芝麻素通过AMPK/NLRP3信号通路缓解哮喘小鼠气道炎症的作用机制

目的 探讨芝麻素通过AMPK/NLRP3信号通路缓解卵清蛋白(ovalbumin, OVA)诱导的哮喘小鼠模型的气道炎症。方法 将40只雄性清洁级Balb/c小鼠,随机分为5组,分别为正常组(control)、OVA模型组、芝麻素低剂量组(50 mg/kg)、芝麻素高剂量组(100 mg/kg)、阳性对照地塞米松(dexamethasone, DEX)治疗组(1 mg/kg),每组8只。使用Diff-Quick染色法对每组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中的各种炎症细胞进行分类、计数;小鼠BALF中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ的含量使用ELISA法进行检测;流式细胞术测定小鼠肺组织CD4阳性细胞群中细胞因子的阳性百分率;对各组小鼠的肺组织进行HE、PAS染色,并观察其病理学改变;对小鼠肺组织进行免疫组织化学染色,观察NLRP3蛋白的表达分布情况;Western blot方法检测AMPK、p-AMPK、NLRP3、Caspase-1、ASC和IL-1β蛋白表达水平。结果 芝麻素能够减少OVA引起的哮喘小鼠BALF中各种炎症细胞数量,降低小鼠BALF中IL-4、IL-5、IL-13...     

麻黄定喘汤通过调控NLRP3炎症小体改善咳嗽变异性哮喘豚鼠气道炎症北大核心CSCD

目的:探讨麻黄定喘汤对咳嗽变异性哮喘(CVA)豚鼠气道炎症的影响及其治疗作用是否与NLRP3信号通路有关。方法:选取50只雄性豚鼠随机分为正常组、模型组、麻黄定喘汤低剂量组(5 g/kg)、麻黄定喘汤高剂量组(20 g/kg)和地塞米松组(0.5 mg/kg),每组10只。除正常组外其余建立CVA模型,连续给药4周。末次给药后辣椒素气溶胶激发记录咳嗽次数及咳嗽延迟时间;肺泡灌洗液(BALF)进行Diff-Quik染色检测炎症细胞计数;肺组织进行HE染色、PAS染色、Masson染色观察病理改变;Caspase-1活性试剂盒观察肺组织Caspase-1活性变化;ELISA检测BALF中IL-1β、IL-18、IL-17A、IL-22、IL-23细胞因子含量;Western blot检测肺组织中NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-18、IL-1β蛋白表达水平;免疫组织化学法和免疫荧光法观察NLRP3在气道周围的分布。结果:麻黄定喘汤有效减少咳嗽次数,降低BALF中炎症细胞数及IL-1β、IL-18、IL-17A、IL-22、IL-23炎症细胞因子含量;下调肺组织中NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-18、IL-1β蛋白表达水平;减弱肺组织NLRP3的荧光强度,降低肺组织中Caspase-1活性。结论:麻黄定喘汤可能通过抑制NLRP3炎症小体改善CVA豚鼠气道炎症。     

薯蓣皂苷减轻卵清蛋白诱导的过敏性哮喘小鼠的气道炎症

目的探讨薯蓣皂苷对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的过敏性哮喘小鼠中过敏性支气管炎的影响及机制。方法24只小鼠随机分为对照组、OVA组、OVA+30 mg/kg薯蓣皂苷组和OVA+60 mg/kg薯蓣皂苷组,每组纳入6只小鼠。全自动生化仪检测各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和单核细胞的数量;ELISA法检测BALF中促炎因子IL-1β、IL-4、IL-5和TNF-α的含量;PAS染色法观察肺组织黏液分泌情况并对黏液分泌程度进行评分;免疫组化法观察肺组织p-NF-κB p65的表达和分布情况;Western blotting法检测肺组织中p-IκB和NF-κB p65的蛋白表达水平。结果薯蓣皂苷可降低过敏性哮喘小鼠BALF中炎性细胞数量,同时降低BALF中促炎因子IL-1β、IL-4、IL-5和TNF-α的水平以及肺部黏液的分泌和NF-κB的活化水平。结论薯蓣皂苷能减轻过敏性哮喘小鼠的气道炎症,且其抗炎作用与抑制NF-κB活化有关。     

五味子乙素对过敏性哮喘小鼠IL-4/IL-13/STAT6 通路及气道杯状细胞 凋亡的影响

目的：探究五味子乙素对过敏性哮喘小鼠的治疗作用及对IL-4/IL-13/STAT6信号通路的影响。方法：BALB/c小鼠随机分为6组：空白对照组、模型组、五味子乙素低（20 mg/kg）、中（30 mg/kg）、高（40 mg/kg）剂量组和地塞米松组（2 mg/kg）,每组12只。除空白对照组外,其他各组均构建过敏性哮喘小鼠模型,造模同时分别灌胃给予相应药物。末次OVA激发24 h后,ELISA检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症因子IL-4、IL-13、IFN-γ水平。取出肺脏,计算肺/体质量指数。HE染色检测小鼠肺组织形态学变化,并进行炎症反应评分。TUNEL和PAS染色结合检测小鼠肺组织杯状细胞凋亡率;Western blot检测小鼠肺组织IL-4、IL-13、p-STAT6蛋白表达。结果：与空白对照组相比,模型组小鼠肺组织结构损伤严重,有大量炎症细胞浸润,肺/体质量指数、炎症反应评分、气道杯状细胞凋亡率、BALF中IL-4、IL-13水平及肺组织中IL-4、IL-13、p-STAT6蛋白表达显著升高（P<0.05）,IFN-γ水平显著降低（P<0.05）;与模型...     

朝医麻黄定喘汤对OVA诱导的过敏性哮喘豚鼠模型HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的：探讨朝医麻黄定喘汤对过敏性哮喘豚鼠气道炎症的影响,并探讨其作用机制是否与HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路有关。方法：选取50只雄性豚鼠随机分为正常对照组、模型组、低剂量（5 g/kg）麻黄定喘汤组、高剂量（20 g/kg）麻黄定喘汤组和地塞米松（0.5 mg/kg）组,每组各10只。除正常对照组外,其余4组均采用卵清蛋白（OVA）腹腔注射致敏和OVA气溶胶雾化激发制备哮喘豚鼠模型。最后一次雾化后观察豚鼠行为学改变;末次激发24 h后处死豚鼠,采集支气管肺泡灌洗液（BALF）,通过Diff-Quik染色进行炎症细胞计数;取肺组织标本,HE、PAS和Masson染色观察肺组织病理学变化;ELISA法检测BALF中IL-4、IL-5和IL-13含量;流式细胞术测定小鼠肺组织中IL-4和IFN-γ水平;Western blot检测肺组织中HMGB1、TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达;免疫组织化学及免疫荧光检测豚鼠肺组织中HMGB1表达。结果：麻黄定喘汤能有效减轻OVA诱导的哮喘豚鼠气道炎症,抑制杯状细胞增生和胶原纤维沉积,减少BALF中IL-4、IL-5和IL-13含量,...     

重楼皂苷Ⅰ对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用研究北大核心CSCD

目的:探究重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法:将小鼠随机分为对照(Control)组、LPS组、PPⅠ5 mg/kg组、PPⅠ10 mg/kg组、PPⅠ20 mg/kg组和地塞米松(DEX)组,每组8只。PPⅠ各组小鼠灌胃相应剂量PPⅠ,DEX组灌胃2 mg/kg DEX,对照组灌胃生理盐水预处理7 d,鼻腔滴入LPS(5 mg/kg)建立小鼠ALI模型。24 h后处死小鼠,收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),检测肺湿/干重(W/D)值;HE染色观察肺组织损伤情况并评分;检测BALF中总蛋白含量、白细胞和巨噬细胞数;试剂盒检测一氧化氮(NO)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平;Western blot检测小鼠肺组织中p38和AMPK的磷酸化及NLRP3、caspase-1、Nrf2和KEAP1的蛋白表达。结果:与对照组相比,LPS组小鼠肺组织发生病理性变化,肺损伤评分、W/D值、BALF中总蛋白含量、炎症细胞、氧化应激水平和炎症细胞因子含量明显升高(P<0.05,P<0.01),p38磷酸化水平、NLRP3、caspase-1和KEAP1蛋白表达显著上调(P<0.01),AMPK磷酸化水平和Nrf2蛋白表达显著下调(P<0.01)。与LPS组比较,PPⅠ(10 mg/kg和20 mg/kg)和DEX减轻了LPS诱导的ALI,肺损伤评分、W/D值、BALF中总蛋白含量、炎症细胞、氧化应激水平和炎症细胞因子含量明显降低(P<0.05,P<0.01),p38磷酸化水平、NLRP3、caspase-1和KEAP1蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),AMPK磷酸化水平和Nrf2蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论:PPⅠ能够减轻LPS诱导的小鼠ALI,可能与p38-NLRP3/caspase-1和AMPK-Nrf2/KEAP1信号途径有关。     

地塞米松减轻过敏性哮喘模型小鼠气道炎性反应

目的 观察地塞米松(DEX)对过敏性哮喘模型小鼠气道炎性的影响并探讨相关机制。方法 将小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组。哮喘组小鼠于实验第0、7、14天皮下注射卵清蛋白(OVA)/氢氧化铝混合液,第21、22天1%OVA混悬液雾化吸入20 min;地塞米松组在哮喘组基础上于每次雾化吸入前3 h地塞米松(2 mg/kg)腹腔注射。末次雾化结束测定小鼠气道阻力,24 h后收集肺泡灌洗液(BALF),Wright-Giemsa染色后行细胞分类计数;ELISA测定BALF中IL-6、IL-18和IL-1β等浓度;免疫组织化学法(IHC)检测肺组织NLRP3、IL-1β蛋白表达,HE染色观察肺组织病理。结果 与对照组比较,哮喘组小鼠气道高反应性(AHR)明显增高;BALF中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞等炎性细胞数量明显增加;IL-5、IL-6、IL-18和IL-1β表达均升高(P<0.01);肺组织NLRP3、IL-1β蛋白表达增强。与哮喘组比较,地塞米松组小鼠AHR显著降低,BALF中炎性细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞均明显减少(P<0.01),IL-5、IL-6、IL-18...     

小白菊内酯通过抑制NLRP3/caspase-1/IL-1β信号通路减轻哮喘幼年大鼠气道炎症

目的 探讨小白菊内酯（PTL）减轻哮喘幼年大鼠气道炎症的作用机制是否与Nod样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)/白介素（IL）-1β信号通路有关。方法 SD幼年大鼠随机分为对照组、卵清蛋白（OVA）组、PTL（低、中、高）剂量组（1、2、4 mg/kg PTL）和PTL+NLRP3激动剂组（4 mg/kg PTL和100 mg/kg尼日利亚菌素钠盐）。OVA致敏与激发构建哮喘模型。测定幼年大鼠气道反应性，分类计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞，检测血清、BALF中IL-1β、IL-18水平，观察肺组织病理学改变，检测肺组织中NLRP3、caspase-1、IL-1βmRNA或蛋白表达。结果 与对照组比较，OVA组幼年大鼠气道阻力，BALF中白细胞总数、巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞数量，血清、BALF中IL-1β、IL-18水平，肺组织炎症评分及肺组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白表达升高（P<0.05）;PTL（低、中、高）剂量组可呈剂量依赖性缓解上述改变；而NLRP3激动剂可减弱PT...     

羌活提取物对哮喘小鼠Thl/Th2细胞平衡的影响及其对p38信号通路的作用

目的 探讨羌活提取物（EN）对哮喘小鼠Thl/Th2细胞平衡的影响,以及p38信号通路在其中的作用。 方法 60只雄性清洁级BABL/c小鼠,随机分为6组,每组10只,分别为正常对照组;卵蛋白(OVA)哮喘组;羌活低剂量组;羌活高剂量组、SB203580组和地塞米松组。在末次激发24 h后小鼠肺组织行HE染色。分别用ELISA检测支气管肺泡灌洗液 (BALF)中白细胞介素（IL）-4、IL-5、IL-13和γ-干扰素（IFN-γ）含量以及Western blotting检测肺组织IL-4、IFN-γ、P38蛋白表达。
结果 哮喘组小鼠与对照组小鼠相比较,BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平增高,而IFN-γ的表达明显降低(P<0.05),肺部炎症浸润明显(P<0.05);肺组织IL-4和磷酸化P38蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05),而肺组织IFN-γ的表达明显低于对照组(P<0.05)。羌活低、高剂量组、SB203580组和地塞米松组与哮喘模型组相比较,BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13浓度以及肺组织IL-4和磷酸化P38蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);肺部炎症明显减轻(P<0.05);BALF和肺组织中IFN-γ明显升高(P<0.05)。 结论 羌活提取物具有明显的抗哮喘作用,其机制可能是通过抑制P38信号通路,影响Thl/Th2细胞平衡实现的。     

大黄素可通过抑制NLRP3炎性小体活化减轻哮喘小鼠的炎症反应

目的探讨大黄素对哮喘小鼠炎症反应及对肺组织中NOD样受体蛋白结构域相关蛋白3(NODlike receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)、凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)和胱冬肽-1(caspase-1)表达的影响。方法 36只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、哮喘组和大黄素组。以卵蛋白为致敏原制备哮喘小鼠模型。收集肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数和分类计数,ELISA方法检测BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)与白介素-4(IL-4)水平。HE染色观察小鼠肺组织病理学改变。Western-blot检测各组小鼠肺组织中NLRP3、ASC和caspase-1的表达。结果大黄素能减少BALF中炎性细胞总数和嗜酸性粒细胞,降低BALF中TNF-α、IL-1β与IL-4含量,减轻肺组织炎性反应。Western-blot结果显示,哮喘组小鼠肺组织NLRP3、ASC和caspase-1的蛋白表达显著高于对照组(P0.01);与哮喘组比较,大黄素组小鼠肺组织NLRP3、ASC和caspase-1的蛋白表达显著降低(P0.01)。结论大黄素可通过抑制NLRP3炎性小体活化减轻哮喘小鼠的炎症反应。     

减毒活菌卡介苗通过STAT6对哮喘小鼠肺组织Th1和Th2型细胞因子的影响

目的:研究减毒活菌卡介苗(BCG)干预对哮喘小鼠呼吸道炎症、气管肺泡盥洗液(BALF)中细胞因子及肺组织信号转导和转录激活因子-6(STAT6)蛋白表达的影响。方法:将昆明小鼠30只随机分为正常对照组、哮喘组、BCG治疗组3组,每组小鼠都为10只。正常对照组以生理盐水致敏激发,以卵清白蛋白(OVA)致敏激发建立小鼠哮喘模型,BCG治疗组于OVA致敏前及后5天分别以BCG皮内注射干预,所有小鼠在最后一次抗原激发后24小时收集BALF,计数BALF中的白细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数目,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理形态学改变,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF中IL-4、IFNγ-水平,以免疫组织化学法观察各组小鼠肺组织STAT6表达。结果:小鼠肺组织HE切片显示哮喘组有大量炎症细胞浸润。哮喘组、BCG治疗组小鼠肺组织STAT6蛋白表达和BALF中的白细胞总数、EOS计数、IL-4水平均较正常对照组升高(P<0.05);而与哮喘组比较,BCG治疗组肺组织STAT6蛋白表达和BALF中的白细胞总数、EOS计数、IL-4水平均降低(P<0.05)。与正常对照组比较,哮喘组BALF中的IFNγ-水平显著下降(P<0.01),而BCG治疗组BALF中的IFNγ-水平增加(P<0.05)。结论:BCG能抑制哮喘小鼠气道炎症、减少哮喘小鼠Th2型细胞因子IL-4的生成、提高Th1细胞因子IFNγ-的水平,其干预机制可能与BCG抑制哮喘小鼠肺组织STAT6蛋白的表达有关。     

谷氨酰胺对内质网应激介导的过敏性哮喘的影响

目的探究谷氨酰胺对过敏性哮喘小鼠气道重塑模型的治疗作用及其可能机制。方法本实验选取雌性Balb/c小鼠30只,并随机抽取10只为1组,共分为3组,分别为Control组、OVA慢性气道重塑模型组、谷氨酰胺治疗组(750 mg/kg)。在最后一次给药24 h后,给予不同剂量的乙酰胆碱激发并做小鼠气道反应评估;Diff-Quick染色对小鼠肺泡灌洗液BALF中的各类细胞进行细胞计数;HE染色方法观察小鼠肺部组织炎症情况;PAS染色方法查看小鼠肺组织杯状细胞变化;Masson染色方法检测小鼠肺部组织胶原纤维沉积状态;ELISA方法检测小鼠BALF中炎性及促炎细胞因子的含量;Western blot对肺组织中的PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、ATF6、IRE1、XBP-1、GRP78含量进行定量分析。结果谷氨酰胺治疗组能够明显降低OVA诱导的哮喘小鼠气道高反应性;谷氨酰胺可以降低哮喘小鼠BALF总细胞及嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞的产生;谷氨酰胺减少哮喘小鼠肺组织炎症细胞渗出、杯状细胞增生以及胶原纤维的沉积;谷氨酰胺能够降低BALF中IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α、IL-1β的水平;Western blot结果显示谷氨酰胺能够抑制p-PERK、eIF2α、ATF4、CHOP和ATF6核异位以及IRE1的磷酸化和XBP-1、GRP78的蛋白表达量。结论 OVA诱导的过敏性哮喘能够诱发肺组织产生内质网应激,谷氨酰胺能够通过抑制内质网应激从而减缓气道炎症以及气道重塑,对过敏性哮喘起到治疗保护的作用。     

牛磺酸对内质网应激介导的过敏性哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 探讨牛磺酸（taurine）对过敏性哮喘小鼠气道炎症的影响及其可能的作用机制。方法将24只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组与牛磺酸组,每组8只,利用卵蛋白（OVA）致敏加激发的方式建立小鼠过敏性哮喘模型。第28 d时处死小鼠,HE染色检测肺组织病理损伤;酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠血清中OVA特异性免疫球蛋白（OVA-IgE）的表达;ELISA检测小鼠肺泡灌洗液（BALF）中炎症因子白介素（interleukin,IL）-4、IL-5、IL-13及干扰素γ(Interferon,IFN-γ)表达;检测BALF中炎性细胞数量;Western blot检测肺组织中葡糖调节蛋白78(GRP78)、转录因子C/EBP同源蛋白（CHOP）、核因子κ-B(NF-κB)的蛋白表达。结果 牛磺酸可显著改善过敏性哮喘小鼠肺组织病理损伤,降低血清中OVA-IgE含量,降低BALF中炎性因子IL-4、IL-5及IL-13的表达,增加IFN-γ的表达,并显著降低BALF中炎性细胞数量。牛磺酸还能够显著降低过敏性哮喘小鼠肺组织中GRP78、CHOP和NF-κB总蛋白表达。结论 牛磺酸能够抑...     

IL-27对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的研究IL-27对卵白蛋白(OVA)激发哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 24只雌性BALB/c小鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及IL-27组,每组8只。应用OVA建立哮喘模型,IL-27组小鼠应用1μgIL-27(溶于50μlPBS中)滴鼻给药,观察3组小鼠肺组织病理改变,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞;ELISA法测定小鼠BALF中IL-4和IFN-γ浓度,RT-PCR测定肺组织T-bet mRNA的表达量。结果 IL-27组小鼠肺组织炎症反应明显轻于哮喘组小鼠;IL-27组小鼠BALF中嗜酸性粒细胞计数为(2.21±0.33)×107/L明显低于哮喘组的(12.82±2.17)×107/L(P0.01);IL-27组小鼠BALF中IL-4浓度为(20.4±3.2)μg/L,明显低于哮喘组的(61.3±13.1)μg/L(P0.05);IL-27组小鼠BALF中IFN-γ浓度为(50.3±6.3)μg/L,明显高于哮喘组的(11.1±3.3)μg/L(P0.05);IL-27组小鼠肺组织T-bet mRNA表达量(吸光度积分比值)为(0.268±0.048),明显高于哮喘组的(0.130±0.012)(P0.05)。结论 IL-27可能通过增强T-bet mRNA的表达增强Th1反应,减少BALF中嗜酸性粒细胞数量,进而减轻了哮喘小鼠肺组织炎症反应。     

番茄红素抗哮喘作用及机制研究

目的:探讨番茄红素对哮喘气道炎症的影响及可能的作用机制。方法:雄性BALB/c小鼠40只随机分为对照组(control)、模型组(model)、番茄红素低剂量组(LYC 50 mg/kg)和番茄红素高剂量组(LYC 100 mg/kg)。卵清蛋白诱导建立哮喘模型。收集支气管肺泡灌洗液(BALF),Diff-quik染色进行炎症细胞计数,HE染色观察肺组织病理学变化,ELISA和Western blot分别检测IL-4、IL-5和IL-13水平,乙酰甲胆碱雾化吸入检测哮喘小鼠气道高反应性,利用荧光探针DCFH-DA检测ROS水平,比色法检测SOD活性和MDA含量,Western blot法检测p-PI3K、p-AKT以及p-p65蛋白表达水平。结果:番茄红素能够明显降低哮喘小鼠BALF中炎症细胞数,改善哮喘小鼠肺组织病理改变及气道高反应性,降低哮喘小鼠BALF和肺组织中IL-4、IL-5和IL-13水平,降低ROS水平和MDA含量,提高SOD活性,抑制p-PI3K、p-AKT以及p-p65蛋白表达。结论:番茄红素通过抑制ROS调控的PI3K/AKT/NF-κB信号通路发挥抗哮喘作用。     

Pyrin重组蛋白通过TGF-β1/SMAD及Jagged1/Notch1信号通路减轻慢性支气管哮喘小鼠气道炎症及气道重塑

目的探讨pyrin重组蛋白是否通过抑制转化生长因子β1(TGF-β1)/SMAD及Jagged1/Notch1信号通路缓解卵清蛋白(OVA)诱导的慢性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑。方法选取雄性BALB/c小鼠32只,分为4组,每组8只。分别为对照组、 OVA模型组、 pyrin重组蛋白治疗组(100μg/kg)、地塞米松(DEX)治疗组(1 mg/kg)。ELISA测定各组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子的表达, HE染色观察小鼠支气管炎症浸润情况,过碘酸雪夫反应(PAS)染色观察杯状细胞数量变化, Masson染色观察胶原纤维沉积,免疫组织化学染色法观察α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、 TGF-β1和Notch1蛋白在肺组织中表达分布情况, Western blot法检测肺组织中α-SMA、上皮钙黏素(E-cadherin)、 TGF-β1、 SMAD2/3、 SMAD7、 Jagged1、 Notch1、 Hes1蛋白水平。结果 Pyrin重组蛋白能够改善OVA诱导的支气管哮喘小鼠气道炎症反应,抑制杯状细胞的增生及胶原纤维沉积,降低BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-4、 IL-13含量,抑制肺组织中TGF-β1、 SMAD2/3、 Jagged1、 Notch1、 Hes1、α-SMA的蛋白表达。结论 Pyrin重组蛋白通过下调TGF-β1/SMAD及Jagged1/Notch1信号通路减轻哮喘小鼠气道炎症及气道重塑。     

硫酸脑苷酯活化Ⅱ型NKT细胞对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察硫酸脑苷酯活化Ⅱ型NKT细胞对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:32只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组,每组8只。对照组和哮喘组分别采用PBS和卵清白蛋白(OVA)致敏和激发,硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组采用OVA致敏,分别在激发前给予硫酸脑苷酯腹腔注射和硫酸脑苷酯活化的Ⅱ型NKT细胞尾静脉注射。分别采用HE和PAS染色检测肺组织学和气道杯状细胞;姬姆萨染色检测支气管肺泡灌洗液(BALF)各细胞分类计数;ELISA法检测血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5水平;流式细胞仪检测肺Ⅱ型NKT细胞、IL-4+和IFN-γ+Ⅱ型NKT细胞的数量。结果:硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞减少。硫酸脑苷酯治疗组和过继转移组小鼠BALF中嗜酸细胞百分比、血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5水平明显低于哮喘组(均P<0.05)。硫酸脑苷酯治疗组小鼠肺IL-4+和IFN-γ+Ⅱ型NKT细胞的数量明显高于哮喘组(均P<0.01)。结论:硫酸脑苷酯可能通过活化Ⅱ型NKT细胞抑制哮喘小鼠气道炎症。     

水飞蓟宾对哮喘幼鼠肺内炎症反应的影响及可能机制

目的 探讨水飞蓟宾对哮喘幼鼠肺内炎症反应的影响及可能机制。方法 45只SPF级BALB/c幼鼠随机分为对照组(Control)、哮喘组(Model)和水飞蓟宾组(Silybin),每组15只,采用卵清蛋白致敏(OVA)制备幼鼠支气管哮喘模型。收集各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),进行总细胞计数和白细胞分类计数,ELISA方法检测各组小鼠BALF中白介素-1β(IL-1β)、白介素-4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平;HE染色观察各组小鼠肺组织病理学变化;免疫组织化学方法与Western blot方法检测各组小鼠肺组织TLR4与NF-κB p65蛋白的表达。结果 与哮喘组相比,水飞蓟宾组幼鼠BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数明显降低（P<0.01）,BALF中炎性因子IL-1β、IL-4与TNF-α的表达水平明显降低（P<0.01）。HE染色结果显示,水飞蓟宾能够减轻哮喘幼鼠肺组织的炎症反应。免疫组织化学方法与Western blot结果显示,水飞蓟宾能够减轻哮喘幼鼠肺组织TLR4与NF-κB p65蛋白的表达（P<0.01）。结论 水飞蓟宾能够...     

地塞米松对呼吸道合胞病毒感染哮喘加重小鼠气道TSLP分泌及炎症的影响

目的:探讨地塞米松(DEX)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染哮喘加重小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)分泌及气道炎症的影响。方法:雌性BALB/c小鼠32只,随机分成4组,分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、鸡卵白蛋白(OVA)组、OVA/RSV组、OVA/RSV/DEX组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘,地塞米松1mg/kg肌肉注射;无创肺功能检测各组小鼠气道反应性;ELISA法检测小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13、IFNγ-和气管灌洗液(BALF)TSLP含量;小鼠肺组织病理观察炎症反应,免疫组化观察小鼠气道上皮细胞TSLP表达水平。结果:无创肺功能检测显示地塞米松抑制RSV感染哮喘加重小鼠气道反应性的增高,OVA/RSV/DEX组小鼠Penh值明显低于OVA/RSV组(P<0.01);OVA/RSV/DEX组小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13、IFNγ-浓度[分别为(86.78±27.04)、(227.66±40.87)、(194.65±73.27)和(17.33±3.06)pg/ml]和BALF中TSLP浓度[(1 873±10)pg/ml],均明显低于OVA/RSV组[分别为(274.2±103.7)、(293.3±46.1)、(330±93.5)、(30.1±5.7)、(2 127±46)pg/ml](P<0.01);病理观察显示地塞米松显著减轻RSV感染哮喘小鼠气道炎症细胞浸润;免疫组化染色证实地塞米松抑制RSV感染哮喘小鼠气道上皮细胞TSLP表达。结论:地塞米松可以抑制RSV感染哮喘加重小鼠气道上皮细胞表达TSLP,减轻RSV感染哮喘加重小鼠气道炎症反应。     

薯蓣皂苷抑制ERK/p38MAPK信号通路减轻过敏性哮喘小鼠炎症反应

目的探讨薯蓣皂苷对过敏性哮喘小鼠炎症反应的影响及对ERK/p38MAPK信号通路的调控作用。方法 SPF级BALB/c小鼠40只,随机分为对照组、过敏性哮喘模型组、薯蓣皂苷组与地塞米松组,每组10只。利用卵白蛋白致敏联合雾化激发法建立小鼠过敏性哮喘模型。HE染色观察肺组织炎症细胞浸润情况;ELISA检测小鼠血清中OVA特异性免疫球蛋白和小鼠肺泡灌洗液中炎性因子表达;Western blot检测各组小鼠肺组织MAPK信号通路相关蛋白ERK1/2、p38 MAPK、JNK、p-ERK1/2、p-p38 MAPK及p-JNK蛋白表达。结果薯蓣皂苷降低过敏性小鼠肺组织炎性浸润,降低血清中OVA特异性IgE含量(P0.05),降低BALF中炎性因子IL-4、IL-5及IL-13,促进IFN-的表达水平(P0.05),抑制哮喘小鼠肺组织p-ERK1/2,p-p38 MAPK及p-JNK蛋白的表达水平(P0.05)。结论薯蓣皂苷抑制过敏性哮喘小鼠炎症反应,与MAPK信号通路相关。