广东省翁源县一起麻疹暴发的血清学和分子生物学研究

目的 分析广东省翁源县一起麻疹暴发的原因。方法 收集2001年12月广东省翁源县暴发麻疹流行资料，并从中收集病例急性期血清和咽拭子各6份，进行血清学检测，病毒分离和中和实验；通过RT－PCR扩增麻疹N基因碳末端589个核苷酸，并进行测序和种系分析。结果 麻疹暴发流行累计发病22例，6份病例血清的麻疹IgM抗体阳性率83．3％，6份咽拭子仅分离出一株麻疹病毒（韶关株），该麻疹流行株不同于中国疫苗株（S－191），鉴定为H1基因型；和目前国外流行株相比在核苷酸水平变异最大可达12．4％，和目前国内H1流行株相比在核苷酸水平变异在1．1％－2．7％；中和实验表明麻疹疫苗免疫后血清能够中和该野病毒，但其中和的滴度比中和疫苗株低2至4倍。结论 麻疹基因变异不会引起新的流行，人群抗体水平低下是该次暴发的根本原因。     

陕西省麻疹病毒基因分型及疫苗免疫因素分析

目的确定引起陕西省麻疹流行的病原毒株,探讨相关的疫苗免疫因素。方法采集麻疹病人咽拭子标本分离病毒,用酚-氯仿抽提法提取病毒悬液中的RNA,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增N基因碳末端的核苷酸450个（bp）片段,对扩增产物进行序列测定和基因分型。用微量中和试验测定健康人群麻疹病人急性期血清中和麻疹疫苗株和野毒株的中和抗体水平。结果从82份咽拭子中分离出19株H1基因型麻疹病毒。麻疹疫苗免疫血清和有免疫史麻疹急性期病人血清对麻疹野毒株的中和抗体几何平均滴度（GMT）分别为26.36和26.90,明显低于疫苗株,GMT分别为49.30和56.18。结论陕西省近年麻疹流行是由H1基因型麻疹野病毒引起,不排除疫苗对目前流行株保护性不足的因素。     

福建省2株麻疹病毒的分离与鉴定

[目的] 了解福建省目前流行的麻疹野病毒的型别与抗原性。[方法]细胞培养分离病毒;PT-PCR扩增病毒N基因碳末端450个核苷酸,并对其产物测定基因序列以定型;细胞中和试验进行抗原性分析。[结果]B95a细胞分离到了2株麻疹野病毒,Vero细胞未分离到,表明B95a细胞敏感性较高;分离到的病毒经PT-PCR及基因序列测定证实为麻疹野病毒H1基因型(中国流行的优势株);分离的野病毒株与疫苗株同时进行血清中和试验显示：目前使用的疫苗产生的抗体对流行的野病毒仍具有中和作用,但中和滴度低于疫苗株。[结论]在保证生物安全的前提下,B95a细胞是目前分离麻疹病毒的首选细胞;新变异来的麻疹H1基因型也在我省流行,且目前使用的疫苗所产生的抗体,在体外中和野毒株的滴度低于疫苗株。     

云浮市首例麻疹野病毒的血清学和分子生物学研究

目的：实验室诊断麻疹疑似病例和进行病原学分析。方法：收集2005年3月广东省云浮市1例麻疹病例流行病学资料，并收集病例急性期血清和咽拭子各1份，进行血清学检测，病毒分离和中和实验；通过RT-PCR扩增麻疹N基因碳末端589个核苷酸。并进行测序和种系分析。结果：该麻疹疑似病例确诊为麻疹病例，并分离出1株麻疹病毒，该麻疹流行株不同于中国疫苗株（S-191），鉴定为H1基因型；和目前国外流行株相比在核苷酸水平变异最大可达12．8％。和目前广东省H1流行株相比在核苷酸水平变异在1．1％-3．7％；中和实验表明麻疹疫苗免疫后血清能够中和该野病毒，但其中和的滴度比中和疫苗株低2至4倍。结论：云浮市存在麻疹病毒野毒株，病毒基因发生变异，现在使用麻疹疫苗免疫对易感人群仍然具有保护作用。     

西安市麻疹流行病原毒株和疫苗免疫因素研究

目的 确定引起西安市麻疹流行的病原毒株，探讨相关的疫苗免疫因素。方法 采集麻疹病人咽拭子标本分离病毒，用酚-氯仿抽提法提取病毒悬液中的RNA，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增N基因碳末端的450个核苷酸（bp）片段，对扩增产物进行序列测定和基因分型。用微量中和试验测定麻疹病人急性期和恢复期血清中和麻疹疫苗株和野毒株的中和抗体水平。结果 采集咽拭子标本13份，分离出麻疹病毒8株，分离率61．54％；8株麻疹病毒均为H1基因型H1a亚型。结论 H1基因型H1a亚型是引起西安市本次麻疹流行的病原病毒。此次麻疹流行不排除疫苗保护性下降因素和麻疹疫苗免疫工作中存在无效接种而造成的免疫空白。     

聊城市麻疹疑似病例血清学检测和麻疹病毒的基因分型

[目的]确定麻疹疑似病例的诊断和麻疹病原毒株的基因分型,为麻疹的预防提供科学理论依据.[方法]采集麻疹疑似病人的血清和病人的咽拭子标本,检测麻疹抗体和分离麻疹病毒.用ELISA法检测麻疹抗体,用酚-氯仿抽提法提取病毒悬液中的RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增N碳末端的核苷酸450个(bp)片段.对扩增产物进行序列测定和基因分型. [结果]从110份麻疹疑似病例中检测出69份麻疹抗体阳性,同时从该69例病人的咽拭子中分离出19株H1基因型麻疹病毒,其中H1a亚型14株,H1b亚型5株. [结论]最近几年我市的麻疹流行是由H1基因型麻疹病毒引起,并且流行株出现了变化.     

麻疹病毒分离及现行疫苗免疫效果分析

目的 分离麻疹流行病毒,与现用麻疹减毒活疫苗(Measles Vaccine,Live;MV)株病毒进行基因比较和交叉中和试验,以分析现行MV的免疫保护性.方法 由江苏省疾病预防控制中心提供2005年麻疹局部流行时急性期病人的咽拭子标本,用Veto/Slam细胞分离病毒,同时提取分离病毒和疫苗病毒核糖核酸,用逆转录-聚合酶链反应扩增血凝素蛋白(H)和核蛋白(N)基因,并进行核苷酸测序分析;另用MV免疫者的血清和麻疹病人的恢复期血清与分离野毒株和疫苗株进行交叉中和试验.结果 一次成功分离到4株麻疹野病毒,对其中1株(JS/26-05)作基因测序,N基因进化树分析为H1基因型;与疫苗株病毒基因比较,H基因核苷酸同源性为94.8%,氨基酸同源性为95.1%;N基因核苷酸同源性为94.4%,氨基酸同源性为96.2%,但碳末端150个氨基酸的同源性为90.0%.疫苗免疫者产生的中和抗体水平低于自然感染者,两者的抗体几何平均滴度分别为:针对野毒株1:9.56和1:22.40,针对疫苗株1:40.05和1:65.41,相差2.9～4.2倍;疫苗免疫产生的抗体中和野毒株的能力平均低于疫苗株4.2倍.结论 2005年江苏省局部地区麻疹流行时分离的病毒为H1基因型,麻疹分离株与现用疫苗株在基因水平上的差异明显,现用MV的免疫保护作用有所减弱,可能已影响到MV的免疫持久性.     

河北省麻疹病毒中和抗体变化情况

目的了解河北省循环的麻疹野病毒抗原变异情况以评估疫苗接种成效;掌握麻疹疫苗的保护效果,为制定消除麻疹的策略和措施提供科学依据。方法采集40份疑似麻疹患者咽拭子标本进行麻疹病毒分离,通过荧光定量PCR鉴定麻疹病毒;用健康人血清和麻疹患者血清分别中和麻疹疫苗株和野毒株,分别计算中和抗体滴度,比较毒株在中和抗体滴度上是否存在差异。结果用40份麻疹患者血清,分别中和麻疹野毒株(Hebei11-03和Hebei11-04)和疫苗株(S191),中和抗体GMT值分别为1∶59.9、1∶59.7、1∶60.4,差异无统计学意义(P0.05);用40份健康人血清同步进行中和实验,抗体GMT值分别为1∶56.0、1∶56.4、1∶69.3,抗体滴度差异有统计学意义(P0.05)。结论目前使用的麻疹疫苗产生的免疫力对于流行的麻疹野毒株仍具有抵抗力。但使用麻疹疫苗产生的麻疹免疫力明显低于野毒株感染所产生的免疫力。     

一起麻疹爆发的病毒分离及基因型鉴定

目的了解宁夏回族自治区流行麻疹野病毒的基因型。方法2004年5月,青铜峡市某小学发生麻疹爆发,收集了3份病人急性期咽拭子标本和11份血标本,分离咽拭子中的麻疹病毒,使用逆转录-聚合酶链反应检测分离到的麻疹病毒核蛋白(N)基因,对扩增后的N基因片段进行核苷酸序列测定,并分析鉴定基因型。结果宁夏回族自治区首次分离到2株麻疹病毒;酶联免疫吸附试验捕捉法检测病人血清的IgM抗体,阳性率为100%;序列分析结果表明,这2株麻疹病毒均属于H1基因型。结论2004年引起青铜峡市麻疹流行的病毒为H1基因型。     

2006年广西资源县麻疹野病毒分离株的抗原性研究

目的研究资源县发热出疹暴发疫情的病原,进行病毒抗原性分析,更有效预防控制疾病。方法采集患者血清及咽拭子,检测血清抗体和分离病毒。进行病毒中和实验(NT),评价麻疹野病毒与沪191疫苗株的抗原性差异。结果用Vero/SLAM细胞分离到麻疹野病毒GuangXi/06/2。患者血清对GuangXi/06/2的IgG与NT检测结果的Spearman等级相关系数(rs)为0.850;疫苗株免疫血清对GuangXi/06/2的IgG与NT检测结果的rs为0.747;疫苗株免疫血清对沪191疫苗株的IgG与NT检测结果的rs为0.786;其余各组检测结果无相关性。患者血清对GuangXi/06/2和沪191的中和抗体GMT分别为1:9.7和1:199.0,有显著性差异(P<0.01);疫苗免疫血清对两毒株的中和抗体GMT分别为1:43.5和1:71.8,无显著性差异(P>0.05)。GuangXi/06/2对沪191疫苗株的抗原比为3.52。结论麻疹IgG滴度与NT检测有很好相关性,资源麻疹患者发病早期血清对GuangXi/06/2中和作用较弱,而麻疹疫苗免疫血清对GuangXi/06/2中和作用较强,GuangXi/06/2野病毒抗原性与沪191疫苗株存在较大差异。