调节Th1／Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的研究外源性细胞因子调节Th1/Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响.方法分别将IFN-γ+IL-4单抗或IL-4+IFN-γ单抗与脑胶质瘤细胞共同孵育,半定量RT-PCR方法观察Th1/Th2类细胞因子基因表达的变化,并用MTT方法检测其对脑胶质瘤细胞生长情况的影响.结果脑胶质瘤细胞Th2类细胞因子的表达明显强于Th1类(P＜0.01),IFN-γ+IL-4单抗可以增强IFN-γ的表达,抑制脑胶质瘤细胞的增殖并呈剂量依赖性关系(P＜0.01);IL-4+IFN-γ单抗则使Th2类细胞因子的表达有所增强,促进脑胶质瘤细胞的增殖,也呈剂量依赖性关系(P＜0.01).结论 外源性的细胞因子或细胞因子单抗可以调节Th1/Th2平衡,逆转Th2优势,影响脑胶质瘤细胞的生长.     

肺癌患者的Th1/Th2免疫反应状态

目的 了解不同病理类型肺癌患者辅助性T细胞亚群(Th1/Th2)的反应状态,探讨肺癌发生发展的免疫机制.方法 收集不同病理类型肺癌患者77例(腺癌30例,鳞癌28例,小细胞肺癌19例)、肺部良性疾病患者33例、健康志愿者45例的血清,分成肺癌组、良性组和正常组,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组外周血中Th1型细胞因子白细胞介素2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的浓度.结果 3种不同病理类型肺癌患者外周血中IL-2、IFN-γ浓度均显著低于正常组,IL-4、IL-10浓度显著高于正常组(P＜0.05).良性组外周血Th1/Th2型细胞因子浓度与正常组比较差别无统计学意义(P＞0.05).结论 腺癌、鳞癌、小细胞肺癌等3种不同病理类型的肺癌患者外周血中的免疫细胞均呈现Th2型免疫反应优势状态,使肺癌逃逸免疫,是肺癌发生发展的可能免疫机制.     

尖锐湿疣患者外周血Th1／Th2细胞因子及局部NK细胞的变化

目的 通过对尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)患者外周血Th1/Th2细胞因子水平及CA皮损内CD4、CD8、CD16、CD57表达的检测,探讨细胞免疫功能对CA发病的影响.方法 采用流式细胞术和细胞内细胞因子染色(ICCS)法检测40例CA患者和20例正常对照者外周血CD4+淋巴细胞内Th1/Th2细胞因子(IL-2、IL-4、IL-12和IFN-γ)水平,同时采用免疫组织化学方法对CA皮损及正常对照者包皮环切组织CD4、CD8、CD16及CD57的表达进行检测.结果 CA患者外周血IL-2+、IL-12+、IFN-γ+-CD4+T细胞百分率均显著低于正常对照组(均P<0.01),IL-4+-CD4+ T细胞百分率稍高于正常对照组,但差异无统计学意义,Th1/Th2比值显著低于正常对照组(P<0.01),说明在CA发病过程中存在Th1向Th2漂移.疣体组织中CD4+T细胞、CD8+T细胞均增高,但CD4+/CD8+比值低于对照组织;CD16、CD57表达较正常组织中减少,说明病损局部NK细胞较正常组织少.结论 CA患者存在外周血Th1/Th2失衡及病损局部细胞免疫功能下降,可能是导致CA长期不愈,反复发作的原因之一.     

女性生殖器尖锐湿疣患者外周血Th1/Th2水平的研究

目的观察女性生殖器尖锐湿疣（CA）患者外周血Th1/Th2细胞因子水平与其相应的组织内Th1/Th2细胞因子水平的相关性,探讨不同感染阶段外周血Th1/Th2细胞因子的变化。方法选取正常对照组20例,女性生殖器CA初发组37例,复发组25例,组织匀浆标本20例,用ELISA法测定各组血清标本和组织标本的细胞因子IL-2、IL-12、IL-4、IL-10的浓度,分析血清各细胞因子与其相应的组织内细胞因子的相关性,比较正常组与CA初发组和复发组的血清细胞因子水平的变化。结果CA组织内细胞因子IL-2、IL-12、IL-4、IL-10水平与相应的血清细胞因子水平密切相关（P〈0.05）;血清Th1细胞因子水平在CA初发组和复发组明显低于正常对照组,而Th2细胞因子水平明显高于正常对照组。结论CA患者血清Th1/Th2细胞因子水平能反映病灶局部的Th1/Th2细胞因子水平。CA患者血清Th1细胞因子水平明显下降,Th2细胞因子水平相对上升,Th1/Th2比值明显下降,导致Th1/Th2失衡。     

食管鳞癌患者手术前后外周血Th1、Th2类细胞因子的变化及其临床意义

目的 探讨食管鳞癌病人外周血Th1和Th2类细胞因子的表达状况以及手术对该表达状况的影响。方法 采用ELISA法检测30例健康对照者和46例食管鳞癌病人术前、术后8 d、术后30 d的外周血单个核细胞(PBMC)培养液上清中Th1类细胞因子白介素2(IL-2)、γ干扰素(INF-γ)和Th2类细胞因子白介素4、6、10(IL-4、IL-6、IL-10)的表达情况。结果 食管鳞癌病人外周血Th1类细胞因子IL-2、INF-γ的表达明显低于对照组(P<0.05),Th2类细胞因子IL-6的表达明显高于对照组(P<0.05),表达趋势与肿瘤的TNM分期相关;手术后上述表达情况逆转。结论 食管鳞癌病人外周血Th2细胞功能增强,Th1细胞功能减弱;手术可逆转食管鳞癌病人Th1、Th2状态;Th1和Th2类细胞因子的动态检测可能为反映食管癌预后和转移或复发的指标。     

重组人干扰素α2b对肝癌术后患者Th1／Th2平衡状态的影响

目的研究重组人干扰素α2b对原发陉肝癌（PHC）手术后患者Th1／Th2平衡状态的影响。方法原发性肝癌术后48例患者随机分为两组,采用重组人干扰素α2b治疗为研究组25例。单纯切除肝癌组织为对照组23例。以白细胞介素2（IL-2）代表Th1类细胞因子,白细胞介素4（IL-4）代表Th2类细胞因子,以ELISA方法检测研究组患者术前和术后20d后外周血IL-2、IL-4的表达。结果研究组术前Th1类细胞因子IL-2[（47．32±12．48）pg／ml],Th2类细胞因子IL-4[（253．32±22．53）pg／m1]与对照组Yh1类细胞因子IL-2[（45．24±11．21）pg／ml]、Th2类细胞因子IL-4（246．76±24．34）pg／ml比较,表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）;术后20d,研究组Th1类细胞因子IL-2[（142．34±13．32）pg／ml]显著增高,与对照组Th1类细胞因子IL-2[（47．53±11．32）pg／ml]组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。研究组Th2类细胞因子IL-4[（264．34±24．32）pg/ml]略增高,与对照组Th2类细胞因子IL-4[（254．53±24．43）pg／ml]组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,代表Th平衡的Th1／Th2（IL～2／IL-4）比值,研究组与对照组比较明显增高（P〈0．05）。结论短期应用重组人干扰素α2b可促使肝癌手术患者免疫状态向Th1状态漂移,改变了Th1/Th2的平衡状态。     

肺癌Th1/Th2反应状态及黄芪的调节作用

目的探讨肺癌细胞株以及荷瘤机体外周血单个核细胞(PBMC)Th1/Th2免疫反应状态,观察中药黄芪(AG)对两者Th1/Th2状态的作用.方法①3种人肺癌细胞株(鳞、腺、小细胞癌)各分为5组,其中1组即刻冻存待测,其余4组分别为不加药对照组、加5%AG、10%AG、20%AG组,培养48h,收集细胞;②采集并分离肺癌患者和健康志愿者的PBMCs,各分为4组其中1组即刻冻存待测,其余3组分别为不加药对照组、加10%AG、20%AG组,培养48h,收集细胞.以II-2,IFN-γ代表Th1型细胞因子,II-4,IL-6,IL-10代表Th2型细胞因子,用RT-PCR方法检测各组肺癌细胞株和肺癌患者PBMC中Th1/Th2型细胞因子m-RNA的表达.结果①3种肺癌细胞株的Th1型因子IFN-γ和IL-2均无表达,Th2型因子IL-4、IL-6、IL-10则均表达;经与黄芪培养后,小细胞肺癌株在3种不同浓度AG存在时均可出现IFN-γ表达,在5%AG时可同时出现IL-2的表达,IL-4、IL-6的表达被抑制;鳞癌和腺癌细胞株经黄芪培养后,其Th1/Th2型细胞因子的m-RNA表达与培养前差异无显著性(P>0.05);②肺癌患者PBMC中,II-4、IL-6和II-10表达阳性率显著高于正常对照(P均<0.05),而IL-2无1例表达(0/23),IFN-γ仅1例表达;经与黄芪培养后(两种浓度),肺癌患者Th2型因子与未加AG培养组相比,IL-4、IL-6和IL-10的表达率下降(P均<0.05);而IL-2的表达率显著提高(P<0.05).结论无论肺癌细胞株还是荷瘤机体外周血的免疫细胞均呈现Th2型免疫反应的优势状态;黄芪对于肺癌细胞株和宿主PBMCsTh1/Th2的状态有良好的调节作用,可使肺癌细胞株和肺癌患者PBMCs的Th2型优势免疫反应向TM方向逆转.     

子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1、Th2型细胞因子功能变化研究

目的研究子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1/Th2细胞因子功能变化.方法子痫前期患者29例,正常妊娠妇女15例,分离外周血单个核细胞,体外培养72小时,ELISA方法检测培养上清液中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ及Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平.结果子痫前期组PBMC培养上清液中,Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平(259.4±90.5)pg/mL,(452.0±122.6)=pg/mL与正常妊娠组(140.3±73.2)pg/mL,(307.5±106.4)pg/mL相比,显著升高,分别为P＜0.01,P＜0.05;Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平(28.8±7.7)pg/mL,(178.9±98.6)pg/mL与正常妊娠组(41.9±11.4)pg/mL,(316.1±284.6)pg/mL相比,显著下降,分别为P＜0.01,P＜0.05.结论子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1型细胞因子功能增强,分泌Th2型细胞因子功能减弱.     

黄芪对慢性乙型肝炎患者外周血Th1/Th2功能平衡的影响

目的探讨黄芪对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者外周血Th1/Th2功能平衡的影响。方法CHB患者和健康人的外周血单个核细胞体外经黄芪作用,培养48h后,用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测培养上清中Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)的含量变化。结果在黄芪诱导下:①健康对照组和CHB患者组Th1类细胞因子明显增高(P<0.01),Th2类细胞因子水平无明显变化(P>0.05);②CHB患者组IFN-γ水平明显高于健康对照组(P<0.01),IL-2水平两组比较差异无统计学意义(P>0.05);③Th2类细胞因子水平CHB患者组比健康对照组高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论黄芪可明显提高CHB患者Th1类细胞因子(IFN-γ、IL-2)的产生水平,改善CHB患者Th1/Th2功能失衡状态,可使CHB患者Th2优势应答状态部分得到纠正。     

对肠易激综合征患者外周血Th1、Th2型细胞因子失衡的探究

目的：研究肠易激综合征（ms）患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）产生Th1、Th2型细胞因子的水平变化。方法：采用ELISA法检测IBS患者外周血PBMC体外培养上清液中Thl型细胞因子IL-12、IFN-1及Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平。结果：（1）IBS组IFN-1、IL-12水平与正常组比较有升高趋势，但无显著差异（P〉0．051；与正常组比较，IBS组IL-4及IL-10水平均显著降低（P〈O．05）。②同正常组比较，pIBS组IFN-1水平较正常组显著升高（P〈0．05）；pIBS组IL-4、IL-10水平较正常对照组显著降低（P〈0．01）。同正常组比较，非DIBS组Th1型、Th2型细胞因子均无显著性差异P〉0．05。结论：腹泻型IBS患者外周血Thl、Th2型细胞因子产生了失衡，呈Th1优势反应；感染因素影响了Th1／Th2失衡；腹泻型IBS患者焦虑状态亦可能影响了Th1/Trh2失衡；抑郁状态与Th1／Th2反应关系不大。     

Th17细胞相关因子在人脑胶质瘤中的测定

目的了解Th17细胞相关因子在人脑胶质瘤组织中的表达,确定Th17的存在及浸润程度。方法应用免疫组化二步法检测Th17细胞相关因子CD4+和IL-17在34例脑胶质瘤和10例正常脑组织病理切片中的表达,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)技术,检测IL-17mRNA、RORγtmRNA在人脑胶质瘤组织中的表达量。结果 IL-17、CD4+在正常脑组织表达不明显,在低级别脑胶质瘤中表达较少,CD4+和IL-17在高级别脑胶质瘤中表达明显,组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。IL-17mRNA和RORγt mRNA在正常脑组织、低级别、高级别脑胶质瘤中的表达量随恶性程度升高而增加,组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论脑胶质瘤中存在Th17的浸润,其表达量随脑胶质瘤恶性程度的升高而增加。     

老年非小细胞肺癌患者Th1/Th2漂移状态与T-bet/GATA3基因表达的关系

目的探讨老年非小细胞肺癌患者Th1/Th2漂移状态及其与T-bet、GATA3基因表达的关系。方法选取老年非小细胞肺癌患者及健康受试者各120例,双抗夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测各组血浆中Th1类细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和Th2类细胞因子IL-4、IL-10的浓度;梯度离心法分离出单个核细胞(PB-MC),采用RT-PCR方法检测其T-bet、GATA3mRNA水平。结果老年非小细胞肺癌患者Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2水平与老年健康受试者比较明显下降[(10.28±0.88)pg/mL vs(16.94±1.05)pg/mL;(9.06±0.85)pg/mL vs(13.96±0.87)pg/mL)],差异均具有统计学意义;老年非小细胞肺癌患者Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平与老年健康受试者比较明显升高[(5.98±0.98)pg/mL vs(3.89±0.28)pg/mL;(47.59±2.89)pg/mL vs(40.47±1.28)pg/mL)],差异均具有统计学意义。老年非小细胞肺癌患者Th1型核转录因子T-bet mRNA的表达水平较老年健康受试者下降[(0.85±0.11)vs(1.46±0.09)];老年非小细胞肺癌患者Th2型核转录因子GATA3mRNA的表达水平较老年健康受试者明显增高[(1.51±0.12)vs(0.89±0.10)],差异均具有统计学意义。结论老年非小细胞肺癌患者存在着Th2漂移现象,该现象可能与影响Th1/Th2的极化状态的关键因子T-bet和GATA3的表达失常有关。     

脑胶质瘤生物学特性的实验研究

为探讨脑胶质瘤生物治疗的新方法,本研究从四个不同方面对脑胶质瘤的生物学特性进行了研究。结果表明,人脑胶质瘤在IL-6的自分泌环路,打断该环路可抑制脑胶质瘤的生长;脑胶质瘤组织和脑胶质瘤细胞均存在明显的Th2类细胞因子优势表达,Th2向Th1方向逆转后可以抑制脑胶质瘤细胞的增殖;红霉素在逆转耐药中以100μg/ml疗效最佳;血管生长抑制因子（angiostatin）不仅能在体外抑制内皮细胞生长,而且在体内亦有明显的抑瘤作用。上述研究结果为脑胶质瘤的治疗提供了新的思路,将有望应用于临床,提高脑胶质瘤患者的治疗效果。     

干预协同刺激信号对反复自然流产患者Th1/Th2转换影响的体外研究

目的 探讨干预协同刺激信号对反复自然流产患者Th1／Th2转换的影响。方法 用人绒毛膜癌细胞株JEG-3制备滋养细胞抗原;用该抗原刺激反复自然流产患者外周血单个核细胞,并分为两组：实验组加入细胞毒性T细胞相关抗导4（CTLA4Ig,10μg／mL组和1μg／mL组）,对照组加IgG（10μg／mL组和1μg／mL组）,培养72h,分别取24h和72h上清液,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测上清液中白介素2（IL-2）、干扰素γ（IFN-γ）和白介索4（IL-4）的水平。结果 与同质量浓度的对照组相比,CTLA4Ig组产生的IL-4水平明显高于对照组（P〈0．05）,而产生的IL-2水平明显低于对照组（P〈0．05）,IFN-γ水平两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。与CTLA4Ig1μg／mL组相比,CTLA4Ig10μg／mL组产生的IL-4水平明显升高（P〈0．05）,IL-2水平明显降低（P〈0．05）,IFN-γ水平两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 CTLA4Ig能通过阻断CD80／CD86共刺激信号,使反复自然流产患者Th1／Th2细胞因子向Th2型细胞因子偏移。     

小窝蛋白-1的表达与胶质瘤细胞增殖的相关性研究

目的 研究小窝蛋白-1(caveolin-1)在人胶质瘤中的表达,探讨其在胶质瘤的发生、发展及细胞增殖中的作用.方法 应用免疫组化SP法检测80例胶质瘤和9例正常脑组织中caveolin-1与增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况.结果 caveolin-1在正常脑组织中全部阳性表达.80例胶质瘤中39例caveolin-1呈阳性表达,其在低级别胶质瘤中的阳性表达率高于高级别胶质瘤(P＜0.05);PCNA在正常脑组织中未见表达,80例胶质瘤中55例呈阳性表达,其在高级别胶质瘤中的阳性表达率高于低级别胶质瘤(P＜0.05).caveolin-1与PCNA在胶质瘤中的表达呈负相关性(r=-0.368,P＜0.01).结论 caveolin-1在胶质瘤中的表达对肿瘤细胞增殖起抑制作用,为胶质瘤的基因治疗提供了一个新的靶点.PCNA可作为反映胶质瘤细胞增殖、恶性程度及预后的指标之一.     

喉癌患者外周血Th1／Th2细胞因子的表达及其临床意义

目的 探讨喉癌患者外周血CD3T细胞分泌细胞因子的水平变化,分析Th1和Th2细胞的细胞因子免疫活动。为肿瘤的免疫治疗提供实验依据。方法采用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,特异性抗原抗体结合,最后应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。用酶联免疫吸附法（ELISA）检测相应的细胞因子的方法进行研究。结果喉癌患者Th1型细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-12（IL-12）表达水平较正常对照组显著降低,Th2型细胞因子白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-10（IL-10）表达水平较正常对照组升高,差异有统计学意义。肿瘤坏死因子-α（TNF—α）表达水平较正常对照组升高,差异有显著性。喉癌患者体内Th2型细胞因子模式占优势状态。结论肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。