窄谱中波紫外线对寻常型银屑病患者外周血Th17/Treg失衡及相关细胞因子表达的影响

目的探讨窄谱中波紫外线（NB-UVB）治疗寻常型银屑病患者外周血辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）和转化生长因子β1（TGF-β1）、白介素-6（IL-6）的变化及其效果。 方法选择进行期和稳定期寻常型银屑病患者各45例（共90例）作为病例组,接受NB-UVB照射治疗,共治疗8周;另选健康体检者50例作为健康对照组。采用流式细胞术检测各组治疗前后外周血Th17细胞和Treg细胞百分比,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组治疗前和治疗8周后（治疗后）血清中TGF-β1和IL-6的含量,并进行统计学分析比较;采用银屑病面积和严重程度（PASI）评分对病例组患者皮损处的红斑、浸润、鳞屑的程度和面积进行加权评分,测定银屑病皮损面积和严重程度。 结果①治疗前,与健康对照组比较,病例组进行期和稳定期银屑病患者外周血Th17细胞百分比［（5.09±1.26）%和（4.85±1.31）%］、Th17/Treg比值［（1.97±0.53）和（1.33±0.61）］及血清中IL-6水平［（190.11±18.76）和（177.92±20.27）ng/L］均较高（P<0.01）,而Treg百分比［（2.53±0.86）和（3.46±0.92）］及血清中TGF-β1［（432.94±50.35）和（419.01±42.13）ng/L］均较低（P<0.01）。经NB-UVB治疗8周后,病例组进行期和稳定期银屑病患者外周血Th17细胞百分比［（1.38±0.52）%和（1.34±0.61）%］、Th17/Treg比值［（0.31±0.16）和（0.26±0.13）］及IL-6水平［（110.41±10.94）和（106.15±11.23）ng/L］均较组内治疗前有明显降低（P<0.01）,而Treg百分比［（4.46±1.51）%和（4.89±1.73）%］和血清TGF-β1含量［（542.23±51.17）和（520.16±55.62）ng/L］则较治疗前有明显升高（P<0.01）。②病例组90例寻常型银屑病患者均完成治疗,进行期和稳定期银屑病患者治疗后PASI评分［（4.11±2.97）和（4.25±3.16）分］较治疗前评分［（18.25±7.13）和（18.11±6.92）分］有明显下降（P<0.01）。经NB-UVB治疗后,寻常型银屑病患者的治疗总有效率达86.67%,其中病例组进行期患者有效率为88.89%,病例组稳定期患者为84.44%,NB-UVB治疗对进行期和稳定期患者之间有效率差异无统计学意义(P&rt;0.05)。③病例组患者PASI评分与Th17细胞百分比、Th17/Treg比值、IL-6水平之间均呈正相关（P<0.01）;Treg细胞百分比、TGF-β1水平与疾病严重程度之间呈负相关（P<0.01）。Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值、IL-6、TGF-β1与疾病严重程度之间均无相关性（P&rt;0.05）。 结论银屑病的发病及其病情的严重程度评分与外周血Th17细胞、IL-6水平的高表达及Treg细胞、TGF-β1水平的低表达有关;NB-UVB可改变患者外周血Th17/Treg细胞失衡比值及相关细胞因子的表达水平。     

外周血辅助性T细胞17与调节性T细胞的平衡与白癜风临床特征的相关性

目的分析白癜风患者外周血辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg)的平衡与临床特征的关系。方法选取白癜风患者109例,其中进展期患者56例,稳定期患者53例,另选取同期本院健康体检者59例为对照组。采用流式细胞术检测3组受试者外周血Th17、Treg细胞数量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组受试者白介素-17(IL-17)、叉头盒蛋白P3(Foxp3)水平;采用Pearson法分析白癜风患者Th17、Treg细胞及IL-17、Foxp3的关系。结果对照组、稳定期组、进展期组Th17细胞含量、Th17/Treg、IL-17水平逐渐升高,Treg细胞含量、Foxp3水平逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。随着白癜风皮损面积的增加,Th17细胞含量、Th17/Treg、IL-17水平逐渐升高,Treg细胞含量、Foxp3水平逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。白癜风患者Th17细胞与Treg细胞、IL-17与Foxp3均呈显著负相关(r=-0.449、-0.497,P0.05)。结论 Th17/Treg细胞平衡可能与白癜风的发生及临床特征有关。     

电刺激小脑顶核对脑梗死大鼠学习记忆能力及生长相关蛋白-43的影响

目的观察电刺激小脑顶核（FNS）对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响。 方法选用随机数字表法将60只健康成年雄性SD大鼠分为正常组、假手术组、FNS组及模型组，采用线栓法将FNS组及模型组大鼠制成左侧大脑中动脉栓塞/再灌注（MCAO/R）模型。FNS组大鼠于制模3h后给予FNS治疗，模型组仅将针电极置于大鼠小脑顶核部位，但不给予电刺激。分别于制模1d、3d及7d时采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力，并于上述时间点采用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠脑梗死部位GAP-43 mRNA表达。 结果制模后1d、3d及7d时模型组与FNS组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期均较正常组及假手术组明显延长（均P<0.05）；FNS组大鼠上述时间点逃避潜伏期［分别为（25.72±0.42）s，（24.27±0.55）s和（23.82±0.63）s］则较模型组显著缩短（均P<0.05）。在制模后1d、3d及7d时正常组与假手术组大鼠脑组织中仅存在少量GAP-43 mRNA表达；模型组及FNS组GAP-43 mRNA表达在上述时间点均较正常组及假手术组显著增多（均P<0.05）；并且上述时间点FNS组GAP-43 mRNA表达［分别为（1.54±0.34），（2.03±0.56）和（2.78±0.81）］亦显著强于模型组（均P<0.05）。 结论FNS干预有助于改善脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力，其治疗机制可能与上调脑梗死部位神经元GAP-43 mRNA表达、从而促进脑梗死灶周围神经轴突再生及修复有关。     

穴位电针刺激对局灶性脑缺血再灌注大鼠基质细胞衍生因子/CXC类趋化因子受体4信号轴的影响

目的探讨穴位电针刺激对局灶性脑缺血再灌注大鼠基质细胞衍生因子（SDF-1α）/CXC类趋化因子受体4（CXCR4）信号轴的影响。 方法选取SD大鼠98只,按照随机数字表法将其分为对照组（8只）、模型组（50只）和电针组（40只）,根据造模后观察时间点的不同,将模型组和电针组大鼠细分为第1、3、7、14、21天5个亚组。采用线栓法对模型组和电针组大鼠进行造模,制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在电针组大鼠双侧合谷穴采用电针刺激,对照组和模型组不作特殊处理。采用免疫组化法检测模型组与电针组大鼠CXCR4阳性细胞的数目,第3、7、14天时采用逆转录聚合酶反应法（RT-PCR）检测模型组和电针组大鼠SDF-1α mRNA及CXCR4 mRNA的表达量。 结果造模后,模型组大鼠缺血区大脑皮质SDF-1α mRNA的表达水平随再灌注时间延长呈单峰样增加,造模后3d（0.971±0.058）明显升高,7d（1.057±0.054）达峰值,随后逐渐下降（P<0.05）。造模后3d、7d、14d,电针组大鼠SDF-1α mRNA表达亦呈单峰样变化,造模后7d达峰值（P<0.05）,且电针组大鼠SDF-1α mRNA水平较模型组同时间点高（P<0.05）。模型组与电针组造模后7d、14d的CXCR4 mRNA相对值均高于组内造模后3d（P<0.05）,造模后14d时的CXCR4 mRNA相对值亦高于组内造模后7d（P<0.05）,与模型组同时间点比较,电针组大鼠CXCR4 mRNA相对值均较高,差异有统计学意义（P<0.05）。模型组大鼠CXCR4阳性细胞于造模后1d［（5.60±1.18）个/HP］开始增加,7d［（18.93±1.38）个/HP］达峰值,14d［（8.20±1.08）个/HP］开始回落,21d［（5.80±1.01）个/HP］的表达量仍然较高（P<0.05）。电针组大鼠CXCR4阳性细胞计数的变化趋势与模型组相似,但电针组的增加趋势更加明显（P<0.05）。 结论穴位电针刺激可激活局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血区大脑皮质的SDF-1α/CXCR4信号轴,促进血管新生。     

电针治疗对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白4及蛋白激酶BβmRNA表达的影响

目的观察电针对胰岛素抵抗（IR）大鼠胰岛素信号转导途径中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)及蛋白激酶Bβ（Akt2）表达的影响。 方法共选取24只健康Wistar雄性大鼠,采用随机数字表法将其分为正常对照组、模型组及电针组,每组8只。采用高脂膳食喂养将模型组及电针组大鼠制成IR模型,电针组于制模成功后给予电针背俞穴治疗。于电针治疗2周后检测各组大鼠胰岛素敏感性指数（ISI）;选用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）对各组大鼠骨骼肌细胞GLUT4及Akt2 mRNA表达进行定量分析。 结果模型组大鼠血浆胰岛素（FINS）较正常对照组明显升高（P<0.05）,ISI较正常对照组显著降低（P<0.05）;电针组大鼠经电针治疗2周后,发现其FINS较模型组明显降低（P<0.05）,ISI则显著升高（P<0.05）;并且电针组骨骼肌细胞中GLUT4及Akt2 mRNA表达均显著强于模型组水平（P<0.05）。 结论电针治疗能改善IR模型大鼠病情,其治疗机制可能与电针促进胰岛素磷脂酰肌醇-3激酶途径通路中GLUT4转位有关。     

运动训练对出血性脑损伤微管相关蛋白-2基因表达的影响

目的观察运动训练对脑出血大鼠微管相关蛋白-2（MAP-2）基因表达的影响。 方法健康雄性SD大鼠160只。将其中96只随机分为实验组（出血后运动）、对照组（出血后不运动）、假手术组（无出血，不运动），每组32只，各组又分为术后7，14，21，28 d共4个时相点，每个时相点4只用于免疫组化检测，4只用于反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测。实验组大鼠于术后72 h开始跑笼训练，其余组大鼠在标准笼内自由活动。另外64只随机分为脑出血组（48只）、无出血组（8只）和正常组（8只），脑出血组又分为术后6,12,24,48,72 h和7 d共6个时相点，每个时相点8只，无出血组、正常组及脑出血组各时相点的4只大鼠用于免疫组化检测，4只用于RT-PCR检测。 结果①免疫组化结果：MAP-2阳性细胞表达为细胞胞浆着棕黄色，阳性细胞主要分布于血肿周围和大脑皮质的神经元。脑出血后24 h MAP-2开始上调，持续到7 d，与正常组和无出血组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。实验组和对照组于术后14 d出现表达上调，28 d表达达高峰，但实验组表达上调更显著，2组间差异有统计学意义（P<0.05），2组与假手术组相比，差异有统计学意义（P<0.01）。②RT-PCR结果：脑出血后12~24 h MAP-2 mRNA有一短暂表达上调，与无出血组和正常组相比，差异有统计学意义（P<0.05），之后恢复接近正常。实验组术后14～28 d表达上调，与对照组和假手术组相比，差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01），对照组在相同时间点同样有上调表现，与假手术组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论MAP-2参与了脑出血后神经可塑性的发生，且运动训练可促进MAP-2的表达，从而改善神经功能。     

银屑病患者 Th17和 Treg细胞及其相关细胞因子的表达

目的：探讨银屑病患者辅助性T细胞17（Th17）和调节性T （Treg）细胞及其相关因子表达的临床意义。方法用流式细胞术检测28例轻度和25例重度银屑病患者及25名健康对照者外周血中Th17和Treg细胞的比例;用逆转录聚合酶链反应（PCR）检测维甲酸相关孤儿受体γt（RORγt）和抗人叉头状转录因子（Foxp3） mRNA的表达;用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测血浆Th17和Treg相关细胞因子白细胞介素17（ IL-17）和转化生长因子β（ TGF-β）的水平。结果与健康对照组比较,银屑病患者组Th17细胞比例、RORγt的mRNA水平及IL-17的浓度显著上升,且重度组显著高于轻度组（P＜0．05）;而重度银屑病患者Treg细胞、Foxp3 mRNA和血浆TGF-β浓度均较健康对照组和轻度组显著降低（ P＜0．05）。结论 Th17和Treg细胞的比例及其相关因子的表达可作为银屑病病情进展的标志。     

16Hz,90dB和16Hz,130dB次声小鼠海马区IL-6及星型胶质细胞GEAP的表达

目的观察16 Hz,90 dB和16 Hz,130 dB次声对小鼠海马区白介素-6（IL-6）表达及星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白含量（GFAP）的影响,从而探讨次声作用对中枢神经系统自我保护功能的影响。 方法共选取BALB/C小鼠60只,将其随机分为90 dB次声作用组（20只）、130 dB次声作用组（20只）及对照组（20只）。将90 dB次声作用组、130 dB次声作用组小鼠分别置于次声压力舱内2 h,期间分别给予90 dB或130 dB的次声刺激,对照组小鼠也于同期置入次声压力舱内,但期间不给予次声刺激。于次声作用1,7,14,21及28 d时观察各组小鼠海马区IL-6及星形胶质细胞GFAP的表达情况。 结果对照组小鼠海马区有一定强度IL-6表达;各次声作用组小鼠海马区IL-6在次声作用7,14及21 d时均较对照组明显增高（P<0.05）,并于次声作用14 d时达到峰值;进一步分析后发现,90 dB次声作用组IL-6表达水平明显高于130 dB次声作用组（P<0.05）。各次声作用组小鼠海马区GFAP表达水平在次声作用7,14及21 d时均较对照组明显增高（P<0.05）,并于次声作用14 d时达到峰值;90 dB次声作用组小鼠海马区GFAP表达水平明显低于130 dB次声作用组（P<0.05）。 结论次声刺激能显著促进小鼠海马区神经元IL-6表达,提高海马区星形胶质细胞GFAP含量。     

超短波对大鼠晶状体上皮细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察小剂量超短波对大鼠晶状体上皮细胞（LEC）凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平的影响。 方法将健康4周龄Wistar大鼠36只（共72只眼）按随机数字表法选取4只大鼠(8只眼)作为正常组，16只大鼠（32只眼）作为实验组（接受小剂量超短波照射，每次7min，1次/日），16只（32只眼）作为对照组（不接受超短波照射），分别于实验第1、3、6和9周四个观察时间点同步处死实验组和对照组大鼠（每个时间点4只大鼠8只眼）。采用无菌操作摘取大鼠双眼，并在手术显微镜下分离晶状体，制备大鼠晶状体石蜡切片，进行免疫组化链霉亲和素-生物素复合物(SABC）染色，应用图像分析技术对LEC的Bcl-2及Bax蛋白表达水平进行检测，所得数据使用SPSS 13.0版统计软件进行分析处理。 结果实验组，在照射1、3、6和9周后的Bcl-2表达平均积分光密度（AIOD）值分别为（0.391±0.014）、（0.447±0.006）、（0.417±0.011）、（0.275±0.007），而Bax表达的AIOD值分别为（0.180±0.015）、（0.155±0.007）、（0.167±0.003）、（0.251±0.016）。照射1周后，实验组与对照组比较，组间差异无统计学意义（P&rt;0.05）；照射3周实验组与对照组相比，其Bcl-2蛋白表达显著增加（P<0.01），且Bax明显减少（P<0.01）；实验组照射6周后的Bcl-2与照射3周后的相比，有所下调但仍较对照组的表达高，且差异有统计学意义（P<0.01），而实验组Bax的表达有所上调但较对照组表达低，且差异有统计学意义（P<0.01）；照射9周后, 实验组的Bcl-2表达明显下降，且远低于对照组（P<0.01），Bax表达亦较对照组明显增加（P<0.01）。对照组上述各时间段大鼠的Bcl-2及Bax的表达与正常组相比，均无明显变化（P&rt;0.05）。 结论小剂量超短波对大鼠LEC的凋亡在一定时间内有保护作用，但随着作用时间的延长可能引起LEC损伤。     

射频消融治疗大鼠移植性肝肿瘤对脾脏树空状细胞的影响

目的探讨射频消融（RFA）治疗大鼠肝肿瘤对其脾脏组织内树突状细胞（DC）表型的影响及其意义。 方法选取40只正常Sprague Dawley大鼠,10只作为正常对照组,其余30只制作Walker-256肝肿瘤模型后,随机分为RFA后7 d组、RFA后14 d组和荷瘤对照组,每组10只。RFA后7 d组、RFA后14 d组分别于RFA处理后7 d及14 d处死,荷瘤对照组与正常对照组不做RFA处理即处死。取其脾脏组织,采用Ficoll密度梯度离心法分离出单个核细胞,应用流式细胞术检测单个核细胞OX62、OX6及CD86表达水平。 结果正常大鼠与荷瘤大鼠的脾脏单个核细胞中分别有（10.36±3.21）％、（11.69±4.39）％表达OX62,二者比较差异无统计学意义（P＞0.05）。正常大鼠与荷瘤大鼠的脾脏单个核细胞中分别有（76.33±7.86）％、（60.58±6.26）％表达OX6;而分别有（63.06±8.77）％、（40.87±8.66）％表达CD86,2者比较差异均有统计学意义（P<0.05）。RFA后7 d OX62阳性表达率为（10.24±2.49）％,RFA后14 d为（15.10±2.37）％,RFA后14 d组与荷瘤对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。RFA后7 d OX6阳性表达率为（77.45±4.53）％,RFA后14 d为（75.47±5.22）％,2组与荷瘤对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。RFA后7 d CD86阳性表达率为（46.86±9.42）％,RFA后14 d为（45.53±9.13）％,2组与荷瘤对照组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。 结论荷瘤鼠脾脏组织中未成熟DC比例高,抗原提呈能力弱,RFA促使荷瘤大鼠外周血中DC前体细胞迁移到脾脏组织中的数量增多,并进一步分化成熟,对提高机体在免疫应答中的抗原提呈能力起到促进作用。     

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒感染与调节性T淋巴细胞和辅助性T细胞17的关系

目的探讨尖锐湿疣（CA）患者人乳头瘤病毒（HPV）亚型及HPVDNA载量与调节性T淋巴细胞（Treg）和辅助性T细胞17（Th17）的关系。方法CA患者80例为CA组和健康者40例为正常对照组,检测外周血Treg、Th17细胞比例,Foxp3mRNA、ROR-γmRNA表达量及HPV亚型和HPVDNA载量。结果CA组和正常对照组及初发组和复发组外周血Treg、Th17细胞比例和Treg／Th17、Foxp3mRNA及ROR-γt mRNA表达量差异均有统计学意义（P〈0．05）,外周血Foxp3mRNA与ROR-γt mRNA表达量呈负相关（P〈0．05）。不同HPV亚型组和不同HPVDNA载量组外周血Treg细胞比例、Th17细胞比例、Treg／Th17、Foxp3mRNA及ROR-γt mRNA表达量差异均有统计学意义（P〈0．05）。外周血HPVDNA载量分别与Treg、Treg／Th17呈正相关（P〈0．05）,与Th17呈负相关（P〈0．05）。结论CA患者HPV感染可诱导Treg细胞活化增殖,Treg／Th17失衡抑制机体抗病毒免疫应答可能在尖锐湿疣发病和复发中起重要作用。     

针刺对快速老化小鼠P8海马神经元突触可塑性及AMPA受体表达的影响

目的研究针刺对快速老化小鼠P8（SAMP8）海马神经元突触可塑性及谷氨酸α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸(AMPA)受体表达的影响。 方法选取雄性9月龄SAMP8 19只,按随机数字表法分为模型组（10只）和针刺组（9只）,另选取雄性同月龄抗快速老化小鼠（SAMR1）9只作为对照组。针刺组给予“百会”、“涌泉”穴位针刺治疗,每日1次,7 d为1个疗程,疗程之间相隔2 d,共治疗4个疗程。第4疗程内每次治疗后,采用Morris水迷宫实验评估动物的学习记忆能力。应用透射电镜观察治疗后小鼠海马CA1区神经元突触的超微结构变化,用Western blot法检测小鼠海马AMPA受体亚基谷氨酸受体1（GluR1）及谷氨酸受体2（GluR2）的含量。 结果定位航行实验中,与对照组比较,模型组逃避潜伏期延长（P<0.05）,针刺组较模型组缩短（P<0.05）。空间探索实验中,对照组、模型组、针刺组小鼠穿越有效区的次数分别为（5.33±2.29）次、（2.30±0.82）次、（5.22±2.05）次,与对照组比较,模型组穿越有效区的次数减少（P<0.05）,针刺组较模型组增加（P<0.05）。与对照组比较,模型组小鼠海马CA1区神经元PSD［（39.83±9.30）nm］变薄（P<0.05）、突触间隙［(19.98±5.21)nm］增宽（P<0.05）、突触界面曲率(1.12±0.05)下降（P<0.05）;与模型组比较,针刺组小鼠突触PSD［(46.78±11.37)nm］增厚（P<0.05）、突触间隙［(15.68±4.03)nm］缩小（P<0.05）、突触界面曲率(1.14±0.09)增大（P<0.05）。模型组小鼠海马GluR1含量较对照组下降（P&rt;0.05）,针刺组较模型组GluR1含量增加（P&rt;0.05）,模型组GluR2含量较对照组下降（P<0.05）,针刺组较模型组GluR2含量增加（P<0.05）。 结论针刺可显著提高SAMP8的学习记忆能力及突触可塑性,并促进其海马AMPA受体GluR2亚基表达,提示针刺可能是促进神经康复、改善学习记忆能力的方法之一。     

脂氧素A4对椎间盘突出所致大鼠根性神经痛的影响

目的观察脂氧素A4对椎间盘突出所致大鼠根性神经痛的影响。 方法选取雄性SD大鼠48只,建立非压迫性椎间盘突出模型,按照随机数字表法将其分为假手术组（假手术+10μl生理盐水）、对照组（模型+10μl生理盐水）、脂氧素A4 10ng组（模型+10ng脂氧素A4）、脂氧素A4 100ng组（模型+100ng脂氧素A4）,每组12只。手术当天及术后连续3d鞘内注射脂氧素A4或生理盐水,观察大鼠的行为学变化,并测定50%缩足阈值（50%PWT）。术后7d取大鼠术侧腰段脊髓背角,用Western blot法测定c-Jun氨基末端激酶（JNK）、细胞外信号调节激酶（ERK）的蛋白表达量,并用ELISA技术测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的含量。 结果假手术组50%PWT在手术前后无显著变化（P&rt;0.05）。与组内术前比较,对照组和脂氧素A4 10ng组术后各时间点的50%PWT降低（P<0.05）。与假手术组术后同时间点比较,对照组和脂氧素A4 10ng组术后各时间点的50%PWT较低（P<0.05）。与对照组比较,脂氧素A4 10ng组术后3d［（8.90±2.76）g］、5d［（8.56±2.77）g］的50%PWT较高（P<0.05）。脂氧素A4 100ng组术后2d、3d、4d、5d、6d、7d的50%PWT显著较高（P<0.05）。与假手术组比较,对照组、脂氧素A4 10ng组和脂氧素A4 100ng组p-JNK、p-ERK水平明显升高（P<0.05）。与对照组比较,脂氧素A4 10ng组和脂氧素A4 100ng组p-JNK、p-ERK水平明显降低（P<0.05）,且脂氧素A4 100ng组下降更明显（P<0.05）,呈剂量依赖性。各组t-JNK和t-ERK蛋白含量之间比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。与假手术组比较,对照组、脂氧素A4 10ng组和脂氧素A4 100ng组TNF-α、IL-1β的表达水平明显升高,TGF-β1的表达水平明显降低（P<0.05）。与对照组比较,脂氧素A4 10ng组和脂氧素A4 100ng组TNF-α、IL-1β的表达水平明显降低（P<0.05）,TGF-β1的表达水平明显升高（P<0.05）,且脂氧素A4 100ng组的变化更明显,呈剂量依赖性。 结论脂氧素A4能够减轻非压迫性椎间盘突出大鼠的根性神经痛,其机制可能与抑制ERK和JNK活性、下调促炎因子表达水平、上调抗炎因子表达水平有关。     

电针曲池穴及足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞线粒体凋亡途径的影响

目的观察电针干预对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞线粒体凋亡途径的影响。 方法选取SD大鼠60只,按照随机数字表法将其分为假手术组、模型组和电针组,每组20只。模型组、电针组大鼠采用Zea Longa线栓法制备大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,缺血2h后,再灌注3d。模型组与电针组各有18只大鼠造模成功。术后2h,在电针组大鼠“曲池”、“足三里”穴进行电针治疗,假手术组及模型组不作特殊干预。采用Zea Longa 5分评价法观察大鼠神经功能缺损的恢复程度;用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色,计算脑梗死体积;应用TUNEL试剂盒检测皮质区缺血周围神经细胞的凋亡情况;采用Western blot法、免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bax蛋白、胱天蛋白酶（caspase）的表达水平。 结果与组内术后2h、1d及2d比较,模型组［（1.67±0.58）分］、电针组［（1.14±0.37）分］术后3d时的神经功能缺损评分较低（P<0.05）。与假手术组同时间点比较,模型组、电针组大鼠术后2h、1d、2d及3d的神经功能缺损评分均较高,电针组术后2d及3d神经功能缺损评分低于模型组（P<0.05）。术后3d,电针组大鼠脑梗死体积百分比明显减小（P<0.05）。假手术组、模型组、电针组大鼠大脑皮质缺血半暗带区神经细胞的凋亡百分比分别为（1.07±0.02）%、（39.4±10.1）%、（15.1±4.2）%。与模型组比较,电针组凋亡细胞数量百分比明显较低（P<0.05）。术后3d,模型组大鼠大脑皮质Bcl-2蛋白（0.11±0.02）、mRNA的相对含量（0.13±0.04）较假手术组明显下降（P<0.05）,与模型组比较,电针组Bcl-2蛋白（0.36±0.11）、mRNA的相对含量（0.41±0.15）较高（P<0.05）。术后3d,模型组、电针组大鼠大脑皮质Bax蛋白、mRNA的相对含量均高于假手术组（P<0.05）,与模型组比较,电针组大鼠大脑皮质Bax蛋白（0.51±0.14）、mRNA的相对含量（0.37±0.13）较高（P<0.05）。术后3d,电针组活化型胱天蛋白酶-3（cleaved caspase-3）免疫阳性细胞明显少于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论电针刺激“曲池”及“足三里”穴对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经细胞具有保护作用,其机制可能与调控线粒体凋亡途径蛋白的表达水平有关。     

低频电刺激诱导外周血干细胞增殖并向施万细胞分化的实验研究

目的探讨体外培养下低频电刺激诱导外周血干细胞增殖并向施万细胞（SC）分化的可能机制。 方法原代培养SD大鼠外周血干细胞,将传至第3代的SD大鼠外周血干细胞分为低频电刺激组、细胞外信号调节激酶（ERK）组、联合应用组、对照组。4组细胞均采用含2%胎牛血清的达尔伯改良伊格尔培养基（DMEM）进行培养,加入SC上清液后,低频电刺激组给予1 h持续低频电刺激,ERK组在DMEM中加入浓度为50 mmol/L的抑制剂PD98059,联合应用组在ERK组基础上给予1 h持续低频电刺激,对照组不行特殊干预处理。诱导前、后,利用噻唑蓝比色法检测4组细胞在570 nm处的吸光度A值,并采用Western blot法对诱导后各组细胞的增殖周期蛋白D1（cyclin D1）及细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK4）含量进行测定。 结果干预前,各组外周血干细胞的A750值无明显差异（P&rt;0.05）;干预后,低频电刺激组、ERK组、联合应用组、对照组A750值分别为（1.051±0.058）、（0.363±0.343）、（0.894±0.343）、（0.758±0.047）,除ERK组外,其它各组A750值均较干预前升高（P<0.05）;各组A750值组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。诱导后,低频电刺激组S-100、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及P75的表达率均高于其它各组（P<0.05）,ERK组各蛋白表达率则均低于其它各组（P<0.05）,联合应用组S-100、GFAP及P75的蛋白表达率介于低频电刺激组与ERK组之间,高于ERK组,低于低频电刺激组,差异有统计学意义（P<0.05）。 各组组间ERK表达量比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）;与对照组比较,低频电刺激组和联合应用组磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（p-ERK1/2）、cyclin D1及CDK4蛋白表达水平均较高（P<0.05）,ERK组则较低（P<0.05）;与联合应用组比较,低频电刺激组p-ERK1/2、cyclin D1及CDK4蛋白表达水平较高（P<0.05）,ERK组较低（P<0.05）。 结论体外培养条件下,低频电刺激可促进SD大鼠外周血干细胞增殖并诱导其向SC分化,且ERK信号传导通路是促进SC增殖分化的途径之一。     

窄谱中波紫外线对银屑病的疗效及外周血IL-17和IL-23的影响

目的研究窄谱中波紫外线(NB-UVB)对寻常型银屑病患者外周血中IL-17和IL-23的影响,探讨NB-UVB治疗银屑病的作用机理,为NB-UVB的临床应用提供理论基础。 方法选取寻常型银屑病患者52例及门诊健康体检人员40例,将其分为观察组和正常对照组。观察组所有患者均采用NB-UVB照射治疗,依据患者的皮肤反应制订个体化照射治疗方案,隔日一次,共20次。利用ELISA法分别于光疗前、光疗10次后和光疗20次后对患者的银屑病皮损面积及严重指数（PSAI）和外周血中IL-17、IL-23的水平进行检测,并与正常对照组同时间的结果进行比较。 结果观察组患者光疗10次时PASI评分为（14.91±1.10）分,与光疗前PASI评分（24.21±7.03）分相比,差异有统计学意义（P<0.01）;光疗20次后PASI评分为（10.54±1.09）分,症状明显改善,与光疗10次时相比,差异有统计学意义（P<0.01）。光疗前,观察组外周血中IL-17和IL-23的水平分别为（79.4±15.1）ng/L和（429±193）ng/L,对照组相应指标水平则为（19.4±12.2）ng/L和（189±74）ng/L,观察组患者外周血中IL-17和IL-23的水平高于正常对照组（P<0.05）;光疗10次后,观察组外周血中IL-17和IL-23的水平分别为（59.3±10.5）ng/L和（318±93）ng/L,与治疗前相比下降,差异有统计学意义（P<0.05）;光疗20次后,观察组上述指标下降至（33.2±14.2）ng/L和（256±48）ng/L,接近但仍高于正常对照组水平,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论NB-UVB照射可有效改善银屑病的疗效并降低外周血中IL-17和IL-23的水平,间接起到调节银屑病患者免疫状态的作用。     

大鼠全脑缺血再灌注后脑组织巢蛋白和红细胞生成素的表达

目的本实验以巢蛋白（nestin）作为神经干细胞标志物，应用大鼠全脑缺血模型研究Nestin与红细胞生成素（EPO）的表达变化规律及其关系，初步探讨内源性神经干细胞增殖、分化的相关机制。 方法共选取健康成年SD大鼠36只，将其分为正常对照组及实验组。实验组采用Pulsinelli四血管闭塞法制作大鼠全脑缺血模型，于全脑缺血30 min再灌注3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d及21 d时各取4 只大鼠处死取材，将脑组织标本制作成石蜡切片，应用免疫组织化学染色法检测Nestin与EPO表达水平。 结果（1）正常对照组海马区、室旁区、皮质区均未见Nestin染色阳性细胞，实验组缺血再灌注3 h室管膜下区、海马区即有Nestin染色阳性细胞表达，于再灌注14 d时达到高峰，再灌注21 d仍有表达，但表达强度逐渐减弱。对照组与实验组各时间段Nestin均数进行方差分析，发现差异具有统计学意义（P<0.05），实验组各相邻时间段Nestin均数间相比，差异均具有统计学意义（均P<0.05）；（2）正常对照组大鼠海马区可见少量EPO表达，实验组缺血再灌注3 h时开始有少量表达，于再灌注24 h时达到高峰，以后则逐渐减弱，但在缺血21 d后仍有表达。正常对照组与实验组各时间段EPO均数经方差分析，发现差异具有统计学意义（P<0.05）；实验组EPO表达水平除再灌注7 d与3 d时差异无统计学意义（P&rt;0.05）外，其余各相邻均数间差异均有统计学意义（均P<0.05）。 结论大鼠全脑缺血再灌注后脑组织Nestin、EPO阳性表达细胞增加；EPO阳性细胞表达增加是脑组织神经损伤后早期保护性反应之一；Nestin、EPO的表达规律具有一致性，EPO可能具有促进神经干细胞增殖的功能。     

激光治疗对噁恶唑酮诱导的溃疡性结肠炎大鼠细胞因子的影响

目的探讨低能量激光治疗溃疡性结肠炎(UC)的分子机制,观察治疗前、后细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)变化,为临床治疗提供依据。 方法将健康成年雄性SD大鼠30只分为正常组（6只）、UC对照组（8只）、200 mW激光治疗组（8只）和400 mW激光治疗组（8只）。采用改良的噁恶唑酮致敏法制备大鼠UC模型。造模后对2个激光治疗组大鼠分别以功率为200 mW与400 mW的砷铝化镓半导体激光进行治疗,每次照射10 min,每日1次,连续10 d。治疗后将大鼠处死,酶联免疫吸附分析（ELISA）测定各组大鼠血清和组织匀浆液中TNF-α、IL-6、IL-10的含量。 结果UC对照组大鼠与正常组比较,体重显著降低（P<0.01),黏液脓血便,血清和结肠组织匀浆中TNF-α和IL-6含量显著升高（P<0.05),IL-10显著下降（P<0.01),造模成功。激光治疗后,大鼠体重和大便性状显著好转;400 mW激光治疗组血清和结肠组织匀浆中TNF-α、IL-6显著降低（P<0.01),IL-10显著提高（P<0.05),接近正常水平;200 mW激光治疗组血清中TNF-α和IL-6显著降低（P<0.05),结肠组织匀浆中IL-6显著降低（P<0.01),TNF-α降低不显著(P&rt;0.05),血清和结肠组织匀浆中IL-10提高没有达到显著性水平(P&rt;0.05)。 结论400 mW砷铝化镓半导体激光能够有效地双向调节噁恶唑酮诱导的UC大鼠细胞因子,减低致炎细胞因子,增加抗炎因子作用,可能是低能量激光治疗UC产生较优疗效的机制之一。     

多发性骨髓瘤患者Treg细胞、Th17细胞及相关转录因子mRNA的表达及临床意义

目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血及骨髓中调节性T细胞(Treg细胞)和辅助性T细胞17(Thl7细胞)的比率及其相应特异转录因子Foxp3、RORγt的mRNA表达水平,分析Treg/Thl7平衡的临床意义。方法:将46例MM患者分为初发组(n=20)、平台期组(n=16)、复发/难治组(n=10),以健康体检者(n=20)为正常对照组。用流式细胞术检测研究对象外周血及骨髓中Treg细胞、Th17细胞占CD4~+T细胞的比率及Treg/Th17比值的变化;RT-PCR检测转录因子Foxp3及RORγt mRNA的表达水平;同时分析患者血清IL-6及CRP水平变化。结果:初发组及复发/难治组患者外周血和骨髓Treg细胞比率较正常对照组及平台期组患者升高(P0.05);初发组及复发/难治组患者外周血和骨髓中Th17细胞比率与正常对照组及平台期差异均无统计学意义。初发组及复发/难治组患者外周血和骨髓中Treg/Thl7比值高于平台期组及正常对照组(P0.05)。各组外周血及骨髓中Foxp3和RORγt mRNA的变化趋势与Treg/Thl7一致。MM患者血清中IL-6、CRP水平与外周血及骨髓中Treg/Thl7比值变化一致。结论:MM患者活动期外周血及骨髓中Treg/Thl7平衡向Treg倾斜,Foxp3表达水平升高;血清中IL-6、CRP水平与Treg/Th17比值变化趋势一致,可用于预测MM患者预后。     

电针对局灶脑缺血再灌注大鼠大脑皮质基质细胞衍生因子-1α表达的影响及其促进脑内血管再生的作用

目的探讨电针促进局灶性脑缺血再灌注大鼠脑内缺血区血管再生的作用机制。 方法选择Sprague-Dawley大鼠84只,分为对照组、模型组和模型电针组。采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型并按局灶性脑缺血1h再灌注后观察时间点,将模型组和模型电针组分为第1,3,7,14和21天5个亚组。取双侧合谷穴（LI4）为电针刺激穴位。再灌注第3,7,14天,采用逆转录聚合酶链反应法检测基质细胞衍生因子-1α（SDF-1α）mRNA的表达;再灌注后各时间点,采用免疫组织化学法检测SDF-1α蛋白的表达,CD34标记微血管并计数。 结果与对照组各时间点比较,模型组、模型电针组缺血区大脑皮质SDF-1α蛋白表达增加（P<0.05）;与模型组比较,再灌注第3,7,14天,模型电针组缺血区大脑皮质SDF-1α mRNA表达增加（P<0.05）。再灌注第1天,模型电针组缺血区大脑皮质SDF-1α蛋白表达增强,微血管计数增加,但与模型组比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。再灌注第3,7,14,21天,模型电针组缺血区大脑皮质SDF-1α蛋白表达明显增强,微血管计数明显增加（P<0.05）。 结论电针可能通过上调局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血区大脑皮质SDF-1α mRNA 及蛋白质的表达而促进缺血区大脑皮质血管再生。