原发性小血管炎和抗中性粒细胞胞浆抗体靶抗原的系列研究

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)是80年代中期发现的原发性小血管炎的特异性血清学诊断工具. ANCA相关小血管炎主要指韦格纳肉芽肿病(Wegener's granulomatosis, WG)、显微镜下型多血管炎(microscopic polyangiitis, MPA)和局灶节段坏死性肾小球肾炎(FSNGN).该类疾病为自身免疫性疾病,可累及全身多个脏器,肺、肾受累后多进展迅速,可危及患者生命或发展为肾衰竭.80年代我国对此类疾病认识不足,未诊断1例小血管炎引起的肾损害.10年来作者开展了对原发性小血管炎及ANCA靶抗原的系列研究.(1)80年代末在国内率先建立并逐步规范了ANCA的检测方法.(2)系统地研究并报道引起ANCA阳性小血管炎的一系列疾病并总结了相应的治疗方法.(3)发现了两种新的ANCA靶抗原:杀菌/通透性增高蛋白(BPI)和天青杀素(azurocidin).(4)开展了其他ANCA阳性疾病的靶抗原研究,证明组蛋白酶G是SLE-ANCA最为重要的靶抗原并证明抗组蛋白酶G抗体与狼疮肾炎的病理活动密切相关;同时在国内率先研究了溃疡性结肠炎的特异性靶抗原.上述工作填补了国内对ANCA相关小血管炎认识上的空白,提高了临床危重急症的救治水平,为进一步研究ANCA相关疾病的发病机制奠定了基础.     

原发性小血管炎和抗中性粒细胞胞浆抗体靶抗原的系列研究

学科分类 内科肾脏病学任务来源 部委计划项目起止时间 1989年9月1日-2000年5月30日项目详细内容 立项背景 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关小血管炎主要指韦格纳肉芽肿病(Wegener’s granulomatosis,WG)、显微镜下型多血管炎(Microscopicpolyangiitis,MPS)和局灶节段坏死性肾     

2001年一等奖项目介绍：原发性小血管炎和抗中性粒细胞胞浆抗体靶抗原的系列研究

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关小血管炎主要指韦格纳肉芽肿病(Wegener′s granulomatosis，WG)，显微镜下型多血管炎(Microscopic polyangiitis，MPS)和局灶节段坏死性肾小球肾炎(FSNGN)。该病为自身免疫性疾病，可累及全身多个脏器．肺受累可以表现为肺部阴影，结节和空洞，与肿瘤，肺结核等不易鉴别．肺大出血可危及患者生命，肾受累则多表现为局灶节段坏死性肾小球肾炎和新月体性肾炎．如不能及时诊治，则多进展迅速．造成不可逆的终末期肾哀竭。而及时诊断和治疗，多可控制病情的进展，甚至可使病情逆转。因此，早期诊断是改善患者的预后的关键。ANCA除见于原发性小血管炎．也可见于其他疾病，如系统性红斑狼疮(SLE)和溃疡性结肠炎等，但具意义未明，其靶抗原也与原发性小血管炎不同。     

抗中性粒细胞胞浆抗体相关小血管炎的研究进展

抗中性粒细胞胞浆抗体相关小血管炎又称为抗中性粒细胞胞浆抗体相关原发性系统性小血管炎。是西方国家仅次于类风湿关节炎的最常见的自身免疫性疾病，其特点就是体内抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)阳性，因此又称之为ANCA相关性小血管炎。ANCA相关的原发性小血管炎主要指韦格纳肉芽肿病、显微镜下型多血管炎、变应性肉芽肿血管炎和原     

抗中性粒细胞胞浆抗体相关小血管炎的研究进展

抗中性粒细胞胞浆抗体相关小血管炎又称为抗中性粒细胞胞浆抗体相关原发性系统性小血管炎。是西方国家仅次于类风湿关节炎的最常见的自身免疫性疾病,其特点就是体内抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)阳性,因此又称之为ANCA相关性小血管炎。ANCA相关的原发性小血管炎主要指韦格纳肉芽肿病、显微镜下型多血管炎、变应性肉芽肿血管炎和原发性局灶坏死性肾小球肾炎。我国自20世纪90年代初才开始ANCA的检测,对ANCA相关小血管炎认识相对较迟。目前国内对该类疾病的认识水平在不同地区之间仍存在较大     

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎及肾损害

1概述系统性血管炎是以血管壁的炎症和纤维素样坏死为病理特征的一组系统性疾病,多根据受累血管大小分类。原发性小血管炎包括:显微镜下多血管炎(microscopic polyangiitis,MPA)、韦格纳肉芽肿(WG)及变应性肉芽肿血管炎(Churg-Strauss syndrome,CSS),均与抗中性粒细胞胞浆抗体(     

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎治疗进展

原发性小血管炎是一类病因不明,以小血管壁炎症、纤维素样坏死为病理特征的自身免疫性疾病。部分与抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）关系密切,     

原发性抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎51例预后分析

目的探讨成年人原发性抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性小血管炎(AASV)的特点并分析其预后,以提高对本病的认识。方法选取原发性AASV患者51例,对其临床表现、辅助检查、病理结果、治疗及预后等资料进行分析。结果 51例中,肺部受累39例、肾脏受累40例;实验室检查髓过氧化物酶(MPO)阳性45例、蛋白酶3(PR3)阳性6例;12例行肾脏病理检查,表现为毛细血管襻坏死和新月体形成。51例患者中49例给予糖皮质激素治疗(其中40例接受糖皮质激素联合免疫抑制剂治疗),1例仅予免疫抑制剂治疗,1例未及接受激素或免疫抑制剂治疗猝死。最终29例病情好转,13例长期维持性血透治疗,7例12个月内死亡,2例接受激素或免疫抑制剂治疗者病情被控制但死于合并重症感染。结论成人原发性AASV临床表现多样,以老年人为主,主要累及肺部和肾脏,ANCA化验有特异性,糖皮质激素联合免疫抑制剂治疗有效。本病若在重要脏器损害前早诊断、早治疗,可降低病死率。     

抗中性粒细胞胞浆抗原和抗体的研究进展

1982年Daries等在一组节段性坏死性肾小球肾炎病人中发现了直接针对多形核白细胞和单个核细胞胞浆成份的自身抗体,称之为中性粒细胞胞浆抗体(Antineutrophil cytoplasma anboay,ANCA)。1985年Vander Woude等发现了ANICA与Wegener肉芽肿之间的关系并进行了深入地研究。1988年Falk和Jennene发现了与系统性血管炎和坏死性新月体形成型肾小球肾炎有关的另一种ANCA。1989年Fargan等发现了与炎症性肠病有关的ANCA。到目前为止,已召开了4次国际ANCA会议。     

两种方法分离人抗肾小球基底膜抗体靶抗原

目的：比较超声粉碎法和化学去污剂法对人抗肾小球基底膜(GBM)抗体靶抗原(粗抗原)的分离纯化效果。方法：取正常肾组织分离肾小球，用两种方法分别分离GBM，将胶原酶消化后的可溶性蛋白进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，并用Western blot和EHSA法检测抗GBM抗体与所分离靶抗原的反应情况。结果：电泳结果显示两种方法分离纯化的可溶性蛋白相对分子质量都主要位于27ku和54ku，且均为抗GBM抗体阳性血清所识别。ELISA显示两种方法分离纯化的蛋白与抗GBM抗体相关疾病患者的血清均呈阳性反应。结论：两种方法都可以用于抗GBM抗体靶抗原的分离纯化，且化学去污剂方法更为简便。     

原发性小肠癌癌胚抗原表达及其粘液成分的变化

目的 研究原发性小肠癌癌胚抗原（ＣＥＡ）表达和粘液性质变化特点及其临床意义。方法 采用免疫组化和粘液组化的方法，对小肠癌及其癌旁组织中ＣＥＡ的分布及粘液成分的变化进行观察。结果 小肠粘膜从正常到不典型增生再发展到癌变的过程中，其ＣＥＡ的分泌及硫酸粘液、非硫酸粘液的分泌比例有显著改变（Ｐ〈０．０１）。结论 检测ＣＥＡ和粘液尬发的改变对判断原发性小肠癌的生物行为和癌前病变有参考价值。     

成人原发性肾病综合征临床及实验系列研究

综述作者对成人原发性肾病综合征（ＰＮＳ）３２年的研究概况，主要包括：①ＰＮＳ发病机理：证明了免疫介导及炎症介导性肾小球损伤在ＰＮＳ发病中的作用，在国内率先报告ＰＮＳ患者有可溶性白介素２受体（ＳＩＬ２Ｒ），肿瘤坏死因子（ＴＮＦα），血小板活化因子（ＰＡＦ）等异常升高，淋巴细胞亚群异常，单核巨噬细胞浸润，增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达增加，抗氧化功能减退等表现；②肾穿刺及病理：报告大量肾穿刺活检资料，着重分析系膜增生性及系膜毛细血管性肾小球肾炎在华南地区的发病情况，研究了系膜增生性肾炎肾生存率；③并发症：在国内率先分析了ＰＮＳ并发感染发生率及其危险因素，探讨了ＰＮＳ并发急性肾功能衰竭（ＡＲＦ）及肾小管功能异常的发病情况及预后；④在国内率先探讨激素（强的松）治疗ＰＮＳ，并就强的松治疗ＰＮＳ作了广泛的多中心随机双盲对照研究，提出了强的松治疗ＰＮＳ及常复发性ＰＮＳ的新方案并证实其疗效，中西医结合治疗可提高疗效，减少不良反应。证明了输注人体白蛋白对微小病变ＰＮＳ的不利影响     

结核分枝杆菌胞浆蛋白质抗原的制备与检测

将结核分枝杆菌（M．tuberculosis）H37Ra株苏通培养基培养物化学灭活，低温高速离心，超声波裂解，SephadexG－200柱层析，获得3个峰，制备了3种胞浆蛋白质抗原。经与结核分枝杆菌阳性参比血清、阴性参比血清及各种分枝杆菌高免兔血清的ELISA检测，并与PPD、聚合OT及菌体PP等抗原比较，结果表明：第二峰的胞浆蛋白质抗原的特异性最好。     

寻常型天疱疮抗原细胞外区1-2表位抗体亚型的致病性

目的探讨不同寻常性天疱疮（PV）抗体亚型在PV中的作用。方法分别用完全弗氏佐剂（CFA）、铝[Al（OH）3]佐剂联合重组寻常型天疱疮抗原（PVA）细胞外区1～2融和蛋白免疫C57BL/6小鼠。免疫后对其细胞因子的类别、特异性抗体滴度和抗体亚型进行检测;并通过诱导新生鼠的动物模型评价其致病性。结果免疫后经细胞因子检测显示CFA组小鼠产生较多的Th1型细胞因子γ-干扰素（IFNγ）,Al（OH）3组则以Th2型细胞因子白介素-4（IL-4）为主;抗体亚型的型别在CFA组中以IgG2a为主,而Al（OH）3组以IgG1为主。新生鼠被动转移实验显示,转移Al（OH）3组小鼠的抗血清可使被转移鼠皮肤出现糜烂,组织病理、免疫荧光均符合PV的表现,而CFA组小鼠的抗血清不能出现上述表现。结论相同PVA在不同免疫佐剂作用下可诱导产生不同抗体亚型;不同亚型的抗PVA抗体其致病性不同。     

原发性胆汁性肝硬化患者血清AMA-M2及其靶抗原检测的阳性率对比

目的:针对PBC患者血清同时选用国产和进口两种试剂盒检测AMA-M2及其靶抗原:丙酮酸脱氢酶复合体E2亚单位(PDC-E2)及抗M2-3E等免疫指标,并对其敏感性进行对比,观察两种试剂盒检测有无差异及3个指标之间的敏感性。方法:对51例PBC确诊患者的血清标本,采用上海丰翔生物公司及欧蒙公司的ELISA试剂盒对待测血清分别进行了AMA-M2、抗M2-3E、PDC-E2等指标的检测,进行阳性率的比较。结果:51例患者血清标本中,国产试剂盒检测AMA-M2、抗M2-3E、PDC-E2的阳性率分别为72.5%、90.2%、72.5%,进口试剂盒检测AMA-M2、抗M2-3E、PDC-E2的阳性率分别为78.4%、92.2%、82.4%,经统计软件处理得到的结果P>0.05,无明显的统计学差异。针对42例AMA阳性的患者进行AMA-M2、抗M2-3E、PDC-E2检测时,国产试剂盒检测的阳性率分别为85.7%、95.2%和78.6%,进口试剂盒检测的阳性率分别为95.2%、100%、95.2%,经统计软件处理后得出P>0.05,两种试剂盒检测无明显的差别。结论:使用进口和国产两种试剂盒检测AMA-M2、PDC-E2、抗M2-3E的阳性率无明显的统计学差异。AMA-M2、PDC-E2、抗M2-3E 3个指标中阳性率最高的是抗M2-3E,AMA-M2和PDC-E2差异无统计学意义。     

抗HSPC238单克隆抗体的制备和初步鉴定

目的 制备抗HSPC238的单克隆抗体,为HSPC238的功能研究奠定基础.方法 以纯化的重组蛋白HSPC238为抗原,免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备HSPC238单克隆抗体,并用问接ELISA法和Westem-blot法对单克隆抗体的特性进行鉴定.结果 成功建立两株稳定分泌抗HSPC238的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为E001和E002.ELISA检测抗HSPC238单克隆抗体的腹水效价为1:12800和1:25600.两株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为Ig异G1.通过Western-blot实验证实,两株单克隆抗体均能特异性结合真核细胞内源性HSPC238蛋白.结论 成功制备了两株效价高、特异性好的抗HSPC238单克隆抗体,制备的抗HSPC238单克隆抗体可用于HSPC238蛋白的鉴定,为HSPC238蛋白的生物学功能研究奠定了基础.     

大鼠吸入EHFV气溶胶后体内抗原抗体的动态观察

本次试验研究表明:实验大白鼠吸入EHFV气溶胶后第5天部份实验鼠血中即可检测到EHFV抗原,14天后EHF抗原全部消失,病毒血症可持续7天左右;第7天肺组织中可检测到EHF抗原其IF强度和病毒感染滴度亦随感染时间而增高。EHF抗原阳性的肺组织中IgA水平显著高于EHF抗原阴性的肺。肺组织中IgA的增高可能有促进EHFV的感染,这对研究EHFV气溶胶感染提供了一定的科学依据。     

抗癌胚抗原单区抗体的质粒构建及表达

目的 对抗癌胚抗原单区抗体进行表达研究。方法 采用ＰＣＲ技术将已获得的抗癌胚抗原（ＣＥＡ）原单克隆抗体Ｅ７Ｂ１０重，轻链可变区基因（ＶＨ、ＶＫ）进行改造后分别克陲是大肠杆菌表达质粒ＰＥＴ－２４α（＋）中，并进行表达，结果 显示重、轻链可变区在大肠杆菌中获得高铲表达，基力体总蛋白的２０％与２５％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ图谱显示表达产物分子量为１３ＫＤ、１２ＫＤ，与其基因编旧白 理     

应用链霉亲和素在ELISA中检测HBe系统

应用链霉亲和素和生物素系统发展成ELISA的改良法,用于检测HBeAg和HBe,取得较为满意的效果。标记SA-HRP吋,两者的重量比以O.5～0.8/1为佳,浓度以7μg/ml时最为理想;SA-HRP的反应时间不同,亦会影响检测结果,其中以30min为适宜;本法、ABC法及普通法进行检测抗-HBe的灵敏度比较,本法相对灵敏度高于后两者。用Abbott试剂作为标准,检测HBeAg100人份、抗-HBe87人份,其阳性符合率、阴性符合率及总符合率均高于ABC法和普通ELISA,BSA法,提高了方法的特异性及灵敏度,在应用上有着广阔的前景。