结肠癌干细胞表面标志的研究和信号传导

背景:近年来研究表明,结肠癌干细胞参与肿瘤的复发和转移,为恶性肿瘤靶向治疗带来新的希望.目的:探讨结肠癌干细胞特异表面标志的分离和鉴定方法,以及与结肠癌干细胞研究紧密相关的信号通路.方法:以"结肠癌干细胞,肿瘤干细胞,细胞表面标志,信号传导"为中文关键词,以"colon cancer stem cell,cancer stem cell,cell surface sign,signal transduction"为英文关键词,采用计算机检索Medline和CNKI数据库2000-01/2011-06有关结肠癌干细胞表面标志和信号传导的相关文章,排除重复研究或Meta分析类文章,筛选纳入40篇文献进行评价.结果与结论:CD133+与CD44+可作结肠癌干细胞的表面标志.与结肠癌干细胞紧密相关的信号通路有Wnt和Notch等,Wnt信号通路在干细胞内环境稳定中起重要作用,Notch信号通路是干细胞信号网络的重要通路.通过研究结肠癌干细胞的表面标志,可以及早地检测出肿瘤的存在;掌握结肠癌干细胞的生物学特性和信号转导路径,可减少肿瘤的复发,为结肠癌的诊断和治疗降低难度.     

以α6-integrin和c-kit为特异性表面标志分离筛选小鼠精原干细胞的可行性

背景:从目前文献报道来看,精原干细胞分离效率较高且较为公认的方法是通过隐睾模型结合表面标志进行多参数筛选.目的:探讨06-integrin和c-kil作为分离筛选精原干细胞特异性表面标志的可行性.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-05/12在武汉大学人民医院完成.材料:6周龄雄性昆明白小鼠40只,随机分为隐睾组、正常对照组,20只/组.方法:隐睾组小鼠建立隐睾模型,麻醉后腹部正中切口,将两侧睾丸拉入腹腔,将脂肪垫靠近附睾处各缝一针,分别固定在侧腹壁.正常对照组小鼠不进行任何干预.造模后两三个月,采用传统的两步消化法获取生精上皮单细胞悬液,加入FITC标记的抗α6-integrin抗体和PE标记的抗c-kit抗体,利用流式细胞仪进行α6-integrin+和c-kit双重筛选,锥虫蓝染色监测细胞活性.主要观察指标:隐睾的形态学变化,精原干细胞分选结果.结果:隐睾小鼠的生精小管内细胞排列紊乱,层次及管腔消失,小管中央可见分裂相细胞,细胞数明显减少.与正常对照组比较,隐睾组side scatter(low)、Forward scatter(hi)区的睾丸细胞增多,图形向左上移位.α6-integrin+和c-kit-细胞分布存在明显的相互偏离,即α6-integrin+细胞绝大多数不是精原干细胞,c-kit-细胞绝大多数也不是精原干细胞.从隐睾组筛选出具有sidescatter(low)、α6-integrin+、c-kit-特征的细胞数占睾丸细胞总数的2.8%,此即为精原干细胞,锥虫蓝监测结果显示细胞活性达95%以上.结论:采用α6-integrin和c-kit这两种表面标志进行精原干细胞的筛选,尽管可以提高细胞悬液中的精原干细胞纯度,但均缺乏特异性.     

信号传导的概况,进展及应用

编者按：近年来，“信号传导（ｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ）”已成为细胞生物学领域研究的重点，并有众多的抗体问世。将这一成果介绍给我国病理界同仁，已成为当务之急。中国医学科学院肿瘤研究所研究员徐教授在美国ＮＩＨ从事了８年细胞信号传导方面的研究，...     

多发性骨髓瘤干细胞 表面标记和信号传导通路的作用与意义

背景:多发性骨髓瘤中存在一小部分比例的骨髓瘤干细胞,具有干细胞特性,有自我更新、无限增殖及多向分化的能力,是多发性骨髓瘤形成、进展、复发和耐药的根源.目的:就多发性骨髓瘤干细胞生物学特性、免疫表型、分离与鉴定及针对该类细胞的信号传导通路和靶向治疗进行综述.方法:应用计算机检索Medline数据库(1999-01/2009-04),以mutiple myeloma stem cells,heterogeneity,phenotypic analysis,signaling pathways,target therapy为检索词;应用计算机检索CNKI数据库(1999-01/2009-04)、CBM数据库(1999-01/2009-04),以多发性骨髓瘤干细胞、异质性、干细胞分离与鉴定、信号传导、靶向治疗为检索词.结果与结论:共收集126篇关于多发性骨髓瘤干细胞相关的文献,中文30篇,英文96篇,排除发表较早、重复及类似研究,纳入30篇符合标准的文献.目前普遍认为多发性骨髓瘤干细胞可能源于正常干细胞的积累突变和通过基因突变重新获得自我更新能力的祖细胞或已经完全分化的成熟细胞.循环克隆记忆性B细胞具有自我更新和多向分化的潜能,代表了多发性骨髓瘤干细胞.多发性骨髓瘤干细胞特异标志物正处于研究阶段,目前主要采用SP细胞分选和醛脱氢酶活性检测分离骨髓瘤干细胞.多发性骨髓瘤干细胞通过hedgehog,wnt及notch等信号通路而具有自我更新的特性,当这些信号传导通路出现异常时,就导致了肿瘤的发生及肿瘤细胞的无控制性增长.针对肿瘤干细胞进行选择性靶向治疗是制定肿瘤治疗策略的一个新的重要方向,肿瘤干细胞特有的表面标记和信号传导通路可以作为杀伤肿瘤干细胞而控制肿瘤发展的靶点.     

大鼠骨髓间充质干细胞生长特性和表面标志与培养基中胎牛血清浓度的关系

目的：探讨两种浓度胎牛血清培养的不同传代次数的骨髓间充质干细胞在生长特性及表面标志方面的差异性。方法：实验于2004年在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心进行。取健康Wistar大鼠5只，采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓间充质干细胞，然后分别以体积分数为0．1和0．15的胎牛血清的L-DMEM培养基进行贴壁培养，观察原代和传代细胞的形态特征、生长曲线及表面标志CD45，CD11b，CD29和CD44的表达（骨髓间充质干细胞表达CD29和CD44，造血前体细胞表达CD45和CD11b）。结果：④两种浓度胎牛血清培养细胞均能获得贴壁梭形骨髓间充质干细胞，但体积分数为0．15的胎牛血清原代培养的细胞分裂增殖较快，集落融合较早，传代时间较短（平均10d）。（爹体积分数为0．1的胎牛血清传代培养第1，2代细胞均质性相对较差，CD45阳性率分别为23．4％，15,4％，CD11b阳性率分别为16．6％，10.3％，高于体积分数为0．15的胎牛血清培养组（P〈0．05），至第3代后两组已无差异，CD45和CD11b阳性率均小于5％，而CD29和CD44阳性率均大于95％。③两组的骨髓间充质干细胞生长曲线相似，但体积分数为0．15的胎牛血清培养的骨髓间充质干细胞对数生长期峰值出现较早，为第6天，而体积分数为0．1的胎牛血清培养组为第7天。结论：体积分数为0．1和0．15的胎牛血清培养的骨髓间充质干细胞在生长特性和表面标志方面存在差异。使用体积分数为0．1的胎牛血清已可满足骨髓间充质干细胞的分离纯化和培养扩增，但要在短期内获得较纯的骨髓间充质干细胞，使用体积分数为0．15胎牛血清优于体积分数为0．1胎牛血清。     

信号传导的概况,进展及应用（续）

信号传导通路３．１概述与分类研究信号传导离不开通路（ｐａｔｈｗａｙ）。基于研究目的不同，探讨科学问题不同，以及切入点不同，人们往往可以在不同的层次来分类和命名传导通路。３．１．１细胞的生命活动研究细胞不同生命活动（细胞增殖与凋亡，细胞粘附，免疫活化等...     

肿瘤干细胞的表面标志物及其在临床中的应用

随着传统治疗方法使肿瘤的耐药性、复发及转移率的增高,人们发现并开始研究肿瘤干细胞在其中的作用。肿瘤干细胞不仅保留了正常干细胞的性质,并且具有自身的特点,对其展开的研究,将为肿瘤的靶向治疗开辟新的途径。本文对肿瘤干细胞的定义、表面标志及其检测与分离方法进行了综述。     

食管鳞癌干细胞的研究进展

自Bonnet等[1]于1997年在急性粒细胞白血病患者分离获得白血病干细胞后,人们又相继在多种实体肿瘤(如乳腺癌、肝癌、结肠癌等)中发现了肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs), 肿瘤干细胞学说越来越受到肿瘤学界的密切关注和广泛支持.该学说的核心思想是提出了在肿瘤组织中存在少量干细胞样的肿瘤细胞亚群,该类细胞是肿瘤形成的起始细胞,具有自我更新、多向分化能力、高侵袭转移能力以及抗化疗、抗辐射等特点,与肿瘤发生、发展、转移以及复发等过程有着密切关系[1-2].     

质疑肿瘤干细胞学说

2003年科学家已从患者肿瘤组织里分离出所谓的乳腺癌肿瘤干细胞，其细胞表面分子CD44认为是肿瘤干细胞特异性分子，但CD44分子也是正常乳腺细胞的分子标志。CD44阳性细胞输入给免疫缺陷的小鼠后可形成乳腺肿瘤。科学家还发现与之紧密相关的细胞为CD22阳性，怀疑其是CD44阳性细胞产生的子代细胞。     

造血干细胞的表面标志和临床应用

目的:探讨造血干细胞的来源、细胞表面标志及其临床应用前景。资料来源:应用计算机检索Medline1989-01/2006-12和Embase1986-01/2006-12期间有关造血干细胞、干细胞移植的文献,检索词“hematopoietic stem cells,stem transplantation”,并限定文章语言种类为English。检索万方数据库1990-01/2006-04期间相关文献,限定文章语言种类为中文,检索词“造血干细胞,干细胞移植”。资料选择:对资料进行初审,选取实验包括造血干细胞来源、细胞表面标志及造血干细胞的移植相关文献,删除明显不随机临床实验研究。资料提炼:共检索32篇关于研究造血干细胞的来源、细胞表面标志及造血干细胞的移植的随机和未随机实验研究,27篇符合纳入标准。排除的5篇实验是重复的同一研究。资料综合:干细胞是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的原始细胞。造血干细胞是干细胞的一种。成年人血液造血干细胞主要存在于骨髓,约占骨髓细胞的0.05%。其主要功能是通过不断分化产生各系造血祖细胞,终生为造血系统提供新细胞来源。造血干细胞群体存在着不同发育阶段的细胞,但血液干/祖细胞与其后续阶段的血细胞相比缺乏直接的形态学特征,所以对造血干细胞表面抗原的表达规律的研究,将为造血干细胞的进一步研究打下重要的基础。造血干细胞的应用包括造血干细胞移植和作为基因治疗的靶细胞。结论:人体内可能存在CD34 和CD34-两种造血干细胞,造血干细胞可以促进造血功能的重建,并可作为基因治疗的靶细胞。     

Growth factor and signal transduction in lung cancer cell

Growth factors are molecules that participate in the control of cell proliferation. They require specific receptors on the target cell and intracellular signaling pathways to transmit the stimulus to the nucleus. Growth factors can stimulate or inhibit cell division. Most of the factors implicated in lung cancer growth are thought to act through positive feedback loops in which factors secreted by the cancer cells bind to receptors on their own surfaces(autocrine stimulation) or those of neighboring cells (paracrine stimulation). Abnormal expression of growth factors, their receptors, or components of their signaling pathways can result in the unrestrained growth of cancer. In this review, we described outlines of the growth factors, their receptors, signal transduction pathways, as well as their clinical applications.     

Colon cancer: Cancer stem cells markers,drug resistance and treatment

Malignant tumours consist of heterogeneous populations of tumour cells. Cancer stem cells (CSC) represent a population of cells within a tumour with highly tumorigenic and chemoresistant properties. These cells may be identified by the expression of CSC markers. There are several key stem cells markers specified for colon cancer: CD133, CD44, ALDH1, ALCAM. These days, a major obstacle to effective cancer management is development of a multidrug resistance (MDR). The principal mechanism responsible for development of MDR phenotype is the over-expression of ABC transporters. Tumours and relapsing tumours after therapy are drived by subpopulations of tumour cells with aggressive phenotype resistant to chemotherapeutics. These cells are called CSC or tumour-initiating cells (TIC). Here we outline recent information about MDR of colon cancer and CSC markers. We have focused on novel therapeutic strategies which have been developed to prevent or overcome MDR. One such strategy is a combination of chemotherapy and modulators of MDR pumps or chemotherapy and monoclonal antibodies against vascular endothelial growth factor VEGF. Colon cancer is characterized by the presence of colon CSC expressing specific stem cell markers. The divergent presence of these markers can help to adjust personalized therapy. The review provides a detailed overview of resistance of colon cancer cells and discusses how the presence of CSC markers can influence therapy and prognosis of patients.     

乳腺干细胞的信号传导通路与乳腺癌

乳腺干细胞是成体干细胞的一种,具有多种分化和自我更新能力,乳腺干细胞的研究为乳腺再造及乳腺癌防治提供了理论依据.在正常情况下,乳腺干细胞的分化、更新能力受到信号转导通路和激素的严格调控,一旦这种机制被破坏或调控异常,细胞就会异常分化,无限制的生长、繁殖,形成乳腺癌干细胞,并发生肿瘤.乳腺干细胞增殖分化的信号转导通路Wnt、 Wnt/β-catenin、 Notch、 Hedgehog是多种类型乳腺癌的发病基础.更好地理解乳腺干细胞的信号转导通路及调控机制,了解其自我更新的关键分子,对于设计更为有效的根除肿瘤起始细胞和乳腺癌干细胞的治疗方法至关重要.     

信号转导通路在神经干细胞分化及其修复脊髓损伤过程中的作用

近年来神经干细胞的研究给中枢神经系统损伤患者带来了新的希望，但神经干细胞的分化诱导仍然是医学界的一大难题。文章试对神经干细胞分化发育过程的基因信号转导通路Notch信号途径、螺旋-环-螺旋转录因子家族信号途径及Wnt信号途径等作以综合分析。探讨这些基因信号转导通路对神经干细胞分化的作用及其修复脊髓损伤的前景。神经干细胞的分化发育受多种途径的共同作用，基因水平的调控，局部微环境以及各种生长因子的作用都对其分化发育有重要影响；其对脊髓损伤的修复具有重要作用。     

干细胞中的骨形态发生蛋白信号转导机制

学术背景:骨形态发生蛋白属于TGF-β超家族的一类多功能分泌型信号分子,通过信号级联传导调节胚胎形态特征、组织器官的发育以及生殖细胞的分化;还能促进干细胞沿不同的方向分化与凋亡.骨形态发生蛋白在不同类型的干细胞中,其信号转导途径呈多样化;目前原因还不十分明确,但研究表明可能与受体或其细胞中多重信号的整合作用有关.目的:综述骨形态发生蛋白信号转导途径在几种类型干细胞中所发挥的作用及其转导机制.检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库 2007-04/07的相关文献,检索词"bone morphogenetic protein,the differentiation and proliferation of stem cell",并限定文章语言种类为English.共检索到45篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①文章所述内容应与骨形态发生蛋白信号转导途径相关.②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章.排除标准:①重复性研究.②Meta分析.文献评价:文献的来源主要是通过对骨形态发生蛋白信号转导途径方面内容进行汇总分析.所选用的31篇文献中,2篇为综述,其余均为临床或基础实验研究.资料综合:①骨形态发生蛋白信号属于激酶转导系统,可通过Smads或p38 MAPK通路传递信号,在转导过程中受多种细胞内外因素的调节.②骨形态发生蛋白信号强弱、时间以及下游信号通路均对早期胚胎干细胞的增殖和分化产生重要影响,可能与Wnts信号通路等多重级联交互作用有关.③骨形态发生蛋白信号可促进神经干细胞向神经元和神经胶质细胞分化,抑制胰脏祖细胞的分化.骨形态发生蛋白4通过抑制分化作用和阻止其前体细胞的增殖这两方面来调节毛细胞数量,还能促进眼胚胎细胞的增殖与凋亡.骨形态发生蛋白和Nodal信号能通过与膜受体竞争性结合调节中胚层祖细胞的发育、增殖与分化.结论:骨形态发生蛋白信号通路受细胞内外多种因素调控,能调控各种来源干细胞的分化与增殖,调节靶基因的转录.但其只是干细胞特性的调节因子,不是干细胞增殖与分化的标记物.目前,骨形态发生蛋白信号转导与整合作用的细胞学机制、信号转导作用的时间与空间位置等问题还有待进一步研究.     

血小板源性生长因子-DD通过Akt信号通路促进膀胱癌T24细胞增殖

目的研究外源性血小板源性生长因子-DD(PDGF-DD)对膀胱癌T24细胞增殖及Akt信号转导通路的影响,阐述factor其诱导细胞增殖的机制。方法外源性PDGF-DD蛋白作用T24细胞,采用MTT法分析细胞的增殖;流失细胞仪检测细胞周期的变化;Western blot法观测膀胱癌T24细胞Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR以及核因子NF-κB蛋白表达的变化。结果 PDGF-DD促进T24细胞的增殖,并且具有浓度依赖性;DNA合成前期(G0/G1期)细胞比例下降,合成期(S期)细胞比例上升;Akt、mTOR表达变化不明显,而p-Akt、p-mTOR及NF-κB p65的表达均上调。LY294002抑制PI3K/Akt及其下游靶位蛋白磷酸化;雷帕霉素和PDTC分别抑制p-mTOR和NF-κBp65的表达。结论外源性PDGF-DD刺激T24细胞的增殖,其机制可能是通过Akt/mTOR和Akt/NF-κB两条独立的信号通路实现的。