聚合酶链反应与ELA法检测560例HBV结果分析

我院用ＰＣＲ和ＥＩＡ法同时对 5 6 0例血清进行ＨＢＶ测试 ,进行两种方法敏感度的可行性论证。1　材料和方法5 6 0份标本来自门诊及住诊患者 ,其中 96份以前ＥＩＡ法测定为ＨＢｓＡｇ阳性 ,46 4份为随机标本。ＨＢＶＥＩＡ试剂盒购于上海科华公司 ,批号 981 1 1 7,灵敏度Ｉｎｇ/ｍｌ;为合格部颁标准 ;乙肝病毒基因检测试剂盒购于上海复华公司。ＨＢＶＥＩＡ法、ＨＢＶ -ＤＮＡＰＣＲ法均按试剂说明书进行操作。2　结果34例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 -ＨＢＣ ,阳性 ,2 8例ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＢｅ、抗 -ＨＢｃ ,阳性 ,2 3例ＨＢｓＡｇ、抗 …     

乙肝患者HBsAg检测假阴性探讨

在应用ＥＬＩＳＡ法进行乙肝病毒标志物检测中 ,会出现ＨＢｓＡｇ阴性而ＨＢｅＡｇ和抗 -ＨＢｃ阳性的少见模式结果。我们选用了 30份该模式结果患者血清 ,将血清分别作 1∶2、1∶5、1∶10生理盐水稀释后 ,再做ＨＢｓＡｇ检测 ,其结果报告如下。1　材料和方法酶标仪ＢＩＯ -ＴＥＫ (美国 ) ;乙肝 5项试剂盒为上海科华生物技术有限公司生产 ;选我院住院及门诊患者 30例 ,乙肝 5项结果为ＨＢｓＡｇ阴性 ,ＨＢｅＡｇ和抗 -ＨＢｃ阳性。将所选用可疑标本用生理盐水作 1∶2、1∶5、1∶10稀释后 ,用ＥＬＩＳＡ方法再做ＨＢｓＡｇ检测。2　结果ＨＢ…     

乙肝疫苗接种后儿童的HBV血清标志物检测

我所用酶联免疫吸附法 (ＥＬＩＳＡ)对 4738名接种过乙肝疫苗儿童血清标本进行乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)部分血清标志物检测 ,并对ＨＢｓＡｇ阳性儿童ＨＢＶ血清标志物模式进行了分析。1　材料和方法1.1　标本来源　 1999年 1月～ 2 0 0 0年 12月来我所作入托体检的 2～ 5周岁儿童血清样本 4738例 (男 2 5 0 8例 ,女 2 2 30例 )。1.2　仪器和试剂　采用Ｍｅｔｅｒｔｅｃｈ公司的∑ 96 0酶标仪。ＨＢｓＡｇ及其抗体(抗 ＨＢｓ)、ＨＢｅＡｇ及其抗体 (抗 ＨＢｅ)、乙肝核心抗体 (抗 ＨＢｃ)测定用试剂盒 ,均为上海实业科华生物技术有限公司提…     

无偿献血者抗-HCV流行状况的初步调查

近年报道(1～ 5) 我国各地丙型肝炎病毒 (ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ,ＨＣＶ)感染情况不一 ,不同人群抗 -ＨＣＶ阳性率在1 .3%～ 2 1 .7%。而且无偿献血人群的抗 -ＨＣＶ阳性率为 0 .6 %～ 1 .2 6 % (6) 。为了解南通市区献血者抗 -ＨＣＶ感染现状 ,作者统计了南通市红十字中心血站所收集的 1 1 1 2 5份血液标本的检测结果报道如下。1 材料和方法血液标本 1 1 1 2 5份来源于 2 0 0 1年 1～ 1 2月南通市区街头无偿献血者 ,ＨＢｓＡｇ阴性 (金标法初筛 )并排除有“肝病”史或有转氨酶升高者 ,按常规进行抗 -ＨＣＶ检测。抗 -ＨＣＶ检测…     

新疆焉耆地区无偿献血者与个体供血者抗-HCV血清学检测结果分析

为了深入了解无偿献血者与个体供血者之间的抗 -ＨＣＶ的差异情况 ,为无偿鲜血工作的开展提供依据 ,我们对新疆焉耆地区 1995～ 2 0 0 1年的无偿献血者与个体供血者的血清进行了抗 -ＨＣＶ检测与分析 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　标本来源　农二师焉耆中心血站。其中无偿献血者血样 70 98人份 ,个体供血者血样 2 789人份 ,年龄 18～ 4 3周岁。1.1.2　试剂　上海科华生物有限公司提供抗 -ＨＣＶ检测试剂盒。北京万泰药业有限公司提供抗-ＨＣＶ试剂盒。1.1.3　仪器　酶标仪 ,荷兰产ＭＲ - 4 10 0型全自动恒温酶标仪。1.1.4　洗…     

标本导致ELISA法检测HBeAg假阳性分析

在日常工作中 ,应用ＥＬＩＳＡ法检测乙型肝炎病毒血清学标志物时 ,发现有时会出现抗 ＨＢｓ和ＨＢｅＡｇ同时阳性或单项ＨＢｅＡｇ阳性等罕见模式。为确保检验结果的准确 ,我们将标本离心后 (30 0 0ｒ/ｍｉｎ 10ｍｉｎ)复检ＨＢｅＡｇ ,结果均为阴性。为此 ,我们特作如下实验     

Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响(摘要)

为了解不同的Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响 ,用成年ＳＤ大鼠脊髓Ｌ5节段制作冰冻切片 (2 0 μｍ)并分为两组 ,分别按程序 1,2用ＮＧＦ抗体 (1∶30 0 0 )作免疫组织化学ＡＢＣ法染色 .程序 1:0 0 5ｍｏｌ/ＬＰＢＳ (ｐＨ 7 2 ) ,5ｍｉｎ× 3;3%Ｈ2 Ｏ2 ,室温 ,30ｍｉｎ ;0 0 5ｍｏｌ/ＬＰＢＳ (ｐＨ 7 2 ) ,5ｍｉｎ× 3;0 4 %ＴｒｉｔｏｎＸ - 10 0 ,15ｍｉｎ ;2 %羊血清 ,37℃ ,30ｍｉｎ ;Ｉ抗兔抗ＮＧＦ ,(1:30 0 0 ) ,37℃ ,2ｈ ;0 0 5ｍｏｌ/ＬＰＢＳ (ｐＨ 7 2 ) ,5ｍｉｎ× 3;Ⅱ抗羊抗兔ＩｇＧ (1:2 0 0 ) ,37℃ ,1ｈ…     

应用立可读ELA检测乙肝标志物出现假象原因的探讨

我们应用立可读ＥＬＡ在对 5 2 0 0例患者血清标本进行乙型肝炎标志物 (ＨＢＶＭ)检测时 ,发现其中有 30 0例ＨＢｅＡｇ阴性而ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ、抗 -ＨＢｅ及抗 -ＨＢｃ阳性的病例 ,现报告其血清学检验结果 ,并对这一结果出现的原因进行初步分析。1　材料和方法30 0例血清标本来自我院门诊和住院患者。所有仪器为芬兰ＤＥＮＬＥＹ洗板仪 ,芬兰ＤｅｎｌｅｙＤｒａｇｏｎＭＫ2 酶标仪。试剂为洛阳华美生物工程公司的立可读一步法试剂盒。操作严格按试剂盒说明书进行 ,样品孔的ＯＤ值≥阴性对照平均ＯＤ值× 2 .1时 ,该孔样品ＨＢｓＡｇ…     

复检血液标本中HBsAg阳性结果分析

为了进一步提高血液质量 ,保证输血安全 ,从 1999年起我们采用了灵敏度和特异性均较高的进口试剂对血液的ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＣＶ、抗 -ＨＩＶ检测进行复检。在 1999年 7月～ 11月期间 ,我们共复检了 2 0 5 6 7份标本 ,对初次复检阳性并再次双孔复试阳性的血液进行淘汰。在这其中因ＨＢｓＡｇ阳性而被淘汰的血液有 76份 (0 4% )。在复检中使用进口试剂后与原来相比明显地提高了阳性检出率。为了了解初检 ,复检的差异是否确实因试剂的灵敏度而产生的 ,我们对其中收集到的 45份因ＨＢｓＡｇ阳性而被淘汰的血液标本用三种试剂做了ＨＢｓＡｇ检…     

一次性密度梯度超速离心分离人血清脂蛋白及无脂血清

密度盐溶液配制　　将分析纯之ＮａＣｌ、ＫＢｒ在 12 5℃干燥 2 4ｈ后 ,将ＮａＣｌ配制成密度为 1 0 0 6的溶液 ,而干燥ＫＢｒ用于调定血清密度。1.1.3　人血清标本　　正常人新鲜全血 ,在室温放置 1ｈ使凝固 ,然后在 4℃、5 0 0 0ｒ ｍｉｎ离心 30ｍｉｎ ,取出血清 ,加ＮａＮ3 (终浓度为 0 0 1% )。1.1.4　试剂　　氨基黑 10Ｂ、苏丹黑 10Ｂ均为北京化工厂产品 ,其余试剂均系分析纯。1.2　方法1.2 .1　人血清脂蛋白的快速分离　　取正常人混合血清 ,定量移入烧杯中 ,根据ｄ =ｍ ｖ ,用万分之一分析天平根据称量法测出血清初始密度ｄｏ ,…     

HBsAg、抗-HCV和抗-HIV诊断试剂质量评估

血站对提高ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＣＶ和抗 -ＨＩＶ检出率和检出的准确性 ,需要各环节共同完成 ,其中使用高质量、合格的ＥＬＩＳＡ诊断剂是影响检验工作质量的关键因素 ,我院对我市血站使用的酶免试剂按照卫生部需求进行批批检测工作。对2 0 0 1年 1月— 2 0 0 2年 2月酶免试剂批检结果进行评估 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　检测参考品　ＨＢｓＡｇ血清盘 :阴性参考品 2 0份 ,阳性参考品 3份 ,灵敏度参考品 4份 (0 .2ｎｇ/ｍｌ、0 .5ｎｇ/ｍｌ、1.0ｎｇ/ｍｌ、2 .0ｎｇ/ｍｌ)精密性参考品 1份 ;抗 -ＨＣＶ血清盘 :阴性、阳性参考品各 40份…     

HBsAg阳性HBV感染者血清学不同标志物组合模式的意义

笔者 1997年 10月至 1999年 5月 ,用ＥＬＩＳＡ法对 80 0例ＨＢｓＡｇ健康携带者 ,进行了ＨＢＶ感染的五种血清学标志物(ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｅ、抗 ＨＢｃ)检查 ,并对出现的不同标志物组合模式进行了分析。1　材料与方法1.1　材料　 80 0例标本均为在我院婚前健康查体筛检出的ＨＢｓＡｇ健康携带者 ,男 5 6 9例 ,女 2 31例 ,年龄 2 3～ 37岁 ,平均2 6岁。1.2　方法　采用ＥＬＩＳＡ法。试剂盒由上海科华生物制品公司提供 ,严格按说明书操作。2　结果80 0例ＨＢｓＡｇ阳性者中 ,抗 ＨＢｓ阳性 8例 (1.0 % ) ,ＨＢｅ…     

红细胞引起ELISA法检测乙肝表面抗原假阳性结果

ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ对标本的要求是 :空腹抽血、标本不能溶血。我们在实际操作过程中溶血标本不影响测定结果 ,但遇到有些血标本量太少 ,测定ＨＢｓＡｇ吸血清时有微量红细胞吸入 ,使结果产生假阳性现象 ,现就我们实验的结果报道如下 :1　材料与方法1.1　仪器 :美国伯乐 550型酶标仪 ,美国伯乐 1575型洗板机。1.2　试剂 :ＥＬＩＳＡ法测定乙肝表面抗原试剂合 ,上海实业科华生物技术有限公司提供。1.3　取 2 0份ＨＢｓＡｇ阴性标本 ,用经离心后无红细胞的血清测定ＨＢｓＡｇ,然后 ,仍用以上 2 0份标本 ,加样时吸入微量红细胞测定ＨＢ…     

溶血对抗-HCV检测结果的影响

1　材料和方法1 1　取样　随机抽取志愿献血者静脉全血1毫升 /人 ,取 0 5毫升置于干燥洁净的试管内 ,凝固后分离血清 ;余下 0 5毫升加入另一干燥洁净试管内 ,用竹签搅拌 ,使其溶血后分离血清。1 2　试剂　检测丙型肝炎病毒抗体的ＥＬＩＡＳ试剂盒 ,济阳华美生物工程公司 ,批号 2 0 0 0 30 8,有效期内使用。1 3　仪器　奥地利ＳＬＴ酶标仪和洗板机 ,检测波长 45 0ｎｍ。1 4　操作方法　在取样当天 ,同时检测同一献血者的非溶血和溶血血清的抗 ＨＣＶ ,操作方法按试剂盒说明进行。附表　溶血与非溶血标本抗 ＨＣＶ的检测结果(Ｎ =158)ＯＤ…     

1999年献血员血液HBsAg、抗-HCV、ALT复检结果分析

为确保血液质量和输血安全 ,有效预防和控制输血后肝炎的发生 ,国家卫生部 1998年发布了 2号部长令即《血站管理办法 (暂行 )》 ,以加强对采供血机构的管理 ,严格筛选献血者 ,严格对血液进行初检和复检。现就 1999年初检合格采集的血液作ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＣＶ、ＡＬＴ复检调查分析报告如下。1　材料与方法1.1　对象　 1999年辖区 6县初检合格后血液采集标本复检5 6 84人次。1.2　方法　检测ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＣＶ用ＥＬＩＳＡ法试剂盒 ,由上海科华公司和厦门新创试剂厂提供 ;ＡＬＴ检测 ,采用改良赖氏法 ,试剂由上海科欣公司提供 ,ＡＬＴ…     

无偿献血抗-HCV阳性标本及灰带区样本的处理

1　材料与方法我站抗-HCV检测初、复检一方出现阳性结果或OD/cutoff值超过0 8者视为可疑,如连续待检2次仍为阳性,均应予以报废。如何确认初、复检不一致的阳性标本及如何处理灰带区的血样标本,是保证安全输血的重要组成部分,因此,笔者于2 0 0 3年1月至5月,在本站无偿献血的标本中随机抽查了部分初、复检不一致的阳性标本,用分片段酶联免疫测定对ELISA进行对比进一步确定,同时对370 6份血样标本进行了连续4 2次的测试质控OD值,对低值质控样本做了再分析。试剂:初检试剂(为厦门新创抗-HCV酶联免疫诊断试剂盒) ,复检试剂(北京医科大学抗…     

ELISA法检测乙肝两对半中两种判断结果的探讨

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)标志物检测是目前国内各实验室开展的常规项目 ,包括ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ。在乙肝两对半检测中 ,目前各实验室都是按试剂盒使用说明书的要求来判断结果 (以下简称方法 1) ,我们在实际工作中 ,发现可用卫生部提供的乙肝两对半临界值血清为阳性截割值对结果进行分析 (以下简称方法 2 )。为了探讨两种方法对结果判定的不同效果 ,我们用上述两种方法分析了 12 9份不同标本 ,并与美国Ａｂｂｏｔｔ公司ＡＸＳＹＭ化学发光仪检测结果进行对比评价。1　材料与方法1.1　标本来源 :检测血清标…     

体外循环围术期胃液pH的监测及临床意义

1　临床资料　西京医院 1999 0 6 / 2 0 0 0 0 1对 4 4 (男 2 1,女 2 3)例患者进行体外循环 (ｃａｒｄｉｏｐｕｌｍｏｎａｒｙｂｙｐａｓｓ,ＣＰＢ)心脏手术围术期胃液 ｐＨ监测 ,患者年龄 4～ 6 1岁 ,均为体外循环时间>6 0ｍｉｎ的心脏手术 ;均采用全麻 ,中度低温ＣＰＢ下进行手术 .术前常规置入胃管 ,应用 ｐＨＳ 2 5液晶数字酸度计测量胃液 ｐＨ .分别在术前 12ｈ、麻醉诱导后、ＣＰＢ 30和 6 0ｍｉｎ(或开放升主动脉钳前 )、术后 1、4、14和 38ｈ从胃管中吸取胃液进行 ｐＨ测定、镜检 (红细胞计数 )和潜血试验 .每次取标本后吸净胃液以…     

乙型肝炎病毒荧光定量聚和酶链反应检测结果分析

乙肝病毒长期以来一直危害着人们的健康 ,乙肝患者血清病毒水平并非衡定不变 ,而是随肝脏炎症情况波动 ,乙肝病毒含量在病程中的变化规律一直为人们所关注 ,ＦＱ -ＰＣＲ结合ＰＣＲ和探针杂交荧光标记的优点 ,能够及时准确的反映患者所处的临床阶段及药物的疗效。1　材料和方法1.1. 　检测对象　收集表面抗原阳性血清 111例 ,其中ＨＢ ｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢＣ阳性血清 4 7例 ,ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ、抗ＨＢＣ阳性血清 30例 ,ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢＣ阳性血清 34例 ,同时收集ＨＢｓ、抗ＨＢＣ阳性血清 2 0例 ,抗ＨＢｓ阳性血清 2 9例 ,…     

医院工作人员HBV感染情况调查分析

1997年 10月对全院 35周岁以上医院职工进行乙型肝炎血清标志物 (两对半 )普查 ,时间一个月 ,共检测6 37例 ,达全院职工 6 7%。1　材料1.1　标本来源　本院在职职工。1.2　检测试剂　选用上海科华生化制品有限公司生产的两对半试剂盒。 (注 :此公司产品经我国卫生部临床质控中心检测合格 ,为推荐使用的 8个厂家之一 )。1.3　检测方法　固相酶联免疫法 (ＥＬＩＳＡ)。2　检测结果　　见表 1。表 1　乙肝血清标志物检测结果模式 ＨＢｓＡｇ 抗-ＨＢｓ ＨＢｅＡｇ 抗 -ＨＢｅ抗 -ＨＢｃ 例 %1 - - 2 74.2 42 -- 2 43 .773 --- 3 0 .474 - --…