纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架材料复合大鼠成骨细胞培养的实验研究

目的 将纳米羟磷灰石/壳聚糖(nHA/CS)支架材料与大鼠的成骨细胞在体外复合培养,研究其生物相容性,以期在骨组织工程支架材料的选择方面提供依据.方法 原代培养大鼠成骨细胞,倒置显微镜作细胞形态学观察,碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红钙染色对细胞进行鉴定.将第三代细胞与nHA/CS材料体外复合培养,采用MTT比色法和...     

聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯作为软骨细胞支架的实验研究

目的探讨聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯（PHBV）作为软骨细胞支架的可行性。方法采用“压片-热处理-粒子析出”技术制备PHBV多孔支架并观测其结构。体外分离培养软骨细胞后接种到PHBV支架进行培养，第3、7、14天后取材行扫描电镜观察；培养至2、6、10周后行组织学观察。结果PHBV支架孔径在200-300μm之间孔隙率80％；软骨细胞-PHBV复合物在体外培养期间支架无塌陷及形变，软骨细胞在支架上黏附、增殖良好，并能分泌细胞外基质。随着培养时间延长，新生软骨的组织学特征日益明显。结论PHBV支架具有适宜的孔结构和生物相容性，可以作为软骨组织工程支架材料。     

组织工程化关节软骨的研究进展

20世纪80年代以来,组织工程学的出现及发展为解决关节软骨缺损、重建关节功能提供了新思路,使软骨组织缺损的完全再生成为可能。软骨组织工程是当前组织工程研究的热点之一,它的基本方法是将体外分离培养的正常组织细胞接种到具有一定空间结构和良好的生物相容性的三维支架上,然后将细胞一支架复合物在体外继续培养或植入体内,同时辅以特殊的生长因子,支架材料逐渐降解,为细胞分泌的基质所代替,形成组织或器官的结构,并行使功能,现将其研究进展综述如下。     

关节软骨组织工程支架材料研究进展

组织工程学是一门交叉学科,它利用工程学和生命科学的原理,来研究和发展具有生物活性的人工替代物.用以维持、恢复或提高人体受损组织的功能.目的是利用人体活细胞在适宜的支架材料上生长成天然的组织和器官以替代人体内受损和缺失的组织和器官.支架材料的选择是组织工程学研究的焦点之一.支架材料作为人工细胞外基质,为功能细胞的停泊、生长、繁殖、新陈代谢提供三维空间.理想的软骨组织工程支架应具有良好的生物组织相容性、良好的结构相容性、良好的表面活性、生物可降解性、可塑性和一定的机械强度.目前,关节软骨组织工程支架材料研究主要涉及天然材料、人工合成材料、人工和天然复合材料、纳米材料.本文就关节软骨组织工程支架材料进行综述.     

魔芋葡甘聚糖/透明质酸钠复合材料构建组织工程髓核支架的实验研究

目的：构建一种新型的组织工程髓核支架材料,为应用组织工程技术修复退变椎间盘的研究奠定实验基础。方法以魔芋葡甘聚糖（konjac glucomannan,KGM）、透明质酸钠（Sodium hyaluronate,SH）为原料,应用真空冷冻干燥、化学交联等技术构建一种新型的组织工程髓核支架,同时对其理化性能及生物学、力学性能进行初步分析。结果支架材料大体及光学显微镜下观察呈三维立体多孔结构;扫描电子显微镜（ scanning electronic microscopy, SEM）观察显示支架材料为三维不均匀多孔结构;噻唑蓝比色法（MTT）分析结果显示支架材料生物相容性良好,无细胞毒性;体外生物降解性能检测结果显示支架材料具有良好的生物降解性能,12周时总降解率为87.6%;孔径为（572.5±51.8）μm,孔隙率为（82.1±7.5）%,吸水率为（1293.5±73.8）%;力学测试结果表明,支架材料具有一定的抗压强度。结论本研究制备的组织工程髓核支架材料具有理想的三维结构和理化性能,符合理想支架材料的结构要求,为进一步行体内外生物学性能研究提供了实验基础和依据。     

两种不同分离方法的鼠肝细胞功能检测及意义

目的了解两种不同分离方法的鼠肝细胞相同细胞数体外培养时细胞功能的生物特性及有无差异。方法采用美国ABBOTT公司生产的AYSYM型全自动免疫分析仪,连续7天检测相同细胞培养量,不同取材方法的肝细胞体外换培养液中的乳酸脱氢酶、白蛋白含量。结果用半原位酶分离技术分离的鼠肝细胞较直接分离法的生物活性略高。两种分离方法相对应的细胞功能检测值间对比无统计学差异(P>0.05)。两种分离方法体外培养的肝细胞活性最佳利用时间都是在分离培养的第3天。结论两种不同分离方法的鼠肝细胞在相同细胞数体外培养时,生物学特性无差异。     

人牙周韧带细胞在SGBG/PHBV三维支架材料上分泌功能的研究

目的研究人牙周韧带细胞（periodontal ligament cells PDLCs）在溶胶-凝胶生物活性玻璃（sol-gel bioglass,SGBG）/聚羟基烷酸酯（poly-3-hydroxy butyrate-co-3-hydroxy valerate,PHBV）三维支架上的分泌功能,为牙周组织工程支架的选择提供依据。方法通过体外细胞培养实验,人牙周韧带细胞与SGBG/PHBV体外三维培养的直接接触法,测定上清液羟脯氨酸含量,检测材料对细胞分泌功能的影响。结果实验组上清液羟脯氨酸含量测定值与对照组有显著性差异,材料不影响细胞的分泌功能,同时支架材料的三维结构更能促进细胞的分泌功能。结论 SGBG/PHBV作为支架材料,有良好的生物相容性,有望应用于牙周组织缺损的组织工程修复。     

不同材料包埋的PGA支架对软骨细胞体外培养的影响

目的 比较不同材料包埋的聚羟基乙酸（PGA）作为支架体外构建组织工程软骨的效果。方法 采用卵磷脂、多聚赖氨酸及纤维粘连蛋白分别包埋PGA支架,并与软骨细胞一起体外培养,观察其亲水性的变化、对细胞生物学行为及合成细胞外基质的影响。结果 以纤维粘连蛋白包埋的PGA支架具有良好的亲水性,改善细胞生物学行为,并显著增强细胞合成细胞外基质的能力。结论 以纤维粘连蛋白包埋的PGA作为软骨组织工程技术中的支架材料,具有较大的应用前景。     

生物人工肝对重型肝炎患者血浆生化指标影响的实验研究

目的 探讨生物人工肝对重型肝炎的治疗效果。方法 通过猪肝细胞的分离与培养,建立猪肝细胞型生物反应器,与日本KM8800型血浆交换仪共同构建生物人工肝体外支持系统,在体外研究了猪肝细胞型生物人工肝对重型肝炎血浆生化指标及药物转化代谢的影响。结果 该型生物人工肝对重型肝炎患者血浆中的总胆红素、谷氨酰转肽酶、胆碱酯酶、血糖、胆固醇及糖化血清蛋白的水平有所下降,对总蛋白、白蛋白、甘油三脂水平增加,氨茶碱浓度迅速下降。结论 猪肝细胞型生物人工肝系统能参与糖、蛋白、脂肪的代谢,有较好的生物合成和生物转化功能,对重型肝炎有一定的肝功能支持作用。     

纳米陶瓷支架的研制及其生物相容性评价

目的制备纳米多孔羟基磷灰石(HA)和磷酸三钙(TCP)支架；研究新型陶瓷支架的生物相容性。方法用Sel-gel法和直接沉淀法分别制备纳米级的HA及TCP粉体，采用有机泡沫浸渍法制备多孔陶瓷支架；采用人骨膜成骨细胞(periosteal—derived osteoblast cells，PPB)与两种陶瓷支架的体外复合培养，观察细胞在材料上的生长及功能表达。结果制备出具有良好孔隙结构和一定强度的纳米多孔陶瓷支架材料；人POB在HA和TCP表面良好的生长，并发挥成骨功能。结论以HA、TCP的纳米级粉体为原料，采用有机泡沫浸渍法可制备出具有良好孔隙结构和较好力学强度的多孔陶瓷支架；新型多孔陶瓷支架有良好的生物相容性。     

大鼠肝实质细胞原代培养模型的研究及其功能鉴定

目的:为肝细胞功能及相关的研究提供一种客观的、简便的大鼠肝细胞原代培养模型,并鉴定肝细胞的功能。方法:在传统的两步灌流法的基础上进行改良分离培养肝实质细胞;流式细胞术测定原代肝细胞的细胞周期和细胞凋亡情况;SRB法测定不同培养基对原代肝细胞的生长和功能的影响。结果:分离得到的肝细胞成活率可达90%以上,纯度可达95%以上;流式细胞术结果表明原代肝细胞大多处于G0/G1期,且基本无凋亡;SRB法和白蛋白分泌量检测结果显示,低糖DMEM组原代肝细胞生长和白蛋白分泌功能在短期内(1~5 d)与高糖DMEM组没有明显差异;RPMI1640组肝细胞的生长和功能则明显低于前两组(P<0.05)。结论:体外培养的肝细胞活力和纯度均较高,体外培养后细胞功能正常,是一种实用的体外研究肝细胞良好的细胞学模型。     

生物可降解支架在经皮冠状动脉介入治疗中的应用

生物可降解支架是近年来用于经皮冠状动脉介入治疗的新型支架。该类支架具有晚期血栓形成发生率低、对边支影响小、对血管内皮功能影响小等优点。本文对生物可降解支架所使用的材料、目前使用的生物可降解支架种类、临床试验结果、各种冠脉病变时生物可降解支架的使用等作一简述。     

组织工程皮肤支架材料的研究和发展

组织工程化皮肤是指由细胞或细胞外基质或由两者共同结合组成的皮肤产品,是应用生命科学和工程学的原理与技术将种子细胞与适当的支架材料相结合构建出的用于修复、维护和改善损伤皮肤组织功能和形态的生物替代物。组织工程支架材料在人工皮肤的构建中起着重要作用,支架材料的研究及其优选是人工皮肤的重要研究内容之一,按化学性质可将其分为合或类与生物类,它们各有优缺点,现分别将其研究现状及其发展作一综述。     

中国牙周组织工程进展

牙周组织工程就是将体外培养的高浓度、功能相关的活性细胞种植于具有良好生物相容性和生物降解性的细胞外基质材料上，在生长因子的作用下，经过一段时间的培养，将这种细胞与生物材料复合体植入机体牙周病损部位，以形成新的具有其原来特殊功能和形态的相应牙周组织，达到修复创伤和重建功能的目的。笔者通过复习近年来国内牙周组织工程的文献，将其主要的3个方面研究成果综述如下。     

新型生物玻璃的细胞生物学评价

目的对生物玻璃BG20多孔支架进行细胞相容性研究。方法采用L929小鼠成纤维细胞体外培养，按细胞增殖度法，取7种浓度BG-20浸提液进行检测，分别于2、4、6、8、10d用四唑盐(MTT)比色法计数，计算细胞相对增殖度，用6级毒性分类法评级；L929细胞接种于BG20多孔支架体外培养，分别于3d、7d取材，扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况。结果Bp20浸提液在高浓度时对细胞增殖有轻度抑制，低浓度对细胞增殖有一定的促进作用。BG20毒性评级为0～1级；扫描电镜示细胞在BG20支架上粘附良好，形态正常。结论BG20作为一种新的多孔支架材料具有良好的细胞相容性。     

抗肿瘤活性生物衍生骨的制备及特性研究

目的 制备同时具有抗肿瘤药物缓释特性及修复骨缺损能力的抗肿瘤活性生物衍生骨,并通过体外实验研究该材料的缓释特性.方法 取猪肱骨近端松质骨,经处理制成去抗原的生物衍生骨支架材料,再与顺铂明胶溶液复合,制成抗肿瘤活性的生物衍生骨材料;将该材料进行体外缓释实验,测定缓释液中的顺铂浓度并进行相应的肿瘤细胞抑制实验.结果 去抗原...     

组织工程在小儿骨科的应用瞻望

在小儿骨科领域中，有许多复杂的先天性畸形，治疗过程中需要各种修复材料进行结构和功能的重建；对缺损的修复多采用自体组织移植，效果满意。但自体组织移植必须从健康部位切取组织修复病损组织，增加创伤，对供区造成新的缺损，且自体组织供区也十分有限，因此这不是最佳的治疗方法。Langer等在大量实验的基础上于1993年首先系统地阐述了“组织工程”这一概念。其基本方法是将体外培养的高浓度组织细胞扩增后吸附于一种生物相容性良好，并可被机体逐步降解吸收的细胞外基质上。该材料为细胞提供生存的三维空间，在这种细胞生物支架逐步降解吸收过程中，种植细胞继续增生繁殖，形成了具有其原来特定功能和形态的相应组织和器官，达到修复和重建缺损组织结构和功能的目的。     

夹层胶原"三明治"法短期体外培养肝细胞

目的研究胶原、表皮生长因子对新鲜分离SD大鼠肝细胞活率、形态和功能的影响。方法采用胶原酶二步原位循环肝脏灌注法分离SD大鼠肝细胞,测定不同条件培养后各组肝细胞的活性及功能。结果双层胶原及双层胶原 表皮生长因子组培养后细胞活性、细胞DNA含量及细胞功能均优于普通培养组(P＜0．05)。结论双层胶原体外培养体系提供了稳定的三维立体生长环境,有利于细胞在体外长期保存。     

肝细胞体外培养及其在药物毒理学研究中的应用

目的对肝细胞体外培养及其在毒理学中的应用进行综述。方法查阅相关文献,归纳体外肝细胞模型制作及分类,总结肝细胞模型的应用方向、评价指标。结果与结论肝细胞体外培养方法成熟,在药物毒理学研究中的应用广泛,是未来药物毒理学研究的一大方向。     

胶原三维培养下卵巢癌细胞生物学性状研究

目的 建立卵巢癌HO-8910PM细胞胶原Ⅰ三维培养模型,对胶原Ⅰ基质中卵巢癌HO-8910PM细胞的形态、活力及功能进行研究,为体外卵巢癌的研究提供参考。方法 透射电镜表征胶原Ⅰ结构特点,以胶原Ⅰ为支架材料,建立卵巢癌细胞体外三维培养模型;倒置显微镜观察卵巢癌细胞生长形态及增殖情况;钙黄绿素-AM染色观察胶原Ⅰ基质中卵巢癌细胞的活力;ELISA检测二维培养及三维培养中卵巢癌细胞血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的分泌。结果 透射电镜下可见胶原Ⅰ呈交联网络状结构,胶原Ⅰ基质中卵巢癌细胞集聚成不规则团状,细胞在胶原Ⅰ中的活力较好,细胞与基质具有良好的生物相容性;与二维培养细胞比较,三维培养体系中VEGF-A、EGF和IGF-1的分泌量均较高,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论 胶原Ⅰ具有良好的结构与性能,适宜于卵巢癌细胞体外三维培养,并能较好地维持卵巢癌细胞的形态和功能。