肠易激综合征患者肠黏膜肥大细胞与P物质的相关性

目的　研究肠易激综合征 (IBS)患者肠黏膜肥大细胞 (MC)、P物质 (SP)的变化及其相互关系 ,探讨其在IBS内脏高敏感性中的可能作用和临床意义。方法　黏膜标本取自 2 2例腹泻型IBS患者、2 0例便秘型IBS患者和 19例正常人的回肠末端、回盲部、升结肠、乙状结肠 ,应用甲苯胺蓝改良染色法和免疫组织化学染色法分别对MC和SP、SP受体 (SPR)进行染色 ,并应用彩色病理图像分析软件及免疫组化分析软件进行分析 ;应用放射免疫测定法检测黏膜SP含量 ;采用石蜡连续切片观察MC与SP免疫反应阳性神经纤维、SPR免疫反应阳性细胞的关系 ;采用原位包埋法透射电镜观察MC与SP免疫反应阳性神经纤维的关系。结果　IBS患者回肠末端、回盲部、升结肠MC明显增多 (P <0 0 1) ,乙状结肠MC无明显变化 ;IBS患者MC存在显著变异 ;IBS患者肠黏膜SP免疫反应阳性纤维表达增强 (P <0 0 1) ,其含量较正常对照组显著升高 (P <0 0 1) ;SP免疫反应阳性纤维与MC靠近或毗邻 ,有些存在“膜膜”接触 ,增强的阳性纤维强度、面积与MC的面积、密度密切相关 ;部分MC呈SPR免疫反应阳性。结论　MC、SP及MC与SP免疫反应阳性神经纤维的相互作用在IBS内脏高敏感的病理生理过程中可能具有重要作用     

肠易激综合征患者肠黏膜肥大细胞的光镜和电镜观察

目的 光镜、电镜下观察肠易激综合征(IBS)患者肠黏膜肥大细胞(MC)的改变及其与P物质(SP)免疫反应阳性纤维、P物质受体(SPR)阳性细胞的关系,探讨其在IBS病理生理机制中的可能作用和临床意义。方法 黏膜标本取自19名正常人和22例腹泻型IBS(D-IBS)患者、20例便秘型IBS(C-IBS)患者的回肠末端、回盲部、升结肠、乙状结肠,应用特殊组织化学染色法(甲苯胺蓝改良染色法)和免疫组织化学染色法分别对MC和SP、SPR进行染色,并应用彩色病理图像分析软件及免疫组织化学分析软件进行分析;采用石蜡连续切片及原位包埋法透射电镜观察MC与SP免疫反应阳性神经纤维的关系。结果 IBS患者回肠末端、回盲部、升结肠MC明显增多(P<0.01),乙状结肠MC无明显变化,IBS患者MC存在显著变异;IBS患者肠黏膜SP免疫反应阳性纤维表达增强(P<0.01);SP免疫反应阳性纤维与MC靠近或毗邻,有些存在“膜膜”接触,增强的阳性纤维强度、面积与MC的面积、密度密切相关;部分肥大细胞呈SPR反应阳性。结论 MC与SP免疫反应阳性神经纤维及其相互作用在IBS内脏高敏感的病理生理过程中可能具有重要作用。     

肠易激综合征患者内脏高敏感性的机制研究

目的检测肠易激综合征(IBS)患者的内脏感觉及其结肠黏膜肥大细胞(MC)、P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)的改变,探讨MC、SP、VIP对IBS患者内脏高敏感性的作用及其机制.方法黏膜标本取自19例正常人和22例腹泻型IBS(D-IBS)、20例便秘型IBS(C-IBS)患者回肠末端、回盲部、升结肠、乙状结肠,应用特殊组织化学染色法、免疫组织化学染色法分别对MC、SP和VIP免疫反应阳性神经纤维进行染色,应用彩色病理图像分析软件进行分析,电镜观察MC及其毗邻结构;应用电子气压泵及灌注导管测压仪检测上述患者肛门直肠压力、直肠对容量刺激的感觉及直肠顺应性.结果IBS组回肠末端、回盲部、升结肠MC明显增多,MC显著变异(P＜0.01);IBS组结肠黏膜SP、VIP免疫反应阳性神经纤维较正常对照组增多、增粗、阳性强度增强(P＜0.01);IBS组SP、VIP免疫反应阳性纤维的阳性强度均值、面积与MC的密度、面积密切相关(r=0.3860～0.6632,P＜0.01、P＜0.05),并可观察到MC与无髓神经末梢及浆细胞等内分泌细胞毗邻或密切接触;IBS组肛门直肠括约肌的静息压、收缩压、松弛压与正常对照组相似(P＞0.05),感觉阈值、排便阈值、疼痛阈值明显低于正常对照组(P＜0.01),直肠顺应性降低(P＜0.01),向直肠内注气20或40 ml后均可引起直肠肛门抑制性反射.结论MC、SP、VIP在IBS的病理生理机制中可能起关键性作用,MC活性、SP、VIP免疫反应阳性神经纤维可能与IBS以内脏感觉及动力变化为特征的内脏高敏感性相关联.     

肠易激综合征患者内脏高敏感机制的实验研究

目的:研究肠易激综合征(IBS)患者肠黏膜肥大细胞 (MC)与神经肽免疫反应阳性纤维有无变化及其在IBS中的可能作用和临床意义。方法:黏膜标本取自19例正常人、22例腹泻型IBS患者和20例便秘型IBS患者的回肠末端、回盲部、升结肠、乙状结肠,应用特殊组化染色法(甲苯胺蓝改良染色法)和免疫组化染色法分别对MC和神经肽免疫反应纤维进行染色,并应用彩色病理图像分析软件及免疫组化分析软件进行分析。在回盲部和乙状结肠各加取2块黏膜标本,     

肠易激综合征患者结肠黏膜P物质、血管活性肠肽和肥大细胞的变化

背景：肠易激综合征（IBS）的发病机制尚不明确。目的：探讨IBS患者结肠黏膜P物质（SP）、血管活性肠肽（VIP）、肥大细胞（MC）的变化及其在IBS中的可能作用。方法：20例腹泻型IBS患者、22例便秘型IBS患者和18名正常对照者纳入本研究．取回盲部、乙状结肠黏膜行SP、VIP免疫组化染色和MC计数。结果：IBS患者回盲部、乙状结肠黏膜SP、VIP免疫阳性神经纤维较正常对照组增多、增粗，阳性增强（P〈0．05）。IBS患者乙状结肠黏膜SP、VIP免疫阳性神经纤维与回盲部相比无显著差异。IBS患者回盲部黏膜MC计数较正常对照组显著增高（P〈0．01），乙状结肠黏膜MC计数与正常对照组相比无显著差异。IBS患者乙状结肠黏膜MC计数与正常对照组相比，显著低于回盲部（P〈0．01）。结论：SP、VIP和MC在IBS的发病中起有一定作用。     

肠易激综合征患者结肠黏膜辣椒素受体、P物质和肥大细胞变化的研究

背景:腹痛是一般人群中最常见的肠道症状,肠易激综合征(IBS)患者的腹痛症状更为严重、频繁,然而其发生机制尚不明确。目的:分析IBS患者结肠黏膜中与痛觉和内脏高敏感相关的辣椒素受体VR1、P物质(SP)和肥大细胞(MC)的变化,探讨IBS患者内脏高敏感和腹痛的发生机制。方法:39例IBS患者[腹泻型IBS(IBS-D)21例,便秘型IBS(IBS-C)18例]和18名健康人纳入研究。受检者于结肠镜检查时在回盲部和乙状结肠取活检,行VR1、SP免疫组化染色和MC改良甲苯胺蓝染色。结肠镜检查前采用视觉模拟评分法行疼痛评分。结果:IBS患者乙状结肠VR1、回盲部和乙状结肠SP免疫反应阳性细胞以及回盲部MC数量显著多于正常对照组(P0.01),IBS-D与IBS-C组间则无明显差异。IBS-D和IBS-C患者的腹痛评分均与VR1呈正相关(r=0.553,P=0.009;r=0.592,P=0.010)。结论:IBS患者结肠黏膜中VR1、SP免疫反应阳性细胞和MC数量显著增多,VR1与腹痛评分呈正相关,三者可能参与了IBS患者内脏高敏感和腹痛的发生机制。     

肠易激综合征患者肠黏膜SP、SPR和D5-HT的变化

目的:观察肠易激综合征(IBS)患者回盲部肠黏膜P物质(SP)、P物质受体(SPR)及5-羟色胺(5-HT)的改变及其相互关系,探讨其在IBS病理、生理机制中可能的作用与临床意义.方法:采用EnVision免疫组织化学染色法对IBD患者回盲部黏膜组织切片的SP与SPR进行染色,5-HT用SP免疫组织化学染色法,用彩色病理图像分析软件及免疫组织化学分析软件进行分析.结果:与对照组比较IBS组SP的阳性强度均值、阳性面积均显著增大,差别有统计学意义(F=6.463,P<0.05),其中IBS-D和IBS-C与对照组比较差别有高度统计学意义(Q=4.231、3.463,均P<0.01);IBS组和对照组相比,回盲部黏膜SPR、5-HT阳性细胞明显增多(均P<0.05),且SPR和5-HT密切相关(r=0.1579,P<0.05).结论:SP、SPR及5-HT相互作用在IBS内脏高敏感的病理生理过程中可能具有重要的作用.     

肠易激综合征患者结肠黏膜神经肽和IL-1β变化及其意义

目的探讨肠易激综合征患者结肠黏膜神经肽和IL-1β变化及其意义。方法黏膜标本取自21例IBS患者、17例正常人回盲部和乙状结肠,分别运用放射免疫测定法和免疫组化方法检测SP、VIP和IL-1β,免疫组化应用图像分析软件进行半定量分析,计算SP、VIP和IL-1β阳性面积和积分光密度值（IOD）。结果放免法检测IBS回盲部黏膜IL-1β、SP和VIP含量均较对照组显著升高（P〈0.01）,乙状结肠黏膜SP和VIP含量也均较对照组显著升高（P〈0.01）,而乙状结肠黏膜IL-1β无统计学意义（P〉0.05）,回盲部IL-1β和VIP存在直线相关性（r=0.75,P〈0.01）,IL-1β和SP无相关性（r=0.15,P〉0.05）。免疫组化检测IBS回盲部和乙状结肠黏膜VIP阳性面积和积分光密度较对照组显著升高（均P〈0.01）;回盲部黏膜IL-1β阳性面积和积分光密度分别较对照组显著升高（P〈0.01,P〈0.05）,而乙状结肠粘膜IL-1β较对照无统计学意义（P〉0.05）;回盲部和乙状结肠粘膜SP阳性面积和积分光密度两组之间无显著性差异（均P〉0.05）。光镜下可见SP、VIP和IL-1β特征性阳性反应部位。结论IBS回盲部黏膜IL-1β表达增高,存在炎症反应;SP、VIP参与IBS发病,VIP可能是IBS重要的标记物,参与免疫抑制调节。     

肠易激综合征精神心理因素、肠黏膜肥大细胞及5-羟色胺的变化

目的:探讨精神心理因素、肠黏膜肥大细胞(MC)及5-羟色胺(5-HT)变化在肠易激综合征(IBS)发病机制中的作用.方法:应用汉密尔顿焦虑量表(HAMA)和汉密尔顿抑郁量表(HAMD)分别对27例IBS患者和27例对照者进行精神心理因素评分.应用免疫组化法检测回盲部肠黏膜MC含量.应用高效液相电化学检测法测定回盲部肠黏膜5-HT含量.应用直线相关分析焦虑抑郁评分、回盲部肠黏膜MC数目和脱颗粒比率、5-HT浓度之间的关系.结果:IBS组焦虑抑郁评分HAMA(18.26±6.23)和HAMD(20.93±6.96)总分均明显高于对照组(9.15±4.91,9.89±5.31),差异有显著性(P＜0.05).IBS组回盲部肠黏膜MC数目、MC脱颗粒比率便秘型(22.1±6.5/HP,35.4%±7.1%)和腹泻型(28.4±7.3/HP和42.3%±10.1%)明显高于对照组(15.6±6.9/HP和24.8%±7.2%),差异有显著性(P＜0.05),其中腹泻型较便秘型明显升高(P＜0.05).IBS组回盲部肠黏膜5-HT浓度便秘型和腹泻型明显高于对照组(2669±920,2628±906 ng/g vs 1893±984 ng/g,P＜0.05),其中便秘型和腹泻型相比无显著性差异(P＞0.05).IBS患者焦虑抑郁评分与回盲部肠黏膜MC数目、MC脱颗粒比率呈正相关性(rHAMA=0.784,0.842,rHAMD=0.711,0.860,P＜0.01),与回盲部肠黏膜5-HT浓度无明显相关性(P＞0.05).IBS患者回盲部肠黏膜5-HT浓度与MC数目、MC脱颗粒比率之间无明显相关性(P＞0.05).结论:IBS精神心理因素异常,回盲部肠黏膜MC含量及活化比例增高,5-HT浓度增高.精神心理因素异常与肠黏膜MC含量增加及肠黏膜MC的脱颗粒有关.     

肠易激综合征患者结肠黏膜T细胞、B细胞、神经肽、细胞因子变化及其相关性

目的 探讨肠易激综合征(IBS)患者结肠黏膜T、B淋巴细胞、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)及IL-1β的表达和相关性.方法 黏膜标本取自21例IBS患者和17例正常人回盲部、乙状结肠.应用流式细胞仪检测结肠黏膜CD3+、CD28+、CDl9+、CD38+表达,放射免疫测定法检测结肠黏膜SP、VIP和IL-1β含量.结果 IBS患者回盲部黏膜CD3+T细胞、CD3+CD28+T细胞均较对照组明显增加(P均《0.01),乙状结肠黏膜两组之间无明显差异(P》0.05);回盲部和乙状结肠CD19+B细胞和CDl9+CD38+B细胞与对照组的差异无统计学意义(P》0.05).IBS患者回盲部黏膜IL-1β、SP和VIP含量均较对照组升高(P《0.01),乙状结肠黏膜SP和VIP含量也均较对照组升高(P《0.01),而乙状结肠黏膜IL-1β变化无统计学意义(P》0.05);IBS患者回盲部IL-1β、VIP含量较乙状结肠明显升高(均P《0.01).回盲部黏膜CD3+28+T细胞分别与IL-1β和VIP存在直线正相关(P《0.58,P《0.01和P《0.81,P《0.01),IL+1β和VIP也存在直线正相关(P《0.75,P《0.01).结论 IBS患者回盲部黏膜表达T细胞增殖和活化,IL-1β、VIP和SP参与IBS的发病,它们之间存在相关性.     

肠易激综合征回盲部肥大细胞的研究

为探讨肠易激综合征（ＩＢＳ）回盲部肥大细胞计数有无变化，以及它的可能作用及临床意义，应用组化染色法检测了１９名正常人及２０例ＩＢＳ患者回盲部肥大细胞的计数，同时应用免疫组化和电镜观察研究肥大细胞与神经纤维的关系。结果：ＩＢＳ患者回盲部肥大细胞计数明显增多（Ｐ＝０．０１９）；神经纤维与肥大细胞密切毗邻，神经纤维多是无髓神经纤维。结果提示肥大细胞在ＩＢＳ的病理生理过程中可能发挥着一定的作用，在肠道和神经系统之间可能是它们相互联系和相互影响的一种中间媒介。认为肥大细胞稳定剂或肥大细胞产物拮抗剂对ＩＢＳ可能具有治疗作用。     

感染对IBS患者肠黏膜细胞因子表达的影响

目的:探讨感染对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)患者神经-免疫-内分泌网络的影响.方法:感染后肠易激综合征(postinfectious irritable bowel syndrome,PI-IBS)患者45例,non-PI-IBS患者60例及30例对照者,结肠镜下活检回盲部黏膜标本,采用免疫组织化学法检测其肠黏膜SP、IL-2、IFN-γ、SPR与5-HT的表达,肥大细胞(mast cells,MC)采用甲苯胺蓝染色.结果:PI-IBS患者的SP表达分别高于non-PI-IBS与对照组(t=2.5,2.8,P<0.01);PI-IBS患者的MC表达分别高于non-PI-IBS与对照组(t=11.5,12.1,P<0.01).PI-IBS患者的5-HT表达分别高于non-PI-IBS与对照组(t=13.6,14.1,P<0.01);PI-IBS患者的SPR表达分别高于non-PI-IBS与对照组(t=3.8,6.1,P<0.05);PI-IBS患者的IFN-γ表达分别高于non-PI-IBS与对照组(t=13.8,15.2,P<0.05);PI-IBS患者的IL-2表达分别高于non-PI-IBS与对照组(t=12.6,14.7,P<0.05).PI-IBS患者回盲部黏膜MC和SP的表达呈高度正相关(r=0.71,P<0.01).PI-IBS患者回盲部黏膜5-HT和SPR的表达呈密切相关(r=0.18,P<0.05).IFN-γIL-2阳性表达的PI-IBS患者,SP表达高于非PI-IBS组(r=2.2,2.3,P<0.05)和对照组(t=2.3,2.4,P<0.05).结论:肠道感染后,神经纤维在IBS的免疫-神经-内分泌发生机制中的作用至关重要.     

肥大细胞异型性在肠易激综合征发病机制中的作用研究

目的　探讨肥大细胞在肠易激综合征 (IBS)患者肠道内分布、变化及其临床意义 ,并对其异型性在IBS发病机制中的作用进行相关研究。方法　经结肠镜钳取 2 4名正常人和 5 9例肠易激综合征患者回肠末端、盲肠和降结肠黏膜 ,分别采用抗人肥大细胞类胰酶抗体标识肥大细胞 ,并应用免疫组化方法检测了肥大细胞数目、活性变化和其雌激素受体表达的差异。结果　 1 IBS患者回肠末端和盲肠黏膜肥大细胞数目增多、活性增强 ,降结肠黏膜肥大细胞数目与正常组无显著差别 ,但腹泻型IBS患者降结肠肥大细胞活性增强 (P <0 .0 1)。 2 肥大细胞与雌激素受体阳性 (ER + )细胞显著相关 (R =0 .884,P <0 .0 1) ,但每例肥大细胞和ER +细胞的积分不同。结论　回肠末端和盲肠肥大细胞活性增强提示此处可能为IBS发病的关键部位 ;肥大细胞异型性与IBS病理生理过程密切相关     

腹泻型肠易激综合征患者食物不耐受、症状指数及回盲部肥大细胞变化的相关性

目的:比较食物不耐受(food intolerance,FI)在腹泻型肠易激综合征患者(diarrhea-dominant irritable bowel syndrome,D-IBS)及健康人群中的存在情况,分析D-IBS患者食物不耐受严重程度、症状指数与回盲部肥大细胞数量变化之间的关系,以探讨食物不耐受在D-IBS发病中的意义及可能机制.方法:选取符合罗马Ⅲ诊断标准的D-IBS患者22例为病例组,无消化系症状的健康体检者21例为对照组,分别接受结肠镜检查.应用食物不耐受状况评价问卷对2组进行食物不耐受状况评分;用功能性肠病症状严重指数(functional bowel disorder severity index,FBDSI)和IBS病情尺度调查表(IBS symptomseverity scale,IBS-SSS)对病例组进行IBS症状严重程度评分.所有研究对象均接受结肠镜检查,在距回盲瓣4cm处取活检组织2块,采用甲苯胺蓝染色法计数黏膜肥大细胞数量,并与食物不耐受严重程度指数、IBS症状严重程度评分进行相关性分析.结果:D-IBS患者回盲部肠黏膜肥大细胞计数(4.68±0.55)个/高倍镜视野,健康对照组为(1.33±0.54)个/高倍镜视野,P<0.001,差异具有统计学意义;病例组食物不耐受存在情况明显高于对照组(P<0.05);食物不耐受严重程度与IBS症状严重程度指数间呈正相关(FBDSI:r=0.992,P<0.001;IBS-SSS:r=0.970,P<0.001);回盲部肥大细胞计数与I B S症状严重程度指数间呈正相关(FBDSI:r=0.957,P<0.001;IBS-SSS:r=0.985,P<0.001);食物不耐受严重程度与IBS患者回盲部肥大细胞计数间呈正相关(r=0.964,P<0.001),健康对照组中食物不耐受者回盲部肥大细胞计数明显高于无食物不耐受者(P<0.05).结论:D-IBS临床症状与肠道肥大细胞数量增多密切相关,食物抗原的刺激作用可能是D-IBS患者回盲部肥大细胞数目增多的原因之一;D-IBS患者食物不耐受存在情况普遍,食物不耐受可加重D-IBS患者肠道症状.     

Mast cells and neuropeptidergic terminals: Experimental studies of the mechanism of visceral hypersensitivity in irritable bowel syndrome

OBJECTIVE: The failure of dysmotility to explain the symptoms of pain in irritable bowel syndrome (IBS) led to studies on visceral hypersensitivity. Mucosal mast cells (MC) may be one factor influencing the response of visceral afferents to mechanical and chemical stimuli because they are found in close proximity to gastrointestinal mucosal sensory nerve terminals containing neuropeptides and a bi‐directional pathway linking the central nervous system, gut and MC has been demonstrated. METHODS: The present study investigated the extent of MC and the neuropeptides, substance P (SP) and vasoactive intestinal peptide (VIP), in the intestinal mucosa of patients with IBS, as well as the location of the MC. The MC and neuropeptidergic terminals were stained histochemically and immunohistochemically, respectively, neuropeptide concentrations were measured by radioimmunoassay (RIA), and the results were investigated qualitatively and quantitatively by color image analyzer. The structural relation between the MC and neuropeptide terminals was studied by ultramicroscopy using in situ embedding technique. RESULTS: In IBS, the number of MC in the terminal ileum, the ileocecal junction, and the ascending colon was significantly increased (P < 0.01), and the MC had great variations in their extent and size. Significantly increased concentrations of VIP and SP were found in the colon of IBS patients compared with controls. A correlation between mucosal MC and the SP(VIP)‐ergic terminals was found, and the MC were close to these terminals in the lamina propria, which demonstrated SP (VIP)‐ergic terminals. CONCLUSIONS: Mast cells and the neuropeptides of intestinal mucosa may play a central role in gut hypersensitivity, resulting in both the motor response and visceral perceptions that occur with IBS.     

Regulatory Mechanism of Electroacupuncture in Irritable Bowel Syndrome: Preventing MC Activation and Decreasing SP VIP Secretion

The efficacy of electroacupuncture (EA) for treating patients with diarrhea-predominant IBS has been confirmed in the authors’ former research, but the regulatory mechanism of EA in IBS is still unknown. The aim of this study was to explore the relationship between the effect of EA on treating IBS rats and the activation and proliferation of mast cell (MC), the secretion of substance P(SP), and vasoactive intestinal polypeptide (VIP). The IBS rat model was set up with stress of binding limbs and colorectal distention. All rats were randomly assigned to four groups (Normal, Model, Tegaserod and EA). Hematoxylin and eosin staining has been used to observe the pathological change in the rats’ colonic mucosa and an AWR scoring system has been applied to evaluate improvement of visceral hypersensitivity in various methods of the different groups. Toluidine blue improved method (TBI) and immunohistochemistry have also been involved in observations of mucous mast cells in the colon, change of c-fos positive cells, and secretion of SP, SPR, VIP, VIPR in the local colon. Firstly, the threshold of visceral sensitivity in the rats model with IBS was remarkably reduced (P < 0.01). The MC count in colonic mucosa and c-fos positive cells count increased significantly (P < 0.01) with positive correlation within each. Secondly, EA on ST-25 and Tegaserod pouring into the stomach can inhibit the proliferation and activation of MC in the colon and regulate secretion of SP, SPR, VIP, VIPR (P < 0.01, P < 0.05), while the effect of EA is obviously superior to Tegaserod. We concluded, firstly, that the abnormal proliferation and activation of mucous mast cells in the colon, and oversecretion of neuropeptides such as SP, VIP and their receptors could be one of key mechanisms of etiology of IBS. Secondly, the inhibition of activation and proliferation and the secretion of SP, VIP could be major effects of EA when treating rats with IBS.