伊贝沙坦对脂多糖诱导血管内皮细胞核因子-κB激活及炎症因子表达的影响

目的 :观察血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1R)拮抗剂伊贝沙坦 (Irb)对脂多糖 (LPS)诱导的体外培养人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)核因子 κB(NF κB)激活与肿瘤坏死因子 α(TNF α)、细胞间粘附分子 1(ICAM 1)表达的影响。方法 :体外培养的第 3～ 5代HUVEC用于实验。用免疫组织化学分析检测细胞NF κB亚单位p6 5、ICAM 1的表达程度 ,酶联免疫吸附法检测培养液上清TNF α浓度。 结果 :LPS有效激活NF κB并诱导HU VEC表达TNF α、ICAM 1增加 ;Irb预先孵育 2h能抑制NF κB并减轻LPS诱导的HUVECTNF α和ICAM 1表达。结论 :LPS可能通过激活NF κB使TNF α、ICAM 1表达增加损伤血管内皮功能 ;Irb能保护因感染而致心血管疾病中的血管内皮功能 ,至少部分通过抑制NF κB这一途径而降低血管内皮TNF α、ICAM 1表达。     

核因子-κB在L-精氨酸所致小鼠急性水肿性胰腺炎模型早期发病中的作用探讨

目的　探讨核因子 κB(NF κB)DNA结合活性在小鼠急性水肿性胰腺炎 (AEP)病变胰腺组织早期中的变化及意义。方法　L 精氨酸腹腔注射诱导小鼠AEP ;对照组给予等量生理盐水。凝胶迁移率法 (EMSA)分析胰腺组织中NF κBDNA结合活性 ;碘比色法测定血清淀粉酶活力 ,放射免疫法测定血清白细胞介素 6(IL 6)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)水平 ;留取胰腺组织分析病理形态学变化、进行病理评分 ;硫代巴比妥酸比色法检测胰腺组织 (丙二醛 )MDA含量 ,黄嘌呤氧化酶法测定胰腺组织 (超氧化物岐化酶 )SOD活力。结果　L 精氨酸腹腔注射后 ,小鼠出现AEP的改变 ;胰腺组织NF κB结合活性呈动态的改变 ,0 .5h时即开始增高 ,6h达到高峰 ,12h时仍高于NS组 (P <0 .0 1)。血清IL 6、TNF α水平 6h ,12h时均显著升高 ,高于NS组 (P <0 .0 1)。6h时组织中MDA含量明显升高并达到高峰 ,12h时仍高于NS组 (P <0 .0 1) ,12h时T SOD活力下降 ,与NS组相比 ,差异具有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论　在L 精氨酸诱导的AEP早期 ,病变胰腺组织存在NF κBDNA结合活性的升高 ,NF κB参与L 精氨酸诱导的AEP的病情演变 ;机制可能与NF κB介导TNF α、IL 6,氧自由基产生及参与氧自由基对细胞膜脂质过氧化损伤有关 ;抑制NF κBDNA结合活性可能有助于改     

氧化苦参碱对葡聚糖硫酸钠诱导大鼠结肠炎的抗炎作用机制研究

目的　探讨氧化苦参碱 (OM )对葡聚糖硫酸钠 (DSS)诱导结肠炎的抗炎作用及其作用机制。方法　建立DSS诱导的大鼠结肠炎模型。SD大鼠 2 6只 ,随机分为OM处理组 (A组 ,10只 )、OM未处理组 (B组 ,10只 )和正常对照组 (C组 ,6只 )。A组第 1～ 11天肌内注射OM 6 3mg·kg-1·d-1,第 4～ 11天饮用 2 %DSS溶液 ;B组第 1～ 11天肌注与A组OM等体积的生理盐水 ,第 4～ 11天饮用 2 %DSS溶液 ;C组肌注生理盐水同B组 ,正常饮水。观察大鼠的腹泻、便血症状及结肠组织学改变 ,ELISA测定血清肿瘤坏死因子 α(TNF α)和白细胞介素 6 (IL 6 )水平 ,免疫组化检测结肠黏膜核转录因子 κB(NF κB)活性及细胞间粘附分子 1(ICAM 1)的表达。结果　与OM未处理组相比 ,OM处理组大鼠的症状和结肠黏膜组织学损伤显著改善 (P值均 <0 .0 5 ) ,TNF α ,IL 6 ,NF κB和ICAM 1显著降低 (P值均 <0 .0 5 )。结论　OM可抑制NF κB活化 ,降低TNF α、IL 6和ICAM 1的生成 ,从而减轻结肠炎性损伤和腹泻、便血症状。     

双歧杆菌影响溃疡性结肠炎患者肠黏膜的研究

目的　研究双歧杆菌对溃疡性结肠炎 (UC)患者肠黏膜内核因子κB (NF κB)的表达和激活的影响及肿瘤坏死因子 (TNF) α、白细胞介素 (IL) 1β、IL 10mRNA表达的影响。 方法　 30例UC患者经治疗后 ,应用Western蛋白印迹分析检测NF κBp6 5表达情况 ;用凝胶电泳迁移率改变分析检测NF κB与DNA结合活性 ;逆转录 PCR检测肠黏膜内细胞因子的表达。结果　应用双歧杆菌后 3例复发 ,对照组 14例复发 ,与对照组相比 ,NF κB与DNA结合活性明显降低 ,蛋白表达量明显下降 (治疗前 0 82± 0 0 5 ,治疗后 0 31± 0 0 5 ,P <0 0 1) ;双歧杆菌明显抑制了TNF α、IL 1β的表达 ;提高IL 10的表达。结论　双歧杆菌的作用可能与抑制NF κB的激活、降低TNF α、IL 1β等致炎因子的表达 ,提高IL 10等抑炎因子的表达有关     

青藤碱对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞表达细胞因子的影响

目的　观察不同剂量的青藤碱体外作用对佐剂性关节炎 (AA)大鼠腹腔巨噬细胞核因子 κB (NF κB)活性及肿瘤坏死因子 (TNF) αmRNA、白细胞介素 (IL) 1βmRNA、IL 10mRNA的影响 ,以阐明该药抗炎和抗风湿的可能机制。方法　以佐剂性关节炎大鼠为模型 ,收集腹腔巨噬细胞 ,电泳迁移率改变分析法 (EMSA)测NF κB活性 ,反转录 多聚酶链反应 (RT PCR )测TNF αmRNA、IL 1βmRNA、IL 10mRNA的表达。 结果　佐剂性关节炎后腹腔巨噬细胞内NF κB活性与TNF αmRNA、IL 1βmRNA、IL 10mRNA的表达与正常对照相比均显著升高 (P <0 0 5 ) ,青藤碱在一定的浓度范围内抑制NF κB活性与TNF αmRNA、IL 1βmRNA、IL 10mRNA的表达。腹腔巨噬细胞NF κB的变化趋势与TNF αmRNA、IL 1βmRNA、IL 10mRNA的表达呈正相关。 结论　青藤碱通过下调NF κB活性而降低腹腔巨噬细胞内TNF αmRNA、IL 1βmRNA的表达。     

益气活血复方对心肌线粒体氧自由基损伤的保护作用

目的研究益气活血复方对异丙肾上腺素（Iso）所致急性心肌缺血防治作用。方法用灌胃的方法,给大鼠灌服益气活血复方（2 mg/kg）两周后,皮下注射Iso（5 mg/kg）以诱导急性心肌缺血模型。并测定心肌线粒体中丙二醛（m alond ialdehyde,MDA）含量,超氧化歧化酶（superoxide d ismutase,SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutath ionperoxidase,GSH-PX）活性;心肌组织及血清中乳酸脱氢酶（Lactic dehydrogenase,LDH）、肌酸激酶（Creatine k inase,CK）含量。结果急性心肌缺血模型组中,心肌线粒体中MDA含量增加,SOD活性降低及GSH-PX活性增加;益气活血复方组大鼠心肌线粒体中MDA含量降低,SOD、GSH-PX活性显著增加;心肌组织中LDH、CK含量显著升高,血清CK、LDH含量显著降低。结论益气活血复方可能是通过降低心肌线粒体中MDA含量,增加SOD、GSH-PX活力,减轻氧自由基的损伤。     

核因子-κB反义寡核苷酸对系膜细胞炎症因子基因表达的影响

目的 :探讨NF κB反义寡核苷酸 (oligodeoxynucleotide ,ODN)对人肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响 ,为利用NF κB反义ODN治疗肾小球炎性病变奠定基础。　 方法 :人工合成p65反义、正义及错配ODN并行全程硫代磷酸化修饰。应用核酸酶保护法观察阳离子脂质体介导的不同浓度的反义ODN(0 0 0 1、0 0 1、0 1、1、1 0μmol/L)对系膜细胞TNF α、IL 1α、IL 1 β、MCP 1、IL 8、TGF β1mRNA表达的影响 ,以正义ODN(1 0 μmol/L)及错配ODN(1 0 μmol/L)作为对照组。　 结果 :正常培养状态下 ,系膜细胞可组成型表达TNF α、IL 1 β、IL 8和TGF β1mRNA ,而不表达IL 1α和MCP 1mRNA。细菌脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)刺激后上述 6种炎症因子表达显著上调。p65反义ODN可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的系膜细胞炎性细胞因子TNF α ,IL α,IL 1 β,MCP 1和IL 8的基因表达 ,而对TGF β1无显著抑制作用 ;p65正义及错配ODN均不能抑制炎性细胞因子的表达。　 结论 :p65反义ODN可明显抑制LPS诱导的肾小球系膜细胞炎性细胞因子的表达 ,提示NF κB在肾小球疾病进展中起关键性调控作用 ,其反义ODN有可能应用于肾脏病变的实验性治疗之中     

核因子KB在被动致敏的人气道平滑肌细胞增殖中的信号转导作用

目的　探讨核因子κB(NF κB)是否参与被动致敏的人气道平滑肌细胞 (HASMC)增殖及是否是蛋白激酶C(PKC)激活后的下游途径。方法　用 10 %哮喘患者血清被动致敏HASMC ,以10 %非哮喘者血清为对照 ,并用吡咯烷二硫氨基甲酸 (PDTC)及 12 肉豆蔻酰 13 乙酸佛波酯 (PMA)干预HASMC ,用流式细胞术、MTT法及增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫荧光技术检测HASMC增殖 ;NF κBp6 5 免疫荧光技术及电泳迁移率改变分析 (EMSA)检测NF κB活性。结果　 (1)哮喘血清处理的HASMC ,S期细胞比例、吸光度值 (A值 )、PCNA表达阳性率、NF κBp6 5阳性率及EMSA灰度值均较对照血清组增加 (均P <0 0 5 ) ,PDTC预处理后上述指标均下降 (均P <0 0 5 )。 (2 )PMA 哮喘血清处理HASMC后 ,S期细胞比例、A值、PCNA表达阳性率、NF κBp6 5阳性率及EMSA灰度值分别为 (2 5 5 2± 3 38) %、0 5 72± 0 0 5 4、(81 2± 10 2 ) %、(2 6 5± 5 0 ) %和 716 5 4± 12 2 93,PDTC预处理后上述指标均下降 (均P <0 0 5 )。结论　NF κB参与了哮喘血清被动致敏的HASMC增殖 ,在其增殖中存在着PKC/NF κB信号途径。     

精氨酸升压素对心肌成纤维细胞核转录因子κB活性的影响

目的　探讨精氨酸升压素 (AVP)对心肌成纤维细胞 (CFs)核转录因子 (NF κB)活性的影响。方法　胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠CFs,分别采用免疫荧光 -共聚焦显微镜法和蛋白质印迹技术检测基础状态下和AVP干预下CFs中NF κB的细胞内定位和CFs核中NF κB的蛋白含量。结果　基础状态下CFs的NF κB主要分布于细胞浆 ,细胞核中无NF κB蛋白表达 ,AVP干预后CFs的NF κB主要分布于细胞核 ,细胞浆中NF κB显著减少。结论　AVP能够激活CFs的NF κB ,使其从细胞浆转位至细胞核 ,提示AVP对CFs的调节作用可能是通过NF κB激活通路发挥的。     

心肌缺血晚期再灌注后的心肌损伤及其与核因子-κB的关系

目的:研究心肌缺血晚期再灌注后的心肌损伤现象及其与核因子(NF)-κB的关系。方法:32只家兔随机分为4组(每组8只):假手术组(S组)、持续缺血组(I组)、晚期再灌注组(I/R组)、PDTC干预组(P组),建立体内心肌缺血再灌注动物模型。S组冠状动脉旷置6h,I组冠状动脉持续结扎6h,I/R组结扎冠状动脉3h后再灌注3h,P组结扎冠状动脉3h后再灌注3h,并于再灌注前10min静脉注入PDTC(200mg/kg)。6h后处死动物取心脏组织分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽还原酶(GR)含量,免疫组化指标NF-κB、IκBα,凋亡指数(AI)。结果:与S组相比,I/R组、P组和I组的SOD、GR降低,MDA、NF-κB、IκBα、AI升高;I/R组与I组相比,SOD、GR降低,MDA、NF-κB、IκBα、AI升高;P组与I/R组相比SOD、GR、IκBα升高,MDA、NF-κB、AI降低;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:心肌缺血晚期再灌注可导致梗死边缘区心肌细胞凋亡增加,提示存在再灌注损伤现象。氧化应激增强、NF-κB的过度激活可能是导致晚期再灌注损伤的重要因素。