细菌梭曼水解酶活性的测定

细菌梭曼水解酶活性的测定董泗建刘昌玲梭曼水解酶是国内外抗有机磷毒剂药物研究方向之一，是从菌种微球菌中提取分离得到了一种触酶，称它为细菌梭曼水解酶，它不仅具有催化水解过氧化氢的作用，而且也能催化水解Ｇ类有机磷毒剂的作用。目前，检测有机磷毒剂的方法操作麻...     

黄杆菌对硫磷水解酶及大肠杆菌过氧化氢酶无水解梭曼活性

黄杆菌对硫磷水解酶及大肠杆菌过氧化氢酶无水解梭曼活性邵煌孙曼霁（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）黄杆菌（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐ．ｓｔｒａｉｎＡＴＣＣ２７５５１）和缺陷假单胞菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｄｉｍｉｎｕｔａＭＧ）的对...     

催化神经毒剂梭曼水解的抗体酶

催化神经毒剂梭曼水解的抗体酶赵毅民荣康泰徐勤惠（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）梭曼是难防难治的有机磷毒剂．为了寻找新的解毒途径，本研究设计并合成了全新化合物１－羟基－１－对胺基苯基甲膦酸单频哪基醇酯．此化合物可竞争性地抑制梭曼水解酶...     

糜蛋白酶预防外科术后肠粘连

糜蛋白酶即α-糜蛋白酶,系从牛或猪胰中提取得到的一种蛋白水解酶,不仅具有肽链内切酶作用,能选择性地水解由芳香族或脂肪族氨基酸形成的肽键,迅速分解蛋白质为分子量较小的肽,而且具有脂酶样活性,能水解酯键.     

山莨菪碱对大鼠体内梭曼解毒的影响

通过测定大鼠血液中梭曼残留浓度及组织中羧酸酯酶 (CaE)活性 ,评价了山莨菪碱对大鼠血液中梭曼消除的影响 .结果表明 ,4 15 μg·kg- 1梭曼 (5LD50 )iv后 15s时 ,山莨菪碱即显著加速了梭曼在大鼠血液中的消除 ,使血中梭曼浓度由 (434± 70 ) μg·L- 1下降到 (342± 4 7) μg·L- 1;CaE活性测定结果表明 ,山莨菪碱有加强梭曼抑制肠道及血浆中CaE的作用 ,提示山莨菪碱加速了梭曼在大鼠血液中的消除 ,可能与该药的改善外周微循环作用有关 ,使更多的梭曼向外周组织中分布 ,并增加了梭曼与外周组织中解毒酶特别是肠道CaE的结合所致     

脯氨肽酶在军事医学中的应用

应用酶清除神经性化学毒剂及有机磷农药的研究课题已有 5 0多年。 194 6年Mazur[1] 首次报道了兔组织中一种酶有水解二异丙氟磷酸酯 (DFP)的能力。 1992年国际生化组织 (TheInternationalUnionofBiochemistry)将此酶定义为有机磷酸酸酐水解酶 (Organophophorusacidanhydrolase ,OPAA ,E .C .3.1.8.2 )。它能水解多种有机磷酸乙酰胆碱酯酶抑制剂 ,包括DPF、神经性化学毒剂梭曼 (Soman)、沙林 (Sarin)和塔崩 (Tabun)以及杀虫剂对硫磷 (parathion)和对氧磷 (paraoxon)等。酶法去污染及化学毒剂的销毁意义重大。以前曾根据水解底物的不…     

人的基因工程氨酰基脯氨酸二肽酶的多效酶活性(英文)

目的　研究人氨酰基脯氨酸二肽酶除催化水解C端为脯氨酸残基的二肽外 ,是否还有G类有机磷化合物水解酶 (G酶)活性。方法　用基因工程技术克隆及表达人的重组氨酰基脯氨酸二肽酶。氨酰基脯氨酸二肽酶及G酶活性用常规方法测定。结果　COS 7细胞表达的人氨酰基脯氨酸二肽酶催化有机磷化合物梭曼的水解 ,也水解二肽化合物Gly Pro。两种活性比未转染的COS 7细胞高 2倍。比较转染了带有氨酰基脯氨酸二肽酶基因的重组载体的COS 7细胞和对照组细胞中的两种酶活性 ,可以看到有平行的升高趋势及恒定的酶活性比值。结论G酶和氨酰基脯氨酸二肽酶为同一个酶 ,或至少属于同工酶     

维生素A和维生素E对梭曼染毒大鼠自由基损伤的预防作用

目的　探讨梭曼染毒自由基损伤及维生素A(VA)和维生素E(VE)对该损伤的保护作用。方法　实验设对照组 ,梭曼染毒模型组及VA 和VE 实验组。在梭曼染毒前 ,对照组和梭曼染毒模型组ig处理过的菜子油 (1mL·kg- 1·d- 1) ,VA 及VE 实验组分别按VA2mg·kg- 1和VE2 .5mg·kg- 1的剂量ig ,共 9d。d 10除对照组外 ,其余大鼠均用梭曼腹部sc(6 3μg·kg- 1) ,中毒 2h后宰杀取血和肝脏组织 ,观察大鼠血清和肝组织中相关指标的变化。结果　结果显示 ,染毒模型组AChE严重下降 ,血清和肝组织中MDA含量明显升高 ,血清和肝组织中SOD活性下降 ,全血和肝组织中GSH Px活性呈显著下降趋势。VA 和VE 实验组血清MDA含量下降 ,在血清和肝组织中SOD及全血和肝组织中GSH Px活性均上升。结论　梭曼染毒引起AChE活性严重下降 ,同时伴有严重的自由基损伤 ,染毒前大鼠用VA 和VEig处理 ,能够保护AChE活性 ,同时作为抗氧化剂的VA和VE 能保护梭曼染毒所致的自由基损伤     

有机磷化合物解毒酶在人体组织中的分布

测定了人体各种组织中与有机磷化合物代谢有关的二异丙基氟磷酸酯酶(DFPase)，对氧磷酶，乙酰胆碱酯酶(AChE)，丁酰胆碱酯酶(BChE)及羧基酯酶(CaE)的活性水平. 结果表明：在肾脏，脾脏和肝脏中含有丰富的DFPase，可催化水解梭曼其他组织该酶活性均很低除人血清外，其他组织均未测到对氧磷酶活性AChE和BChE主要分布于中脑，桥脑，延脑，纹状体及丘脑等脑干区域，另外肝脏中BChE的比活性也较高CaE主要分布于肝脏组织中，肺脏中也有较高的CaE活性.以上结果对了解有机磷化合物在人体中的中毒及代谢提供了一定的理论基础.     

蟾蜍血清高密度脂蛋白(HDL)的分离鉴定及对梭曼的水解作用

用阶段密度梯度超速离心法,从蟾蜍血清中分离出7个组份,somanase(A酯酶)的活性在第3组份(35 ml离心管),或分成10个组分,则活性在第5组份(10 ml离心管),提纯12倍,对重复加入的梭曼水解较快。用苏丹黑预染聚丙烯酰胺凝胶电泳法,油红“0”脂蛋白染色琼脂糖电泳法,均显示脂蛋白染色呈阳性反应的一条区带,并求出K_m,V_(max)和相关系数值。在含蔗糖—KBr的介质中稳定性好,60℃3d未失活。对脂质部分的定量分析、分子量测定、电镜检查、及飘浮系数值均符合HDL的特征,因此,血清中的梭曼水解酶是HDL的一种成分。     

山莨菪碱对大鼠体内梭曼解毒的影响

通过测定大鼠血液中梭曼残留浓度及组织中羧酸酯酶(CaE)活性,评价了山莨菪碱对大鼠血液中梭曼消除的影响. 结果表明,415 μg·kg^-1梭曼(5 LD₅₀)iv后15 s时,山莨菪碱即显著加速了梭曼在大鼠血液中的消除,使血中梭曼浓度由(434±70)μg·L^-1下降到(342±47)μg·L^-1;CaE活性测定结果表明,山莨菪碱有加强梭曼抑制肠道及血浆中CaE的作用,提示山莨菪碱加速了梭曼在大鼠血液中的消除,可能与该药的改善外周微循环作用有关,使更多的梭曼向外周组织中分布,并增加了梭曼与外周组织中解毒酶特别是肠道CaE的结合所致.     

过氧化氢酶对梭曼水解的催化作用

本文就过氧化氢酶与梭曼反应的性质进行了研讨，证明过氧化氢酶是催化梭曼水解的反应物，而不是简单的“中和”反应物；过氧化氢酶催化梭曼水解的米氏常数为０．２ｍｍｏｌ·Ｌ－１．叠氮化钠对过氧化氢酶催化梭曼和过氧化氢反应的影响是不同的，这种差别意味着过氧化氢酶分子具有两个分离的活性部位。     

Distribution of the scavenger esterases against organophosphorus compounds in human tissues

测定了人体各种组织中与有机磷化合物代谢有关的二异丙基氟磷酸酯酶（ＤＦＰａｓｅ），对氧磷酶，乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ），丁酰胆碱酯酶（ＢＣｈＥ）及羧基酯酶（ＣａＥ）的活性水平．结果表明：在肾脏，脾脏和肝脏中含有丰富的ＤＦＰａｓｅ，可催化水解梭曼．其他组织该酶活性均很低．除人血清外，其他组织均未测到对氧磷酶活性．ＡＣｈＥ和ＢＣｈＥ主要分布于中脑，桥脑，延脑，纹状体及丘脑等脑干区域，另外肝脏中ＢＣｈＥ的比活性也较高．ＣａＥ主要分布于肝脏组织中，肺脏中也有较高的ＣａＥ活性．以上结果对了解有机磷化合物在人体中的中毒及代谢提供了一定的理论基础     

模拟高原梭曼中毒磷脂酶 A_2 的变化及其在肺损伤中的作用

模拟高原梭曼中毒磷脂酶Ａ２的变化及其在肺损伤中的作用赵吉青魏相德吕宏宇胡贵方（第三军医大学毒理学教研室，重庆６３００３８）采用滴定法测定了在模拟高原４０００ｍ梭曼中毒后大鼠肺组织及肺灌洗液的磷脂酶Ａ２活性和伊文思蓝含量的变化．结果显示无论是单纯梭曼作...     

鱿鱼神经节的有机磷毒剂水解酶

<正> 作者用华氏呼吸检压法测定了软体动物鱿鱼太平洋褶桑鱼(Todarodes pacificus Steenstrup)的神经节部位的有机磷毒剂水解酶活力,并进行了初步分离。结果发现鱿鱼的脑、头部神经节、星状神经节均含有较丰富的水解酶,此酶可水解DFP和梭曼两种毒剂。 依利诺斯工学院Hoski曾对此酶进行过纯化,但未提及电泳纯度的鉴定。我们用0.01 M pH7.5的磷酸缓     

急性低压缺氧复合梭曼中毒对大鼠肺微血管损伤作用

应用伊文思蓝标记白蛋白法，微量滴定法和紫外法观察了急性低压缺氧复合梭曼中毒肺组织伊文思蓝含量，磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活力以及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＰＬＡ２活力，血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性和蛋白含量的变化。结果表明，低压缺氧（模拟海拔４０００ｍ）６ｈ后，给大鼠梭曼７２μｇ·ｋｇ－１ｓｃ，继续减压可引起肺组织伊文思蓝含量增加，ＢＡＬＦ中ＡＣＥ活性和蛋白含量升高，同时伴有肺组织和ＢＡＬＦ中ＰＬＡ２活性明显升高，提示急性低压缺氧复合梭曼中毒导致的肺损伤可表现为肺微血管通透性（ＰＭＶＰ）增高，微血管内皮细胞损伤和ＰＬＡ２的作用是引起ＰＭＶＰ增高的主要原因。     

乳猪肝制备肝水解肽的工艺研究

目的以乳猪肝为原料制备肝水解肽，分析产品活性。方法应用酶水解／超滤法提纯制备肝水解肽，采用Folin-酚法、四氮甲唑蓝（MTT）法测定含量及活性，并与成年动物肝脏对比。结果乳猪肝组收率明显高于成年动物肝组，产品活性与后者的比较，极显著性差异。结论采用乳猪肝制备肝水解肽，产品的生物活性高，收率好，具有一定的应用价值？     

体外不同动物及人血浆中羧酸酯酶与梭曼结合特点比较

羧酸酯酶 (ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ ,ＣａＥ)是一组能催化水解羧酸酯生成羧酸和乙醇的同工酶 .血浆中ＣａＥ含量存在种属差异 .啮齿类动物血浆中ＣａＥ含量最高 ,灵长类血浆中ＣａＥ含量最低 .目前国外认为动物对梭曼解毒能力的高低 ,在很大程度上与血液中ＣａＥ活性的高低密切相关 .然而 ,ＣａＥ能否充分发挥其解毒作用 ,除与酶自身活性高低有关外 ,还取决于ＣａＥ与梭曼亲和力的强弱 .为了解种属间ＣａＥ在结合梭曼时 ,是否存在不同的作用特点 ,本文在体外研究了梭曼与各种属血浆中ＣａＥ抑制的量 效关系 ,并首次发现人 ,犬血…     

梭曼单链抗体酶EP_6作用机理的计算机模拟

在梭曼抗体酶EP6可变区 (EP6V)三维结构的基础上利用自动柔性分子对接方法获得了PRCR 梭曼与EP6V复合物的结构 ,结构分析和相互作用能计算结果表明 ,氢键和静电作用在EP6V和PRCR 梭曼结合中起关键作用 ,抗体酶重链Asn 52和轻链Tyr 95在水解过程中起了关键作用 ,在生理条件下水分子在水解过程中也将起重要作用     

磷酸二酯酶IV在心血管系统中的表达、活性及作用

磷酸二酯酶(PDEs)催化水解细胞内第二信使cAMP及cGMP，使细胞内cAMP和cGMP呈浓度梯度及区室化分布，在信号传导和调控生理学反应中起中心作用，包括心血管系统在内的所有类型细胞的新陈代谢、收缩性、运动性和转录等。PDE4是cAMP特异性的水解酶，其水解活性通常占细胞内水解cAMP活性的绝大部分。近来的研究表明，PDE4在心血管系统的各种细胞类型上都有表达，在调控心血管系统的运动中有重要的作用，其表达和活性的改变与心衰和心律失常的发展有关。这些研究为开发治疗心血管疾病的药物提供了新的靶点。