地塞米松联合脂多糖诱导股骨头坏死模型的构建

背景:对于研究股骨头坏死的发病机制及治疗方法,建立与股骨头坏死病程相似的动物模型是非常重要的。目的:观察地塞米松联合脂多糖诱导兔股骨头坏死的实验效果。方法:健康雄性新西兰大白兔30只,随机分为模型组(n=20)和对照组(n=10)。模型组经耳缘静脉注射2次10μg/kg的脂多糖,再肌肉注射3次地塞米松25mg/kg,对照组注射同等剂量的生理盐水。结果与结论:4周后,CT扫描显示模型组兔股骨头不同程度的骨密度不均匀。显微CT观察发现,模型组骨体积分数、骨矿物质密度、骨矿物质含量和骨小梁厚度均显著低于对照组,而骨小梁间隙高于对照组(P<0.05)。组织学切片见模型组骨细胞陷窝空疏,脂肪细胞增多,部分血管栓塞,其中存活动物的骨坏死率和骨陷窝空虚率均明显低于对照组。说明地塞米松联合脂多糖可有效建立骨坏死模型。     

激素性股骨头坏死模型：不同构建技术分析

背景：良好的股骨头坏死动物模型的建立,有助于研究股骨头坏死的发病机制,为股骨头坏死的预防和治疗提供理论依据。目的：研究内毒素脂多糖联合地塞米松注射液诱导兔股骨头坏死的实验效果。方法：新西兰大白兔36只随机分为模型组21只和对照组15只。模型组连续2d每日经耳缘静脉注射内毒素脂多糖10pg／kg,再连续3d,每日肌肉注射地塞米松注射液25mg／kg对照组注射同等剂量的生理盐水。结果与结论：模型组4周后×射线显示兔关节间隙增宽,密度增大,关节软骨下骨密度增高,股骨头变平,骨小梁模糊,软骨下骨与骨松质界限不清,在股骨头内出现斑块状高密度区域,股骨颈变短粗。双能量X射线骨密度测量仪进行股骨头局部骨密度测量,兔股骨头骨密度检测发现模型组股骨头骨密度、骨矿物质含量均显著低于对照组（P〈0．05）。组织学切片见模型组骨细胞陷窝空疏,脂肪细胞增多,部分血管栓塞,其中存活动物的骨坏死率和骨陷窝率均明显高于对照组。证实地塞米松联合脂多糖可有效建立激素性股骨头坏死模犁。     

马血清及不同结构皮质类固醇激素单独或联合应用对兔股骨头坏死产生的影响

目的：验证马血清及不同结构皮质类固醇激素单独或联合应用后对兔股骨头坏死所产生的影响。 方法：实验于2005-06／11在第四军医大学唐都医院骨科全军骨肿瘤研究所完成。①取健康新西兰雄性大白兔60只，随机分成6组，每组10只。单纯马血清组：间隔2周耳缘静脉注射码血清，每次10mg／kg。地塞米松组：臀肌注射地塞米松2．5mg／kg，2次／周；甲基氢化泼尼松组：臀肌注射甲基氢化泼尼松10mg／kg，2次／周。马血清加甲基强的松龙组：同马血清组注射马血清，第2次注射2周后，臀肌沣射甲基强的松龙10mg/kg，2次／周。马血清加地塞米松组：同马血清组注射马血清，第2次注射2周后，臀肌注射地塞米松2.5mg／kg，2次／周。正常对照组，臀肌注生理盐水，2次／周。②8，12，18周，取各组家兔权侧股骨头组织病理学检测。 结果：①各组家兔双侧股骨头组织病理学特征：单一处理的兔子中，骨坏死常伴有临近修复过程，复合处理的很少能观察到修复反应，股骨头坏死发生率明显。②组织学改变：用药12周可见大量守骨陷窝，髓内脂肪细胞增大，坏死骨小粱出现断裂，出现死骨片，髓内脂肪细胞增大并融合成片；18周时骨小梁纤细、断裂。间距增大。结构模糊，血管数量明显减少，骨的近端或远端含有骨坏死。③各组股骨头坏死率的比较：马血清组占30％（6／20）；地塞米松组占50％（10／20）；甲摹氢化泼尼松组占65％（13／20）；马血清加甲基强的松龙组占75％（15／20）；马血清加地塞水松组占70％（14／20）；正常对照组为0；马血清加甲基强的松龙组、马血清加地塞米松组两组与其他各组相比较差异有恩著性意义（P〈0．01）。 结论：马血清与甲基氢化泼尼松或与地塞米松合用时造成兔股骨头坏死率明显超过其他种类药物导致的骨坏死率。     

普伐他汀干预激素性股骨头坏死兔模型的组织学变化:大体和光镜下比较和印证

背景:研究表明普伐他汀可通过上调内源性骨形成蛋白2、核心结合因子α1和血管内皮生长因子等基因的表达从而产生促进激素性股骨头坏死兔模型坏死股骨头修复的作用.目的:验证性观察普伐他汀干预激素性股骨头坏死兔模型大体和光镜下的组织学改变,并进行相互比较和印证.方法:将80只新西兰白兔按随机数字表法分为对照组18只,实验组62只.向实验组耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素(10μg/kg)2次,注射间隔24h.并于第2次注射大肠杆菌内毒素后,臀肌注射甲强龙(20 mg/kg)3次,注射间隔24 h,制备兔激素性股骨头缺血坏死模型.造模第5周,将造模成功的39只新西兰白兔以随机数字表法分配其中的36只至模型组和他汀组,每组18只.他汀组以普伐他汀(1.2 mg/kg)灌胃,1次/d:模型组和对照组以等体积的蒸馏水灌胃.造模后8,12,16周,取股骨头,分别进行大体和光镜观察.结果与结论:大体观察及光镜观察显示模型组出现明显的骨坏死灶,骨髓腔内可见大量脂肪细胞增生;与模型组比较,他汀组骨细胞受损程度较轻,骨小梁密度较高,空骨陷窝比率较少,骨坏死面积和髓腔内脂肪细胞数量明显减少,骨坏死修复迹象明显.说明普伐他汀可有效促进早期激素性股骨头坏死兔模型坏死股骨头的修复.     

激素性兔股骨头坏死模型的建立

背景：激素的应用已经成为激素性股骨头缺血坏死发病的首要原因。目的：拟应用马血清与皮质醇激素联合制备兔股骨头缺血性坏死早期模型,探讨激素性股骨头坏死的发病机制。方法：新西兰大白兔随机分成3组。激素联合马血清组静脉注射马血清10mL/kg,3周后再次注射马血清6mL/kg,再2周后注射甲强龙45mg/kg,1次/d,连续5d。激素组注射甲强龙45mg/kg,1次/d,连续5d。正常对照组不做任何处理。于激素给予前及激素注射后1,3,7和14d检测定血胆固醇、三酰甘油水平;于激素注射后第2、4、8周行股骨头MRI和组织病理学检测。结果与结论：与对照组比较,激素联合马血清组和激素组大白兔血清三酰甘油和总胆固醇分别于激素注射后1d和3d明显高于对照组（P〈0.01）。MRI检测结果显示,激素联合马血清组大白兔股骨头于激素注射后第4周出现坏死信号;激素组第8周出现坏死信号。组织学检测结果显示,激素联合马血清组大白兔于激素注射第4周时股骨头出现骨小梁部分变细、断裂,空骨陷窝增加;第8周骨小梁稀疏、破碎,脂肪细胞增大,空骨陷窝明显增大。激素组病理坏死程度各时段均较激素联合马血清组轻。结果表明,激素联合马血清方法可成功制备股骨头坏死早期模型。     

大鼠激素性股骨头坏死模型的建立和评价

目的建立并评价大鼠激素性股骨头坏死模型。方法选择清洁级实验大鼠50只,按随机数表法将大鼠均分为实验组和对照组各25只。实验组采用注射脂多糖及大剂量甲基强的松建立大鼠激素性股骨头坏死模型,对照组同时间给予等量生理盐水注射,两组均观察6周后处死。比较两组大鼠活动情况指标,包括开场试验中活动平均速度、活动总距离及3 min内自主活动次数、最大抓力。分析两组大鼠生化指标变化,包括血清睾酮(T)、促甲状腺激素(TSH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)及血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)水平。观察两组组织病理学情况,包括骨小梁宽度、股骨头单位面积内骨小梁面积占比、每视野下骨空泡陷窝数量及单位面积骨小梁内胶原含量。结果实验组大鼠开场试验中活动平均速度、活动总距离及3 min内自主活动次数、最大抓力均低于对照组(P<0.05)。实验组大鼠T、TSH、ACTH、cAMP水平均低于对照组(P<0.05),cGMP水平高于对照组(P<0.05)。实验组大鼠骨小梁宽度、股骨头单位面积内骨小梁面积占比、骨小梁内胶原含量均低于对照组(P<0.05),空泡陷窝数量高于对照组(P<0.05)。结论采用脂多糖及大剂量甲基强的松可成功诱导大鼠激素性股骨头坏死模型。     

马血清及不同结构皮质类固醇激素单独或联合应用对兔股骨头坏死产生的影响

目的:验证马血清及不同结构皮质类固醇激素单独或联合应用后对兔股骨头坏死所产生的影响。方法:实验于2005-06/11在第四军医大学唐都医院骨科全军骨肿瘤研究所完成。①取健康新西兰雄性大白兔60只,随机分成6组,每组10只。单纯马血清组:间隔2周耳缘静脉注射马血清,每次10mg/kg。地塞米松组:臀肌注射地塞米松2.5mg/kg,2次/周;甲基氢化泼尼松组:臀肌注射甲基氢化泼尼松10mg/kg,2次/周。马血清加甲基强的松龙组:同马血清组注射马血清,第2次注射2周后,臀肌注射甲基强的松龙10mg/kg,2次/周。马血清加地塞米松组:同马血清组注射马血清,第2次注射2周后,臀肌注射地塞米松2.5mg/kg,2次/周。正常对照组,臀肌注生理盐水,2次/周。②8,12,18周,取各组家兔双侧股骨头组织病理学检测。结果:①各组家兔双侧股骨头组织病理学特征:单一处理的兔子中,骨坏死常伴有临近修复过程,复合处理的很少能观察到修复反应,股骨头坏死发生率明显。②组织学改变:用药12周可见大量空骨陷窝,髓内脂肪细胞增大,坏死骨小梁出现断裂,出现死骨片,髓内脂肪细胞增大并融合成片;18周时骨小梁纤细、断裂,间距增大,结构模糊,血管数量明显减少,骨的近端或远端含有骨坏死。③各组股骨头坏死率的比较:马血清组占30%(6/20);地塞米松组占50%(10/20);甲基氢化泼尼松组占65%(13/20);马血清加甲基强的松龙组占75%(15/20);马血清加地塞米松组占70%(14/20);正常对照组为0;马血清加甲基强的松龙组、马血清加地塞米松组两组与其他各组相比较差异有显著性意义(P<0.01)。结论:马血清与甲基氢化泼尼松或与地塞米松合用时造成兔股骨头坏死率明显超过其他种类药物导致的骨坏死率。     

富血小板血浆凝胶联合髓芯减压修复兔股骨头无菌性坏死

背景：近年来的研究表明,富血小板血浆有较强的成骨能力且在骨科及口腔科领域已得到广泛应用,而其在股骨头坏死方面的实验未见报道。 目的：观察富血小板血浆凝胶联合髓芯减压修复股骨头无菌性坏死模型兔的效果。 方法：取新西兰大白兔25只,在不造成髋关节脱位的基础上,用液氮冷冻兔双侧股骨头建立无菌性坏死模型,造模后2周,随机分组：模型组9只不做任何治疗,髓芯减压组8只行髓芯减压治疗,联合组8只采用富血小板血浆凝胶联合髓芯减压治疗,造模后第8周采集股骨头标本组织切片行MRI检查及苏木精-伊红染色。 结果与结论：①MRI 检查：模型组表现为股骨头脂肪高信号中出现不同形态的低信号区,呈环形、带状和灶状;髓芯减压组减压缺损区无明显成骨改变,缺损腔无明显缩小,以长 T1、T2信号为主;联合组缺损腔消失,被短T1、T2的大量新生骨所充填。②苏木精-伊红染色：模型组关节软骨缺损与修复同时存在,呈现骨性关节炎样改变;髓芯减压组骨小梁空骨陷窝,骨髓内造血细胞和脂肪细胞坏死;联合组骨小梁空骨陷窝,骨髓散在灶状坏死。表明富血小板血浆凝胶联合髓芯减压治疗股骨头坏死模型兔的效果优于单纯髓芯减压治疗。     

高压氧对兔早期激素性股骨头缺血性坏死骨修复的影响

目的：建立激素性股骨头缺血性坏死（SANFH）动物模型，然后采用高压氧（HBO）治疗，探讨HBO治疗早期SANFH的病理变化及作用机制。方法：健康成年日本大耳白兔60只，随机分为模型组（n=42）与对照组（n=18）,造模成功后，再将模型组分为HBO组（n=16）及其对照组（n=16）。观察模型组、HBO组及其各自对照组X线、MRI、光镜、透射电镜的变化。结果：①模型组第6周股骨头软骨下区骨小梁稀疏、变细，甚至骨小梁断裂，死骨形成。部分关节软骨区域性坏死。髓腔内造血组织减少，肥大脂肪细胞增多，后期脂肪细胞液化坏死,基质水肿出血。透射电镜观察到骨细胞坏死及成骨细胞凋亡现象。②HBO组第4—6周时不同程度的造血功能恢复,肥大脂肪细胞数目逐渐减少,部分骨小梁周围出现少量梭形或成排的成骨细胞,髓腔内纤维组织增生,在部分坏死的关节软骨下区髓腔内见活跃的纤维组织及成骨细胞增生：第8周时坏死骨小梁周围出现多核破骨细胞及较肥胖的成骨细胞。造血细胞增生明显、肥大脂肪细胞明显减少。透射电镜观察到成骨细胞、骨细胞、胶原纤维再生、修复的证据。结论：HBO治疗对早期SANFH有明显的骨修复作用。     

骨蚀宁胶囊治疗股骨头坏死的实验研究

目的:探讨破瘀通络药物为主降低股骨头无菌性坏死骨内压的作用。方法:建立INFH动物模型,将模型动物随机分为3组:实验组、对照组、药物+手术减压组,实验组灌服骨蚀宁胶囊,对照组灌服生理盐水,药物+手术减压组灌服仙灵骨葆配合手术钻孔减压,术后4周、8周、12周分别做骨的血液动力学检查,观察骨内压和骨血供改善情况,术后12周实验完毕时股骨头标本做组织学检查,最后评定骨细胞、骨小梁改善情况。结果:对照组动物的一般状态差,骨坏死发生严重,实验组动物一般状态较好,骨坏死发生轻,对照组空骨陷窝率明显高于实验组(P0.01),实验组空骨陷窝率稍低于药物+手术减压组(P0.05),组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:脉络瘀阻与SANFH关系密切,破瘀通络方能防止股骨头无菌性坏死的发展。     

普伐他汀联合髓芯减压术治疗激素性兔股骨头坏死对VEGF mRNA表达水平的影响

目的研究普伐他汀联合髓芯减压术治疗激素性兔股骨头坏死对组织病理学和血管内皮生长因子(VEGF) mRNA表达水平的影响.方法45只实验大白兔制作成激素性股骨头坏死模型后随机分为3组:髓芯减压术治疗组(A组),普伐他汀联合髓芯减压术治疗组(B组)和模型组(C组),每组各15只.观察各组各时期兔股骨头毛细血管数、管径、骨陷窝空缺百分比以及VEGF mRNA表达水平.结果 A、B两组等4周VEGF mRNA表达水平与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05),而B组第8周和第12周VEGF mRNA表达水平明显高于A、C组(P<0.05),且随治疗时间延长,B组VEGF mRNA表达水平明显升高(P<0.05).结论普伐他汀联合髓芯减压术可明显上调股骨头VEGF mRNA的表达水平,是治疗激素性股骨头坏死的有效方法.     

多壁碳纳米管改善激素性股骨头坏死模型兔的股骨头形态

背景：碳纳米管可以促进成骨细胞的增殖和分化,可能对激素性股骨头坏死发挥治疗作用。目的：观察多壁碳纳米管在激素性股骨头坏死模型建立过程中的作用。方法：36只新西兰大耳白兔随机选出32只等分为治疗组和模型组,剩余4只作为空白组。治疗组兔每天臀肌注射地塞米松2.5 mg/kg,每周向双侧股骨的骨髓腔内各注射0.1 g/L多壁碳纳米管悬浊液1 mL;模型组每天臀肌注射地塞米松2.5 mg/kg,每周向双侧股骨的骨髓腔内各注射生理盐水1 mL,空白组每天臀肌注射生理盐水2 mL,每周向双侧股骨的骨髓腔内各注射生理盐水1 mL。     

活血通络法治疗激素性股骨头坏死兔胰岛素样生长因子1的变化

背景:活血通络法是临床防治激素性股骨头坏死的有效治法,活血通络方促进骨坏死组织修复有确切疗效。目的:观察活血通络法对激素性股骨头坏死家兔模型组织形态学和胰岛素样生长因子1的影响。方法:家兔随机分为5组,其中4组用糖皮质激素造成激素性股骨头坏死模型,活血通络方高、中、低剂量组分别灌服活血通络汤混悬液10.0,5.0,2.5mL/kg,模型组灌服10mL/kg蒸馏水;空白对照组不造模仅灌服10mL/kg蒸馏水,连续8周。结果与结论:组织形态学检查显示,模型组骨坏死发生严重,活血通络方各剂量组骨坏死发生轻。空骨陷窝率模型组较空白对照组明显升高(P<0.01),活血通络方各剂量组较模型组明显降低(P<0.05)。胰岛素样生长因子1水平模型组较空白对照组升高(P<0.05),活血通络方各剂量组均较模型组明显升高(P<0.01),但活血通络方中高剂量组之间差异无显著性意义(P>0.05)。提示活血通络方可能通过升高胰岛素样生长因子1水平来促进坏死股骨头的修复与重建,但当剂量达到一定程度时胰岛素样生长因子1并不随剂量的增大而继续升高。     

激素对兔骨髓间充质干细胞神经递质表达的影响

背景：激素性股骨头坏死的确切发病机制仍未清楚,研究发现神经系统可通过多种途径调控骨髓间充质干细胞的分化,激素可能通过影响其调控机制而引起骨坏死。目的：观察在激素作用下,骨髓间充质干细胞中神经递质或其受体mRNA表达的变化。方法：密度梯度离心和贴壁培养获得兔骨髓间充质干细胞。将传代培养的第3代细胞随机分为两组,实验组加入浓度为10-7mol/L的地塞米松,对照组正常培养。分别于诱导后第4,7,11,15天,测定细胞中神经生长因子、成纤维细胞生长因子、降钙素相关基因肽受体、血管活性肠肽受体、P物质受体及过氧化物酶体增殖子活化受体γ的mRNA表达。结果与结论：实验组神经生长因子、成纤维细胞生长因子、降钙素相关基因肽受体、血管活性肠肽受体和P物质受体的mRNA表达较对照组明显降低,而过氧化物酶体增殖子活化受体γmRNA表达较对照组明显增高,差异均具有显著性意义（P〈0.01）,实验组各因子在不同时间点间进行比较却无明显差异（P〉0.05）。结果表明大剂量激素可使骨髓间充质干细胞中具有成骨或成血管作用的神经递质或其受体表达下降,这可能与激素性股骨头坏死发生的机制有关。     

激素性股骨头坏死模型中凋亡相关因子的表达

背景：近年研究发现,激素性股骨头坏死模型中存在大量凋亡骨细胞,而Caspase-3及Bcl-2为调节细胞凋亡的两个重要因子。目的：观察Bcl-2和Caspase-3在激素性股骨头坏死大鼠模型中的表达及二者的相关性。方法：选取健康Wislar大鼠60只随机分为2组,实验组臀肌注射泼尼松龙12．5mg／kg,每周2次,制备激素l生股骨头坏死模型;对照组注射等量生理盐水。分别于给药后4,8,12周获取离体大鼠股骨头,采用苏木精一伊红染色观察骨组织形态学改变,免疫组织化学染色观察Bcl-2和Caspase．3蛋白的表达水平,并采用直线相关分析Bcl-2和Caspase-3的相关性。结果与结论：对照组及实验组股骨头外形均完整,软骨面平整、光滑。随着给药时间的延长,实验组大鼠股骨头内骨小梁逐渐变细,脂肪细胞增多,骨陷窝空虚率明显升高。免疫组织化学染色显示：与对照组比较,实验组大鼠股骨头Caspase-3表达明显增高（P〈0．01）,且随给药时间的延长呈逐渐增高趋势;而Bcl-2的表达显著低于对照组（P〈0．01）。相关分析结果显示Bcl-2和Caspase-3在各组内的表达不具有相关性。提示激素可提高Caspase-3的表达促进骨细胞凋亡,降低Bcl-2的表达抑制抗凋亡作用,进而导致激素性股骨头坏死的发生和发展。     

重组增强型绿色荧光蛋白慢病毒载体示踪转染的脐血间充质干细胞移植治疗兔股骨头缺血性坏死（英文）

背景：目前国内外已有关于人脐血间充质干细胞移植修复鼠脊髓损伤、脑肿瘤、心肌梗死等的报道,将其在特定的条件下向成骨细胞诱导分化的研究也已有报道,但尚未有将脐血间充质干细胞移植治疗动物骨坏死的研究报道。目的：观察重组增强型绿色荧光蛋白慢病毒载体示踪转染的脐血间充质干细胞移植修复兔股骨头缺血性坏死的效果。方法：含骨形态发生蛋白2基因质粒与携带重组增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体与脐血间充质干细胞共培养;制作兔股骨头缺损模型,随机分为3组,正常组未作任何处理,对照组骨缺损未进行填充;实验组骨缺损填充重组增强型绿色荧光蛋白慢病毒载体示踪转染的脐血间充质干细胞;分别于治疗4周和8周时股骨头行影像学和组织学观察。结果与结论：影像学和组织学检查显示实验组治疗4周时即有明显的成骨反应和新骨形成,8周时基本修复股骨头的骨缺损区;对照组治疗4周时骨缺损为纤维结缔组织填充,8周时股骨头缺损周边骨质硬化,骨缺损处充填纤维结缔组织,股骨头骨小梁紊乱。结果显示重组增强型绿色荧光蛋白慢病毒载体示踪转染的脐血间充质干细胞有较强的诱导成骨作用,可以成功的修复股骨头缺损性坏死。