共轭亚油酸对肿瘤细胞亚油酸代谢途径中限速酶的影响

目的采用体外细胞培养方法,研究不同浓度c9,t11-共轭亚油酸(c9,t11-CLA)对人胃腺癌细胞(SGC-7901)中亚油酸代谢途径的限速酶的影响。方法用200、100、50和25μmol／L浓度的c9,t11-CLA处理SGC-7901细胞24h,四甲基偶氮唑盐实验检测c9,t11-CLA对SGC-7901细胞增殖的抑制作用,采用逆转录聚合酶链反应检测c9,t11-CLA对SGC-7901细胞中亚油酸代谢途径的Δ6-脱氢酶、△5-脱氢酶、环氧合酶(COX)-1、COX-2和5-脂氧合酶(5-LOX)mRNA表达的影响。结果在200、100、50和25μmol／L浓度时,c9,t11-CLA对SGC-7901增殖的抑制率分别为54．3％、20．5％、10．5％、2．93％;均可下调COX-2mRNA的表达,上调Δ6-脱氢酶、COX-1mRNA的表达,但对Δ5-脱氢酶和5-LOXmRNA表达的影响不显著。结论c9,t11-CLA可通过调节Δ6-脱氢酶和COX的表达抑制肿瘤细胞的增殖,说明c9,t11-CLA通过影响亚油酸代谢途径中限速酶的基因表达而改变类二十碳烷酸的形成,推测c9,t11-CLA影响肿瘤细胞中亚油酸代谢途径的限速酶是其发挥抗癌活性的另一作用机制。     

共轭亚油酸对人胃腺癌细胞中环氧合酶的影响

目的采用体外细胞培养方法,研究不同浓度c9,t11-共轭亚油酸(CLA)对人胃腺癌细胞(SGC-7901)的亚油酸代谢途径中限速酶-环氧合酶(COX)表达的影响.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测不同浓度c9,t11-CLA处理后的SGC-7901细胞中环氧合酶(COX)-1、(COX)-2mRNA和蛋白的表达.结果在200,100,50和25μmol/L浓度时,c9,t11-CLA均可下调COX-2 mRNA和蛋白的表达,与共轭亚油酸(CLA)浓度呈负相关;上调COX-1 mRNA的表达,并与CLA浓度呈正相关.结论 c9,t11-CLA的抗癌活性与其影响COX的表达有关.     

共轭亚油酸诱导人胃腺癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用

目的 研究共轭亚油酸单体（c9,t11-CLA)诱导人体胃腺癌细胞（SGC－7901）凋亡作用。方法 采用细胞生长曲线,凋亡细胞的荧光显微镜、电镜观察,流式细胞光度术的检测以及P53蛋白表达方法。结果 显示出c9,t11-CLA对SGC－7901细胞有明显的抑制作用,并可诱导SGC－7901细胞产生凋亡,并随着c9,t11-CLA浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加;而P53蛋白表达则随着c9,t11-CLA浓度的增加呈逐渐降低的趋势。结论 这可能是c9,t11-CLA抑制肿瘤细胞机制之一。     

c9,t11-共轭亚油酸氧化稳定性的研究

目的：研究75％c9，t11-共轭亚油酸（c9，t11-CLA）在不同条件下的氧化稳定性，并在同等条件下与亚油酸（LA）进行比较，探讨影响75％c9，t11-CLA氧化稳定性的因素。方法：测定75％c9，t11-CLA和LA在暴露于空气、充氮保护、加入0．02％没食子酸丙酯、色拉油中及0．02％Ca^2＋存在条件下的过氧化值，同时进行气相色谱分析，观察5个不同时间75％c9，t11-CLA和IA含量的变化。结果：当75％c9，t11-CLA和LA在暴露于空气、充氮保护、加入0．02％没食子酸丙酯、色拉油中及0．02％Ca^2＋存在的条件下，75％c9，t11-CLA在不同处理条件下的氧化稳定性顺序为：0．02％没食子酸丙酯组〉充氮保护组〉色拉油组〉暴露于空气组〉0．02％Ca^2＋组（P〈0．05）。75％c9，t11-CLA的氧化速度快于亚油酸（IJA）的氧化速度（P〈0．05）。结论：0．02％没食子酸丙酯可明显提高c9，t11-CLA的氧化稳定性。增强c9，t11-CLA的稳定性已成为保护c9，t11-CLA有效生物活性的至关重要的因素。     

共轭亚油酸对人胃腺癌细胞侵袭及转移相关基因表达的影响

目的 研究c9,t11－共轭亚油酸（CLA）对人胃腺癌细胞（SGC－7901）侵袭能力的影响,探讨其抑制肿瘤转移的可能机制。方法 用重组基底膜侵袭实验评价癌细胞侵袭能力;用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测SGC－7901细胞中组织基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）－1、TIMP－2和nm23-H1mRNA的表达。结果 在200、100和50μmol/L浓度时,c9,t11-CLA对SGC－7901细胞侵袭重组基底膜的抑制率分别为53.7%、40.9%和29.3%。c9,t11-CLA可诱导SGC－7901细胞中TIMP－1、TIMP－2和nm23-H1mRNA的表达。结论 c9,t11-CLA抑制SGC-7901细胞侵袭重组基底膜。c9,t11-CLA的抗侵袭活性与诱导肿瘤细胞中TIMP－1、TIMP－2和nm23-H1mRNA的表达等有关。     

全氟辛烷磺酸对小鼠大脑谷氨酸含量和蛋白激酶活性的影响

目的 通过观察全氟辛烷磺酸（PFOS）对雄性小鼠大脑谷氨酸含量、蛋白激酶C（PKC）和蛋白激酶A（PKA）活性的影响及超微结构的改变,探讨PFOS所致神经毒性机制。方法 44只雄性昆明系小鼠按体重分为4组,每组11只。PFOS染毒剂量分别为5、10、20mg／kg,对照组给予同等体积2％吐温．80,连续经口染毒10d。分光光度计法测定小鼠大脑谷氨酸含量,非放射性蛋白激酶检测法测定PKC和PKA活性,透射电镜观察大脑皮质超微结构的损伤。结果 10、20mg／kg染毒组小鼠大脑谷氨酸含量分别为（1．57±0．11）、（1．62±0．16）mmol/g蛋白,与对照组[（1．45±0．13）mmol/g蛋白]相比,差异有统计学意义（F=39．59,P〈0．05）;5、10、20mg／kg染毒组PKC活性分别为（29．05±2．89）、（33．65±3．82）和（34．20±3．16）pmol·min^-1·（mg蛋白）^-1,与对照组[（24．53±2．88）pmol·min^-1·（mg蛋白）^-1]比较,差异有统计学意义（F=7．75,P〈0．05）。5、10、20mg／kg染毒组PKA活性与对照组比较,分别升高了（24．12±3．86）％、（34．02±3．04）％和（33．42±3．71）％,差异有统计学意义（F=26．27,P〈0．01）。但PKC和PKA活性的升高趋势在PFOS剂量为20mg／kg时趋缓。给予小鼠PFOS可对大脑皮质细胞造成细胞核膜凹陷的超微结构损伤。结论 PFOS染毒导致小鼠脑组织谷氨酸含量、PKC和PKA活性升高,并对大脑皮质细胞造成超微结构损伤,可能是PFOS引起神经毒性的机制之一。     

Bel7402肝癌细胞中共轭亚油酸异构体通过不同机制下调COX-2表达

[目的]采用体外细胞培养方法,研究c9,t11-CLA和t10,c12-CLA对肝癌细胞Bel7402的COX-2表达的影响和机制。[方法]采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Westernblot)方法检测c9,t11-CLA和t10,c12-CLA处理后的Bel7402细胞中COX-2 mRNA和蛋白质的表达以及PPARγ配体罗格列酮和GW9662对COX-2蛋白水平的影响。[结果]在100μmol/L的浓度下,c9,t11-CLA和t10,c12-CLA都可以降低COX-2mRNA和蛋白质的表达,罗格列酮可以下调COX-2蛋白水平,而PPARγ抑制性配体GW9662可以逆转c9,t11-CLA对于COX-2蛋白水平的下调作用,但是对于t10,c12-CLA的下调作用则没有影响。[结论]两种异构体对COX-2表达的下调作用很可能具有不同的机制。     

经内镜鼻胰管引流在急性胰腺炎治疗中的应用

目的初步总结经内镜鼻胰管引流在急性胰腺炎治疗中的疗效。方法自2002年1月以来，在急性胰腺炎患者入院后常规非手术监测治疗的同时。随机行经内镜置放鼻胰管引流30例。其中明确合并胆结石16例。观察每天胰管引流量和入院后第5天体温、心率、白细胞计数、血糖、血钙、动脉氧分压和血、尿淀粉酶的变化，并与第1天比较。记录治疗结果和住院时间。并进行引流管的观察及护理，心理护理及卫生宣教。结果经鼻胰管引流时间为（6．9±3．1）d，前5天的胰液引流量分别为168．6±38．1、210．7±56．3、268．1±71．9、391．6±63．9ml和306．0±73．8mL。入院后第1天和第5天的体温为38．6±1．3和37．0±1．1℃（P〈0．05=、心率为108±16和87±13次／min（P〈0．05=，白细胞计数为15．8±3．1和9．7±2．6×109／L（P〈0．05=，血糖为13．3±3．9和7．3±2．7mmol／L（P〈0．05=，血淀粉酶为739±68和103±39u／L（P〈0．05=，尿淀粉酶为3361±677和373±136u／L（P〈0．05=，血钙为2．0±0．7和2．1±0．6mmol／L（P〉0．05）．30例全部治愈出院，平均住院时间为26．0±9．1天。结论经内镜鼻胰管引流能有效引流胰液，在重症急性胰腺炎治疗中是一项重要的措施，值得进一步观察和对比总结。引流管的观察及护理。心理护理及卫生宣教对病情恢复起到良好的作用。     

他唑巴坦＋哌拉西林持续滴注对多药耐药铜绿假单胞菌性VAP的临床价值

目的研究他唑巴坦＋哌拉西林（哌拉西林／他唑巴坦）持续滴注对多药耐药铜绿假单胞菌性呼吸机相关性肺炎（VAP）的临床价值。方法将35例多药耐药铜绿假单胞菌性VAP患者随机分为两组，持续滴注组19例，哌拉西林／他唑巴坦4．5g持续滴注6h，每6h1次；分次滴注组16例，哌拉西林／他唑巴坦4．5g滴注1h，每6h1次，疗程均为14d。结果持续滴注组和分次滴注组的感染控制天数分别为（7．3±2．2）d和（9．3±2．2）d，P=0．045；ICU住院天数分别为（21．6±6．6）d和（27．5±6．8）d，P=0．040；脱机天数分别为（8．6±5．5）d和（4．9±3．5）d，P=0．049。但感染控制率、细菌清除率和VAP发生后28d病死率两组比较差异无统计学意义。结论哌拉西林／他唑巴坦持续滴注能更快控制感染，更早转出ICU，脱机天数更长。     

白细胞介素-13对成年人支气管哮喘的影响

目的通过检测白细胞介素（IL）-13浓度及其变化，探讨它在成人支气管哮喘（哮喘）发病机制中的意义，同时检测IL-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α浓度，探讨它们与IL-13的相互关系。方法以31例哮喘患者（哮喘组）及9例健康者（对照组）作为研究对象。采集诱导痰及外周血标本，制作成涂片进行细胞学分析；用酶联免疫吸附法测定IL-13、TNF-α及IL-10浓度。结果哮喘组血清IL-13浓度高于对照组[分别为（89．88±36．75）ng／L和（27．03±12．19）ng／L，P〈0．01]，诱导痰中浓度也高于对照组[分别为（69．14±24．48）ng／L和（18．74±8．87）ng／L，P〈0．01]，且血清中的浓度高于诱导痰中的浓度（P〈0．05）；激素使用患者诱导痰中浓度比非激素使用患者低（P〈0．05），诱导痰中IL-13浓度与嗜酸粒细胞百分比呈显著正相关（r=0．54，P〈0．05）。哮喘组诱导痰中TNF-α及IL-10浓度均较对照组高[TNF-α分别为（66．32±18．74）ng／L和（5．36±6．86）ng／L，P〈0．01；IL-10分别为（118．08±55．17）ng／L和（5．66±8．03）ng／L，P〈0．05]。哮喘组中，发作期诱导痰中IL-10浓度高于稳定期浓度（P〈0．05）。轻度哮喘患者诱导痰中TNF-α浓度与重度哮喘患者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论IL-13是与哮喘发病病理过程相关的细胞因子，与嗜酸粒细胞的活动关系密切，参与哮喘气道炎性反应及气道高反应性的发生，哮喘患者在激素治疗后其浓度降低。     

共轭亚油酸对人胃腺癌细胞侵袭能力的影响及其作用机制

研究c9,t11-共轭亚油酸 (CLA)对人胃腺癌细胞 (SGC 790 1)侵袭能力的影响 ,探讨其抑制肿瘤转移的可能机理。用 0、2 5、5 0、10 0和 2 0 0 μmol LCLA处理细胞 2 4h后 ,分别用重组基底膜侵袭实验评价癌细胞侵袭能力 ;PAGE底物酶谱方法检测Ⅳ型胶原酶活性 ;RT PCR方法检测SGC 790 1细胞TIMP 1和TIMP 2mR NA表达。研究结果表明 :c9,t11 CLA处理后 ,SGC 790 1细胞侵袭重组基底膜的能力下降、SGC 790 1细胞培养上清中的Ⅳ型胶原酶活性降低、SGC 790 1细胞中TIMP 1和TIMP 2mRNA的表达增加。因此 ,c9,t11 CLA抑制SGC 790 1细胞侵袭重组基底膜 ,并且c9,t11 CLA的抗侵袭活性与降低肿瘤细胞培养上清中Ⅳ型胶原酶活性和诱导肿瘤细胞TIMP 1和TIMP 2mRNA的表达等有关     

共轭亚油酸对正常动物细胞和人体肿瘤细胞间通讯功能的影响

为探讨c9,t11-共轭亚油酸 (CLA)的抑癌作用可能机制 ,在促癌物 (TPA)存在下 ,对正常细胞(CHL)以及人体肿瘤细胞 (SGC 790 1细胞和MCF 7细胞 )的细胞间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响 ,采用划痕标记染料示踪技术 (SLDT) ;c9,t11 CLA剂量为 2 5 (mol L ,5 0 (mol L ,10 0 (mol L和 2 0 0 (mol L ,阴性对照为乙醇。结果显示 ,c9,t11 CLA可明显地提高TPA对CHL细胞的GJIC的抑制效应 ,当c9,t11 CLA浓度为 2 0 0 (mol L作用 48h时 ,细胞间隙通讯功能基本上与阴性对照组相近 ;当用c9,t11 CLA作用SGC 790 1细胞和MCF 7细胞2 4h和 48h时 ,可见 (2 4h 10 0 μmol L的MCF 7细胞 ) 2 4h 2 0 0 μmol L和 48h 10 0、2 0 0 μmol L剂量组的肿瘤细胞有一定的细胞间隙通讯功能。提示c9,t11 CLA可提高SGC 790 1细胞和MCF 7细胞的GJIC的功能 ,并且不同程度的拮抗TPA对CHL细胞GJIC的抑制效应     

环氧合酶-2在c9,t11-共轭亚油酸抑制胃腺癌细胞增殖中的作用

目的　采用体外细胞培养方法,研究不同浓度c9,t11 共轭亚油酸对人胃腺癌细胞(SGC- 790 1)的亚油酸代谢途径中限速酶———环氧合酶(COX -2 )及其产物前列腺素E2 (PGE2 )的影响。方法　采用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)和Westernblot方法检测不同浓度c9,t11 CLA处理后的SGC 790 1细胞中COX- 2mRNA和蛋白的表达,放射免疫方法检测细胞分泌的PGE2 浓度。结果　在2 5、5 0、10 0和2 0 0 μmol L浓度时,c9,t11 CLA均可下调COX 2mRNA和蛋白的表达,同时降低细胞中PGE2 的分泌。结论　环氧合酶2是c9,t11 CLA抑制肿瘤细胞增殖的作用靶点。     

NS-398对肝癌细胞系HepG2环氧合酶-2表达的影响

目的 研究环氧合酶-2(COX-2)抑制剂氮-2,环己氧-4,硝基苯-甲基磺胺(NS-398)对肝癌细胞株HepG2细胞体外抗肿瘤作用,探讨其抗癌作用的分子机理.方法 分别用100、200、300、400μmol/L NS-398处理HepG2细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定肿瘤细胞增殖抑制率,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期的改变及凋亡百分比的变化,用Westen blotting检测COX-2蛋白的表达,用放射免疫测定法检测NS-398对HepG2细胞前列腺素E2(PGE2)释放水平.结果 NS-398呈剂量依赖性的方式抑制HepG2细胞增殖,并诱导其凋亡,细胞周期分析表明,随着浓度增大,S期细胞明显减少,有G1期细胞累积现象,24 h时半数有效剂量(IC50)为300μmo/L.NS-398明显抑制COX-2的活性和表达.随着浓度的增加,其COX-2蛋白表达逐渐降低,100、200、300、400μmol/L NS-398组灰度值分别为1515.1±127.2、1023.5±108.4、691±94.3和493.6±86.6,与对照组1822±157.4相比差异有统计学意义(t值分别为3.736、1.623、1.810、2.587,P<0.01).NS-398可明显抑制HepG细胞PGE2释放水平,其吸光度值(A值)分别为0.70±0.02、0.48±0.02、0.29±0.01和0.18±0.01,与对照组比较0.03±0.01差异有统计学意义.结论 NS-398对肝癌细胞增殖有抑制作用并诱导其凋亡,可能与细胞G1期阻滞以及通过抑制COX-2活性,抑制COX-2下游产物PGE2表达有关.     

Antiproliferative effects of conjugated linoleic acid on human colon adenocarcinoma cell line Caco-2

Conjugated linoleic acid (CLA) reduces body fat reserves, and reduces atherogenesis and type II diabetes in animal experiments. It has been reported that CLA have isomeric-specificity, such as c9, t11 CLA with anticancer activity. The antiproliferative effects of two isomers of CLA (c9, t11-CLA, t9, t11-CLA) and their mixture on the human colon adenocarcinoma cell line Caco-2 were investigated in this paper. Caco-2 were incubated in serum-free medium. The antiproliferative effects of different concentrations (0, 25, 50, 100, 200 micromol/L) of linoleic acid (LA), c9, t11-CLA, t9, t11-CLA (the purity of LA and CLA was 96%) and a mixture of c9, t11-CLA and t9, t11- CLA (1:1 v/v) on caco-2 in various action time (1d, 2d, 3d, 4d) were tested in the present study. The antiproliferative effects of four substances in the same concentration and with the same action time were compared. All substances tested could inhibit Caco-2 cell proliferation. The higher anti-proliferation activity in the four materials is the mixture of CLA, then is t9,t11-CLA, c9,t11-CLA, and linoleic acid respectively. The activity is closely related to treatment time and concentration. The isomer t9, t11-CLA itself was found to have antiproliferative activity.