错配修复hMLH3基因C2825T和A2173C突变在家族性食管癌中的意义

 目的 探讨错配修复基因hMLH3在家族性食管癌发病中的突变及其作用.方法 应用聚合酶链反应(PCR)、变性高效液相色谱分析(DHPLC)和直接测序法检测8个有遗传背景的食管癌家族的hMLH3基因突变情况.结果 在2个家系中发现了2处错义突变C2825T和A2173C.33%的突变发生于低风险的人群中,而高风险家系中有20%的基因突变.在2个家系中hMLH3的错义突变与食管癌发生有较强的相关性.结论 首次发现hMLH3基因C2825T和A2173C错义突变.hMLH3基因作为一新的风险基因,在家族性食管癌的发病中可能通过与其它基因互相叠加、共同起作用.     

急性髓细胞白血病FLT3基因内部串联重复和点突变及治疗

FLT3受体是Ⅲ型受体酪氨酸激酶家族中成员。FLT3突变是急性髓细胞白血病（AML）中一种最常见基因改变,1/3的AML患者有该基因突变,最主要的突变包括FLT3近膜区（JM）内部串联重复突变（ITD）和＂活化环＂处点突变（TKD）。这些突变导致FLT3下游信号通路持续活化和变异细胞增殖[1]。     

家族性多发性内分泌腺瘤2A型的基因诊断

目的：提高对多发性内分泌腺瘤2型（multiple endocrine neoplasia 2, MEN2）的诊断和预测诊断水平。方法对临床已诊断首发症状为嗜铬细胞瘤的一个家族内两姐妹患者进行RET（外显子10～16）、VHL（外显子1～3）、SDHD（外显子1～4）、SDHB（外显子1～8）及SDHC（外显子1～6）基因测序。发现两患者均有RET基因634号核酸发生突变,并对其家族其他成员的RET基因进行测序。结果其家族内共有5例患者均有RET基因634号突变（ TGC突变为CGC）,导致其氨基酸编码由半胱氨酸变为精氨酸。其中2例先为临床诊断然后基因诊断,1例先由基因诊断然后临床诊断,2例（均为儿童,分别为6岁及7岁）为基因诊断,目前尚未发病。其中3例行腹腔镜双侧肾上腺肿瘤切除术,病理确诊为双侧嗜铬细胞瘤;1例行甲状腺切除术,病理诊断为甲状腺髓样癌。结论对于多发性内分泌多发肿瘤2A型患者及其家族成员行基因检查不仅可以作为确诊手段,更可以作为无症状者的预测诊断途径。     

过氧化氢导致肠上皮细胞线粒体编码三磷酸腺苷合成酶基因损伤的研究

目的 探讨过氧化氢（H2O2）对肠上皮细胞线粒体DNA（mtDNA)编码的三磷酸腺苷（ATP）合成酶基因的损伤作用。方法 肠上皮细胞株（SW－480）采用4mmol/L H2O2处理后进行mtDNA的提取，对ATP合成酶的ATPase6亚基、ATPase8亚基基因进行聚合酶链反应（PCR）扩增，并对PCR产物直接进行测序；同时于该时相点测定酶活性。结果 ATPase 8亚基基因在8385－8543段出现大范围的点突变；H2O2可导致mtDNA突变基因所编码的ATP合成酶活性明显下降。结论 H2O2可明显损伤mtDNA编码的ATP合成酶基因，这种损伤作用最终导致其编码的酶蛋白活性明显下降。     

GJB3基因在新疆维汉两民族遗传性非综合征耳聋患者的突变分析

目的耳聋具有高度的遗传异质性,分析GJB3基因在新疆地区维汉两族中的突变,了解其分子病因学机制。方法调查对象来自新疆地区非综合征耳聋患者（耳聋组）93例,其中维吾尔族43例。对照组为听力正常者110例．其中维吾尔族56例。所有受检者均采集外周血并提取DNA,应用聚合酶链反应（PCR）产物直接测序方法对各种感音神经性耳聋患者93名、对照组110名进行GJB3基因编码区突变检测及鉴定。结果在93名患者中发现GJB3基因的3种单核苷酸改变,其中有两种碱基变化导致了氨基酸的改变,为错义突变方式。其中1个突变（256G→A）,另1个突变形式（33C→T）为本研究首次发现。110名正常对照组中未发现同样突变。结论国人非综合征型遗传性聋者GJB3基因突变筛查研究发现了一个GJB3基因新的突变形式（256G→A）,为进一步开展耳聋相关基因的筛查研究打下了基础。     

家族性腺瘤性息肉病与APC基因相关性研究进展

随着纤维结肠镜技术的发展和普及,以及PCRR-SSCP等技术的应用,家族性腺瘤性息肉（familial adenomatous poly-posis,FAP）病的检出率逐年增高。此种以家族性聚集为典型特征的遗传性疾病是一种常染色体显性遗传病[1]。目前普遍认为家族性腺瘤性息肉病的发生与APC基因突变有着直接关系。正确认识APC基因的作用、其突变所产生的影响以及准确检测APC基因的突变对于家族性腺瘤性息肉病的治疗、恶变预防和预后有着重要意义。     

人脑肿瘤组织中p53基因249位密码子点突变的研究

点突变是野生型P53基因失去阻止细胞分裂和抑瘤功能的主要方式。目前在多种肿瘤中如结肠癌、肺癌、成骨肉瘤、食管癌、肝癌及乳腺癌等发现有P53基因的点突变，且175、249和273位密码子是突变热点（hot0PO小“‘。更令人感兴趣的是P53基因的突变与病人的临床分期和预后相关，具有指导临床应用的价值o－”。人脑肿瘤组织中P53基因点突变研究较少。本文用聚合酶链反应——限制性片段长度多态性（PCR——RFLP）分析法检测人脑肿瘤P53基因第7外显子249位密码子点突变情况，旨在探讨P53基因突变和人脑肿瘤的发生及转归等的关系。材料和方法1…     

CYP450基因多态性研究进展

基因多态性是指同一人群的同一基因位点上存在多个等位基因的形态,且遵循孟德尔定律。细胞色素P450（CYP450）家族代谢酶的基因多态性,导致了药物和机体之间出现多种表型,这些多个等位基因中的任何一对的发生频率在1％以上,     

检测PKD2基因多态性生物芯片的建立

目的：PKD2基因在人群中以多种等住基因的形式存在和遗传，其中某些变异型等位基因所编码的多囊蛋白2功能发生改变或缺失，从而引起常染色体显性遗传多囊肾病（ADPKD）的发生。检测PKD2基因的变异情况具有重要的临床诊断意义。方法：针对文献报道的中国人群中检测发现的PKD2变异位点，设计检测探针度引物，并制备基因芯片，构建了基因片段的质粒作为标准模板。结果：通过实验优化，建立了样品荧光标记、基因芯片杂交与检测的条件度分型标准。通过对标准质粒模板和人外周血提取的基因组DNA模板的检测，验证了基因芯片检测结果的重复性和准确性。结论：本实验制备的基因芯片可以准确区分PKD2基因中的9个突变住点的变异情况。     

ABCA1基因编码区SNP检测及R1587K与血脂和冠心病的关系

目的探讨三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因ABCA1R1587K单核苷酸多态性(SNP)在中国广东汉族人群中的发生情况及该多态性与脂代谢和冠心病易感性的关系。方法选择确诊的冠心病患者112例和同地区正常人108例,以引物引入限制性内切酶分析聚合酶链反应(PIRA-PCR)方法对ABCA1的R1587K多态性进行检测,并进行血脂水平检测。结果全部检测人群中RR型占49·1%,RK型占44·1%,KK型占6·8%。等位基因频率符合Hardy-Weinberg平衡,冠心病及正常人中R携带者HDL-C水平均明显高于非携带者(P<0·01)。在ABCA1的RR、RK和KK3种基因型中,HDL-C水平依次下降(分别1·35±0·29、1·24±0·27、0·77±0·21mmol/L,P<0·01)。多重回归分析提示,R1587K基因型与HDL-C水平有显著相关(P=0·000)。冠心病患者与正常人等位基因频率、基因型频率差异无显著性(P>0·05)。K基因型携带者与非携带者患冠心病的风险无显著性差异(OR=0·889,95%CI=0·49~1·61,P>0·05)。结论ABCA1基因编码区R1587K携带情况与人群血浆HDL-C水平密切相关,K携带者血浆HDL-C水平明显下降,但与冠心病患病风险无明显相关性。     

过氧化氢导致肠上皮细胞线粒体DNA编码基因损伤的研究

目的 :探讨过氧化氢 (H2 O2 )对肠上皮细胞线粒体DNA编码细胞色素C氧化酶、ATP合成酶基因的损伤作用。方法 :肠上皮细胞株 (SW - 4 80 ) ,采用 4mmol·L-1H2 O2 处理细胞后进行线粒体DNA的提取 ,对细胞色素C氧化酶 (COXⅠ、COXⅡ、COXⅢ )基因、ATP合成酶 (ATPase 6亚基、ATPase8亚基 )基因进行PCR扩增 ,并将PCR产物进行直接测序。结果 :细胞色素C氧化酶COXⅠ从 6 80 3～ 6 84 8出现大范围的点突变及 70 2 7出现点突变 (TC) ,在 732 9(CG)、7341(TG)、735 2 (GA)出现点突变 ,在 7337出现缺失突变 (缺T) ;COXⅡ序列在 82 19～ 82 6 0段出现大范围的点突变 ;Atpase 8亚基基因在 8385～ 85 4 3段出现大范围的点突变。结论 :H2 O2 可明显损伤mtDNA编码的细胞色素C氧化酶及ATP合成酶基因。     

XRCCl基因多态性与青海世居汉族乳腺癌关系的研究

目的：研究青海世居汉族人群乳腺癌易感性与x射线损伤修复交叉互补基因1（XRCC1）C26304T位点基因多态性的相关关系。方法：应用聚合酶链反应一限制性片段多态性（PCR—RFLPs）方法检测青海世居汉族人群30例乳腺癌患者（乳腺癌组）及30例乳腺良性病变患者（对照组）XRCClC26304T基因多态性分布情况。同时运用统计学方法对XRCClC26304T的基因型和基因频率进行分析。结果：XRCC1C26304T基因CC、CT、TT基因型在对照组中分别是56．7％、33．3％、10％,而在乳腺癌组中分别是50．0％、36．7％、13．3％。TT基因型在对照组及乳腺癌组中,相对于CT、CC基因组表达较低,但是对照组和乳腺癌组间并没有明显差异（P〉0．05）。经过分析,c、T基因频率在对照组中是0．733、0．267,而在乳腺癌组中是0．683、0．317,两组比较,c、T基因频率也无明显差异（P〉0．05）。结论：XRCClC26304T基因多态性可能与青海世居汉族人群乳腺癌易感性无关。     

96例冠心病介入治疗患者ABCA1基因启动子区-477C/T单核苷酸多态性分析

目的研究ABCA1基因启动子区-477C／T单核苷酸多态性（SNP）与血浆高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和冠心病的关系。方法用聚合酶链反应、限制性酶切法（PCR-RFLP）检测96例冠心病患者和100例正常人的ABCA1基因启动子区-477位点基因型,比较基因型在冠心病组与正常人组间、冠心病组中不同病变亚组之间分布的差异性及3种基因型与冠心病相关临床指标的关系。结果冠心病组与正常人组比较,3种基因型CC、CT、TT分布频率差异具有显著性。TT基因型、T等位基因在冠心病组中的分布频率明显高于对照组（P〈0．05、P〈0．01）。冠心病组中,急性冠脉综合征组TT基因型、T等位基因明显高于稳定性心绞痛组（P〈0．05、P〈0．01）,多支病变组TT基因型明显高于单支病变组（P〈0．05）,TT基因型血浆I-IDL-C水平明显低于CC基因型（P〈0．01）。结论ABCAl基因启动子区-477C／TSNP可显著影响中国冠心病者血浆HDL-C水平,而且与冠心病严重程度相关。     

中国人群低钾型周期性麻痹家系CACNA1S和SCN4A基因突变状态分析

目的 检测中国人群中低钾型周期性麻痹(HPP)家系CACNA1S和SCN4A基因的突变情况,并与既往文献报道的西方白种人群HPP基因突变情况进行比较分析.方法 应用PCR和DNA测序技术,对2个家族性HPP家系、1个甲亢性HPP家系和4例散发性HPP患者的CACNA1S基因和SCN4A基因进行测序,与基因库中的参考序列比对,以确定是否存在突变.在PubMed数据库中,搜集1999年1月-2012年12月公开发表的关于HPP家系CACNA1S、SCN4A基因突变的相关文献,最终纳入9篇文献.结果 先证者均存在伴有血清钾降低的发作性肌无力、肌无力常累及四肢等典型的HPP临床表现,辅助检查证实血清钾降低,心电图提示低钾性改变,肌电图提示运动电位时限短、波幅低,诊断明确.3个家系的先证者和家族成员以及4例散发性HPP患者的CACNA 1S和SCN4A基因中未发现突变位点.既往文献显示,西方白种人群中HPP患者CACNA1S及SCN4A基因的突变阳性率远高于中国人群.结论 中国人群HPP患者CACNAIS和SCN4A基因突变率极低,与西方白人患者的检测结果存在差异.     

肌酸激酶同工酶及其基因与耐力的关系

随着生物医学和体育科学的迅速发展,人们对肌酸激酶(creatinekinase,CK)家族的研究也越来越深入。CK家族是由5种酶组成,广泛存在于骨骼肌、心肌、神经组织和线粒体等需能部位,不同组织中酶的种类和比例不同。一般认为,CK酶家族的共同作用是催化肌酸和磷酸肌酸的相互转化,同时释放ATP供给生命活动。不同CK酶的作用有所不同,CKMM酶与耐力呈一定负相关,而CKMB酶及线粒体CK酶与耐力呈一定正相关。研究表明,CKM(muscle,肌型)基因和CKB(brain,脑型)基因与耐力运动能力相关[1],CKM基因型影响个体的VO2max及VO2max的训练效果。耐力训…     

ABCA1在卵巢癌中的表达及临床意义

 目的 探讨ATP结合盒转运体A1 (ABCA1)在卵巢癌(ovarian cancer)中的表达及临床意义。方法 选择2016-01至2020-12首都医科大学附属北京妇产医院患者212例,其中106例卵巢癌患者为卵巢癌组,另106例良性卵巢上皮性肿瘤患者为对照组。常规收集患者空腹肘静脉血,用酶氧化法分析两组之间血脂含量[三酰甘油(CHO)、总胆固醇(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)]并进行差异分析;采用免疫组化及Western-blot检测组织中ABCA1的表达情况并进行差异分析;采用Kaplan-Meier生存分析方法估计ABCA1表达情况及卵巢癌患者生存之间的关系,并应用Log-rank方法进一步验证。结果 与对照组相比,卵巢癌组患者外周血中血脂水平(CHO、TG、HDL、LDL)显著降低(P<0.01); ABCA1在两组中均存在表达,而卵巢癌组的表达量(0.15±0.02)明显高于对照组(0.06±0.01),差异有统计学意义(P<0.01);生存分析结果显示,ABCA1阳性表达组的中位总生存期为48.0个月(95%CI: 45.9~51.5个月),而ABCA1阴性表达组的中位总生存期为57.0个月(95%CI: 54.7~58.9个月),ABCA1表达量与卵巢癌患者生存期之间存在负相关(P<0.01)。结论 ABCA1与卵巢癌发病密切相关,可能通过调控卵巢癌的脂质代谢从而参与卵巢癌的发生发展,进而影响患者预后。     

HSP70基因多态性与宁夏回汉民族2型糖尿病的关联研究

目的：探讨热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）家族基因多态性与宁夏回汉族人群2型糖尿病（ type 2 diabetes mellitus,T2DM）之间的关联。方法采用病例对照研究设计,按照纳入与排除标准,于2010年3月至2011年10月在宁夏医科大学第二附属医院与教学医院（吴忠市人民医院）收集201例T2DM患者和471例按年龄、性别、民族匹配的健康人为研究对象。应用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism ,PCR-RFLP）技术分析基因HSP70-1（＋190G／C）、HSP70-2（＋1267A／G）和HSP70-hom（＋2437T／C）的基因型及等位基因分布的频率。采用礸2检验及Logistic回归分析研究指标与T2DM间的关系。结果 HSP70-1、HSP70-hom基因各基因型及等位基因频率在病例组及对照组的分布差异均无统计学意义（P＞0．05）,而病例组HSP70-2基因GG基因型及G等位基因频率明显高于对照组,差异均有统计学意义（礸2＝14．737,12．769,P＜0．01）;HSP70-1、HSP70-2、HSP70-hom基因各基因型及等位基因频率在回汉族人群中分布的差异均无统计学意义（ P＞0．05）;病例组与对照组中不同性别人群HSP70-1基因＋190位点和HSP70-hom基因＋2437位点基因型及等位基因频率分布的差异均无统计学意义,病例组男性HSP70-2基因型频率分布与女性比较差异无统计学意义（P＞0．05）,而等位基因频率的差异有统计学意义（礸2＝4．165,P＜0．05）;病例组男性HSP70-1、HSP70-hom基因各基因型及等位基因频率与女性比较差异均无统计学意义（P＞0．05）;多因素Logistic回归分析显示,T2DM患病的危险因素主要有腰围（waist circumference,WC）、甘油三酯（triglycerides,TG）、总胆固醇（total cho-lesterol,TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、收缩压（systolic blood pressure,SBP）、糖尿病家族史、G等位基因;而高密度脂蛋白胆固醇（ high-density lipoprotein cholesterol ,HDL-C）为其保护性因素。结论 HSP70-2基因GG基因型及G等位基因携带可能与T2DM的发病有关;宁夏回汉民族间HSP70家族基因各基因型及等位基因频率的分布无明显差异;糖尿病家族史、LDL-C、TC、HSP70-2 G等位基因是影响回汉族人群T2DM发病的重要危险因素;不同性别间HSP70-2基因G等位基因频率的分布可能存在差异,有待进一步研究证实。     

ATP敏感性钾通道的分子生物学与药理学研究进展

综述ATP敏感性钾通道（ATP－sensitive potassium channel,KATP）的结构功能相关性和调控机制、KATP与家族性高胰岛素血症的相关性及其在脑缺血中的调节作用。KATP是由调节亚基磺酰脲类受体（sulfonylureas,SUR)和通道形成亚基内向整流钾通道（inwardly rectified potassium channel,Kir)按1：1比例组成的异源性八聚体（SUR／Kir6.X)4。细胞内〔ATP〕i和〔ADP〕i变化调节KATP活性,KATP将心肌、血管平滑肌、骨骼肌、神经元和内分泌细胞的代谢和电活动偶联起来,并在这些组织发挥重要的生理学和病理学调节作用。Kir6.X亚基决定K^ 选择性内向整流作用和单位导电系数,但核苷敏感性和药理学特性取决于SUR。SUR和Kir6.X的多种业型导致了KATP亚型的多样性和功能调节的复杂性。SUR1或Kir6.2突变使胰腺β细胞KATP丧失,导致家族高胰岛素血症,KATP的开放可能是脑缺血缺氧的重要自身保护机制。     

梅毒患者红细胞CR1密度相关基因多态性的研究

目的探讨梅毒患者红细胞CR1密度相关基因型的频率分布。方法采用聚合酶链反应（PCR）、限制性内切酶HindⅢ酶切技术测定患者红细胞CR1密度相关基因多态性。结果患病组中CR1基因HH、HL和LL基因型分布频率分别为58.75%、35.00%和6.25%,对照组中HH、HL和LL基因型分布频率分别为68.75%、26.25%和5.00%,两组CR1基因型的分布频率差异无显著性（P〉0.05）;梅毒患者组基因突变率为41.25%,对照组为31.25%,也无显著性差异（P〉0.05）。结论梅毒患者的红细胞免疫功能低下与红细胞CR1基因发生突变关系不密切。     

白细胞介素1β基因单核苷酸多态性分析

目的 检测中国人白细胞介素1（interleukin-1，IL-1）β基因多态性，并初步预测调控区单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）对IL-1β功能的影响。方法 对来自中国人群有代表性的10个民族27名个体的基因组DNA作为样本，采用直接测序的方法检测IL-1β基因的5’区、编码区、部分内含子区和3’区序列，以确定中国人群中IL-1β基因多态性的位置和类型，用生物信息学方法对5’区SNPs的功能进行初步预测。结果 在4610bp的测序片段中，共发现了6个SNPs，包括5’区3个，内含子区3个，其中5’区的-511T／C、-31C／TSNP国内外已有报道，而-1470G／CSNP未见相关报道。生物信息学分析其中5’区的3个SNP均不在5区的重复区，且3个位点都是与IL-1β转录有关的核因子结合的区域。结论 IL-1β调控区3个SNPs可能对IL-1B表达产生影响，有待进一步深入研究。