恒定磁场中大鼠成骨细胞的增殖和功能活性

背景:磁场对成骨细胞生物学的影响存在一定的分歧。目的:探讨不同强度恒定磁场作用不同时间后成骨细胞增殖和功能活性的改变。方法:用体外培养的SD大鼠成骨细胞第3～5代分别在0,5,22,86,135mT恒定磁场下培养,观察8,12,24h后细胞增殖和凋亡变化及细胞上清液中骨钙素及Ⅰ型前胶原C端前肽的表达。结果与结论:磁场作用8,12h后,5,22,86,135mT磁场培养的细胞增殖指数均高于对照组(P<0.05),作用24h时,仅5mT组高于对照组(P<0.05)。而0,5,22,86,135mT恒定磁场下培养8,12,24h的凋亡百分数差异无显著性意义。磁场作用8h后,22,86,135mT组骨钙素分泌量均高于对照组(P<0.05);作用24h后,135mT组骨钙素分泌量则明显低于对照组(P<0.05);而磁场作用8,12h后,22,86mT组Ⅰ型前胶原C端前肽分泌量明显高于对照组(P<0.05),作用24h后,135mT组Ⅰ型前胶原C端前肽分泌量则明显低于对照组(P<0.05)。表明低强度磁场、短时间作用可促进成骨细胞的增殖及成骨物质的分泌,而高强度磁场或磁场暴露时间过长则抑制成骨细胞增殖及成骨物质的分泌。     

氟对体外培养成骨细胞氧化应激和增殖活性的影响

目的研究氧化应激反应对染氟成骨细胞增殖活性的作用。方法取昆明小鼠乳鼠颅骨进行成骨细胞培养，应用生化方法检测细胞内蛋白和丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活性。结果 暴露于低水平氟（0．5—1mg^F-／L）的成骨细胞脂质过氧化物MDA水平明显较低，但在2mg^F-/L组MDA水平明显提高；长时间（≥72h）暴露于高水平氟的成骨细胞MDA含量显著增多。染氟24—72h的成骨细胞GPX活性在低氟（0．5—2．0mg^F-／L）组明显升高。暴露于高氟环境的成骨细胞酶活性下降。结论低浓度氟刺激成骨细胞增殖和氧化应激活跃；高浓度氟引起过量氧化应激和细胞增殖受抑制。     

p38MAPK与新生大鼠成骨细胞的增殖、分化和凋亡

背景:p38MAPK是MAPK信号转导途径的通道之一.但是,p38MAPK如何参与成骨细胞增殖、分化的调控,是否与成骨细胞的凋亡有关,目前尚未见相关文献报道.目的:观察p38MAPK对新生大鼠成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响.设计、时间及地点:单一样本观察,细胞学体外对比观察,于2007-05/2008-03在解放军兰州军区总院骨科研究所细胞培养室完成.材料:新生24 h SD大鼠9只用于分离成骨细胞;SB203580(p38MAPK的阻断剂)为Sigma公司产品.方法:取新生SD大鼠头盖骨成骨细胞.药物刺激组分别加入不同浓度(1×10-6,1×10-7,1×10-8mol/L)的17β-雌二醇、葛根素;含阻断剂组提前30 min添加10 μmol/LSB203580阻断信号转导通路,再加药物;设空白对照组.主要观察指标:作用72 h后用四甲基偶氮唑盐法与对硝基苯磷酸法测定细胞的增殖能力和碱性磷酸酶活性,AnnexinV-FITC/P1双标记流式细胞仪分析细胞早期凋亡.结果:加入17β-雌二醇或葛根素药物后,成骨细胞的增殖、分化明显增强,与空白对照组比较差异有显著性意义(P<0.05);阻断p38MAPK信号转导通路后,细胞增殖未受明显抑制(P>0.05);分化受到明显抑制,与未阻断组比较差异具有非常显著性意义(P< 0.01).流式细胞仪分析结果显示,与对照组相比,药物组细胞早期凋亡率明显降低(P< 0.05);与药物刺激组相比,含阻断剂组细胞早期凋亡率无明显变化(P>0.05).结论:17β-雌二醇、葛根素能促进成骨细胞的增殖和分化并抑制其凋亡;p38MAPK在成骨细胞分化过程中发挥重要作用,对成骨细胞的增殖、凋亡无明显影响.     

恒定磁场与硫酸肝素对人肝癌细胞系增殖和凋亡的影响

目的：探讨恒定磁场与硫酸肝素对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法：体外观察硫酸肝素作用于人肝癌细胞系（HepG2）后的细胞增殖、凋亡疚和细胞ras基因表达的变化，并探讨其在恒定磁场作用下的相互关系。结果：硫酸肝素能抑制细胞HepG2的增殖能力及其细胞ras基因蛋白的表达，并诱导其细胞凋亡率增加。同时，在恒定磁场作用下获得细胞增殖抑制与凋亡诱导的加强。结论：硫酸肝素对人肝癌细胞增殖、凋亡的影响与ras基因蛋白介导的信号传递作用有关；恒定磁场与硫酸肝素对人肝癌细胞增殖和凋亡具有协同作用。     

葛根素对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响

目的:课题以往的研究已证实,葛根素在体外能够抑制破骨细胞的骨吸收活性,促进骨生长,实验将进一步验证葛根素对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响,并评价其对骨形成的作用。方法:实验于2003-03/2004-03在武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行。①实验材料:葛根素(Puerarin)购自中国药品生物制品检定所,雌酚酮购自浙江仙居制药厂。大鼠由解放军军事医学科学院实验动物中心提供。②实验方法:实验分5组:雌酚酮阳性对照组、空白对照组(不加药,只加等量细胞悬液和培养基)、0.01,0.1,1μmol/L葛根素组。由新生24hSD大鼠颅盖骨分离培养成骨细胞,调整成骨活细胞密度为0.9×107L-1,接种于24孔培养板,每组12个复孔,分别于第1,3,5天每组取3孔计数,绘制细胞生长曲线。③实验评估:分别于第1,3,5天采用四唑盐法测定吸光度,计算平均增殖率,采用硝基苯基质动力学法测定各组细胞内外碱性磷酸酶活性。结果:①与空白对照组相比,0.1,1μmol/L葛根素干预组与雌酚酮阳性对照组第3,5天细胞增殖速度均加快,差异有显著性意义(P<0.01)。②经1μmol/L葛根素处理的第1,3,5天,细胞内、外碱性磷酸酶活性均明显高于空白对照组(P<0.01)。经0.1μmol/L葛根素处理第3,5天,细胞内、外碱性磷酸酶活性明显高于空白对照组(P<0.05,P<0.01)。经0.01μmol/L葛根素处理后第5天,细胞外碱性磷酸酶活性明显高于空白对照组(P<0.01)。结论:葛根素对骨形成的作用:①通过影响碱磷酸酶活性,而促进成骨细胞分化。②通过雌激素受体介导促进成骨细胞的骨形成效应。     

恒定磁场对家兔坐骨神经损伤后修复作用的观察

实验家兔随机分为两组，以同法造成左后肢上段坐骨神经Ｓｅｄｄｏｎ ＩＩ度损伤，造模后将片厚１ｍｍ，直径６ｍｍ，表面磁感应强度０．２Ｔ钕铁硼磁片在无菌条件下埋入被损伤神经皮下对应处，连续作用７、１４、２１和２８天，对照组除不埋磁片外，其余条件与实验组相同，实验毕处死家兔，各取坐骨神经组织０．８￣１．０ｃｍ，超薄切片，电镜观察。结果证明，恒定磁场能使有髓神经髓鞘、轴索在短时间内恢复正常，神经水肿消失，并     

钛颗粒对大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响

背景:钛磨损颗粒在人工关节假体周围骨溶解的形成中具有重要作用,其对成骨细胞的影响可能是骨溶解形成的原因之一.目的:观察钛颗粒对大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响.设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,于2008-09/12在上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科实验室完成.材料:商晶化纯钛颗粒(货号:00681;Johnson Matthey,Ward Hill,MA,USA),平均粒径4.5 μm,86%的颗粒小于10 μm.方法:分离培养新生24 h内SD大鼠成骨细胞.选用第3代大鼠成骨细胞接种于培养血板中,24 h后细胞完全贴壁,更换无血清培养液孵育24 h,根据是否加入钛颗粒条件培养基分为钛颗粒组和对照组,其后钛颗粒组更换含0.1 g/L钛颗粒的条件培养摹,3 d换液1次.对照组同时换液,但不加入含钛颗粒的条件培养基.主要观察指标:于2,4,7,14 d采用四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖情况:第7天和第14天行碱性磷酸酶染色和碱性磷酸酶定量观察细胞的碱性磷酸酶活性变化:第14,21天行茜素红钙结节染色观察细胞矿化能力的变化.结果:钛颗粒组与对照组相比各时间点细胞增殖无明显差异(P>0.05);7 d和14 d碱性磷酸酶染色可见钛颗粒组较对照组减弱,碱性磷酸酶活性定量分析钛颗粒组明显低于对照组(P<0.01);14,21 d茜素红染色可见钛颗粒组钙结节数量较对厢组明显降低.结论:钛颗粒对大鼠成骨细胞分化和矿化功能具有抑制作用,但不影响细胞增殖.     

孕酮对体外培养人成骨细胞增殖和分化的促进作用

目的：探讨孕酮对正常成人成骨细胞的作用，验证孕激素治疗绝经后骨质疏松症的假设机制。方法：以正常成年女性松质骨分离培养的人成骨细胞为对象，用10^-10，10^-8，10^-6M孕酮干预。四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖情况；半定量反转录聚合酶链反应和免疫印记法测定孕激素受体mRNA和蛋白质表达；半定量RT-PCR测定c-fos，c-jun和骨钙紊基因表达。结果：与对照组相比较，10^-10，10^-8，10^-6M孕酮增加人成骨细胞增殖达9．8％，23．O％和32．8％。孕酮不影响孕激素受体mRNA和蛋白质表达，但可增加c-fos，c-jun mRNA表达，分别为5．4％，15．3％，35．5％和7．2％，20．1％，40．3％。孕酮增加骨钙紊mRNA表达为12．2％，23．7％和45．5％。结论：孕酮可促进人成骨细胞的增殖和分化，可用于治疗绝经后骨质疏松症。     

恒定磁场对家兔前列环素和血栓素B2的影响

应用放射免疫分析法对14只正常健康家兔,分别在钐钴合金永磁片和铈钴合金永磁片作用下,观察不同强度恒定磁场对家兔血浆血栓素B_2和6-酮-前列环素的影响。结果表明:恒定磁场可使家兔血栓素B_2增加,0.15T恒定磁场可使家兔6-酮-前列环素含量明显下降,血栓素B_2的增高或前列环素下降的结果,促使血小板处于高聚集状态,从而促进血凝,这可能是磁疗止血的机理之一。     

芒果苷对大鼠成骨细胞增殖作用的影响

背景：芒果苷以及含芒果苷植物提取物具有多方面生理和药理作用,但其是否促进成骨细胞增殖尚未见报道。目的：验证芒果苷对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖的影响。方法：取新生的SD大鼠的颅骨,二次酶消化法培养成骨细胞。应用MTT法及细胞周期的流式细胞仪检测,观察不同浓度的芒果苷对大鼠成骨细胞毒性,不同浓度的芒果苷对体外培养成骨细胞增殖的影响。结果与结论：在一定浓度范围内,不同浓度的芒果苷均可促进成骨细胞增殖、分化,并呈现出一定的量效、时效关系。芒果苷最佳促进增殖浓度为40μmol/L。药物作用时间48,72h,芒果苷20,40,80μmol/L组均有显著促进成骨细胞增殖的作用（P〈0.01或P〈0.05）。芒果苷浓度20,40,80μmol/L等各组细胞S期比值均较正常细胞显著增高,以芒果苷40μmol/L浓度组增高最显著（P〈0.05）。表明在一定浓度范围内,芒果苷具有促进体外成骨细胞增殖的作用。     

不同强度恒磁场对大鼠主动脉内皮细胞增殖的影响

目的:观察不同强度恒磁场对大鼠主动脉内皮细胞增殖的影响。方法:将体外培养3代的大鼠主动脉内皮细胞分为对照组及不同强度(0.5,1.0,5.0,10.0,100.0,500.0Gs)磁场组。磁场作用时间为48h,用四唑盐比色法测定细胞增殖。结果:与对照组相比,0.5,1.0,5.0Gs磁场组细胞增殖显著高于对照组(分别为0.301±0.023,0.308±0.042,0.294±0.025和0.230±0.026;t=11.20,8.65,7.92;P<0.05);10.0Gs磁场组细胞增殖与对照组相比无明显差异(0.228±0.034和0.230±0.026;t=0.26;P>0.05);100.0Gs和500.0Gs磁场组细胞增殖显著低于对照组(分别为0.173±0.022,0.166±0.015和0.230±0.026;t=9.17,11.68;P<0.05)。结论:0.5～5.0Gs的恒磁场可以促进大鼠主动脉内皮细胞的增殖,而100.0Gs以上恒磁场可抑制内皮细胞增殖。     

恒磁场对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的　研究不同强度的恒磁场对人脐静脉内皮细胞增殖的影响。方法　体外培养的第 3代人脐静脉内皮细胞 ,分为对照组及不同剂量磁场组。各剂量磁场作用组的磁感应强度分别为 0 .0 5mT、0 .1mT、1mT、10mT、30mT、60mT和 10 0mT ,磁场作用时间均为 48h。用3H TdR法及MTT法测定细胞增殖。结果　 0 .0 5mT组细胞增殖显著高于对照组 (0 .2 92± 0 .0 10对 0 .2 2 0± 0 .0 0 8,P <0 .0 5 ) ;0 .1mT组细胞增殖与对照组相比无明显差异 (0 .2 31± 0 .0 0 9对 0 .2 2 0± 0 .0 0 8,P >0 .0 5 ) ;其余剂量组细胞增殖均显著低于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　 0 .0 5mT的恒磁场可以促进人脐静脉内皮细胞的增殖     

不同强度静磁场对成骨细胞细胞骨架改建的影响

背景:静磁场对成骨细胞增殖活性、细胞因子分泌及碱性磷酸酶表达等功能活性影响的机制尚不清楚。目的:观察不同强度静磁场加载对成骨细胞骨架改建和细胞骨架蛋白表达的影响。方法:取新生24h内SD大鼠颅骨进行成骨细胞的培养和鉴定。采用静磁场加载装置对体外培养的成骨细胞进行0,8,50,160mT的静磁场加载,分别于静磁场加载24,48,72h应用BODYPY-Phaloidin进行成骨细胞骨架染色,激光扫描共聚焦显微镜和图像处理软件ImageJ测定细胞骨架蛋白的荧光强度。结果与结论:8,50,160mT静磁场加载24,48,72h,荧光标记的成骨细胞骨架蛋白向细胞核周围集中,荧光强度增强(P<0.05),其中经50mT静磁场加载的成骨细胞骨架蛋白的荧光最强。说明一定强度的静磁场可以影响成骨细胞骨架的改建和重组。     

不同强度静磁场对成骨细胞细胞骨架改建的影响

背景：静磁场对成骨细胞增殖活性、细胞因子分泌及碱性磷酸酶表达等功能活性影响的机制尚不清楚。目的：观察不同强度静磁场加载对成骨细胞骨架改建和细胞骨架蛋白表达的影响。方法：取新生24h内SD大鼠颅骨进行成骨细胞的培养和鉴定。采用静磁场加载装置对体外培养的成骨细胞进行0,8,50,160mT的静磁场加载,分别于静磁场加载24,48,72h应用BODYPY-Phaloidin进行成骨细胞骨架染色,激光扫描共聚焦显微镜和图像处理软件ImageJ测定细胞骨架蛋白的荧光强度。结果与结论：8,50,160mT静磁场加载24,48,72h,荧光标记的成骨细胞骨架蛋白向细胞核周围集中,荧光强度增强（P〈0.05）,其中经50mT静磁场加载的成骨细胞骨架蛋白的荧光最强。说明一定强度的静磁场可以影响成骨细胞骨架的改建和重组。     

低氧条件下成骨细胞的增殖与分化

背景:低氧可通过多种途径作用于成骨细胞影响骨代谢,对骨生成、骨愈合等产生负面影响。目的:观察低氧对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化的影响,并探讨其分子机制。方法:分离培养新生Wistar大鼠颅盖骨成骨细胞,取第2代细胞分别在常氧(体积分数20%O2)与低氧(体积分数3%O2)条件下培养。结果与结论:低氧组成骨细胞增殖、碱性磷酸酶活性、骨钙素水平及茜素红结节形成数量均明显低于常氧组(P<0.05或P<0.01),说明缺氧条件对成骨细胞的增殖、分化及功能有抑制作用;低氧组骨形成发生蛋白2及Runx2表达低于常氧组(P<0.05或P<0.01),说明低氧条件下大鼠成骨细胞Runx2、骨形成发生蛋白2的表达受抑制。结果表明低氧可通过抑制大鼠成骨细胞的Runx2、骨形成发生蛋白2的表达进一步抑制成骨细胞的增殖与分化。     

低氧条件下成骨细胞的增殖与分化

背景：低氧可通过多种途径作用于成骨细胞影响骨代谢,对骨生成、骨愈合等产生负面影响。目的：观察低氧对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化的影响,并探讨其分子机制。方法：分离培养新生Wistar大鼠颅盖骨成骨细胞,取第2代细胞分别在常氧（体积分数20%O2）与低氧（体积分数3%O2）条件下培养。结果与结论：低氧组成骨细胞增殖、碱性磷酸酶活性、骨钙素水平及茜素红结节形成数量均明显低于常氧组（P〈0.05或P〈0.01）,说明缺氧条件对成骨细胞的增殖、分化及功能有抑制作用;低氧组骨形成发生蛋白2及Runx2表达低于常氧组（P〈0.05或P〈0.01）,说明低氧条件下大鼠成骨细胞Runx2、骨形成发生蛋白2的表达受抑制。结果表明低氧可通过抑制大鼠成骨细胞的Runx2、骨形成发生蛋白2的表达进一步抑制成骨细胞的增殖与分化。     

恒磁场对人脐静脉内皮细胞增殖的影响 实验证据支持磁场效应可降低RS发生率

目的观察恒磁场(staticmagneticfield,SMF)对人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendotheliumcell,HUVEC)增殖的影响,以探讨SMF能否用于经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneoustrans-luminalcoronaryangioplasty,PTCA)及支架植入术后冠脉再狭窄(restenosis,RS)的防治。方法用含100g/L小牛血清的DMEM培养液体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),分别在给予SMF和无SMF条件下培养,用3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入法和流式细胞技术分析SMF对HUMEC的DNA合成及细胞周期的影响。结果对照组cpm值为1194.669±287.250,恒磁场组cpm值为1356.578±363.845,差异显著(P<0.05)。恒磁场组S期细胞高于对照组,G1期细胞较对照组降低,增殖指数PI值(S+G2M)%增高,差异显著(P<0.05)。结论SMF对HUMEC的增殖具有明显的促进作用。SMF对PTCA支架植入术后的冠脉RS可能具有防治作用。     

帕米磷酸钠对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响

目的观察二磷酸盐类药物帕米磷酸钠对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化的影响。方法取新生SD大鼠头盖骨分离成骨细胞体外培养 ;不同浓度帕米磷酸钠刺激后 ,四甲基偶氮唑盐 (MTT)法检测细胞增殖能力 ;取细胞上清液 ,碱性磷酸酶试剂盒检测细胞培养液中碱性磷酸酶活性。结果在 10 6M— 10 12 M时 ,帕米磷酸钠能促进大鼠成骨细胞增殖 (P <0 .0 5 ) ,10 4M则抑制细胞增殖 (P <0 .0 5 ) ;帕米磷酸钠抑制大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性。结论帕米磷酸钠能直接作用于大鼠成骨细胞 ,促进其增殖 ,但抑制分化