抗-p30单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

作者用纯化的p30抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。融合率为93.95％,抗体阳性率为21.01％。经克隆化,获得两株分泌抗-p30单克隆抗体的杂交瘤细胞株E_8与G_1。染色体计数:E_8为98.7±6.54;G_1为97.7±7.77。PAGE于γ区出现浓染的蛋白带。免疫组织化学染色和ELISA抑制试验证实该两株细胞分泌的抗体具有较好的种属特异性和器官特异性。均属IgG_2。都不能使人精子凝集和制动。     

分泌抗—HBe单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＨＢｅＡｇ阳性血清纯化ＨＢｅＡｇ，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，反复克隆化培养，最终获得４株分泌抗－ＨＢｅ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的ＥＬ／ＩＳＡ效价分别为１：８００和１：５００，诱生同属小鼠腹水中的ＥＬＩＳＡ效价均为１：１０００，特异性试验表明，两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体，小鼠Ｉｇ亚类鉴定，两株抗体均为ＩｇＧ１亚类球蛋白。细胞染色体数为９５～１１０条。结果证明，此细胞株为特异性分泌抗—Ｈｋｅ单克隆抗体细胞株。     

建立分泌抗人精液抑制素杂交瘤细胞株及其单克隆抗体的研究

用人精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得４株分泌抗人精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为ＩＢ１０，ＩＧ５，ＩＡ４和ＩＡ６。     

建立分泌抗人精液抑制素杂交瘤细胞株及其单克隆抗体的研究

用人精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ—１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得４株分泌抗人精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为ＩＢ１０，ＩＧ５，ＩＡ４和ＩＡ６。其分泌抗元体均为ＩｇＧ１型，均不与大鼠ＬＨ，ＦＳＨ和ＰＲＬ产生交叉反应，杂交瘤细胞染色体平均为８６～１０３条。细胞经反复冻存、复苏和传代，仍稳定的分泌特异性抗体。     

分泌小鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

采用活体内生长ＳＰ２／０骨髓细胞为融合伙伴,用ＳＰ２／０细胞与甲胎蛋白免疫的ＢＡＬＡ／Ｃ小鼠脾细胞进行融合,建立了２株稳定分泌抗ＡＦＰ单克隆抗体的小鼠杂交瘤株。冻存两年后复苏,仍稳定地分泌特异抗体。培养上清的抗体效价达１０＾－３,腹水效价达１０＾－６,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４识别抗原表位不同,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４均属于小鼠ＩｇＧ１亚类。     

分泌抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用人甲胎蛋白(AFP)免疫BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗人AFP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株(G2和G10)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液和小鼠腹水的特异性抗体效价,分别为2～4×10~(-3)和10~(-6)～10~(-7)。两株杂交瘤细胞染色体的众数为104～108条。经体外连续传代及冻存半年复苏后,仍具有分泌抗体能力,说明其性能稳定。两株所分泌的抗体,均属IgGl型。     

分泌抗——HBe单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＨＢｅＡｇ阳性血清纯化ＨＢｅＡｇ，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，反复克隆化培养，最终获得４株分泌抗－ＨＢｅ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的ＥＬＩＳＡ效价的分别为１：８００和１：５００，诱生同属小鼠腹水中的ＥＬＩＳＡ效价均为１：１０００，特异性试验表明，两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体，小鼠Ｉｇ亚类鉴定，两株抗体均为ＩｇＧ１亚类球蛋白。细胞染     

分泌抗人喉癌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及临床意义

用喉癌抗原免疫疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选获得４株分泌抗人喉癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，均收集到腹水型ＭｃＡｂ，并验证其滴度高，纯化效果好，特异性强。     

抗HBV逆转录酶杂交瘤细胞系的建立及其单克隆抗体鉴定

目的 建立抗乙型肝炎病毒逆转录酶单克隆抗体杂交瘤并研究杂交瘤细胞及抗体特性。方法 用经原核表达的乙型肝炎病毒逆转录酶蛋白（HBV-RT）免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,经筛选和克隆化制备杂交瘤细胞系,然后用ELISA法筛选出阳性克隆,最后用免疫组化ABC方法研究杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性。结果 2株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系,其杂交瘤细胞经过100d连续培养,单克隆抗体分泌稳定,特异性强、腹水抗体效价免疫组化ABC法1：1000。免疫组化检测显示其相应抗原在肝炎及肝硬变组织中呈高表达（73%）,正常肝组织中未见阳性反应;其抗原主要分布于细胞质内。结论 此2株抗乙型肝炎病毒逆转录酶杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体具有特异亲合性,它们的成功制备为研究HBV感染的早期诊断及乙肝患的治疗奠定了基础。     

抗HBV末端蛋白杂交瘤细胞系的建立及其单克隆抗体鉴定

目的：制备分泌抗乙型肝炎病毒末端蛋白mAb杂交瘤并研究杂交瘤细胞及所产生抗体的特性．方法：用经原核表达的乙型肝炎病毒末端蛋白(HBV-TP)免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2／O融合，经筛选和克隆化建立杂交瘤细胞系，然后用ELISA法筛选出阳性克隆，以免疫组化ABC方法研究杂交瘤细胞分泌的mAb特性．结果：共筛选出3株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系，其杂交瘤细胞经过100d连续培养，mAb分泌稳定，特异性强，腹水抗体效价免疫组化ABC法1：1000。免疫组化检测显示其相应抗原在肝炎及肝硬变组织中呈高表达(80％)，正常肝组织中未见阳性反应；其抗原主要分布于细胞质内．结论：此3株抗乙型肝炎病毒末端蛋白杂交瘤细胞分泌的mAb具有特异亲合性，其成功制备为研究HlBV感染的早期诊断及乙肝患的生物治疗奠定了基础。     

分泌载脂蛋白AII单克隆抗体杂交瘤的建立

以人血清载脂蛋白AⅡ为抗原,免疫BALB/C小鼠,将脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,经HAT选择性培养,特异性筛选及克隆化,获得1-C1、2-C2两株分泌抗人血清载脂蛋白AⅡ单克隆抗体杂交瘤细胞株。免疫双扩散确定它们分泌抗体的亚型均为IgG1;吸收试验及ELISA交叉试验表明单克隆抗体的特异性;ELISA测定其培养上清中抗体效价都为1:100,诱生腹水效价分别为1:10000和1:5000;两株杂交瘤细胞染色体均数分别为96.34±6.06、95.01±5.38;采用Protein A Sepharose 4B层析柱纯化了1-C1杂交瘤细胞培养上清中的单克隆抗体。     

抗人成骨肉瘤杂交瘤细胞系的建立及单克隆抗体特性

目的：建立抗人成骨肉瘤单克隆抗体杂交瘤并对杂交瘤细胞及抗体特性进行研究。方法 利用我室自建成骨肉瘤细胞系（ＯＳ－９６０７）免疫ＢＡＬＢ／c小鼠，取其脾细胞与骨髓 瘤细胞Ｓp２／０两便，经筛选和克隆化，制备杂交瘤细胞系，用免疫组化ＡＢＣ方法研究交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性。结果：制得２株能持续、稳定分汔抗体的杂交瘤细胞系。其中６Ｅ７和５Ｄ３株杂交瘤细胞经过１００d连续培养，背地里克隆抗体６Ｅ７mＡb和５     

分泌抗H_(615)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

用抗正常615纯系小鼠肝细胞抗体处理的H615瘤细胞免疫Balb/c小鼠、取其脾细胞与小鼠骨髓细胞融合、以间接免疫荧光法和细胞ELISA二种方法检测、建立两株分泌抗H615单克隆抗体的杂交瘤细胞系。两杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体与正常615小鼠的肝、脾、肺、肾、心肌、横纹肌、胸腺的组织细胞和小鼠肿瘤细胞及人肝癌细胞无交叉反应,证明两种单克隆抗体具有一定的特异性。对两种单克隆抗体进行亚类检定均属IgG_1。     

抗内毒素类脂A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及保护性实验研究

采用Ｊ５突变株免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞融合，建立了６株分泌单克隆抗体的杂交瘤，分别命名为９Ｇ６，１０Ｈ１１，９Ｈ１，９Ｆ９，１１Ｅ７和１２Ｈ１１。它们的亚类鉴定为ＩｇＭ，ＩＧ１，ＩＧ２ａ和ＩＧ２ｂ。在酶联免疫吸附试验中证实可与多种革兰阴性杆菌出现阳性反应。其中９Ｇ６单克隆抗体具有高效价的抗类脂Ａ活性，小鼠腹腔内保护实验表明，可产生较广谱的抗革兰阴性杆菌活菌攻击的保护活性。是一种可望有较好临床效果的免疫制剂。文中还讨论了单克隆抗体不同输入时间对保护效果的影响。     

Establishment of anti-thyrotropin monoclonal antibody hybridoma cell lines with extract of human pituitary gland

Theproductionofanti--humanthyroid--stimulatinghormone(anti--hTSH)monoclonalantibody(McAb)isofgreatimportanceinbothmedicalresearchandclinicaldiagnosis.Howeveritwasnoeasyjobproducinganti--hTSHMcAbswithhighspecificityasseveralglycoproteinhormones,includinghumanfollicle--stimulatinghormone(hFSH),humanluteinizinghormone(hLH),humanchorionicgonadotropin(hCG)andhTSH,containthesameasubunit.Inspiteofthis,Josephine['],RidgwayetalLZjhaveobtainedMcAbwithhighspecificityandaffinitybyusingpurehTSHa…     

Studies the monoclonal antibodies against HbsAg the establishment of the hybridoma cell lines secreting monocloal antibodies against HbsAg

<正> We succeeded in the establishment of two hybridoma cell linessecreting anti—HBsAg monoclonal antibodies by means of the fusionbetween mouse myeloma cells SP2/0 and spleen cells from BALA/cmice immunized with purified HBsAg(adr,adw).One of the hybri-dome,cell lines was named XM—B5 and another was named XM—C5. The McAB secreted by XM—B5 and XM—C5 showed high specific