蚕蛹虫草的1.6倍,虫草素的含量是柞蚕蛹虫草5倍。结论:储存时间对腺苷和虫草素分布规律以及总量顺序无明显影响,但对其腺苷总含量有明显影响。     

工业化培育北虫草生物活性成分含量变化的研究

目的:明确工业化培育北虫草的主要生物活性成分在不同生长时期含量变化的规律.方法:采用HPLC和苯酚硫酸法,分别对不同生长时期的工业化培育的北虫草的虫草素、腺苷和虫草多糖含量的变化进行了跟踪.结果:培养周期内虫草素含量随生长期增长而不断增高,而腺苷和虫草多糖含量均在第40d达到最高值.结论:本研究结果对工业化生产,合理有...     

虫草属EST-SSR标记系统的建立研究

目的:通过球孢虫草、蛹虫草EST设计EST-SSR引物,建立虫草属EST-SSR标记系统.方法:从NCBI公共数据库下载获得虫草EST,利用Sequece Seiners 1.2软件去除冗余序列并设计引物,进行PAGE电泳.结果:通过去除EST总序列中低质量的和冗余的序列后,得到全长为2 953 173 bp的4 556条无冗余球孢虫草EST.从中发掘出718个EST-SSR,分布于616条EST中,出现频率是15.8％.平均分布频率是每4 096 bp出现1个,三核苷酸重复序列有419个,是出现最多的重复类型.蛹虫草EST去冗余后得到1 363条无冗余EST,共含有1 117个EST-SSR,出现频率为81.95％,出现最多的重复类型是A核苷酸重复.根据球孢虫草EST-SSR序列,设计合成50对引物,有扩增产物的引物为34对,占总设计引物数的68％.根据蛹虫草EST-SSR,设计合成40对引物,有扩增产物的引物为39对,占总设计引物数的97.5％.基于SSR标记进行聚类分析,7种虫草无性型均能分开,且分为4支.结论:虫草属EST-SSR出现频率较高、类型较丰富、多态性潜能较高,具有较高的利用价值.球孢虫草和蛹虫草EST开发的SSR标记在虫草属有较好的转移性与通用性,可以很好的应用于虫草种间遗传关系的研究.应用虫草物种EST建立分子标记是一条简便而又有效的途径.     

HPLC法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量

目的建立HPLC法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量。方法采用SinochromODS Cl8柱,以磷酸盐缓冲液-甲醇(85:15)为流动相;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为260 nm。结果腺苷在8.92~44.6μg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;虫草素在6.23~31.15μg?mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;腺苷平均加样回收率为97.80%,RSD为1.1%(n=5)。虫草素平均加样回收率为97.46%,RSD为1.5%(n=5)。结论本法专属性强,准确度高,重现性好,可作为蛹虫草质量控制的方法。