冬眠心肌的研究进展

冬眠心肌的研究进展郭金成综述胡旭东审校（北京市心肺血管医疗研究中心，北京１０００２９）ＰｒｏｇｒｅｓｓｉｎＳｔｕｄｙｏｎＨｉｂｅｒｎａｔｉｎｇＭｙｏｃａｒｄｉｕｍＧｕｏＪｉｎｃｈｅｎｇ（ＣａｒｄｉｏｐｕｌｍｏｎｖａｓｃｕｌａｒＶａｓｃｕｌａｒＭｅｄｉ...     

气管夹闭窒息法致家兔心脏骤停模型的建立

目的:建立一种稳定的、可操作性强的家兔心脏骤停模型,以满足研究药物对心肺复苏评价的需求。方法:取健康成年家兔28只,雌雄不拘,体重2.0-2.5 k只;耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠(1.2 ml/kg)麻醉;行气管切开、颈外动脉插管,监测有创动脉血压,以气管夹闭窒息法致心脏停搏,观察窒息至心脏停搏的时间及平均动脉压(MAP)的变化,并行心肺复苏,研究各种方法对心肺复苏成功率的影响。结果:气管夹闭前MAP为102.000±7.091mmHg;夹闭后平均动脉压升高峰值128.750±6.453 mmHg,高峰出现时间1分47.500秒±10.351秒,MAP明显下降时间2分51.875秒±20.343秒,降至50 mmHg时间3分48.125±33.374秒,5分钟时MAP 27.125±12.495mmHg,7分钟时8.000±3.817 mmHg,自主循环恢复25例,失败3例,成功率89％。结论:该模型具有满意的可操作性及可重复性,能够满足心肺复苏的实验研究。     

一种高效便捷的家兔肺气肿模型建立方法

目的应用猪胰蛋白酶气管注入同时联合木瓜蛋白酶静脉注射法来建立家兔肺气肿模型。方法将家兔随机分为模型组及对照组。模型组兔耳缘静脉注入8%木瓜蛋白酶同时5%猪胰蛋白酶气管注入制作模型。对照组:家兔经环甲膜穿刺一次性注入生理盐水1 ml/kg。再经家兔耳缘静脉一次性注入生理盐水1 ml/kg。观测实验动物动脉血气及肺功能,并对肺组织进行病理学观察。结果与正常对照组相比,模型组兔动脉血Pa CO2升高;而p H值、Pa O2、Sp O2降低;潮气量下降,呼吸总阻力、中心阻力、总气道阻力升高;病理组织切片光镜下见肺泡壁变薄、断裂,肺泡腔扩张、融合,典型肺气肿表现。结论应用猪胰蛋白酶气管注入同时联合木瓜蛋白酶静脉注射法能成功建立兔肺气肿模型。该方法快捷可靠,适用于各种肺气肿动物研究实验。     

DSE、SPECT检测家猪慢性冬眠心肌的对比研究

目的 (1)比较硝酸甘油介入^99Tc^m-甲氧基异丁基异腈(MIBI)单光子发射计算机断层心肌灌注显像(SPECT)方法与多巴酚丁胺超声负荷试验(DSE)对慢性冬眠心肌(chronic hibernating myocardium，CHM)的检出率；(2)探讨造成两种检测方法差别的根本原因。方法 6只小型中国家猪均以右冠状动脉为靶血管，经右股动脉送入自制的缩窄器，造成冠状动脉狭窄后继续喂养1个月制备成CHM的模型。处死动物前3d分别采用硝酸甘油介入的SPECT方法及DSE方法检测CHM，获取心肌样本进行光镜、电镜检查。结果 (1)病理结果除1只动物未发生心肌梗死外，其余5只均发现病变中心区局限性心肌梗死灶。正常心肌、CHM在光镜下的结构无明显差别；(2)CHM超微结构的改变依据DSE、SPECT定位共同检出的CHM在电镜下的表现为肌丝明显稀少，线粒体小而密，糖原积聚，核周空区增大。仅依据SPECT定位共同检出的CHM在电镜下的表现为肌丝轻度稀少，线粒体小而密，糖原积聚，核周空区增大；(3)DSE和SPECT对冬眠心肌的检出率分别为73．3％、72．9％。结论 依据SPECT和DSE检出的CHM在超微结构方面的改变是不同的，DSE检出的CHM超微结构改变较SPECT检出者更为典型。     

多巴酚丁胺超声心动图负荷试验检测冬眠心肌的价值及适宜剂量

目的 探讨多巴酚丁安超声心动图负荷试验（ＤＳＥ）检测冬眠心肌的最佳剂量及其价值。方法 利用１０只犬建立慢性心肌冬眠动物模型并进行ＤＳＥ,多巴酚丁胺的滴注剂量分别为５,１０,２８０,３０,４０μｇ／（ｋｇ．ｍｉｎ）,利用二维超声于每期末测量室壁动度。结果 本实验成功地建立了慢性冬眠动物模型,ＤＳＥ过程中,运动异常了段数,运动改善节段数,ＷＭＳＩ及ＬＶＥＦ均呈双相反应,多巴酚丁胺剂量为１０－２０μｇ／     

超声评价卡托普利对犬实验性冬眠心肌的影响

19只犬制成短期冬眠心肌模型，随机分为了二组，一组（n＝9）静脉注射卡托普利；另一组（n＝10）输入等量生理盐水。结果在明，卡托普利可以改善室壁运动异常，缩小心肌缺血范围（P＜0．05），有益于冬眠心肌心功能的恢复.     

超声评价冬眠心肌再灌注前后心功能变化的实验研究

本实验成功地建立犬短期冬眠心肌模型。超声评价左室收缩功能。结果显示，在冠脉狭窄后局部心功能明显降低（Ｐ值＜０．００１），狭窄期间相对稳定在低水平范围，再灌注后心功能出现改善，以ΔＴ％为例，再灌注后１２０ｍｉｎ时，恢复到狭窄前的７１％。动态心功能曲线呈降低－平台－回升的规律。这一事实说明，冬眠心肌收缩功能变化与冠脉血流量直接相关，并在血流恢复后早期恢复     

构建四氯化碳诱导的家兔肝纤维化模型

背景：四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化模型常用于抗肝纤维化药物的筛选和评价，但目前很少有四氯化碳诱导兔肝纤维化模型的报道。目的：建立家兔肝纤维化动物模型，并观察造模过程中动物的肝脏功能和组织病理学变化。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-12／2008—04存解放军成都军区昆明总医院实验动物巾心完成。材料：40只普通级日本大耳家兔，雌雄各半，体质量1．75～2．25k，用于建立家兔肝纤维化动物模型。方法：40只家兔采用随机数字表法分为实验组m=30）和对照组（n=10）。实验组腹腔注射40gm四氯化碳橄榄油溶液，对照组腹腔注射等董生理盐水。1-3周四氯化碳剂量为0．1～0．2mL／kg，根据动物的情况每周注射2次：3-6周四氯化碳剂量调整为0．3-0．4mL／kg；6～8周为0．4～0．5mL／kg。于注药后4，8，12周分别留取肝组织和血清标本，进行苏木精一伊红染色病理观察和生化检测。主要观察指标：实验家兔肝脏大体及病理学改变，静脉血生化指标的变化。结果：纳入口本大耳家兔40只，造模20d时，实验组家兔死广4只，原因主要为急性肝坏死及对药物的耐受性差。40d时死亡1只；50d腹腔注射因药物误入血管死亡1只。①对照组家兔肝脏外观呈暗红包，病理切片示：肝小叶结构完整，肝细胞围绕中央静脉呈放射状排列。实验组8周时，肝脏呈暗紫色，表面有轻微粟粒样改变，病理切片示：肝细胞点状及点灶状坏死，汇管区炎症细胞浸润，呈早期纤维化症状。12周时，肝脏呈灰褐色，有较明显粟粒样改变。病理切片示：肝小叶结构破坏，肝索排列紊乱，肝细胞脂肪变性，问质纤维组织增生，有炎性细胞浸润，为明显肝纤维化症状。③家兔血生化指标随着注药时间的延长，白蛋白含量及白球蛋白比值逐渐下降，球蛋白、间接胆红素、直接胆红素逐渐升高，谷丙转氨酶、谷草转氨酶前期明显升高后期又有所下降。结论：长期给予四氯化碳可导致家兔的肝纤维化形成，并有较明显的阶段性变化。     

慢性冬眠心肌组织信号传导与转录激活子-3的激活及DNA结合活性的改变

目的研究慢性冬眠心肌组织中信号传导与转录激活子-3(STAT3)的磷酸化水平及DNA结合活性的改变。方法．选用中国家猪，以右冠状动脉为靶血管，经右股动脉送入自制的缩窄器造成冠状动脉即刻50％～75％狭窄后继续喂养一个月形成的慢性冬眠心肌和心肌梗死模型。运用免疫印迹和电泳迁移率改变实验检测冬眠心肌组织匀浆上清液和核抽提物中STAT3的磷酸水平及DNA结合活性。结果慢性冬眠心肌组织匀浆的胞质部分和核抽提物中显示STAT3被磷酸化激活，并引起相应DNA结合的增加(和正常心肌组相比分别增加约2．89，3．54和4．5倍)。结论慢性冬眠心肌组织STAT3的磷酸化水平及DNA结合活性的增加可能与心肌细胞的存活有一定的关系。     

Identification of hibernating myocardium by acoustic microscopy

Hibernating myocardium is viable myocardium that recovers after revascularization. The observation of loss of contractile proteins (myofibrils) and accumulation of glycogen in hibernating cardiomyocytes provide the basis for diagnosing hibernating myocardium. In this pilot study, acoustic microscopy was used to identify the cellular structure of normal vs. hibernating myocardium. Sections cut at 5-microm of archival paraffin blocks on glass slides were used for this study. Acoustic microscopy of normal cardiomyocytes showed intracellular linear echoes suggestive of myofibrils, and cardiomyocytes of hibernating myocardium revealed absence of myofibrils and dense intracellular echoes that corresponded to glycogen accumulation on optical microscopy. This modality of visualization allows a definitive diagnosis of hibernating myocardium.     

Acute focal dystrophy of the myocardium with hibernating or stunned myocardium

Opportunities of clinical, laboratory and device diagnosis of acute focal dystrophy (AFD) with hibernating or stunned myocardium are postulated. Myocardial AFD belongs to intermediate coronary syndrome and is a clinico-morpho-functional manifestation of one of the acute coronary syndromes in ischemic heart disease. Differentiation of hibernating with stunned myocardium is made after myocardial revascularization. 230 coronaroventriculographies have been made, of them 72 were urgent with balloon angioplasty and stenting.     

激素性股骨头缺血性坏死免模型的构建

背景:成人股骨头缺血性坏死可导致股骨头塌陷和髋关节破坏,但其真正的病因和发病机制尚未完全明了.因此建立实验性动物模型是目前研究激素性股骨头缺血性坏死的重要手段之一.目的:建立兔激素性股骨头缺血性坏死模型,探讨其可能的发病机制.方法:将健康成年新西兰白兔以抽法随机分成4组.对照组,注射生理盐水;激素组,注射甲基泼尼松龙3次;单次内毒素组,静脉注射大肠杆菌内毒素24h后,立即注射甲基泼尼松龙3次;双次内毒素组,大肠杆菌内毒素注射24h后重复给药1次,随后注射甲基泼尼松龙次.造模前及造模后行射线片、MRI 检查及组织学检查、透射电镜观察,并计算空骨陷窝率.结果与结论:造模第8周时激素组、单次内毒索组、双次内毒素组空骨陷窝率较对照组明显增高(P<0.01),并且双次内毒素组空骨陷窝率明显高于激素组和单次内毒素组(P<0.01).双次内毒素组较激素组及单次内毒素组股骨头出现坏死的时间更早、坏死的效果更显著,并且随着时间的推移股骨头坏死的效果越来越明显.说明在相同的实验条件下,实施双次内毒素与激素联合诱发股骨头坏死出现最早、坏死效果最明显,且骨陷窝空虚率随时间的延长而增加.     

门静脉癌栓兔模型建立及超声监测

目的建立肝癌伴门静脉癌栓的动物模型,探讨超声在监测门静脉癌栓生长中的作用.方法新西兰大白兔12只,开腹后将VX2肿瘤块直接注入门静脉主干内,接种后每日超声观察门静脉内癌栓生长情况,记录癌栓的大小、位置、回声及血供情况.结果 10只门静脉癌栓模型成功建立(10/12).种植后2周超声可探及门脉内癌栓,3周可发现其血供情况.结论门静脉内直接种植肿瘤块是建立门静脉癌栓模型的可靠方法,成功率较高.超声是监测门静脉癌栓生物学特性的方便可行的影像学方法之一.     

免VX2肌肉肿瘤模型的建立及生物学特性

目的:兔VX2肿瘤细胞株可接种在兔的肝、肾、骨及脑等部位制成肿瘤模型,但是接种于肌肉内建立的肿瘤模型很少用于实验研究.建立兔VX2肌肉肿瘤模型并观察其生物学特性.方法:实验于2007-03/08在重庆医科大学医学生物工程研究所完成.①实验材料:两三个月月龄纯种新西兰大白兔33只,雌雄不限,体质量1.5～2.0 kg;VX2肿瘤细胞株由日本京都Funabashi Farm公司馈赠.②实验过程:采用组织块包埋法,将vx2肿瘤组织块移植于33只新西兰大白兔大腿股外侧肌内建立软组织肿痛模型.③评估:随机取15只荷瘤兔,分别在接种肿瘤后7,10,14,21,28 d行B超、彩色多普勒血流成像检查;另18只分别于接种后10,15,20,25,30,35d随机麻醉后处死3只荷瘤兔,进行大体解剖和病理学检查.实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.结果:33只兔均进入结果分析.①建立的兔VX2肌肉肿瘤模型成瘤率高达100%,接种7～10 d,肿瘤生长迅速,生长率为55.9%;接种10～14 d,肿瘤生长减缓,生长率为68.6%;14 d以后,肿瘤再次迅速增长.②B超示21 d后肿瘤内部可见形状不规则,大小不等的小片状无回声区(9/15,60%)或高回声钙化区(4/15,26.7%);彩色多普勒血流成像肿瘤边缘血供丰富.③病理组织学可见肿瘤细胞呈巢状或条索状弥漫分布,瘤细胞体积较大,形态不规则,有较多核分裂相,细胞异型性大.④肿瘤移植后25 d开始出现肺转移,其他部位均无转移.结论:此模型移植成功率高,建模时间短且肿瘤生长迅速,肿瘤血供丰富,转移发生较晚,且只发生肺转移,无其他部位转移,该模型是一种较为理想的用于研究肿瘸局部治疗对肺转移影响的动物模型.     

Evidence of hibernating myocardium by a new transesophageal echocardiographic technique

Reversal of resting wall motion abnormalities after successful coronary angioplasty were documented in a patient with the use of a novel approach to stress testing. Transesophageal stress echocardiography utilizes transesophageal atrial pacing to provoke myocardial ischemia while the left ventricular contractility is being monitored by means of transesophageal echocardiography. The potential use of this technique is illustrated in this report.     

移植性鳞癌兔模型的建立及生物学特征

背景:兔VX2荷瘤目前已广泛应用于全身多个器官肿瘤动物模型的建立,但在耳郭建立鳞癌动物模型至今少有报道。目的:采用2种不同移植瘤方法建立稳定的兔耳VX2移植瘤模型,并对所建肿瘤模型的生物学特性进行观察和比较。方法:将新西兰大白兔分别用瘤细胞悬液注入法和瘤组织块切开植入法移植于兔耳皮下,观察和比较2种方法所建立的模型的肿瘤生长状况、成瘤率和自发转移发生率。结果与结论:瘤细胞悬液注入组和瘤组织块植入组的成瘤率分别为73.3%和50%,差异有显著性意义(P<0.05)。局部淋巴结转移率分别为75%和86%。两种方法建立的兔VX2鳞癌移植瘤模型中,组织呈浸润性生长,瘤细胞核深染,分裂相多见,并呈癌巢排列的符合鳞状细胞癌特征。证实,瘤细胞悬液注入法和瘤组织块切开植入法建立的移植瘤模型均较接近人鳞癌自然生长过程。瘤细胞悬液注入法建立的动物模型,因成瘤率和转移率高,更适合于鳞癌研究。     

实验性兔颈总动脉—外静脉动静脉瘘模型的建立

目的探讨兔实验性颈总动脉-颈外静脉动静脉瘘模型建立的可行性.方法用显微外科技术对5只兔子建立实验性动静脉瘘,并作数字减影血管造影(DSA)观察瘘口附近动静脉发生的血流动力学改变.结果5只兔颈总动脉与颈外静脉侧侧吻合均一次成功.血管造影清楚显示吻合口近端动脉与近端静脉、近端动脉与吻合口两端静脉、吻合口两端动静脉同时显影,且随着注射造影剂压力的增大,吻合口远端颅内静脉细小属支亦见显影.结论通过显微血管吻合方法建立兔颈总动脉一颈外静脉动静脉瘘模型切实可行.