左卡尼汀强化St.Thomas No.2液对低温离体心脏的保存效果

背景:在心脏瓣膜置换中应用添加左卡尼汀的心脏停搏液可明显减轻心肌线粒体的脂质过氧化反应,保护心肌细胞.目的:观察加入左卡尼汀的St.Thomas No.2液对大鼠离体心脏低温保存的效果.方法:利用Langendorff 灌注装置建立SD大鼠离体心脏灌注和工作模型,随机分成4组,其中2组采用 St.Thomas No.2 液作为心脏停搏液与保存液分别保存心脏4 h、6 h,另2组采用添加左卡尼汀的St.Thomas No.2液作为心脏停搏液与保存液分别保存心脏4 h、6 h.结果与结论:与St.Thomas No.2 液保存4 h组比较,添加左卡尼汀的St.Thomas No.2液保存 4 h组心脏心率、冠状动脉流量、左心室收缩峰压和左心室内最大上升速率及心肌含水量、ATP含量差别无显著性意义(P > 0.05),但心肌酶漏出量明显减少(P < 0.05);添加左卡尼汀的St.Thomas No.2液保存 6 h组上述指标检测结果均优于St.Thomas No.2保存6 h组 (P < 0.05).提示左卡尼汀强化的St.Thomas No.2液可显著提高大鼠离体心脏的低温保存效果.     

X-J心脏保存液对离体心脏不同保存时限ATP及超微结构的影响

目的 :探讨XIJING (X J)超极化保存液对离体兔心低温下不同保存时间再灌注 3 0min后心肌细胞ATP含量及心肌超微结构的影响。方法 :健康大白兔 3 2只 ,随机分成 4组 ,每组 8只 ,Ⅰ组 :低温保存 4h ;Ⅱ组 :低温保存 6h ;Ⅲ组 :低温保存 8h ;Ⅳ组 :低温保存 10h。每组供心均用X J超极化心肌保存液进行低温保存。测定再灌注 3 0min心肌细胞ATP含量及心室肌超微结构 ,比较不同保存时间再灌注后心肌细胞ATP及心肌超微结构的变化。结果 :随着低温保存时间的延长再灌注 3 0min后心肌细胞内ATP的含量无明显的差异 (P >0 0 5 )。从电镜观察来看 ,兔心保存 4～ 6h时心肌纤维排列尚整齐 ,线粒体轻度肿胀 ;在保存 8h后心肌纤维排列紊乱 ,线粒体嵴肿胀 ,个别线粒体出现空泡化 ;10h时心肌组织出现部分心肌细胞坏死 ,细胞器散在于细胞间。结论 :X J超极化心脏保存液在低温保存供心 4～ 6h心肌超微结构变化不明显 ,心脏保存 10h后心肌超微结构改变较 8h明显。     

离体心脏保存液的现状及研究进展

1967年12月3日Bannard在开普敦完成了全世界第1例同种异体原位心脏移植手术，揭开了人类心脏移植的序幕。20世纪80年代以来，随着新型免疫抑制药物的出现，心脏移植术后长期生存率明显提高，心脏移植作为终末期心脏病的治疗方法被广泛接受，从而在许多国家获得迅速发展。令人关注的是，良好的离体心脏保存不仅能够减少术后并发症的发生，还能够延长心脏保存时间，从而能够从较远的地方获得供心。目前，临床上安全的离体     

HP100XD心脏保存液低温保存猪离体冠状动脉血管平滑肌功能的效果评价

目的 评价低温心脏保存液HP100XD对猪离体冠状动脉血管平滑肌功能的保存效果。方法 瑞典家猪10只,全身麻醉及全身肝素化后取出心脏,经冠状动脉开口滴注氧和Krebs溶液去除冠状动脉内血液,于手术显微镜下游离前降支远端血管,并切成1mm长的血管环。随机将血管环分为新鲜对照组、24h保存组和48h保存组,新鲜对照组将血管环直接置入器官浴槽内,24h保存组和48h保存组将血管环置入4℃HP100XD溶液中分别保存24、48h。3组采用高钾Krebs溶液和血栓烷A2相似物（U-46619）检测平滑肌的收缩功能,采用罂粟碱诱导血管环的非内皮依赖性舒张反应评价平滑肌的舒张功能。结果 新鲜对照组由高钾Krebs溶液和U-46619诱导的收缩反应值分别为（22.3±3.3）、（16.4±3.6）mN,24h保存组分别为（21.8±3.4）、（16.3±2.3）mN,48h保存组分别为（22.3±3.3）、（17.3±2.2）mN,3组比较差异均无统计学意义（P〉0.05）;3组血管平滑肌的最大舒张百分数均为100%。结论 HP100XD溶液可完整保存离体冠状动脉血管平滑肌功能达48h,是一种较好的心脏保存液。     

自制心脏保存液保存离体兔心的研究

目的：初步探讨自制心脏保存液对离体兔心的保存效果。方法：取18只新西兰白兔，随机成分3组，建立非循环式Langendorff灌注模型，分别用晶体停搏液、uⅣ液和我院自制的心脏保存液在低温下保存4h；复灌后检测左心室压力、心肌酶学指标及心肌含水量。结果：自制心脏保存液组左心室压力、心肌酶学指标及心肌含水量与晶体停搏液组有显著差异，与UW液组无显著差异。结论：实验证实我院自制的心脏保存液与uⅣ液心肌保护效果相近，其配方设计基本可行。     

心脏保存液的现状与人工血液代用品在心脏保存中的应用

20世纪80年代以来,器官保存的研究从基础理论及动物实验到临床应用虽然取得了重大进展,对器官保存中细胞及器官损伤的基本机制也有了更深入的了解,但是各种器官的有效保存时间仍然不够理想,限制了临床外科手术以及各种移植工作的发展.     

STH-2液pH值对低温保存离体兔心功能恢复的影响

目的:探讨STH-2液pH值对低温保存离体兔心功能恢复的影响。方法:96只成年新西兰兔随机分为8组,每组12只。所有兔心在不同pH值STH-2液中4℃保存4h。STH-2液pH值分别为6.4、6.8、7.0、7.2、7.4、7.8、7.9和8.4,其中标准STH-2液4℃时pH值为7.9,设为对照组。应用Langendorff灌注模式,观测保存前后离体兔心功能恢复,自动生化仪检测冠脉流出液中肌酸激酶(CK)含量,高效液相色谱法检测保存末心肌组织中高能磷酸化合物水平。结果:各组心功能恢复、冠脉流出液中CK含量和保存末心肌组织中总腺苷酸(TAN)、能荷比(ECR)差异存在显著性。pH7.0、pH7.2组心功能恢复最佳,pH7.2组冠脉流出液中CK含量最低,pH7.2组心肌组织中TAN、ECR最高。结论:标准STH-2液对低温离体兔心的保存效果并非最佳,适度偏酸的STH-2液能够改善低温离体兔心的保存效果。     

左卡尼汀对改善维持性血液透析老年患者心功能的效果分析

探讨左卡尼汀对改善维持性血液透析老年患者心功能的临床疗效。选取2013年10月~2015年10月于我院进行维持性血液透析的老年患者80例作为研究对象,按照随机数字分配原则将其平均分为对照组和观察组。两组患者血液透析基本治疗一致,其中观察组患者于每次透析结束回血前3min从血路管静脉端注入左卡尼汀1g,每周进行三次,三个月为一个疗程,对照组患者采用同样方式给予等量生理盐水。观察比较两组患者治疗前后的心脏指数,左心功能指数,每分钟心搏出量、每搏心输出量等指标。两组患者组内比较,观察组患者治疗后心功能改善情况明显优于治疗前(P0.05);两组患者组间比较,观察组患者治疗后心功能明显优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。在维持性血液透析老年患者中应用左卡尼汀可以有效的保护患者心肌,显著的改善患者的心功能。     

托马斯液联合应用康斯特保护液对离体大鼠缺血-再灌注损伤心肌酶学的影响

目的观察托马斯(STH)液复合应用康斯特(HTK)保护液对大鼠离体缺血再灌注损伤心肌酶学的影响。方法健康清洁级雌性Wistar大鼠40只,体重230～280g,制备离体Langendorff心脏灌注模型后,采用随机数字表法,将离体心脏随机分为5组(n=8):S组、H组、S+H10组、S+H20组、S+H30组。各组均先用K-H液平衡灌注30min后,S组、H组分别用STH液15ml/kg或HTK液30ml/kg单次灌注;另外三组先用15ml/kg STH液灌注后续灌HTK液分别为10ml/kg、20ml/kg、30ml/kg。每组心脏停搏120min后,再灌注K-H液30min。取停搏前、再灌注15、30min时冠脉流出液,用于测定心肌乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量。再灌注末取心肌组织,测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果与S、H、S+H10比较,S+H20及S+H30组冠脉流出液LDH、CK活性,心肌组织MDA含量降低,心肌组织SOD活性升高(P0.05);S+H20与S+H30组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 STH液联合应用HTK液可明显减轻缺血再灌注损伤,且与剂量有关。     

猪不停跳心脏离体模型的建立

背景:保持供心离体跳动,可以减少供心的缺血时间,延长供心的离体保存时间.目的:建立稳定简便的猪不停跳心脏离体模型.方法:12只健康家猪随机等分为不停跳组和冷晶体灌注组.不停跳组经升主动脉建立冠状动脉灌注,经右心房进右心室建立静脉引流,经左心耳放置软管入左心室引流,建立猪的不停跳心脏离体模型.冷晶体灌注组按常规心脏移植实行心脏离体保护.结果与结论:不停跳组共施行6例猪心脏离体手术,术后2,4 h离体心脏不停跳成功率为100%(6/6),6 h离体心脏不停跳成功率为83%(5/6).与对照组相比,不停跳组丙二醛水平降低,超氧化物歧化酶活性升高(P < 0.05),心肌超微结构保持良好.说明猪的不停跳心脏离体模型成功率高,是研究离体不停跳心脏仪器的稳定可靠动物模型.     

不同器官保存液对停搏供心的保护

背景：有研究已经证实应用人停搏供心进行心脏移植可以取得与非停搏供心移植相同的效果，但如何对停搏供心进行处理使之达到或接近非停搏供心移植的效果是一个新的课题。 目的：采用新西兰大白兔离体停搏供心模型，探讨3种不同的器官保存液Celsior液、Pioacidile液和UW液对停搏供心的保护效果。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005—03／2006—04在中南大学湘雅二医院胸心外科实验室心功能室完成。材料：选用新西兰大白兔24只，随机分成3组：UW液灌注组、Celsior液灌注组、Pinacidil液灌注组。 方法：制作免离体停搏供心的模型，当心热缺血10min后，分别应用4℃的UW液、Celsior液、Pinacidil液经主动脉根部冠状动脉开口灌注后4℃保存。4h后取出免心固定在Langendorff灌流装置上复灌。 主要观察指标：复灌后30，60，90，120min兔心脏血流动力学、2h内平均冠状动脉流量、心肌含水量及丙二醛含量。 结果：复灌后120min Pinacidil灌注组左室发展压、左室内压最大上升速率、左室内压最大下降速率均优于其余两组（P〈0．05）。UW液灌注组复灌后120min心率高于另两组（P〈0．05）。Pinacidile液灌注组和Celsior液灌注组心肌中含水量少于UW液灌注组，UW液灌注组心肌丙二醛含量高于Celsior液和Pinacidile液灌注组。复灌后120min内Pinacidile液灌注组心肌平均冠状动脉流量大于Celsior液和UW液灌注组。 结论：Pinacidil液对停搏供心的保护优于UW液和Celsior液，表现为左室心功能及冠状动脉流量恢复得更好。     

左卡尼汀对心肺复苏后大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的 通过观察左卡尼汀对复苏后大鼠血清、肾组织中细胞因子的影响,探讨左卡尼汀对复苏后肾脏保护作用的机制.方法 建立心肺复苏大鼠模型,30只Wistar大鼠随机分为手术对照组(S组)、常规复苏组(C组)和左卡尼汀组(L组),每组10只,S组只行手术操作,不致颤;C组造成心搏骤停并行常规复苏;L组在心搏骤停并复苏成功后静脉注射左卡尼汀.动态观察,血清中TNF-α、IL-1β、iNOS、SU、Scr及肾组织中TNF-α、IL-1β、iNOS的变化.结果 与S组比较,C组和L组复苏成功后血清TNF-α、IL-1β、iNOS、SU、Scr及肾组织TNF-α、IL-1β、iNOS有不同程度升高(P＜0.01).L组与同时相C组比较,血清TNF-α、IL-1β、iNOS、SU、Scr及肾组织TNF-α、IL-1β、iN-OS升高程度减轻(P＜0.05).结论 左卡尼汀能减轻炎性细胞因子介导的肾脏损伤,对复苏后肾脏有保护作用.     

左卡尼汀对糖尿病合并心力衰竭老年患者的临床疗效观察

目的观察左卡尼汀对糖尿病合并心力衰竭老年患者的临床疗效。方法选取糖尿病合并心力衰竭老年患者48例,随机分为两组。对照组采取常规抗心力衰竭治疗14 d,治疗组在此基础上静脉滴注左卡尼汀3.0 g,每日1次,共14 d。治疗前及治疗后分别检查两组患者的6 min步行试验、心脏超声心动图及血浆钠尿肽(BNP)、血糖、血脂、胰岛素水平。结果治疗后,两组患者的心功能指标6 min步行试验、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(FS)和舒张功能指标E峰与A峰的比值(E/A)均较治疗前显著改善(P0.05)。且治疗组6 min步行试验、LVEF、E/A改善程度较对照组更为明显(P0.05)。对照组治疗后BNP、空腹血糖(FBG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)较治疗前有改善(P0.05),治疗组治疗后BNP、FBG、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、HOMA-IR较治疗前有显著改善(P0.05),且治疗组BNP、FBG、TC及HOMA-IR改善程度较对照组更为显著,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组治疗后临床疗效总有效率明显高于对照组(P0.05)。结论左卡尼汀可明显纠正糖尿病合并心力衰竭老年患者的心肌能量代谢障碍,调节心肌的舒张及收缩功能,改善胰岛素抵抗,从而改善患者的临床症状和预后,延缓心力衰竭的进展。     

Protective effects of B2 preservation solution in comparison to a standard solution (histidine-tryptophan-ketoglutarate/Bretschneider) in a model of isolated autologous hemoperfused porcine kidney

Reperfusion injuries after organ transplantation affect graft function and influence long-term graft survival. As hypothermic storage, which minimizes the extent of unspecific tissue injury after ischemia and reperfusion, is significantly influenced by the composition of preservation solutions, strategies to optimize the different components may lead to longer graft survival. In the present study the effects of the preservation solution B2 on early renal function and histopathological changes were compared to histidine-tryptophan-ketoglutarate solution (HTK, Bretschneider) in a model of isolated blood-perfused porcine kidneys. B2-preserved kidneys displayed a lower renal resistance and significantly better creatinine clearance as compared to HTK. Mean differences were also found for filtration fraction and sodium fraction reabsorption. The functional data were also related to histopathological changes. Together, these data indicate that the recently developed preservation solution B2 offers new principles of preservation and is a useful preservation solution for experimental isolated perfused kidney models. B2 may also be an interesting model for optimizing preservation within other organ perfusion models.     

Dynamic effects of acid on Barrett's esophagus. An ex vivo proliferation and differentiation model.

Barrett's esophagus (BE), or specialized intestinal metaplasia, is a premalignant heterogeneous epithelium associated with reflux and an increased risk for adenocarcinoma. Since acid is a major component of refluxate, we investigated its effects ex vivo on cell differentiation as determined by villin expression; and on cell proliferation, as determined by tritiated thymidine incorporation and proliferating cell nuclear antigen expression. To mimic known physiological conditions, endoscopic biopsies of normal esophagus, BE, and duodenum were exposed, in organ culture, to acidified media (pH 3-5) either continuously, or as a 1-h pulse and compared with exposure to pH 7.4 for up to 24 h. Before culture, villin expression was noted in 25% of BE samples, and increased after 6 or 24 h of continuous acid to 50% or 83% of BE samples, respectively. Increased villin expression correlated with ultrastructural maturation of the brush border. In contrast, an acid-pulse followed by culture at pH 7.4, did not alter villin expression in BE. Moreover, continuous acid exposure blocked cell proliferation in BE, whereas, an acid-pulse enhanced cell proliferation, as compared to pH 7.4. Based on our ex vivo findings, we propose a model in which the diverse patterns of acid exposure in vivo may contribute to the observed heterogeneity and unpredictable progression to neoplasia of BE.     

Noninvasive imaging of ex vivo intracoronarily delivered nonviral therapeutic transgene expression in heart.

We developed a clinically applicable approach for noninvasive monitoring of reporter-therapeutic linked gene expression in the whole heart of large animals using PET imaging and further validated the efficacy and cardiac adverse effects of reporter-therapeutic linked gene transfer in a rabbit cervical heterotopic functional heart transplant model. Cationic liposome complexed with a vector containing a herpes simplex virus type 1 mutant thymidine kinase (HSV1-sr39tk) as the reporter gene and a recombinant human immunosuppressive cytokine, interleukin-10 (hIL-10), as the therapeutic gene was ex vivo intracoronarily delivered into cardiac allografts before implantation. Long-term HSV1-sr39tk and hIL-10 transgene and protein overexpression associated with myocardial PET reporter probe 9-(4-[18F]fluoro-3-hydroxymethylbutyl)guanine ([18F]FHBG) accumulation was observed in the allografts. The expression of the HSV1-sr39tk gene was significantly correlated with the hIL-10 gene expression and the total myocardial [18F]FHBG accumulation quantified as a percentage of intravenously injected [18F]FHBG dose. A homogeneous distribution of [18F]FHBG accumulation was seen in the whole heart similar to the distribution of [18F]fluorodeoxyglucose, a PET glucose metabolism probe. The immunosuppressive therapeutic efficacy remained the same in allografts treated with reporter-therapeutic linked gene and therapeutic gene only. No cardiac adverse effect was found. Our results demonstrate for the first time that PET reporter-therapeutic linked gene imaging is applicable for noninvasively monitoring ex vivo intracoronarily delivered therapeutic transgene expression in the whole heart.     

离体灌注模型氢气预处理对心脏死亡器官捐献移植供体肺组织的保护作用

目的 探讨离体灌注模型氢气预处理对心脏死亡器官捐献(DCD)移植供体肺组织的保护作用.方法 选用新西兰大耳白兔18只,构建离体肺灌注(EVLP)模型,采用空气或含2％氢气的空气进行通气,并对动脉和气道压力连续监测;每小时取灌注液以检查氧合情况.EVLP模型建立后,将肺移植物正位移植到同龄大耳白兔体内,并检查肺功能.结果 EVLP灌注4h时,2组氧合指数[pa(O2)/FiO2]、肺血管阻力(PVR)和动态肺顺应性比较,差异有统计学意义(P＜0.05).EVLP期间,氢气组肺移植物白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的mRNA表达水平高于假手术组,但低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).2组EVLP灌注4h时葡萄糖消耗量较1、2、3h时降低,差异有统计学意义(P＜0.05);EVLP灌注4h时,对照组乳酸水平较1、2、3h时升高,差异有统计学意义(P＜0.05);氢气组1、2、3、4h时乳酸水平低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).EVLP 4 h后,对照组、氢气组肺组织中线粒体复合物Ⅰ酶活性较假手术组降低,线粒体复合物Ⅱ、Ⅳ活性、ATP水平较对照组、假手术组均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).EVLP期间,氢气组血红素氧合酶(HO)-1、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子(PGC)-1和核呼吸因子-1(NRF-1)的mRNA表达水平均高于对照组、假手术组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EVLP肺移植表现出显著的促炎变化和代谢谱受损.氢气预处理肺移植物可明显减轻促炎反应,促进肺移植整个过程中肺内线粒体的生物合成,并对移植肺功能起到较好的保护作用.