α-细辛醚对无镁细胞外液培养海马神经元构建难治性癫痫细胞模型的影响

背景:无镁细胞外液处理培养的海马神经元可诱导产生反复自发性癫痫样放电,该模型可作为临床难治性癫痫细胞模型。目的:探讨难治性癫痫细胞模型中α-细辛醚对神经元的保护作用。方法:分离培养新生24h内的SD大鼠海马神经元,取经鉴定的海马神经元,加入含终浓度为7.5,15,30,60,120mg/Lα-细辛醚的维持培养液培养4h后,换为无镁液建立难治性癫痫细胞模型,3h后恢复含α-细辛醚的维持培养基继续培养24h,MTT法检测海马神经元活力。结果与结论:经无镁细胞外液培养后,海马神经元的活力显著降低(P<0.01),α-细辛醚处理后,海马神经元的活力显著升高(P<0.01),且随α-细辛醚浓度的增加,海马神经元的相对活力升高。说明α-细辛醚可以抑制难治性癫痫细胞模型中的神经元损伤,发挥神经元保护作用,且具有剂量依赖性。     

α-细辛醚对慢性肺源性心脏病心电图及心血管影像的影响

目的　探讨α 细辛醚对慢性肺源性心脏病的疗效。方法　观察对象随机分为两组 :α 细辛醚组35例 ,给予α 细辛醚注射液 10mg肌注 ,每日 2次 ,连续 30d ;对照组 2 1例 ,给予强心剂、利尿剂、抗生素等治疗。结果　治疗后心电图示 :①肺型P波、重度顺钟向转位及QRS额面电轴右偏的消失率依次为 88%、72 %、5 4 % ,与对照组 (抗菌、利尿、强心、对症等常规治疗 )相比差异有显著意义 (P <0 0 1～ 0 0 5 ) ;② 2例ST段压低、T波低平者 ,治疗后均恢复正常 ;③窦性心动过速 2 0例 ,经治疗心率均降至 10 0次 /min以下。X线胸片示 :①右肺下动脉干横径大于 15mm者 12例 ,治疗后减少至 7例 ,同时肺动脉段凸出高度亦有所降低 ;②经治疗 ,心胸比例由小增大者 5例 ,其中 ,有 4例心电图异常者治疗后恢复正常。结论　α 细辛醚是治疗慢性肺心病的有效药物     

β-细辛醚对痴呆小鼠皮质神经元细胞内钙离子浓度的影响

目的：探讨β-细辛醚对三氯化铝引起的痴呆小鼠脑皮质神经元凋亡的保护机制。方法：选用NIH小鼠,正常培养3个月,随机分为正常对照组,模型对照组,β-细辛醚1.06mg/100g/d组。除正常对照组给予生理盐水外,其他各组均灌胃三氯化铝,并分别给予生理盐水或β-细辛醚,计6个月。用流式细胞术测量脑皮质神经元内钙离子浓度及DNA周期分析,观察细胞的凋亡率。结果：1.06mg/100g/dβ-细辛醚组神经功能缺损较非治疗组明显减轻,相应的β-细辛醚治疗组细胞内钙离子浓度增高受抑、细胞凋亡减少。结论：1.06mg/100g/dβ-细辛醚可以减轻脑组织神经元痴呆损伤和抑制神经元凋亡;抑制受损神经元细胞内钙离子浓度增高可能是其保护作用的机制之一。     

卡马西平联合α细辛醚对癫痫幼鼠惊厥行为及多耐药基因表达的影响

【目的】探讨卡马西平联合α细辛醚对癫痫幼鼠惊厥行为及多耐药基因表达的影响。【方法】选取3周龄幼鼠,随机分为空白组、癫痫组、卡马西平组、α细辛醚组、联合治疗组。除空白组外,其余各组均隔日腹腔注射35 mg/kg戊四氮,共注射15次以构建幼鼠癫痫模型,建模同时各组开始灌胃给药,卡马西平组给予30 mg/kg卡马西平,α细辛醚组给予25 mg/kgα细辛醚,联合治疗组给予卡马西平30 mg/kg联合α细辛醚25 mg/kg,空白组灌注等量生理盐水,1次/d,连续30 d。治疗结束后,观察各组幼鼠惊厥发生时间、惊厥发生次数、惊厥发作等级;比较各组幼鼠海马区组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性及一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平;观察各组幼鼠海马区组织病理组织变化,并计算神经元细胞凋亡率;比较各组幼鼠海马区组织中多耐药基因MDR1a、MDR1b及P-糖蛋白(P-gp)mRNA与蛋白表达水平比较。【结果】与癫痫组比较,卡马西平组与α细辛醚组、联合治疗组惊厥发生时间缩短(P<0.05),惊厥发生次数减少(P<0.05),惊厥发作等级及海马区组织中MDA、NO、NOS水平降低(P<0.05),其中α细辛醚组>卡马西平组>联合治疗组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,卡马西平组、α细辛醚组和联合治疗组海马区组织中SOD水平升高(P<0.05),其中联合治疗组>卡马西平组>α细辛醚组,差异均有统计学意义(P<0.05)。癫痫组海马区组织中神经元细胞大量减少,细胞核固缩,空泡化严重;卡马西平组、α细辛醚组和联合治疗组海马区组织中神经元细胞数量增加,形态恢复,其中联合用药组神经元细胞病变改善最佳。与癫痫组相比,卡马西平组海马中多耐药基因与P-gp的mRNA与蛋白表达差异不明显(P>0.05);α细辛醚组和联合治疗组海马区组织中MDR1a、MDR1b及P-gp mRNA与蛋白表达降低(P<0.05);与α细辛醚组相比,联合治疗组海马区组织中MDR1a、MDR1b及P-gp mRNA与蛋白表达降低(P<0.05)。【结论】卡马西平联合α细辛醚用药可以明显改善癫痫幼鼠的惊厥行为,对神经元细胞具有良好的保护作用,且可降低幼鼠海马区组织中MDR的表达,增强疗效。     

体外培养大鼠海马神经元癫痫模型中神经元凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3基因的表达

背景：颞叶癫痫的发病与海马神经元丢失死亡有关，但其海马神经元丢失的具体方式和详尽机制还不清楚，难以确定海马神经元癫痫样放电与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cysteine-containing ASPartate—specific protease，Caspase-3）激活及神经元凋亡的必然联系。 目的：观察体外培养大鼠海马神经元癫痫模型中神经元凋亡及Caspase-3基因的表达情况。 设计：开放性实验。 单位：解放军第二军医大学长海医院神经外科，解放军第二军医大学长征医院神经外科。 材料：实验于2002-06／2003—06在解放军第二军医大学神经外科实验室完成。选取出生24h内的SD大鼠10只，雌雄不拘。Caspase-3流式检测试剂盒购自美国BD公司，PCR引物由上海皓嘉公司合成。 方法：①将24h内新生SD大鼠断头取脑，解剖出双侧海马，制备海马神经元癫痫样放电细胞模型。通过全细胞膜片钳对细胞模型放电情况进行检测。以培养8d并经无镁处理的神经元细胞作为癫痫样放电模型组，以培养8d但未经无镁处理的神经元细胞作为空白对照组，记录电位变化。②采用反转录-聚合酶链法克隆大鼠全长caspase-3 cDNA．并加以标记；采用原位杂交和流式细胞术检测caspase-3基因表达和神经元凋亡情况。 主要观察指标：①Caspase-3基因cDNA的克隆结果。②Caspase-3原位杂交检测结果。③细胞凋亡检测结果。 结果：①反转录-聚合酶链反应扩增的产物经12g/L琼脂糖凝胶电泳显示约800bp DNA片段区带，与预期值一致。DNA序列测定显示所得克隆的开放阅读框架长843bp。②杂交显示空白对照组海马阳性染色神经元少于10％，神经元突起饱满，形成广泛的突触联系。癫痫样放电模型组无镁处理3h后，染色阳性细胞明显增多；无镁处理12h后，有较多强阳性染色神经元，基本保持有神经元突起，但突起变得菲薄。③流式细胞分析显示。无镁处理6h后凋亡细胞开始明显增加，单位时间内凋亡细胞数不尽一致。 结论：癫痫样放电可以启动caspase-3表达，继而介导神经元凋亡。     

酮体β-羟基丁酸减轻癫痫持续状态模型大鼠离体海马神经元的损伤

目的 探讨β-羟丁酸（BHB）对离体癫痫持续状态模型海马神经元的保护作用及可能机制。方法 体外原代培养14 d神经元细胞,通过无镁灌流制成癫痫持续状态体外模型。加入不同浓度BHB(0 mmol/L、2 mmol/L、4 mmol/L、8 mmol/L)后采用MTT法测定神经元细胞的活性,通过流式细胞学方法测定加入BHB后神经细胞的凋亡情况及细胞中的活性氧簇表达情况。结果 MTT实验示无镁模型体外神经元细胞活力明显下降,提示无镁灌流制成癫痫持续状态模型。高剂量组BHB处理后细胞活力明显改善,差异有统计学意义（P均<0.01）。流式细胞学方法示神经元在无镁环境下早期凋亡（P<0.05）、晚期凋亡（P<0.01）及凋亡总数（P<0.01）均增加。高剂量组早期凋亡及凋亡总数较模型组下降,差异有统计学意义（P均<0.05）。且活性氧簇水平下降,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 高浓度BHB能增加神经元活力,减少神经细胞凋亡,对癫痫持续状态体外培养海马神经元活性有保护作用,并可能通过影响活性氧簇途径起作用。     

海马神经元活化产物对大鼠GABA(α1)受体表达的影响

目的：通过研究体外培养的海马神经元被戊四氮活化后的产物与癫痫的关系，探讨惊厥发作前癫痫形成的机制。方法：将神经元活化产物注入大鼠的侧脑室，观察大鼠行为、脑电图及GABA(α1)受体免疫组织化学反应的改变。结果：实验组注射神经元活化产物后10～30min大部分大鼠出现2～3级惊厥反应，EEG呈短程、中高幅尖波、尖慢复合波；对照组行为及EEG未见异常，实验组GABA(α1)受体免疫组化反应呈阳性的细胞明显少于对照组。结论：神经元活化产物具有致痫作用，可通过抑制GABA(α1)受体表达参与癫痫发病机制。     

体外培养大鼠海马神经元癫痫模型中神经元凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3基因的表达

背景:颞叶癫痫的发病与海马神经元丢失死亡有关,但其海马神经元丢失的具体方式和详尽机制还不清楚,难以确定海马神经元癫痫样放电与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine-containingASPartate-specificprotease,Caspase-3)激活及神经元凋亡的必然联系。目的:观察体外培养大鼠海马神经元癫痫模型中神经元凋亡及Caspase-3基因的表达情况。设计:开放性实验。单位:解放军第二军医大学长海医院神经外科,解放军第二军医大学长征医院神经外科。材料:实验于2002-06/2003-06在解放军第二军医大学神经外科实验室完成。选取出生24h内的SD大鼠10只,雌雄不拘。Caspase-3流式检测试剂盒购自美国BD公司,PCR引物由上海皓嘉公司合成。方法:①将24h内新生SD大鼠断头取脑,解剖出双侧海马,制备海马神经元癫痫样放电细胞模型。通过全细胞膜片钳对细胞模型放电情况进行检测。以培养8d并经无镁处理的神经元细胞作为癫痫样放电模型组,以培养8d但未经无镁处理的神经元细胞作为空白对照组,记录电位变化。②采用反转录-聚合酶链法克隆大鼠全长caspase-3cDNA,并加以标记;采用原位杂交和流式细胞术检测caspase-3基因表达和神经元凋亡情况。主要观察指标:①Caspase-3基因cDNA的克隆结果。②Caspase-3原位杂交检测结果。③细胞凋亡检测结果。结果:①反转录-聚合酶链反应扩增的产物经12g/L琼脂糖凝胶电泳显示约800bpDNA片段区带,与预期值一致。DNA序列测定显示所得克隆的开放阅读框架长843bp。②杂交显示空白对照组海马阳性染色神经元少于10%,神经元突起饱满,形成广泛的突触联系。癫痫样放电模型组无镁处理3h后,染色阳性细胞明显增多;无镁处理12h后,有较多强阳性染色神经元,基本保持有神经元突起,但突起变得菲薄。③流式细胞分析显示,无镁处理6h后凋亡细胞开始明显增加,单位时间内凋亡细胞数不尽一致。结论:癫痫样放电可以启动caspase-3表达,继而介导神经元凋亡。     

七氟醚对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元ATP酶活性的影响及其机制分析

目的探讨七氟醚对脑缺血再灌注损伤(IRI)大鼠海马神经元三磷酸腺苷(ATP)酶活性的影响,并分析其机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常组,模型组(建立局灶性脑IRI大鼠模型)和七氟醚组(脑IRI模型+七氟醚吸入治疗),每组各10只。电镜观察各组大鼠海马组织的超微结构,免疫荧光检测海马神经元含量,免疫组化检测海马环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)蛋白表达,试剂盒法检测海马ATP酶活性,荧光定量-聚合酶链锁反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测海马cAMP、PKA、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA和蛋白表达。结果正常组海马神经元细胞膜结构完整,模型组海马神经元胞体萎缩,染色质浓缩并聚集在细胞核边缘,七氟醚组海马神经元形态明显改善。与对照组相比,模型组大鼠海马组织微管相关蛋白-2(MAP-2)阳性细胞占比显著降低(P<0.05),七氟醚组显著高于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠海马组织cAMP和PKA阳性表达、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性显著降低(P<0.05),七氟醚组显著高于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠海马组织cAMP、PKA、CREB、BDNF mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),七氟醚组显著高于模型组(P<0.05)。结论七氟醚可通过激活cAMP-PKA-CREB-BDNF信号通路来促进脑IRI大鼠海马神经元的ATP酶活性,进一步改善脑IRI。     

左乙拉西坦联合奥卡西平治疗儿童难治性癫痫对癫痫发作次数及Th细胞亚群的影响

目的 研究左乙拉西坦联合奥卡西平治疗儿童难治性癫痫（chilldren refractable epilepsy,CRE）对癫痫发作次数及Th细胞亚群的影响。方法 选取2019年2月至2021年12月兰陵县人民医院收治的106例CRE患儿为研究对象,根据随机数字表法将其分为观察组（n=53）和参照组（n=53）。参照组患儿接受奥卡西平治疗,观察组患儿接受左乙拉西坦+奥卡西平治疗,两组患儿均治疗6个月。比较两组患儿的治疗总有效率,治疗前、治疗6个月后癫痫发作频率、持续时间、外周血Th细胞亚群[辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞17(Th17)、调节性T淋巴细胞（Treg）]、炎性细胞因子[γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素17A(IL-17A)、环氧化物酶2(COX-2)]及治疗期间不良反应。结果 观察组患儿治疗总有效率显著高于参照组（P <0.05）;治疗6个月后,两组患儿癫痫发作频率、持续时间、外周血Th1水平、外周血Th17细胞水平、血清IFN-γ、血清IL-17A、血清COX-2水平较治疗前均降低,且观察组低于参照组（P <0.05）;两组患儿外周血Treg细胞水...     

CRMP2对七氟醚诱导的大鼠原代海马神经元树突发育障碍的影响

目的:探究坍塌反应调节蛋白2对七氟醚所致原代海马神经元树突发育障碍的影响。方法:采用野生型CRMP2慢病毒转染原代海马神经元, RT-PCR、WesternBlot验证过表达效果。转染24 h后,处理组经过4.0%的七氟醚暴露8 h后,检测细胞活力,神经元细胞密度以及树突总长度和分支数。结果:七氟醚诱导的原代海马神经元,出现神经元细胞活力下降、密度降低以及树突总长度以及分支数减少。促进CRMP2表达,不能逆转七氟醚所致海马神经元数量减少和活力降低,但能减轻七氟醚所致树突总长度降低。结论:七氟醚干扰原代海马神经元树突发育的机制可能与抑制CRMP2功能有关。     

穴位埋药线对癫痫持续状态大鼠海马神经元凋亡的影响

目的:观察穴位埋药线对癫痫持续状态大鼠海马神经元形态和神经元细胞凋亡的影响,并分析其发生机制。方法:实验于2002-11-18/24在广州中医药大学针灸推拿学院针灸治疗学实验室完成。①选用健康纯系雄性SD大鼠40只,1.5～2月龄。喂养1周后按随机抽签法将大鼠分为5组:空白组、模型组、西药组、常规针刺组、穴位埋药线组,每组8只。模型组、西药组、常规针刺组、穴位埋药线组大鼠均腹腔注射青毒素4×106IU/kg造成癫痫持续状态模型;空白组腹腔注射与造模组同等剂量的温生理盐水。以大鼠出现行为和皮质脑电图改变判断造模是否成功。具体方法如下:穴位埋药线组:在造模前3d埋线,选取大鼠大椎、心俞透膈俞(双)穴。用医用羊肠线浸泡于安定液24h后,将药线埋植在穴位的皮下组织或肌层内。常规针刺组:选大椎、心俞透膈俞(双)穴,用美容针,平补平泻,30min/次,1次/d,在造模前5d开始治疗,致痫当天也予治疗。西药组:致痫后即予腹腔注射0.25mg/kg苯妥英钠。空白组和模型组不予治疗。②所有动物均在致痫24h后,取脑,制成石蜡切片。以苏木精-伊红染色光镜下观察癫痫持续状态后大鼠海马神经元形态学改变;以原位细胞凋亡检测法检测穴位埋药线对癫痫持续状态后大鼠海马神经元DNA片段化的影响,每张切片计数3个不同视野(×400)内的阳性细胞数,取平均数作为细胞凋亡指数。③计量资料差异比较采用t检验。结果:大鼠40只均进入结果分析。①海马神经元细胞形态:空白组大鼠海马神经元细胞形态正常。致痫后24h,模型组、西药组、常规针刺组和穴位埋药线组的大鼠海马神经元细胞均可见不同程度的凋亡表现。②神经元细胞凋亡情况:模型组细胞凋亡指数明显高于空白组[(85.26±22.76),(11.50±4.20)个,P<0.01];穴位埋药线组、西药组与常规针刺组细胞凋亡指数低于模型组[(25.48±9.70),(32.00±5.05),(55.56±10.11)个],但只有穴位埋药线组与模型组差异明显(P<0.01),最接近空白组;3个治疗组细胞凋亡指数相近。结论:穴位埋药线疗法可能通过抑制神经元细胞凋亡起到治疗癫痫的作用。     

姜黄素早期干预对孤独症模型鼠海马神经元和星形胶质细胞的影响

摘要 目的：研究孤独症模型鼠海马神经元和星形胶质细胞的变化以及姜黄素早期干预对二者表达的影响。 方法：根据Schneider的方法,对孕12.5天Wistar大鼠腹腔注射丙戊酸钠600mg/kg建立子代孤独症模型,正常组注射同等剂量的生理盐水（正常组）,分别对两组仔鼠进行模型鉴定。随机选取7日龄模型仔鼠20只,正常组仔鼠10只。模型组仔鼠随机分为模型组10只和姜黄素组10只。姜黄素组于7日龄连续3周腹腔注射姜黄素50mg/kg[姜黄素用含1ml/L二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide, DMSO）的PBS液配成10g/L的溶液],正常组、模型组于7日龄连续三周腹腔注射同等剂量的含1ml/L DMSO的PBS液。利用尼氏染色、免疫荧光染色观察比较28日龄三组仔鼠海马神经元和星形胶质细胞的形态和数量。 结果：发育方面：与正常组相比,模型组体重明显降低;行为学方面：模型组社会交往和交流次数减少,重复性刻板行为增加,并且学习记忆能力下降;尼氏染色：正常组神经元排列紧密规则,面积大小无明显差别,数量较多;模型组神经元排列稀疏且不规则,面积较小,数量减少;姜黄素组神经元排列较规则,数量有所增加;免疫荧光染色：姜黄素干预后神经元数量增加（P＜0.05）,星形胶质细胞数量降低（P＜0.05）。 结论：孤独症模型仔鼠海马神经元和星形胶质细胞表达异常;姜黄素早期干预后上调了神经元的表达,抑制了星形胶质细胞的表达。     

戊四氮诱导的癫痫对发育期大鼠海马内低氧诱导因子-1α和血红素加氧酶-1的影响

目的探讨发育期大鼠癫痫持续状态对其海马内低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法 21 d SD大鼠随机分为2组:生理盐水组(NS组)、戊四氮(PTZ)致癫痫持续状态模型组(模型组)。1%PTZ(80 mg/kg)予大鼠腹腔注射诱导建立癫痫持续状态模型,生理盐水组予等量生理盐水腹腔注射,采用免疫组化和Western blot分别检测海马内HIF-1α、HO-1蛋白和阳性细胞数的表达。结果 HIF-1α、HO-1蛋白在正常生理状态下(NS组)均表达,而且表达平稳;在模型组存在明显的表达时程和表达高峰变化,HIF-1α蛋白1 h即有表达,4 h增多,8 h达高峰,然后逐渐下降;HO-1蛋白1 h少量表达,4~8 h逐渐增多,12 h达高峰,后渐下降。结论癫痫持续状态后,HIF-1α和HO-1表达升高可能是癫痫后的一个重要的脑保护机制。     

激光氧液对癫痫持续状态大鼠海马谷氨酸及γ-氨基丁酸含量及细胞形态的影响

目的:通过戊四氮(PTZ)癫痫持续状态(SE)大鼠模型观察激光氧液对海马组织内谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)动态变化及细胞形态的影响。方法:建立28dSD大鼠戊四氮诱导癫痫持续状态模型。随机分为4组:生理盐水(NS)+5%葡萄糖液(GS)组、NS+激光氧液组、PTZ+GS组、PTZ+激光氧液组。选择造模治疗后第0、3、7、10、14天5个时间点进行观察,采用高效液相法检测海马组织内Glu和GABA含量,HE染色法观察海马区细胞形态变化情况。结果:PTZ组造模后第3、7、10、14天海马组织Glu含量较NS组明显增高,尤以造模后第3天升高差异具有显著性(P<0.05)。PTZ+激光氧液治疗组在造模后第3、7、10、14天Glu含量较PTZ组下降,尤以造模后第3天差异有显著性(P<0.05),但仍高于NS组。PTZ组造模后第3、7、10、14天海马组织GABA含量较NS组明显降低,尤以造模后第3、7天降低差异具有显著性(P<0.05)。PTZ+激光氧液治疗组在造模后第3、7、10、14天GABA含量较PTZ组升高,尤以造模后第14天升高差异有显著性(P<0.05)。结论:大鼠癫痫持续状态后一定时间内海马Glu含量升高,而GABA含量降低。激光氧液能够降低大鼠癫痫发作后异常增加的Glu含量,升高GABA的含量,但对GABA含量的影响明显慢于Glu。     

益母草碱对糖尿病脑病海马神经元细胞损伤及炎症的影响

目的 探究益母草碱对糖尿病脑病（DE）海马神经元细胞损伤及炎症的影响。方法 利用高糖诱导的海马神经元（HT-22）细胞建立DE细胞模型,同时给予益母草碱干预,24 h后利用四氮唑盐比色法（MTT）检测海马神经元细胞损伤,利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,利用Western blot检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白表达情况。结果 益母草碱能显著抑制高糖诱导的HT-22细胞活力,并降低IL-1β、TNF-α、IL-6水平。Western blot实验结果显示,益母草碱可以降低凋亡蛋白caspase-3、Bax的表达,促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,提高高糖诱导的HT-22中BDNF的表达。结论 益母草碱能通过抑制海马神经元凋亡及炎症反应来改善DE中高糖诱导的海马神经元损伤。     

纳洛酮对体外培养的缺氧大鼠皮质神经元细胞凋亡的影响

目的 :观察缺氧对大鼠皮质神经元细胞凋亡的影响及纳洛酮的保护作用。方法 :取体外培养 12 d的Wistar大鼠皮质神经元细胞 ,随机分为正常对照组、缺氧组、缺氧加纳洛酮组。缺氧 6h后在常氧下继续培养2 4h,用原位末端标记 (TUNEL)法和流式细胞仪检测不同时间段神经元细胞凋亡率。结果 :缺氧能诱导神经元细胞凋亡显著增加 ,纳洛酮可以降低凋亡率 ,与缺氧组相比差异显著 (P<0 .0 1)。结论 :纳洛酮可抑制缺氧诱导的大鼠皮质神经元细胞凋亡 ,对神经元细胞具有保护作用     

难治性癫痫模型大鼠脑组织中srGAP2分子的表达

背景：众多研究结果显示srGAP2分子在突起生长和突触可塑性起到关键的作用,但具体机制不明。目的：检测srGAP2在致痫大鼠模型中的表达,探讨srGAP2与难治性癫痫发病机制的相关性。方法：选取雄性SD大鼠56只随机分为7组,其中随机选取6组建立癫痫模型,构成实验组,剩余1组作为对照组。分别选取癫痫发作后的6h、1d、1周、2周、1个月、2个月等6个时间点的颞叶脑组织作为研究对象,并与对照组进行比较。利用免疫组织化学、免疫荧光以及免疫印迹3种方法检测srGAP2在致痫动物模型以及对照组的脑组织中的表达及变化规律。结果与结论：实验组中srGAP2除在皮质区表达增高外,还在海马区高表达,与对照组相比各时间点srGAP2在颞叶癫痫动物组中的表达含量逐渐升高,且在2周左右达高峰并维持,到2个月左右降至接近对照组水平。结果提示srGAP2可能通过促进苔藓纤维出芽,进而导致脑组织中异常神经网络的建立,并最终在难治性癫痫的发生发展中起到重要作用。     

异氟醚对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤期氧自由基及细胞间黏附分子-1表达的影响

目的探讨异氟醚通过抑制细胞间黏附分子（ICAM-1）表达参与减轻肝脏缺血-再灌注（IR）损伤的可能调节机制。方法 32只雌性SD大鼠分为4组。A组大鼠行腹腔注射1%戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉,进行手术但不阻断入肝血流;B组1%戊巴比妥钠麻醉后行部分肝脏IR;C组大鼠仅接受1.0 MAC异氟醚吸入麻醉,不阻断血流;D组采用1.0 MAC异氟醚麻醉,建立肝脏IR模型。肝脏缺血60 min,再灌注3 h后取肝组织和血液标本,检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬门氨酸转氨酶（AST）、肝组织ICAM-1和肝组织还原型谷胱甘肽（GSH）、脂质过氧化物丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量。结果与戊巴比妥钠麻醉比较,采用异氟醚处理后明显降低血清ALT和AST的水平,再灌注肝组织内GSH、SOD含量明显高于而MDA含量降低,同时抑制肝组织ICAM-1的表达。结论异氟醚麻醉能够有效减轻肝脏IR损伤,抑制氧自由基的生成和释放,具体机制可能与抑制ICAM-1表达致使细胞内GSH含量增加密切相关。     

大鼠癫痫持续状态对海马神经元的损害及腺苷A2A受体阻断剂的保护作用研究

目的研究大鼠癫痫持续状态对海马神经元损伤及腺苷A2A受体阻断剂的保护作用。方法取36只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组(正常大鼠)、癫痫组(通过氯化锂-毛果芸香碱构建大鼠癫痫持续状态模型)、干预组(造模前15 min给予0. 05 mg/kg SCH58261,腹腔给药),三组各12只。造模24 h后,观察三组大鼠脑组织海马CA3区神经元病理形态学改变,比较大鼠磷酸化C-Jun N-末端激酶(p-JNK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)及p-p38蛋白的表达水平。结果癫痫组造模成功率为91. 67%(11/12),干预组造模成功率为83. 33%(10/12)。对照组脑组织海马CA3区可见大量锥体细胞,且结构致密、排列整齐、结构完整,细胞核内染色质分布均匀,细胞膜边缘清晰可见;癫痫组大鼠脑组织海马CA3区大量神经元明显变性和坏死,大量细胞体积增大、肿胀明显、边缘模糊,细胞核溶解、碎裂、固缩,细胞明显脱失;干预组大鼠脑组织海马CA3区神经元脱失明显少于癫痫组,神经元变性不明显,少数胞质Nissl小体减少。p-ERK、p-p38、p-JNK蛋白均表达于三组大鼠脑组织海马区,其中癫痫组和干预组p-ERK、p-p38、p-JNK蛋白的表达水平较对照组均显著升高(P 0. 01),干预组p-p38和p-JNK蛋白的表达水平较癫痫组均显著下降(P 0. 01),干预组p-ERK蛋白的表达水平与癫痫组比较,并无显著差异(P0. 05)。结论大鼠癫痫持续状态可导致脑组织海马神经元损伤,给予腺苷A2A受体阻断剂SCH58261腹腔给药可通过阻滞MAPK通路,从而具有保护海马神经元的作用。