葛根素对STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜的保护作用及机制研究

目的探讨葛根素对糖尿病大鼠视网膜的保护作用及可能机制。方法 40只♂SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病(DM)模型组、DM+葛根素低剂量组(Pue1组)、DM+葛根素高剂量组(Pue2组)。给药后4周,行视网膜组织病理学检查,荧光法检测视网膜晚期糖基化终末产物(ad-vanced glycation end products,AGEs)含量、Real-time PCR法、Western blot法分别检测视网膜组织晚期糖基化终末产物受体(receptor of advanced glycation end products,RAGE)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mR-NA表达和蛋白水平。结果 DM组视网膜外核层细胞厚度明显变薄,Pue2组较DM组有所好转。DM大鼠视网膜中VEGF的mRNA和蛋白表达水平均明显高于正常对照组(P<0.01);Pue1、Pue2组VEGF的mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P<0.01)。DM大鼠视网膜内AGEs水平较正常对照组明显上调(P<0.05),高剂量葛根素能抑制AGEs形成(P<0.05)。RT-PCR与Western blot结果显示,DM大鼠视网膜中RAGE的mRNA水平和蛋白表达均高于正常对照组(P<0.05),高剂量葛根素可使之下调(P<0.05)。结论葛根素可抑制DM大鼠视网膜AGEs形成及RAGE的表达,抑制视网膜VEGF的表达,起到保护糖尿病大鼠视网膜的作用。     

转录因子激活蛋白-2α在大肠癌组织的表达及意义

目的 研究转录因子激活蛋白-2α(AP-2α)的表达在大肠癌发生发展过程中的作用.方法 以60例大肠癌手术标本为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法分别检测大肠癌和癌旁正常组织中AP-2α基因的mRNA表达水平;以60例大肠癌组织AP-2α mRNA 的表达均值为界限,将大肠癌组织AP-2α mRNA 表达分为高、低表达,比较不同临床资料、病理参数下大肠癌组织AP-2α mRNA 的表达率.结果 大肠癌组织中AP-2α mRNA表达水平显著低于癌旁正常组织(P＜0.01);大肠癌组织AP-2α mRNA低表达率在不同性别、年龄、肿瘤部位患者差异均无统计学意义(P＞0.05),但其表达降低或缺失与大肠癌的组织学分级、Duke's分期及淋巴结转移密切相关(P＜0.05,P＜0.01).结论 转录因子AP-2α在大肠癌的发生发展过程中起重要作用,可能成为大肠癌防治的一个新靶点.     

重组人粒细胞集落刺激因子在大鼠局灶性脑缺血中的抗炎作用

目的 探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)在大鼠局灶性脑缺血中的抗炎作用.方法 用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血-再灌注(MCAO/R)模型,观察rhG-CSF对神经功能缺损评分的影响;用半定最逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法 测定脑缺血区白细胞介素(IL)-1βamRNA和肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA的表达.结果 与对照组相比,rhG-CSF治疗绀大鼠的神经功能缺损评分明显降低,脑缺血区IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达降低.结论 rhG-CSF可降低IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达,在缺血-再灌注损伤中有抗炎作用.     

TNF受体封闭肽对大鼠佐剂性关节炎的影响

目的观察肿瘤坏死因子(TNF)受体封闭肽对大鼠佐剂性关节炎的影响。方法注射弗氏完全佐剂建立大鼠佐剂性关节炎模型,在关节局部注射TNF受体封闭肽,观察对大鼠关节肿胀度、关节组织病理改变及腹腔巨噬细胞表达IL-1β mRNA和TNF-α mRNA(RT-PCR)的影响。结果建立了与人类类风湿性关节炎极其相似的大鼠佐剂性关节炎模型;TNF受体封闭肽治疗10 d后,大鼠踝关节肿胀完全受到抑制;关节组织内炎症细胞浸润减少,炎性病理损伤明显减轻;大鼠腹腔巨噬细胞表达的TNF-α mRNA和IL-1β mRNA明显减低。结论TNF受体封闭肽通过抑制佐剂性关节炎TNF-α和IL-1的产生,而发挥抗炎作用,明显减轻关节的病理性损伤,有效抑制关节炎的临床进程。     

灯盏花素、铜仿透析膜和内毒素对PBMC产生TNFα的干预作用

目的：研究铜仿透析膜和内毒素对尿毒症非透析及血液透析患者外周血单个核细胞(PBMC)所产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响，以及灯盏花素对TNF-α的干预作用。方法：铜仿透析膜、内毒素和灯盏花素与PBMC培养后，采用生物活性法及RT-PCR法测定TNF-α生物活性及TNF～α mRNA的基因表达。结果：(1)铜仿透析膜可使血液透析患者TNFα mRNA表达增加，加入内毒素后TNFα生物活性增加。(2)灯盏花素对上述过程有不同程度抑制。结论：铜仿透析膜及内毒素以协同作用的形式影响TNFα mRNA表达及TNFα活性，灯盏花素对上述过程有抑制作用。     

Effect of Pioglitazone on Expression of Chemerin,Cmklr1 and Tumor Necrosis Factor-alpha mRNA in Liver of Diabetic Rat Model

目的:观察噻唑烷二酮类药物对糖尿病大鼠肝脏chemerin、cmklr1及肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA表达的影响.方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、糖尿病组与吡格列酮组,尾静脉注射链脲佐菌素制作糖尿病大鼠模型,造模成功后吡格列酮组每天按15 mg/kg经胃灌药,连续给药8周.第8周末处死大鼠留取肝脏组织.采用实时定量PCR法检测大鼠肝脏chemerin、cmklr1及TNF-α mRNA的表达水平.结果:糖尿病组肝脏chemerin表达低于正常组及吡格列酮组,差异均有统计学意义(均P＜0.017).3组间肝脏cmklr1表达差异无统计学意义.糖尿病组肝脏TNF-α表达较正常组升高(P＜0.017),吡格列酮组较糖尿病组有所降低,但差异无统计学意义.结论:糖尿病大鼠肝脏TNF-α表达增高,吡格列酮可能通过上调chemerin的表达而改善肝脏的胰岛素敏感性.     

糖尿病大鼠甲状腺组织NISmRNA表达的变化

目的:探讨糖尿病(DM)大鼠甲状腺组织钠,碘转运体(NIS)mRNA表达的变化及胰岛素、氨基胍对其的干预作用.方法:高脂饲料喂养联合链脲佐菌素制备DM大鼠49只,随机分为DM组17只、胰岛素十预组(DI)16只、氨基胍干预组(DA)16只,设正常对照组(NC)9只,成模12周末处死,取甲状腺组织,以半定量RT-PCR方法测定NISmRNA的表达.结果:DM组大鼠甲状腺组织NISmRNA与GAPDH mRNA表达水平比为0.17±0.09显著低于NC组的0.47±0.16(P<0.05),经胰岛索或氨基胍干预后DI组与DA组大鼠甲状腺组织NIS mRNA与GAPDH mRNA表达水平比分别为0.45±0.20、0.40±0.17显著高于DM组(P<0.05).结论:高糖毒性可能通过非酶糖基化途径导致DM大鼠甲状腺组织NIS mRNA表达下降.     

Influence of melatonin on the expression of tumor necrosis factor alpha in rats with endotoxemia

目的 探讨褪黑素(MT)对脂多糖(LPS)诱导的内毒素血症大鼠循环血和血管组织中肿瘤坏死因子-α (TNF-α)表达的影响.方法 雄性SD大鼠,分组如下:(1)溶剂对照组;(2)LPS组;(3)LPS+MT组;(4)MT组.应用酶联免疫吸附法检测血清TNF-α含量;应用RT-PCR和免疫组织化学法检测TNF-α在血管组织的表达.结果 与对照组相比,LPS组大鼠血清TNF-α含量、血管TNF-α mRNA水平均增高(P＜0.01),TNF-α蛋白在血管内皮和平滑肌细胞阳性表达增多;而给予LPS前后应用MT干预治疗,可显著降低血清TNF-α含量、血管TNF-α mRNA生成,与同时间点LPS组比较均差异有统计学意义(P＜0.01).结论 MT降低内毒素血症大鼠TNF-α生成和表达.     

人参皂苷Rg_1的肠内菌代谢Ⅱ 人参皂苷Rg_1和Rh_1免疫活性(英文)

目的:比较人参皂苷Rg_1及其代谢产物Rh_1对细胞因子及其mRNA表达的影响.方法:将Rg_1及Rh_1加入正常人外周血单核细胞(PBMC)培养24小时后,计数细胞,观察其对正常细胞增殖的影响.用放射免疫法(RIA)观察Rg_1及Rh_1对人组织瘤细胞(THP-1)分泌与炎症有关的细胞因子(IL-1α,TNFα,IL-8)产生的影响,用逆转录酶链式聚合反应(RT-PCR)方法,检测Rg_1及Rh_1对TNFα的mRNA表达的影响.结果:Rg_1及Rh_1(0.1,1,10,100 mg/L)对PBMC增殖无明显影响.但在脂多糖10 mg/L和PMA 200 nmol/L存在下,Rh_1的低浓度(1 mg/L)能促进THP-1细胞产生TNFα与IL-8.而Rg_1在LPS 100 mg/L时抑制TNFα的产生.Rg_1 1 mg/L及Rh_1 100 mg/L均能促进IL-1α的产生.RT-PCR实验结果表明,Rh_1能显著促进TNFα mRNA的表达.结论:Rg_1与Rh_1的免疫活性有所不同,在有些方面甚至相反.     

HIF-2α和Tie2在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 研究低氧诱导因子2α(HIF-2α)、血管生成素受体(Tie2)、微血管密度(MVD)在乳腺癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化法检测41例乳腺癌组织(A组)及22例乳腺正常组织(B组)中HIF-2α、Tie2及MVD表达,RT-PCR方法检测HIF-2α mRNA和Tie2 mRNA表达水平,分析HIF-2α、Tie2表达与乳腺癌临床指标的关系.结果 与B组相比,A组HIF-2α、Tie2、MVD表达明显增加(P＜0.05).A组中HIF-2α mRNA、MVD表达均与Tie2 mRNA表达呈正相关(r=0.881、0.832,P＜0.05).HIF-2α、Tie2蛋白表达与肿瘤大小、淋巴结转移密切相关.结论 HIF-2α、Tie2在乳腺癌血管生成过程中起到了重要的作用,可作为判断肿瘤生物学行为指标之一.     

缺氧诱导因子1α表达与胃癌的关系

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-lα)在胃癌组织中的表达与胃癌发生、发展的关系.方法 应用组织芯片方法检测162例胃癌组织和32例癌旁组织中HIF-1α的表达;采用RT-PCR方法检测11例胃癌组织和12例胃正常组织中HIF-1α mRNA的表达水平.结果 HIF-1α在胃癌组织和癌旁组织中表达的阳性率分别为37.04％(60/162)和9.38％(3/32)(P＜0.05);HIF-1α的表达与TNM分期、浸润深度和淋巴结转移有关(P＜0.05).HIF-1α mRNA在胃癌组织和胃正常组织中的表达水平分别为(6.62±0.63)和(7.32±1.12)(P＜0.05).结论 HIF-1α在胃癌组织中高表达,并与胃癌的发生、发展及转移密切相关.     

内毒素血症大鼠肾脏水通道蛋白2等基因表达及肾脏结构功能的改变

目的:探讨内毒素血症大鼠肾脏水通道蛋白(AQP)2、细胞间黏附分子(ICAM)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA和蛋白表达及肾脏结构功能的改变。方法:Wistar大鼠24只随机分为空白对照1(C1)组,只注射生理盐水和脂肪乳的对照2(C2)组及注射内毒素和脂肪乳的内毒素(L)组,每组8只,在内毒素血症模型造模成功12h后,处死取材。观察肾组织病理学改变,RT-PCR、Western blot及免疫组化方法测定AQP2、ICAM-1和TNF-α的表达。结果:L组较C1组、C2组肾组织出现病理损伤,尿量减少,尿渗透压下降,血渗透压、血肌酐及尿素氮增高,AQP2 mRNA及蛋白表达减少,ICAM-1、TNF-α mRNA及蛋白表达增多,差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论:大鼠内毒素血症可导致肾组织形态改变和功能损伤,AQP2表达减少,ICAM-1和TNF-α表达增多。     

埃他卡林对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织HIF-1α mRNA和蛋白表达的影响

目的 研究新型ATP敏感性钾通道开放剂(KATP CO)埃他卡林(IPT)对大鼠肺组织中低氧诱导凶子1α(HIF-1α)表达的影响.方法 36只清洁级SD大鼠随机分成对照组、低氧性肺动脉高压(HPH)模型组和IPT处理组,每组12只.HPH模型组及IPT处理组于(10.0±0.5)%氧浓度的常压低氧舱内饲养,每天8 h,每周6 d,共4周.IPT处理组给予IPT 1.5 mg·kg-1·d-1灌胃;对照组及HPH模型组给予0.9%氯化钠5 ml·kg-1·d-1灌胃.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织HIF-1α mRNA表达,用Western blot方法检测肺组织HIF-1α白的表达.结果 HPH模型组大鼠肺动脉平均压、右室/(左室+室间隔)重量比和HIF-1α mRNA和蛋白表达均高于对照组和IPT处理组(P＜0.01).IPT处理组与对照组的HIF-1α mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IPT降低肺动脉压可能与抑制HPH大鼠肺组织中的HIT-1α表达有关.     

细胞因子对胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的:观察肿瘤坏死因子α(TNFα)和干扰素γ(IFNγ)对大鼠胰岛细胞和小鼠βTC-3细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响.方法:应用TUNEL法检测高浓度TNFα和IFNγ培养后大鼠胰岛细胞和小鼠BTC-3细胞凋亡百分率,应用半定量RT-PCR(sQRT-PCR)检测培养后bcl-2、hax、c-myc、p53和fas mRNA的表达.结果:大鼠胰岛细胞经高浓度TNFα和IFNγ处理后,上清液中胰岛素浓度明显下降,由(169.69±1.62)mIU/L降为(136.1±1.44)mIU/L(P<0.01);凋亡细胞比例明显增加,由(10.25±1.71)%升为(17.25±1.71)%(P<0.01).βTC-3细胞经高浓度TNFα和IFNγ处理后,上清液中胰岛素浓度明显下降,由(254.13±4.35)mIU/L降为(221.42±3.98)mIU/L(P<0.01);凋亡细胞比例明显增加,由(20.25±2.22)%升为(38.75±3.4)%(P<0.01).大鼠胰岛细胞和βTC-3细胞经高浓度TNFα和IFNγ处理后,致凋亡基因hax、c-myc、fas mRNA表达明显增an(P<0.05);抗凋亡基因bcl-2 mRNA表达明显下降(P<0.05);bcl-2/bax mRNA表达比率明显下降(P<0.01);p53mRNA表达无明显改变(P0.05).结论:TNFα和IFNγ可能通过诱导胰岛细胞凋亡导致或加重糖尿病,其中bcl-2/bax mRNA表达比率变化可能起重要作用.     

重组人成纤维细胞生长因子-21对2型糖尿病模型大鼠LXRα及GLUT1 mRNA表达的调节作用

目的研究重组人成纤维细胞生长因子-21(rhFGF-21)对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠LXRα及GLUT1mRNA表达的调节作用。方法将T2DM大鼠模型随机分组,每日皮下注射rhFGF-21,8周后,测定大鼠空腹FBG、FA、TG、TC、HDL-C、LDL-C含量,采用RT-PCR方法检测LXRα及GLUT1 mRNA的表达水平。结果(1)rhFGF-21能稳定降低T2DM模型大鼠血糖。(2)rhFGF-21用药组大鼠较T2DM模型组大鼠LXRα和GLUT1 mRNA表达量显著增加。(3)大、中剂量rhFGF-21能显著降低T2DM模型大鼠血清FA、TG、TC、LDL-C含量,同时显著升高血清HDL-C含量。结论rhFGF-21能上调T2DM模型大鼠LXRα、GLUT1 mRNA表达,增加基础水平的葡萄糖转运,从而降低血糖,改善脂质代谢紊乱。     

褪黑素对内毒素血症大鼠TNF-α表达的影响

目的探讨褪黑素(MT)对脂多糖(LPS)诱导的内毒素血症大鼠循环血和血管组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法雄性SD大鼠,分组如下:(1)溶剂对照组;(2)LPS组;(3)LPS+MT组;(4)MT组。应用酶联免疫吸附法检测血清TNF-α含量;应用RT-PCR和免疫组织化学法检测TNF-α在血管组织的表达。结果与对照组相比,LPS组大鼠血清TNF-α含量、血管TNF-α mRNA水平均增高(P<0.01),TNF-α蛋白在血管内皮和平滑肌细胞阳性表达增多;而给予LPS前后应用MT干预治疗,可显著降低血清TNF-α含量、血管TNF-α mRNA生成,与同时间点LPS组比较均差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MT降低内毒素血症大鼠TNF-α生成和表达。     

褪黑素受体激动剂Neu-p11改善T2DM大鼠的胰岛素抵抗作用研究

目的研究褪黑素受体激动剂Neu-p11改善2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠的胰岛素抵(insulin resistance,IR)作用,并预测其可能机制。方法采用长期高脂肪饲养加小剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg·kg^-1,ip)诱导雌性大鼠2型糖尿病动物模型,灌胃给药4周后处死,取肝脏组织。采用RT-PCR方法测定大鼠Sirt1、Nrf-1/2、ERRα等相关因子的mRNA表达量;Western Blot法测定PGC-1α、Mfn2的相对表达。测定大鼠INS,计算HOME-IR与ISI。测定大鼠肝脏ATP含量及ATP酶活力。结果与正常组相比,T2DM大鼠发生IR,PGC-1α、Mfn2蛋白表达上调,Sirt1等mRNA表达显著降低,ERRαmRNA表达升高,ATP含量显著减少,ATP酶活力减弱。与模型组相比,Neu-p11低剂量组降低T2DM大鼠INS;改善T2DM大鼠IR;上调大鼠肝脏蛋白和mRNA表达,下调ERRαmRNA的表达,增加大鼠肝脏ATP含量与ATP酶活力。结论褪黑素受体激动剂Neu-p11可能以调节T2DM大鼠肝脏线粒体平衡相关因子,维持线粒体功能正常为机制,改善IR。     

杂色曲霉素对小鼠穹隆下器官TNFα和TGFβ_2的mRNA表达的影响

目的观察杂色曲霉素(ST)损伤脑组织时有无肿瘤坏死因子(TNF)α和转化生长因子(TGF)β2的mRNA表达的改变。方法用BALB/c小鼠,ST3mg.kg-1灌胃,分别于灌胃后0.5,1,2,4,8和16h处死动物,用原位杂交方法观察穹隆下器官(SFO)细胞TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA的表达。结果TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA阳性细胞广泛分布在SFO。ST处理组从0.5h开始TNFα mRNA阳性表达细胞数缓慢上升,4h达到顶点,之后缓慢下降;TGFβ2 mRNA阳性表达细胞数从0.5h缓慢持续上升,16h达到顶点。ST组各时间点TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA阳性细胞数均明显高于对照组。结论TNFα和TGFβ2在ST对SFO细胞损伤和修复中可能起着重要的作用。     

阿托伐他汀对糖尿病大鼠大血管组织单核细胞趋化蛋白1表达的影响

目的 研究链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠大血管组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达和阿托伐他汀对MCP-1表达的影响.方法 30只SD大鼠随机分成正常对照(NC)组和DM造模组,造模组给予STZ 60 mg/kg一次性腹腔注射,造模成功后再随机分为DM组和DM 阿托伐他汀治疗(AT)组,AT组大鼠给予阿托伐他汀(15 mg·kg-1·d-1)灌胃.于8周末,1%戊巴比妥麻醉下取胸主动脉,分别采用半定量RT-PCR及Western blot方法检测大血管组织中MCP-1 mRNA和蛋白的表达水平.结果 与DM组相比,AT组大鼠体重、血糖水平无明显差异(P＞0.05),而血浆胆固醇、甘油三酯明显降低(P＜0.05).与NC组相比,DM组大鼠大血管组织MCP-1 mRNA和蛋白的表达明显增加(P＜0.01);与DM组相比,AT组大鼠大血管组织MCP-1mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P＜0.01).结论 糖尿病大鼠血管组织中MCP-1的表达明显升高,而阿托伐他汀可能通过减少炎症因子MCP-1的表达而对糖尿病大血管并发症产生治疗作用.     

细胞因子对膀胱平滑肌细胞内诱导性一氧化氮合酶的激活作用(英文)

探讨肿瘤坏死因子α (TNFα)和γ干扰素(INFγ)对大鼠膀胱平滑肌细胞诱导性一氧化氮合酶(iNOS )的影响 .将TNFα (1nmol·L- 1)或INFγ(5 0kU·L- 1)分别或同时加入膀胱平滑肌细胞培养液 ,2 4h后测定细胞培养液中一氧化氮 (NO)水平 ,并用Western印迹方法检测iNOS的表达 .结果显示 ,TNFα或INFγ单独不能诱导iNOS表达 ,也不能引起NO水平显著提高 .但当TNFα和INFγ联合诱导细胞 2 4h ,则细胞培养液中NO水平明显升高 ,用Western印迹分析可见iNOS表达 ,说明TNFα和INFγ具有协同诱导作用 .在TNFα和INFγ加入膀胱平滑肌细胞前 30min ,加入NOS抑制剂L 氮 精氨酸甲酯 (L NAME) ,可显著抑制TNFα和INFγ对NO的生成诱导 .结果提示 ,TNFα和INFγ联合应用可激活膀胱平滑肌细胞iNOS .