胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织中磷酸化p38与JNK通路及痹肿消汤的影响

背景:有研究报道滑膜细胞信号传导异常是类风湿关节炎发病的重要机制之一.目的:观察胶原诱导性关节炎大鼠中丝裂原活化蛋白激酶通路中磷酸化p38 和磷酸化JNK 的活化及痹肿消汤的影响.方法:将72 只SD 大鼠随机分为正常组、模型组、痹肿消汤组.模型组及痹肿消汤组大鼠足趾注射胶原蛋白乳剂制备胶原诱导性关节炎模型大鼠,10 d 后加强免疫,初次免疫后第14 天开始给痹肿消汤组大鼠每天痹肿消汤灌胃,模型组蒸馏水灌胃,正常组自由饮水.结果与结论:Western blot 检测结果显示,胶原诱导性关节炎大鼠中磷酸化p38 及JNK 的表达较正常组显著增高(P < 0.05).与模型组相比,痹肿消汤组能下调磷酸化p38 及JNK 蛋白的表达(P < 0.05).说明痹肿消汤可抑制类风湿关节炎中磷酸化p38及JNK 的高表达.     

痹肿消汤干预胶原诱导关节炎模型大鼠关节滑膜组织细胞外信号调节激酶1/2及细胞外信号调节激酶5的表达

背景：滑膜细胞信号转导异常是类风湿性关节炎的重要发病机制之一。中药复方痹肿消汤治疗类风湿性关节炎具有较好的临床疗效,但在细胞信号转导水平探讨痹肿消汤治疗类风湿性关节炎的作用机制是十分必要的。目的：观察中药复方痹肿消汤对胶原诱导关节炎模型大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5表达的影响。方法：SD大鼠45只随机数字表法分为对照组、模型组、痹肿消汤组。胶原诱导关节炎模型大鼠,用痹肿消汤药液3.0～3.5mL灌胃,1次/d,连续14d。检测造模后第14,21,28天大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5的磷酸化水平。结果与结论：造模后,大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5的磷酸化表达随时间而增加（P〈0.05）。痹肿消汤治疗后,细胞外信号调节激酶1/2,5磷酸化表达水平则明显下降（P〈0.05）。提示痹肿消汤能抑制细胞外信号调节激酶1/2,5蛋白激酶的激活,从而抑制细胞外信号调节激酶1/2,5信号转导通路的活化,这可能是其阻抑类风湿性关节炎滑膜异常增殖、关节骨质侵蚀的重要机制之一。     

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤的干预效应

目的：观察胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤干预的影响。方法：实验于20H05-05／2005-07在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成。选用51只健康SD大鼠，以随机数字表法选出36只造模，采用皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎）模型，另15只作为正常对照组，注射等量生理盐水。成模大鼠30只以随机数字表法分为模型组和痹肿消汤组，各15只。痹肿消汤组于初次免疫7d后开始灌服痹肿消汤（痹肿消汤由白花蛇舌草、肿节风、苡米、络石藤、丹参、骨碎补等15味中药组成，体表面积比换算关系，大鼠用药为70妇成人临床用药3倍，药材从中南大学湘雅医院中药房一次性选购，两次水煎取药液备用），相当于生药62．1g/（K&;#183;d），每只约1．5mL，2次／d灌服；模型组与正常组同体积生理盐水。观察大鼠一般情况，并定期对其进行关节炎指数评分。按04级进行评分，0分：无关节炎；1分：有红色斑点后轻度肿胀；2分：关节部位中度肿胀；3分：关节严重肿胀；4分：关节严重肿胀且不能负重。采用免疫印迹法（Westem blot）检测正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠在不同时间点滑膜组织醛缩酶A的表达，运用Imagel佃13．0灰度扫描软件对结果进行半定量分析。结果：纳入实验的51只大鼠，造模不成功被淘汰6只，最终痹肿消汤组15只、模型组15只、对照组15只，共45只大鼠进入结果分析。①各组大鼠关节炎指数比较：模型组大鼠关节炎指数于免疫后25d左右达到高峰，30d后呈下降趋势；痹肿消汤组大鼠亦于25d左右达高峰，但较模型组低。②各组大鼠滑膜组织醛缩酶A的表达：模型组醛缩酶A表达在25，35，45d递增（P〈0．05-0．01），且明显高于同时间正常组及痹肿消汤组（P〈0．05-0．01）；痹肿消汤组醛缩酶A表达在各时间点明显低于同时间模型组及正常组（P〈0．05，P〈0．005，P〈0．001），在25，35d和45d表达水平呈递减趋势（P〈0．05，0．01）。结论：类风湿关节炎关节病变过程中醛缩酶A表达增加，且随免疫时间延长而逐渐上调。痹肿消汤能下调关节炎大鼠滑膜醛缩酶A表达，这可能是其阻抑类风湿关节炎骨质侵蚀的重要机制之一。     

胶原诱导性关节炎大鼠灌服痹肿消汤后滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达

目的：观察胶原诱导性关节炎大鼠灌服痹肿消汤后滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达变化。 方法：实验于2005-02／06在蛋白质组国家重点实验室完成，选用78只健康SD大鼠，按随机数字表法分为3组：①正常对照组（n=10）。②模型组（n=35）。⑧痹肿消汤组（n=33）。模型组和痹肿消汤组大鼠采用牛Ⅱ型胶原10mg与完全福氏佐剂5mL混合注射诱导大鼠关节炎模型；正常对照组注射等量生理盐水。痹肿消汤组于初次免疫7d后开始灌服痹肿消汤（由白花蛇舌草15g，肿节风30g，丹参15g，苡米30g等15味中药组成），按10mL／kg标准给药，2次／d；模型组与正常对照组每天灌服相同体积的生理盐水。观察大鼠一般情况，并定期对其进行关节炎指数评分（0分：无关节炎；4分：关节严重肿胀且不能负重。关节炎指数=四肢关节评分之和，平均关节炎指数：总关节炎指数／每组大鼠的总数）。各组大鼠分别于造模后25d，35d，45d麻醉断头处死。取踝跖关节作病理检查，采用免疫印迹法检测大鼠在不同时间点滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达，运用ImageTool3．0灰度扫描软件对结果进行半定量分析。 结果：对未出现红斑、肿胀等关节炎体征或体征不明显的大鼠予以舍弃。进入结果分析的大鼠共70只，正常对照组、模型组及痹肿消汤组分别为10，30，30只。①各组大鼠的关节炎指数比较：模型组大鼠在造模14d后关节炎症状进行性加重，平均关节炎指数增加；痹肿消汤组平均关节炎指数于造模25d和30d达高峰，但仍较模型组低。②各组大鼠滑膜病理学改变：模型组大鼠滑膜组织中炎性细胞浸润，血管增生，滑膜增厚等特征改变持续加重，而痹肿消汤组显示炎症减轻，新生血管减少，滑膜增厚不明显。③各组大鼠滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达：模型组造模后45d膜联蛋白Ⅰ表达明显低于正常对照组（P〈0．01），在造模后25d，35d，45d膜联蛋白Ⅰ的表达水平呈递减趋势。痹肿消汤组大鼠膜联蛋白Ⅰ表达水平明显高于模型组与正常对照组（P〈0．05-0．01），且在造模后25d，35d,45d呈递增趋势。 结论：痹肿消汤具有上调胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织膜联蛋白Ⅰ表达的作用，这可能是该药控制类风湿关节炎病程发展的途径之一。     

痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质组学研究

目的：观察痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质改变，分析痹肿消汤治疗类风湿关节炎可能的作用机制。 方法：实验于2004-05／2005-02在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成。70只SD大鼠随机分为3组，正常组10只，其余60只大鼠采用牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎模型，选取造模成功者再随机分为两组，即痹肿消汤组和模型组。痹肿消汤煎液制备：白花蛇舌草15g。肿节风30g，丹参15g，络石藤20g。骨碎补15g，苡米30g等15味中药，双蒸水煎2次。30min／次，两煎混合。G4滤器过滤。于60℃水浴中浓缩成每毫升药液含生药116g。痹肿消汤组灌服痹肿消汤煎液10mL／kg（相当于生药62．1g）。2次／d灌服；模型组灌服生理盐水10mL／kg，2次／d灌服。正常组自由进水。应用双向凝胶电泳技术分别分离正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠关节滑膜的总蛋白后，经胶体考染显色、图像分析、识别差异表达的蛋白质点。应用MALDI—TOF—MS质谱仪得到相应的肽质量指纹图谱，然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。 结果：纳入实验的70只大鼠，造模不成功被淘汰7只，最终痹肿消汤组26只、模型组27只、对照组10只，共63只大鼠进入结果分析。①建立了正常组、模型组和痹肿消汤组关节滑膜的双向凝胶电泳图谱，其平均蛋白质点数分别为947&;#177;39，994&;#177;4l，1031&;#177;52。其匹配率为92％，9l％，94．2％。②发现并鉴定了正常组、模型组和痹肿消汤组大鼠滑膜的差异表达大于2倍的蛋白质点55个，这些差异表达蛋白质的功能涉及物质代谢、能量产生、物质转运、抗氧化应激、信号转导及细胞骨架蛋白，随即用免疫印迹的方法差异蛋白质annexin 1、aldolase A在正常组、模型组、痹肿消汤组中的表达，其结果也显示了类似的表达差异。 结论：类风湿关节炎模型关节滑膜病变是一个多种蛋白质参与的复杂过程。滑膜组织的比较蛋白质组学分析是一种筛选病变相关蛋白的可靠方法之一。annexin 1、aldolase A可能与实验性关节炎的关节滑膜病变有关；痹肿消汤可能通过对实验性关节炎大鼠滑膜蛋白质表达的凋控达到治疗目的。     

痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质组学研究

目的:观察痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质改变,分析痹肿消汤治疗类风湿关节炎可能的作用机制。方法:实验于2004-05/2005-02在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成。70只SD大鼠随机分为3组,正常组10只,其余60只大鼠采用牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎模型,选取造模成功者再随机分为两组,即痹肿消汤组和模型组。痹肿消汤煎液制备:白花蛇舌草15g,肿节风30g,丹参15g,络石藤20g,骨碎补15g,苡米30g等15味中药,双蒸水煎2次,30min/次,两煎混合,G4滤器过滤,于60℃水浴中浓缩成每毫升药液含生药116g。痹肿消汤组灌服痹肿消汤煎液10mL/kg(相当于生药62.1g),2次/d灌服;模型组灌服生理盐水10mL/kg,2次/d灌服。正常组自由进水。应用双向凝胶电泳技术分别分离正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠关节滑膜的总蛋白后,经胶体考染显色、图像分析、识别差异表达的蛋白质点,应用MALDI-TOF-MS质谱仪得到相应的肽质量指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果:纳入实验的70只大鼠,造模不成功被淘汰7只,最终痹肿消汤组26只、模型组27只、对照组10只,共63只大鼠进入结果分析。①建立了正常组、模型组和痹肿消汤组关节滑膜的双向凝胶电泳图谱,其平均蛋白质点数分别为947±39,994±41,1031±52,其匹配率为92%,91%,94.2%。②发现并鉴定了正常组、模型组和痹肿消汤组大鼠滑膜的差异表达大于2倍的蛋白质点55个,这些差异表达蛋白质的功能涉及物质代谢、能量产生、物质转运、抗氧化应激、信号转导及细胞骨架蛋白,随即用免疫印迹的方法差异蛋白质annexin1、aldolaseA在正常组、模型组、痹肿消汤组中的表达,其结果也显示了类似的表达差异。结论:类风湿关节炎模型关节滑膜病变是一个多种蛋白质参与的复杂过程。滑膜组织的比较蛋白质组学分析是一种筛选病变相关蛋白的可靠方法之一。annexin1、aldolaseA可能与实验性关节炎的关节滑膜病变有关;痹肿消汤可能通过对实验性关节炎大鼠滑膜蛋白质表达的调控达到治疗目的。     

胶原诱导性关节炎大鼠灌服痹肿消汤后滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达

目的:观察胶原诱导性关节炎大鼠灌服痹肿消汤后滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达变化。方法:实验于2005-02/06在蛋白质组国家重点实验室完成,选用78只健康SD大鼠,按随机数字表法分为3组:①正常对照组(n=10)。②模型组(n=35)。③痹肿消汤组(n=33)。模型组和痹肿消汤组大鼠采用牛Ⅱ型胶原10mg与完全福氏佐剂5mL混合注射诱导大鼠关节炎模型;正常对照组注射等量生理盐水。痹肿消汤组于初次免疫7d后开始灌服痹肿消汤(由白花蛇舌草15g,肿节风30g,丹参15g,苡米30g等15味中药组成),按10mL/kg标准给药,2次/d;模型组与正常对照组每天灌服相同体积的生理盐水。观察大鼠一般情况,并定期对其进行关节炎指数评分(0分:无关节炎;4分:关节严重肿胀且不能负重。关节炎指数=四肢关节评分之和,平均关节炎指数=总关节炎指数/每组大鼠的总数)。各组大鼠分别于造模后25d,35d,45d麻醉断头处死。取踝跖关节作病理检查,采用免疫印迹法检测大鼠在不同时间点滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达,运用ImageTool3.0灰度扫描软件对结果进行半定量分析。结果:对未出现红斑、肿胀等关节炎体征或体征不明显的大鼠予以舍弃,进入结果分析的大鼠共70只,正常对照组、模型组及痹肿消汤组分别为10,30,30只。①各组大鼠的关节炎指数比较:模型组大鼠在造模14d后关节炎症状进行性加重,平均关节炎指数增加;痹肿消汤组平均关节炎指数于造模25d和30d达高峰,但仍较模型组低。②各组大鼠滑膜病理学改变:模型组大鼠滑膜组织中炎性细胞浸润,血管增生,滑膜增厚等特征改变持续加重,而痹肿消汤组显示炎症减轻,新生血管减少,滑膜增厚不明显。③各组大鼠滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达:模型组造模后45d膜联蛋白Ⅰ表达明显低于正常对照组(P<0.01),在造模后25d,35d,45d膜联蛋白Ⅰ的表达水平呈递减趋势。痹肿消汤组大鼠膜联蛋白Ⅰ表达水平明显高于模型组与正常对照组(P<0.05～0.01),且在造模后25d,35d,45d呈递增趋势。结论:痹肿消汤具有上调胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织膜联蛋白Ⅰ表达的作用,这可能是该药控制类风湿关节炎病程发展的途径之一。     

痹肿消汤干预胶原诱导关节炎模型大鼠关节滑膜组织细胞外信号调节激酶1/2及细胞外信号调节激酶5的表达

背景:滑膜细胞信号转导异常是类风湿性关节炎的重要发病机制之一.中药复方痹肿消汤治疗类风湿性关节炎具有较好的临床疗效,但在细胞信号转导水平探讨痹肿消汤治疗类风湿性关节炎的作用机制是十分必要的.目的:观察中药复方痹肿消汤对胶原诱导关节炎模型大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5表达的影响.方法:SD大鼠45只随机数字表法分为对照组、模型组、痹肿消汤组.胶原诱导关节炎模型大鼠,用痹肿消汤药液3.0～ 3.5 mL灌胃,1次/d,连续14 d.检测造模后第14,21,28天大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5的磷酸化水平.结果与结论:造模后,大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5的磷酸化表达随时间而增加(P < 0.05).痹肿消汤治疗后,细胞外信号调节激酶1/2,5磷酸化表达水平则明显下降(P < 0.05).提示痹肿消汤能抑制细胞外信号调节激酶1/2,5蛋白激酶的激活,从而抑制细胞外信号调节激酶1/2,5信号转导通路的活化,这可能是其阻抑类风湿性关节炎滑膜异常增殖、关节骨质侵蚀的重要机制之一.     

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤的干预效应

目的:观察胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤干预的影响。方法:实验于2005-05/2005-07在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成。选用51只健康SD大鼠,以随机数字表法选出36只造模,采用皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎)模型,另15只作为正常对照组,注射等量生理盐水。成模大鼠30只以随机数字表法分为模型组和痹肿消汤组,各15只。痹肿消汤组于初次免疫7d后开始灌服痹肿消汤(痹肿消汤由白花蛇舌草、肿节风、苡米、络石藤、丹参、骨碎补等15味中药组成,体表面积比换算关系,大鼠用药为70kg成人临床用药3倍,药材从中南大学湘雅医院中药房一次性选购,两次水煎取药液备用),相当于生药62.1g/(kg·d),每只约1.5mL,2次/d灌服;模型组与正常组同体积生理盐水。观察大鼠一般情况,并定期对其进行关节炎指数评分。按0～4级进行评分,0分:无关节炎;1分:有红色斑点后轻度肿胀;2分:关节部位中度肿胀;3分:关节严重肿胀;4分:关节严重肿胀且不能负重。采用免疫印迹法(Westernblot)检测正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠在不同时间点滑膜组织醛缩酶A的表达,运用ImageTool3.0灰度扫描软件对结果进行半定量分析。结果:纳入实验的51只大鼠,造模不成功被淘汰6只,最终痹肿消汤组15只、模型组15只、对照组15只,共45只大鼠进入结果分析。①各组大鼠关节炎指数比较:模型组大鼠关节炎指数于免疫后25d左右达到高峰,30d后呈下降趋势;痹肿消汤组大鼠亦于25d左右达高峰,但较模型组低。②各组大鼠滑膜组织醛缩酶A的表达:模型组醛缩酶A表达在25,35,45d递增(P<0.05～0.01),且明显高于同时间正常组及痹肿消汤组(P<0.05～0.01);痹肿消汤组醛缩酶A表达在各时间点明显低于同时间模型组及正常组(P<0.05,P<0.005,P<0.001),在25,35d和45d表达水平呈递减趋势(P<0.05,0.01)。结论:类风湿关节炎关节病变过程中醛缩酶A表达增加,且随免疫时间延长而逐渐上调。痹肿消汤能下调关节炎大鼠滑膜醛缩酶A表达,这可能是其阻抑类风湿关节炎骨质侵蚀的重要机制之一。     

痹肿消汤对关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子表达水平及关节症状的影响

目的:观察痹肿消汤对实验性关节炎大鼠滑膜组织血管内皮生长因子(vscularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达水平的影响,探讨痹肿消汤治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:75只SD大鼠按随机数字表法分为4组(正常对照组,模型对照组,甲氨蝶呤治疗组,痹肿消汤治疗组),皮下注射Ⅱ胶原诱导实验性关节炎模型,用免疫组化法检测各组不同时间点大鼠滑膜组织VEGF的表达,同时采用关节指数积分法评价其关节炎症状。结果:免疫大鼠88.57%出现关节炎症状;模型组的关节炎指数逐渐增加,而痹肿消汤组和甲氨蝶呤组关节炎指数则在35d后逐渐下降。正常组滑膜组织未见明显VEGF表达,模型组VEGF表达犤(30.6±6.2)%于25d起就明显高于痹肿消汤组犤(16.2±4.4)%犦(P<0.001)和甲氨蝶呤组犤(24.4±3.6)%犦(P<0.001);随着时间的延长,模型组VEG表达逐渐升高,痹肿消汤组与甲氨蝶呤组的VEGF表达逐渐降低,于45d模型组更明显高于痹肿消汤组(P<0.001)和甲氨蝶呤组(P0.001),且痹肿消汤组又低于甲氨蝶呤组(P<0.001)。结论:VEGF参与了RA疾病滑膜炎的形成和发展过程;其VEGF表达的高低与关节炎症状的轻重有关。痹肿消汤可能通过阻断VEGF的表达来阻抑关节炎滑膜血管翳的形成或骨质侵袭。     

大鼠胶原诱导性关节炎模型的制备及评价

目的：制备型胶原诱导性关节炎大鼠模型（CIA模型）。方法：将40只大鼠随机分为正常组和模型组。以酶联免疫吸附测定法（ELISA法）检测模型组和正常组大鼠血清中炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,同时采用组织病理学和X线摄片的方法显示关节炎大鼠的发病程度和病理学特征。结果：与正常组相比,模型组在免疫后第36天关节肿胀达到最高峰。ELISA法检测结果显示模型组TNF-α的水平均较正常组大鼠明显增高（P〈0.05）。组织病理学和X射线摄片结果显示,关节软骨组织、骨组织和滑膜组织呈典型的关节炎病变。结论：胶原诱导的大鼠关节炎模型,其病理特征和人类类风湿关节炎（RA）极为相似,为进一步深入研究人类RA的发病机制及其临床治疗提供了有价值的实验材料。     

自拟通痹汤对Ⅱ型胶原性关节炎关节软骨的作用

背景：自拟通痹汤是喻建平教授临床观察多年的临床经验方,适用于类风湿关节炎湿热痹阻证。目的：验证自拟通痹汤对Ⅱ型胶原性关节炎大鼠的足肿胀的抑制作用,以及对自身抗体IgG、T细胞亚群、细胞因子白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的调节作用及对踝关节局部病理损伤的治疗作用。方法：Wistar大鼠分为6组。除正常组外,以Ⅱ型胶原建立大鼠Ⅱ型胶原性关节炎动物模型。模型组：给予给药大剂量组等体积的蒸馏水;对照组：给予泼尼松5.0mg/kg;自拟通痹汤大、中、小剂量组,剂量分别为11.6,5.8和2.9g/kg。正常对照组大鼠右后足趾皮下注射生理盐水0.1mL。1周后以相同剂量于每只大鼠尾部加强注射1次。造模2周后开始给药,均为灌胃给药,1次/d,连续2周。结果与结论：结果表明,自拟通痹汤对Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎关节肿胀有明显的抑制作用;对大鼠血清IgG水平升高有明显的抑制作用;对大鼠胸腺CD4＋和CD8＋T淋巴细胞的异常有明显的免疫调节作用;对大鼠血清肿瘤坏死因子α有明显的抑制作用。自拟通痹汤各剂量组大鼠滑膜水肿、炎性细胞浸润、滑膜增生、血管翳生成、软骨破坏等病理损害均得到改善。     

丙酮酸乙酯对大鼠自身免疫性关节炎的治疗作用

目的观察丙酮酸乙酯对自身免疫性关节炎（CIA）大鼠关节炎症、骨质破坏及血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素10（IL-10）表达水平的影响,探讨其治疗类风湿关节炎的可能机制.方法实验大鼠分为正常对照组、CIA模型组和丙酮酸乙酯（EP）治疗组.用关节炎指数评价关节炎肿胀程度、HE染色、检测关节滑膜炎症及骨质破坏、酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清TNF-α、IL-10浓度.结果 EP治疗组关节炎指数明显低于CIA模型组（P〈0.05）,EP治疗组炎性细胞渗出及骨质破坏明显低于CIA模型组（P〈0.05）,EP治疗组血清TNF-α水平较CIA模型组明显降低而IL-10水平明显升高（P〈0.05）.结论丙酮酸乙酯能减轻大鼠关节炎症、骨质破坏,能降低血清TNF-α表达水平、提高IL-10表达水平,表明丙酮酸乙酯有望成为治疗类风湿关节炎（RA）的一种新药.     

雷公藤多苷对胶原诱导性关节炎大鼠VEGF基因表达的影响

目的研究雷公藤多苷对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响,探讨其在治疗类风湿关节炎中的抗血管生成机制。方法建立大鼠CIA模型,造模成功后灌胃给药,动物分为正常组、模型对照组、沙利度胺组(作为阳性对照)、雷公藤多苷组,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠不同组织(肺、心、肝、肾、滑膜)中VEGF的表达,观察雷公藤多苷对VEGF基因表达的影响。结果雷公藤多苷组、沙利度胺组大鼠各组织中VEGF mRNA均低于模型对照组(P<0.05),与沙利度胺组比较无明显差异(P>0.05)。结论雷公藤多苷对CIA大鼠VEGF的表达有抑制作用。     

异种脐血干细胞移植胶原性关节炎小鼠Bcl-2和Bax的表达（英文）

背景：类风湿性关节炎的发生发展与滑膜细胞及淋巴细胞的增殖与凋亡不平衡密切相关,其滑膜细胞存在细胞凋亡过程的异常。目的：观察异种、异基因双份脐血干细胞移植对Ⅱ型胶原性关节炎小鼠Bcl-2和Bax表达的影响。方法：弗氏完全佐剂＋Ⅱ型胶原诱导C57BL/6（H-2b）小鼠,建立Ⅱ型胶原性关节炎小鼠模型。小鼠二次免疫接种后第2天,模型组、正常对照组尾静脉注射生理盐水,细胞移植组将脐血造血干细胞注入小鼠尾静脉内（其中单份剂量2×106/50g;双份剂量：每份1×106/50g,共2×106/50g）。甲氨喋呤阳性对照组小鼠灌胃甲氨蝶呤,每次0.0175g/kg,每5天1次,共6次。结果与结论：移植后第42天全部处死动物取膝及肘以下关节组织,病理组织学显示正常对照组关节面光滑,滑膜层未见炎性细胞浸润,软骨细胞形态正常;模型组滑膜组织高度增生,大量的炎性细胞浸润,软骨面破坏;甲氨蝶呤阳性对照组、单份脐血造血干细胞移植组滑膜组织可见轻度增生,少量炎性细胞浸润,双份脐血造血干细胞移植组关节软骨表面光滑,未见破坏,有极少量炎性细胞浸润。免疫组织化学检测显示,双份脐血造血干细胞移植组Bax、Bcl-2的表达低于单份脐血造血干细胞移植治疗组（P〈0.05）;与正常对照组比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。结果说明双份脐血干细胞在一定数量及作用时间内可诱导Ⅱ型胶原性关节炎小鼠滑膜细胞凋亡,对滑膜组织损伤起保护作用。     

低浓度硫化氢对类风湿性关节病变的软骨保护

背景：类风湿性关节炎是一种常见的慢性系统性自身免疫疾病,以关节滑膜病变、骨质侵蚀为主要特征,临床上的治疗仍然比较棘手。目的：探讨外源性硫化氢对类风湿性关节炎大鼠关节病变的影响。方法：将SD大鼠分为4组：空白组、模型组、高浓度硫化氢干预组、低浓度硫化氢干预组。干预2,4周时,测量关节炎指数,血清炎症因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β水平,滑膜组织病理学变化,膝关节标本Ⅱ型胶原染色的平均吸光度值。结果与结论：从关节炎指数,血清炎症因子水平以及滑膜染色炎性浸润方面看,模型组以及硫化氢干预组均高于空白组,高浓度硫化氢干预组明显高于模型组（P＜0.05）,低浓度硫化氢干预组低于模型组（P ＜0.05）。在膝关节软骨Ⅱ型胶原染色的平均吸光度值方面,模型组以及2个硫化氢干预组均低于空白组,高浓度硫化氢干预组明显低于模型组（P＜0.05）,低浓度硫化氢干预组高于模型组（P ＜0.05）。结果可见硫化氢对类风湿关节炎症有调节作用,高浓度的硫化氢加重关节炎症及软骨降解,低浓度的硫化氢减轻关节炎症并对软骨有保护作用。     

脐带间充质干细胞对CIA大鼠炎症因子的干预

背景：脐带间充质干细胞可表达多种胚胎干细胞的特有分子标志,具有分化潜力大、增殖能力强、免疫原性低等特征。目的：观察脐带间充质干细胞对类风湿性关节炎免疫炎性的病理过程的干预作用。方法：实验分为3组,建立Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎模型大鼠,脐带间充质干细胞组于造模后第4周经大鼠尾静脉注射脐带间充质干细胞,模型组注射生理盐水。结果与结论：治疗后第7天及第35天模型组大鼠血清白细胞介素1、白细胞介素6、白细胞介素18、肿瘤坏死因子α、血管细胞黏附分子1和中性粒细胞表面CD11b的表达水平均高于正常组（P〈0.05）。脐带间充质干细胞治疗后各因子水平显著低于模型组（P〈0.05）,治疗后第35天显著低于第7天（P〈0.05）。表明脐带间充质干细胞能明显抑制CIA大鼠的炎症因子释放和抑制内皮细胞的异常活化,有利于缓解类风湿性关节炎的免疫炎性关节症状。