不同厂家口炎清产品中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量比较

目的 研究不同厂家口炎清的质量情况,为提高药品标准、正确评价药品质量提供理论依据.方法 采用高效液相色谱(HP LC)法对4个厂家生产的10批口炎清中的主要成分绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量分数进行测定,色谱柱为Waters XBridgeTM C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,流速为1 mL/min;流动相为乙腈-0.4％(体积分数)醋酸(梯度洗脱),绿原酸采用二极管阵列检测器(PDAD)检测,检测波长为330 nm,灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙用蒸发光散射检测器(ELSD)检测,检测条件:雾化室温度60 ℃,漂移管温度65 ℃,N2的载气流量1.6 L/min,进样量8μL.结果 不同厂家口炎清产品中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙质量分数差别较大.口炎清颗粒剂的质量相比胶囊剂和片剂较好;口炎清胶囊中不但灰毡毛忍冬皂苷乙质量分数非常低,而且检测不到川续断皂苷乙;口炎清片样品中灰毡毛忍冬皂苷乙的质量分数却异常高.结论 不同厂家的口炎清产品由于原材料质量、制剂工艺等不同,导致了产品中有效成分的质量分数存在较大差异.     

HPLC-ELSD测定绥阳山银花中绿原酸和灰毡毛忍冬皂苷乙的含量

目的 采用HPLC-ELSD联用的方法对绥阳山银花中绿原酸和灰毡毛忍冬皂苷乙进行含量测定.方法 采用Phenomenex Luna C1s（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,柱温30℃,以乙腈为流动相A,0.4％醋酸溶液为流动相B,梯度洗脱（0～10 min,11.5％ A→15％A;10～12min,15％A→29％A;12～18 min,29％ A→33％ A; 18～30min,33％ A→45％A）,流速为0.8 mL/min,蒸发光散射检测器漂移管温度40℃.结果 绿原酸和灰毡毛忍冬皂苷乙的回归方程依次是y=4 609x-300.53（R2=0.9995）和y=5 810.1x-421.19（R2 =0.998 8）,其线性范围依次是0.0 804～ 0.6 432 mg/mL,0.0966～0.7728 mg/mL.平均加样回收率依次为100.5％,101.6％.结论 该方法操作简单,结果准确,绥阳山银花中绿原酸与灰毡毛忍冬皂苷乙的平均含量分别为4.45％、7.94％,均高于2010版《中国药典》的规定2.0％、5.0％,具有潜在的开发价值.     

正交试验优选山银花的微波灭菌工艺研究

目的 采用正交试验优选山银花的微波灭菌工艺.方法 以灭菌率及绿原酸的含量为指标,采用L9(34)正交试验对灭菌时间、灭菌功率、药材铺层厚度进行考察,并考察最佳微波灭菌工艺对绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷含量的影响.结果 筛选出最佳微波灭菌工艺参数:灭菌时间9 min、灭菌功率8 kW、药材铺层厚度3 cm.其绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷含量略有下降.结论 优选的微波灭菌工艺灭菌效果好,有效成分损失少,操作简便,适合大生产.     

HPLC-ELSD同时测定山银花中绿原酸、木犀草苷和川续断皂苷乙的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定山银花中绿原酸、木犀草苷和川续断皂苷乙的方法。方法:采用Col-umn XB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,用乙腈(A)-0.5%冰醋酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,以蒸发光散射检测器检测绿原酸和川续断皂苷乙。梯度程序为:0 min(A:9%,B:91%)保持10→12 min(A:29%,B:71%)→20 min(A:33%,B:67%)→25 min(A:45%,B:55%),流速1.0 ml/min;检测器漂移管温度100℃,载气流速为3.0 ml/min。结果:绿原酸、木犀草苷及川续断皂苷乙的回归方程分别为:Y绿原酸=1.341 1X+4.360 1,r=0.999 5;Y木犀草苷=25 948.31X-22.863 41,r=0.999 92,Y川续断皂苷乙=5.688 8 X+5.350 6,r=0.999 6。线性范围分别为:绿原酸0.005-0.045 mg/ml;木犀草苷0.017 7-0.085 5 mg/ml,川续断皂苷乙0.048 6-0.243 mg/ml。结论:该方法操作简便、结果准确,专属性强,分离效果和重现性好,可有效缩短总分析时间,为较全面控制金银花药材的质量控制提供了简便可靠的方法。     

灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因的克隆及表达分析

目的 分别克隆灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因全长序列,并进行生物信息学和表达量分析,以揭示HQT2在灰毡毛忍冬与忍冬绿原酸生物合成中的可能功能。方法 多糖多酚试剂盒法分别提取灰毡毛忍冬与忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆HQT2基因的全长c DNA序列,运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）分别测定灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花中相关基因的相对表达量;采用HPLC测定绿原酸含量并结合表达量做相关性分析。结果 克隆得到LmHQT2(MH196564)和LjHQT2(MK294639),其开放阅读框长度均为1 296 bp,编码431个氨基酸,生物信息学分析预测为亲水性蛋白,可能定位于细胞质中,属于氯霉素乙酰转移酶样结构域超家族;qRT-PCR结果显示,HQT2基因具有组织特异性,在灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花器官中表达存在差异;绿原酸含量与基因相对表达量之间呈现一定的相关性。结论 本研究成功克隆了灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因并探索其在不同器官中的表达模式,推测HQT2基因在灰毡毛忍冬与忍冬的绿原酸生物合成途径中发挥...     

金银花与山银花挥发性成分GC-MS的研究

金银花和山银花均属忍冬科植物,分别收载于<中国药典>2005年一部.金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或初开的花,山银花为忍冬科植物灰毡毛忍冬L.macranthoides Hand.-Mazz.、红腺忍冬L.hypoglauca Miq.或华南忍冬L.confusa DC.的干燥花蕾或初开的花.     

山银花的组织培养研究进展

正山银花为忍冬科植物灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.、红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq.、华南忍冬Lonicera Confusa DC.或黄褐毛忍冬Lonicera fulvotomentosa Hsuet S.C.Cheng的干燥花蕾或带初开的花[1]。具有抗病原微生物、抗炎退热、抗氧化、抗肿瘤、抗过敏、抗动脉粥样硬化、降血脂、保护肝脏、免疫调节等药理作用[2-3]。近年来,山银花的种植区域越来越广,如何提高其产量与质量一直备受关注。组织培养作为一种现代生物技术,在植物种质保存和优良品种快速繁育方面具有重要的应用价值。本文对山银花近十年组织培养的研究进行了综述,为进一步深入研究提供理论参考。     

金银花提取物的质量评价研究

【目的】采用特征图谱、绿原酸与木犀草苷含量测定、山银花检查等综合方法,评价市场金银花提取物的质量。【方法】高效液相色谱(HPLC)特征图谱及绿原酸含量测定以Kromasil 100-C18为色谱柱,流动相为乙腈—0.4%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为327 nm,柱温为35℃,流速为1.0 m L·min~(-1)。木犀草苷HPLC含量测定以ZOBAX SB-Phenyl为色谱柱,流动相为乙腈—0.5%(体积分数)冰乙酸(梯度洗脱),检测波长为350 nm,柱温为25℃,流速为0.9 m L·min~(-1)。山银花HPLCELSD检查方法,以Kromasil 100-C18为色谱柱,流动相为乙腈—0.4%(体积分数)冰乙酸(梯度洗脱),流速为1.0 m L·min~(-1)。【结果】13批市售金银花提取物特征图谱均检出6个酚酸类特征峰,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸。金银花与山银花药材均检出6个酚酸类特征峰,但药材与提取物相对峰面积差异较大,提示提取物制备过程中发生酚酸类成分异构体的转化。13批样品中有6批样品检出山银花的灰毡毛忍冬皂苷乙特征峰,提示这些样品为山银花提取物伪品或掺假山银花提取物。样品中绿原酸与木犀草苷含量分别为1.56~45.61 mg·g~(-1)、0.038~0.734 mg·g~(-1),山银花提取物伪品或掺伪品的绿原酸含量相对较高,而木犀草苷含量明显较低,不同厂家的正品金银花提取物绿原酸含量差异也较大,提示可能与金银花原料质量、制备工艺方法及辅料加入量的不统一有关。【结论】市场上金银花提取物质量差异很大,山银花假冒金银花或掺伪金银花现象严重,应加强原料质量控制、确定稳定的制备工艺,以保障提取物质量的稳定性。     

山银花研究的最新进展

山银花为临床常用中药，具有清热解毒、凉散风热的功效，常用于治疗痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热。山银花为灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides Hand．-Mazz．、红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq．或华南忍冬Lonicera confusa DC．的干燥花蕾或带初开的花。山银花在我国资源丰富，分布区域广，一直以来是多种中成药的主要原料。近年来还被广泛应用于食品、饮料、保健品、     

金银花与山银花之鉴别

金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb.)、红腺忍冬(L.hypoglarluca Miq.)、山银花(L.confusa Dc.)、毛花柱忍冬(L.dasystyla Rehd.)或灰毡毛忍冬(L.macranthoides hand)干燥花蕾或带初开的花,为常用中药,具有清热解毒、消痈散结、凉血止痢的功能,主治痈肿、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症,应用历史悠久.     

HPLC测定山银花药材中常春藤皂苷元的含量

目的建立山银花药材中的常春藤皂苷元含量的测定方法。方法以盐酸一乙醇溶液为水解溶剂,山银花样品加热回流4h,再用三氯甲烷萃取;采用HPLC,以Waters Symmetry C18（150min×4．6mm,5μm）色谱柱,甲醇-0．4％冰醋酸水溶液（80：20）为流动相,流速为1．0mL／min,柱温为30℃,检测波长为210nm,测定常春藤皂苷元含量。结果山银花中常春藤皂苷元的线性范围为2-12μg,平均加样回收率99．O％,RSD为1．9％。不同产地山银花的常春藤皂苷元含量差异较大．湖南隆回野生的含量高达2＋8％,而云南、贵州产的未检出。结论所建立方法操作简便、准确、可靠、重复性好．可用于山银花药材中常春藤皂苷元的含量测定。     

微粉化技术对金银花溶出度的影响

目的：考察微粉化技术对中药材金银花溶出度的影响。方法：以绿原酸含量为指标,采用薄层色谱法对中药材金银花进行定性鉴别,用紫外分光光度法测定金银花中绿原酸的含量。结果：随着粉碎粒度的变细,金银花有效成分绿原酸的提出量明显提高,超微粉（10μm）〉160目筛细粉〉120目筛细粉〉80目筛细粉〉60目筛细粉,超微粉有效成分含量比60目筛细粉提高14.4%。结论：微粉化技术对金银花溶出度影响明显。     

HPLC法同时测定中药金银花中咖啡酸和木犀草苷的含量

目的建立高效液相色谱（HPLC）方法同时测定中药金银花中咖啡酸及木犀草苷的含量。方法采用Agilent C18色谱柱（250mm×4.6mm,5.0μm）,流动相采用甲醇：0.1%的磷酸水溶液,按照梯度洗脱方式,流速为1.0ml/min,进样量为15μl,检测波长为338nm,柱温为25℃。结果咖啡酸与木犀草苷分别在8.1-82.0μg/ml、2.1-42.0μg/ml范围内线性关系良好,线性回归方程分别为Y=37.71X-265.77（R=0.9997）,Y=15.56X＋3.98（R=0.9995）。结论采用HPLC方法测定金银花中的有效成分咖啡酸、木犀草苷,方法简单、分离效果好,重复性好,是一种较好的检测金银花药材质量的方式。     

产地加工方法对山银花药材品质的影响

目的 比较不同产地加工方法对山银花药材外观及其有效成分绿原酸含量的影响。方法采用HPLC法,测定6种产地加工方法的山银花含量。结果不同产地加工方法的药材中外观及其绿原酸含量相差悬殊,绿原酸的含量从高到低依次为烘烤法>蒸制干燥法>熏硫干燥法>炒制干燥法>生晒法>晾干法。结论烘烤法加工的药材外观质量最优,绿原酸含量最高,应广泛推广和应用。     

柴芩清肾颗粒质量标准的研究

目的：建立柴芩清肾颗粒的定性、定量鉴别方法。方法：采用薄层色谱法对柴芩清肾颗粒中的黄芩、金银花、柴胡、连翘进行定性鉴别。采用高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷的含量,色谱柱：ZorbaxC18柱（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：甲醇-水-冰醋酸（50∶50∶1）;流速：1.0mL/min;检测波长：277nm;进样量：10μL。结果：采用薄层色谱法定性鉴别专属性强,斑点清晰;含量测定结果表明,黄芩苷的线性范围为0.202μg～4.04μg,r=0.9999（n=5）,平均加样回收率为100.22%,RSD=1.53%（n=6）。结论：所建立的方法简便、准确,专属性强,可作为柴芩清肾颗粒的质量控制标准。     

HPLC法测定小儿解表颗粒中金银花及单味金银花绿原酸的含量

目的建立高效液相色谱法测定小儿解表颗粒中绿原酸含量的方法。方法采用Hypersil C18（250mm×4．6mm,5um）,色谱柱;以乙腈-0．4％磷酸溶液（13：87）为流动相,流速为1．0mL／min,柱温为室温,检测波长为327nm,以外标法测定金银花药材及小儿解表颗粒中绿原酸的含量。结果绿原酸在11．2～134．4ug·mL^-1内呈线性关系。绿原酸在制剂中的平均回收率（n=5）为99．18％（RSD=0．60％）。结论该方法准确、简便、重现性好,可用于小儿解表颗粒的质量控制。     

毛细管电泳-安培检测测定金银花中的绿原酸和木犀草素

目的测定金银花中的绿原酸和木犀草素。方法采用毛细管电泳-安培检测，以微碳圆盘电极为检测电极，检测电位0．95V、pH8的50mmol／LNa2B4O7-100mmol／L NaH2PO4缓冲液为运行液，使用长70cm、内径25μm的熔融石英毛细管分离。结果当分离电压为21kV时，绿原酸和木犀草素在26min内完全分离。绿原酸和木犀草素的线性范围为0．35～21．0μg/ml和0．20～12．0μg/ml，检出限为0．08μg/ml和0．01μg/ml。结论毛细管电泳-安培检测法可用于金银花中绿原酸和木犀草素含量的测定。     

胶束电动毛细管色谱法测定山银花中5种有效成分含量

建立了简单、快速且能同时分离测定山银花中马钱子苷、当药苷、异绿原酸、木犀草苷、绿原酸5种有效成分含量的胶束电动毛细管色谱法。该方法缓冲液由60mM及10mM硼酸缓冲溶液组成;未涂层石英毛细管柱（50μm×50cm）;运行电压30kV;柱温25℃;检测波长为254nm;50mbar（3s）压力进样。山银花中5种有效成分在8min内分离良好,线性范围内r≥0.9900,所测有效成分的日内精密度RSD〈3%（n=6）,平均加样回收率在72%~103.1%之间。该方法简便、快速、结果准确可靠,可作为山银花及其制剂的质量控制方法。