HLA测序分型方法及其在造血干细胞移植中的应用

HLA基因位于人类第6号染色体短臂6p21．3区域，由一系列紧密连锁的基因座组成，具有高度的多态性，是迄今为止所知的人类最复杂的遗传系统。截止2007年4月，被WHO正式命名的HLA-Ⅰ类等位基因数为1839个，HLA-Ⅱ类等位基因数为875个，2者合计2714个。HLA基因编码的蛋白质主要功能是参与免疫应答中的抗原呈递，     

造血干细胞移植配型中HLA分型方法的研究进展

移植物抗宿主病(GVHD)是造成异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)和器官移植失败的关键因素之一，而移植前选择供受体HLA合适的配型则是减弱和减轻移植排斥反应的重要措施。随着无关供受体移植数量的逐年增加以及HLA新等位基因的不断发现(已发现1900多个等位基因)．势必要求建立一种快速、特异、高分辨、低成本、大规模及智能化的新型HLA分型技术平台，因此，HLA分型技术为适应这一现状而取得了飞速发展。我们对近年出现的几种HLA分型策略作一概述。     

HLA分型工作中的错误原因分析

造血干细胞移植,是挽救白血病患者的生命及治疗重型再生障碍性贫血、免疫缺陷综合征、地中海贫血等疾病的有效手段~[1].中华骨髓库的建立为数以百万计的患者带来福音.骨髓(造血干细胞)移植过程中,HLA是影响移植存活率的主要因素之一,因此,人类白细胞抗原(HLA)分型数据入库结果的准确性是骨髓库工作的重要内容.     

HLA半相合造血干细胞移植的研究进展

异基因造血干细胞移植是治疗恶性血液病最有效的手段之一，但人类白细胞抗原(HLA)屏障限制了其广泛应用。随着免疫学、分子生物学、细胞生物学理论和技术的不断发展，HLA半相合造血干细胞移植日益受到关注。本文就其研究进展作一综述。     

分子生物学技术在血小板特异性抗原基因分型中的应用

血小板特异性抗原（human platelet antigens，HPA）位于血小板膜糖蛋白上。目前，通过血清学方法已确认了24个HPA，其中的12个被分成6个HPA系统（HPA-1-5、15）。迄今，24个HPA中的22个HPA的分子基础已经得到了阐明，除了HPA-14bw是由于编码相应糖蛋白基因的1901-1911位置上AAG3个碱基缺失外，     

供、患者HLA-A、B、DRB1高分辨分型的无关供者外周血造血干细胞移植32例回顾分析

目的探讨供、患者的人类白细胞抗原HLA-A、B、DRB1基因高分辨相合及亚型相合,无关供者外周血造血干细胞移植后效果的情况,为临床造血干细胞移植治疗选择适配供者提供理论依据。方法采用PCR-SSP或SBT技术对供、患者HLA-A、B、DRB1的基因进行高分辨分型,定期随访患者在造血干细胞移植后状况,统计分析移植后效果。结果32例患者与供者的HLA低分辨分型结果完全相合,HLA-A、B、DRB1基因高分辨分型全相合的患者与HLA-A、B、DRB1基因高分辨分型不相合的患者,造血干细胞植活和两年半内的移植存活率比较,无统计学差异。结论HLA低分辨分型结果完全相合是临床医生选择造血干细胞移植的重要条件之一,供、患者HLA-A、B、DRB1高分辨分型是外周血造血干细胞移植治疗前组织配型不可少的实验之一,但HLA-A、B、DRB1基因高分辨分型错配对无关供者外周血造血干细胞移植的造血干细胞植活和两年半内的移植存活率影响较小,HLA基因高分辨分型可以帮助临床医生选择合适的供者。     

骨髓移植HLA基因分型程度探讨

自20世纪90年代末期起,HLA基因分型技术日趋成熟.由于HLA基因分型方法比传统的HLA血清学分型方法准确,故已取代后者并被广泛用于骨髓移植中的HLA分型.根据HLA基因分型的精细程度,一般被分为低分辨分型和高分辨分型两种.低分辨分型是指被鉴定的等位基因相当于HLA抗原分解物(split)水平,即通常所说的HLA亚型(即组基因).在WHO基因命名中,HLA亚型相当于星号后2位数的水平.高分辨分型是指精确到核苷酸顺序水平,即WHO命名的星号后4位数.     

HLA—Ⅱ类基因分型在器官移植中的应用研究

目的：探讨应用于临床器官移植的组织配型新技术。方法：采用快速一提技术;建立微量ＳＳＰ－ＨＬＡ－ＤＲＢ／ＤＱＢ基因分型方法,并与单克隆抗体一步法分型结果进行对比研究。结果：应用两种方法对７３份标本进行ＨＬＡ－Ⅱ类抗原／基因分型。结果完全相符,微量ＳＳＰ法不但快速,需血量少,而且分辨率高,结论：微量ＳＳＰ法具有快速１、准确、省血等优点,适合在临床器官移植配型中推广应用。     

HLA分型的若干问题

器官移植是二十一世纪医学发展的方向之一,也是医院达标创等级的条件之一。造血干细胞的移植使许多造血系统恶性疾病患得以治愈。HLA配型是器官移植特别是造血干细胞移植的前提,HLA分型还用于血小板输注、亲子鉴定、法医个体识别、疾病关联辅助诊断、人类学研究等诸方面。     

分子生物学方法在肠球菌耐药性研究中的应用

目的：为了及时准确地检测细菌的耐药性,该文将肠球菌耐药性研究中的分子生物学方法进行综述。方法对近年来肠球菌耐药性研究的相关文献进行整理、分析与归纳。结果一些方法比较常见,如 PCR,PFGE,MSLT和 Southern杂交等,而一些方法如焦磷酸测序和基因芯片技术,目前在细菌耐药机制研究中的应用并不广泛,属于交叉学科,但是稍加利用会有一定的发展前景。结论任何一个方法都有优点,也存在一些局限性,应取长补短,发挥每种方法的最大优势。     

脑胶质瘤的分子生物学研究进展

脑胶质瘤是中枢神经系统发生率最高的恶性肿瘤。近年来,脑胶质瘤发病的相关分子机制和凋亡研究已得到了深入而广泛的研究,为胶质瘤的分子病因、恶性进展、分子分型、基因治疗及预后评估研究提供有价值的参考依据。本文介绍了在该领域的相关研究进展。     

耶尔森菌的分子分型

耶尔森菌属包括11个种,其中能引起人类疾病的有鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌.本文综述了目前耶尔森菌多种分子分型技术的研究现状.这些分子分型技术是对常规表型分型技术的补充和深入,使我们对所要研究的细菌有更加全面的了解.     

Molecular Biology of the Long QT Syndrome: Impact on Management

The long QT syndrome (LQTS) is a familial disease characterized by prolonged ventricular repolarization and high incidence of malignant ventricular tachyarrhythmias often occurring in conditions ofadrenergic activation. Recently, the genes for the LQTS linked to chromosomes 3 (LQT3), 7 (LQT2), and 11 (LQTl) were identified as SCN5A, the cardiac sodium channel gene and as HERG and KvLQTl potassium channel genes. These discoveries have paved the way for the development of gene-specific therapy for these three forms of LQTS. In order to test specific interventions potentially beneficial in the molecular variants of LQTS, we developed a cellular model to mimic the electrophysiological abnormalities of LQT3 and LQT2. Isolated guinea pig ventricular myocytes were exposed to anthopleurin and dofetilide in order to mimic LQT3 and LQT2, respectively. This model has been used to study the effect of sodium channel blockade and of rapid pacing showing a pronounced action potential shortening in response to Na⁺channel blockade with mexiletine and during rapid pacing only in anthopleurin-treated cells but not in dofetilide-treated cells. Based on these results we tested the hypothesis that QT interval would shorten more in LQT3 patients in response to mexiletine and to increases in heart rate. Mexiletine shortened significantly the QT interval among LQT3 patients but not among LQT2 patients. LQT3 patients shortened their QT interval in response to increases in heart rate much more than LQT2 patients and healthy controls. These findings suggest thatLQT3 patients are more likely to benefit from Na⁺ channel blockers and from cardiac pacing because they are at higher arrhythmic risk at slow heart rates. Conversely, LQT2 patients are at higher risk to develop syncope under stressful conditions, because of the combined arrhythmogenic effect of cate-cholamines with the insufficient adaptation of their QT interval. Along the same line of development of gene-specific therapy, recent data demonstrated that an increase in the extracellular concentration of potassium shortens the QT interval in LQT2 patients suggesting that intervention aimed at increasing potassium plasma levels may represent a specific treatment for LQT2. The molecular findings on LQTS suggest the possibility of developing therapeutic interventions targeted to specific genetic defects. Until definitive data become available, antiadrenergic therapy remains the mainstay in the management of LQTS patients, however it may be soon worth considering the addition of a Na + channel blocker such as mexiletine for LQT3 patients and of interventions such as K⁺ channel openers or increases in the extracellular concentration of potassium for LQTl and LQT2 patients.     

分子生物学方法在医院感染监控中的应用和评价

简要说明了一些医院感染监控的特征和微生物学的分型方法 ,重点阐述了应用在医院感染监控和流行病学调查的分子生物学方法。这些分子生物学方法主要包括两类 :1蛋白质检测技术 ,如同工酶电泳、免疫印迹技术。 2 DNA检测技术 ,如质粒分析、染色体 DNA的限制性核酸内切酶技术、核糖分型、脉冲电场凝胶电泳和 PCR技术。最后列举了一些分子生物学方法在流行病学调查和医院感染监控中的应用。     

肿瘤坏死因子受体分子生物学研究及临床应用

肿瘤坏死因子受体 (Tumornecrosisfactorreceptor ,TNFR)分为TNFRⅠ和TNFRⅡ ,阐述其基因结构及分子生物学特征。sTNFR的检测对TNF相关疾病诊断有重要意义。基因工程生产sTNFR及其与其它分子的嵌合体 ,作为TNF拮抗剂药物 ,有广阔发展前景。     

中国人HLA-A和B位点血清学分型错误的分析

对27例HLA—A和—B位点血清学分型错误进行分析。结果表明，HLA—A和—B位点的误检型错误均高于漏检型错误(P＜0．05)，A和B位点分型间别无显差别。中国人分型错误频率高的有A1(66．7％)，A3(50.0％)，A11(13．5％)，A9(11．8％)和A19(7．1％)及B16(50．0％)，B48(43．9％)，B15(16．7％)，B40(11．1％)，B13(10．0％)和B17(9．1％)等抗原。结论：血清学分型方法应与基因分型技术互为补充。     

增生性瘢痕形成的分子生物学研究

增生性瘢痕由于目前其发病机制还不清楚,给矫形美容外科治疗病理性瘢痕带来了一定的困难.为了解决增生性瘢痕的治疗问题,国内外学者在细胞和分子生物学方面就增生性瘢痕的形成做了大量的研究,取得了不少的成果,开辟了增生性瘢痕治疗学上的新天地。现阐述近年来病理性瘢痕形成的分子生物学机制和增生性瘢痕形成的分子生物学研究进展。