Tca8113和BcaCD885对口腔癌靶向隐形顺铂聚乳酸纳米粒的敏感性研究

目的：观察口腔鳞癌细胞系（Tca8113和BcaCD885）对口腔癌靶向顺铂聚乳酸聚乙二醇纳米粒（CDDP—PLA—PEG—NP，或称隐形聚乳酸纳米）的敏感性，并与顺铂（CDDP）对Tca8113和BcaCD885的抗癌活性进行对比观察。方法：用四唑盐显色法（MTr法）检测CDDP—PLA—PEG—NP和CDDP在1～8d内8个时间点对Tca8113和BcaCD885的抗癌活性，计算出2种药物在8个时间点对2种癌细胞的抑癌率和药物的半数抑癌率浓度。结果：CDDP—PLA—PEG—NP和CDDP对Tca8113和BcaCD885均有强的杀伤作用，其杀伤效应均呈时间依赖性和剂量依赖性。结论：经改型后的CDDP—PLA—PEG—NP对口腔鳞癌细胞Tca8113和BcaCD885仍有强大的杀伤作用，为以后进一步的体内实验提供了依据。     

人口腔鳞癌细胞系对淋巴靶向葫芦素BE聚乳酸纳米微粒的敏感性研究

目的:探讨人口腔鳞癌细胞系(Tca8113和BcaCD885)对颈淋巴结靶向性葫芦素BE聚乳酸纳米微粒(CuBE- PLA-NP)的敏感性。方法:用四唑盐显色法(MTT法)检测用不同剂量的CuBE-PLA-NP和CuBE在1~8 d内8个时间点对Tca8113和BcaCD885的抗癌活性,计算出2种药物在8个时间点对2种癌细胞的抑癌率和药物的半数抑癌率浓度。结果:CuBE-PLA-NP和CuBE对Tca8113和BcaCD885均有强的杀伤作用,其杀伤效应均呈时间依赖性和剂量依赖性。结论:经改型后的淋巴靶向CuBE-PLA-NP没有降低CuBE成份的抗癌活性,同时,由于CuBE-PLA-NP具有淋巴靶向性,更有利于杀灭口腔癌颈淋巴结转移灶内的癌细胞。     

OK-432对人口腔鳞癌细胞系Tca8113和BcaCD885药物敏感性研究

目的    探讨OK-432对人口腔鳞癌细胞系Tca8113和BcaCD885的药物敏感性。方法    采用四基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同剂量OK-432在5个时间点（1、2、3、4、5 d）对Tca8113和BcaCD885的生长抑制作用,计算不同时间点OK-432的半数抑癌率（IC50）和生长抑制率,选择药物作用后第4天观察量效关系。结果    OK-432 能明显抑制Tca8113和BcaCD885细胞的增殖生长,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,其抑制效应随药物浓度升高而增高。结论    OK-432能显著抑制Tca8113和BcaCD885增殖,对Tca8113的敏感性比BcaCD885强。     

平阳霉素抑制舌鳞癌细胞系的量效和时效关系及可能的抗癌机制

目的:探讨平阳霉素体外抑制口腔鳞癌细胞系的量效和时效关系及可能的抗癌机制。方法:用不同浓度的平阳霉素培养人舌鳞癌细胞系Tca8113不同时间,以MTT法和荧光显微镜观察细胞增殖抑制情况,流式细胞术分析细胞凋亡率。结果:MTT法和荧光观察显示:不同浓度平阳霉素组间细胞生长抑制率有显著差异(P<0.05),浓度越高,抗增殖效应越明显;随药物作用时间延长,肿瘤细胞生长受抑制递增(P<0.05)。流式细胞术显示:凋亡率随药物浓度增加而增加,但与作用时间长短无关。低浓度药物无法诱导细胞凋亡。结论:平阳霉素在体外能明显抑制人舌鳞癌细胞系Tca8113生长,并具有浓度和时间依赖性。其抗癌机制可能包括细胞毒作用和启动程序化死亡信号等。     

Naa10p 表达对舌鳞癌 Tca8113细胞平阳霉素敏感性的影响

目的：观察 N-α乙酰基转移酶（Naa10p）表达对舌鳞癌 Tca8113细胞平阳霉素（PYM）敏感性的影响。方法：采用慢病毒体系分别构建干扰及过表达 Naa10p 的 Tca8113细胞株,并设立相应的对照细胞 Tca8113-LV-NC,鉴定干扰和过表达效率,MTS 法检测药物处理后各处理组细胞对 PYM的敏感性。结果：干扰 Naa10p 的 Tca8113-LV-shNaa10p 细胞、过表达Naa10p 的 Tca8113-LV-Naa10p 细胞与对照细胞 Tca8113-LV-NC 对平阳霉素的半数抑制浓度（IC50）分别为（20．772±0．106）μg／ml、（2．157±0．123）μg／ml、（6．301±0．069）μg／ml（组间比较,P ＜0．05）。结论：下调 Naa10p 表达可降低口腔鳞癌细胞 Tca8113对平阳霉素的敏感性,上调 Naa10p 表达可增强口腔鳞癌细胞 Tca8113对平阳霉素的敏感性。     

X-性染色体连锁凋亡抑制蛋白与口腔鳞癌细胞Tca8113化疗耐药的关系

目的研究X-性染色体连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）在口腔鳞癌细胞Tca8113中的表达水平,并探讨XIAP表达与Tca8113细胞对化疗药物耐药性之间的关系。方法用平阳霉素（PYM）间歇性加药,逐步递增剂量,采用甲基噻唑基四唑（MTT）法检测药物处理前后细胞对PYM的敏感性,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测XIAP在药物处理前后的各Tca8113细胞组中的表达变化,并探讨XIAP与细胞耐药性的关系。结果Tca8113细胞在PYM间断作用下产生耐受,Tca8113-1-10组、Tca8113-10-10组耐药细胞对PYM的半数有效浓度（IC50）分别为（12.758±0.030）、（18.986±0.150）μg·mL-1。Tca8113-1-20、Tca8113-10-20组耐药细胞对PYM的IC50分别为（26.302±0.072）、（35.294±0.115）μg·mL-1。XAIP的表达水平与细胞对PYM的耐药有相关性（P<0.01）。结论XIAP在口腔鳞癌中的表达水平升高,可能与鳞癌的化疗耐药性有关,这可作为口腔鳞癌基因治疗的一个新靶点。     

口腔鳞癌细胞系对葫芦素BE的敏感性研究

目的：观察具有多种生物活性的葫芦素BE对口腔鳞细胞的杀伤作用,方法：用四唑盐显色法（MTT法）检测人舌低分化鳞癌（Tca8113）和人平高分化鳞癌BcaCD885）细胞系对葫芒素BE的敏感性实验,结果：葫芦素BE对两种癌细胞系均有较高的相对抗瘤活性（RAA值分别为345、148）,结论：实验结果为葫芦素BE治疗口腔癌的进一步研究提供了重要依据。     

银杏酸对口腔鳞癌多药耐药的影响

目的以卡铂（CBP）和平阳霉素（PYM）为诱导物,构建耐药细胞株Tca8113/CBP和Tca8113/PYM,再通过银杏酸（GAs）与化疗药物联用探讨银杏酸对耐药细胞多药耐药（MDR）的影响。方法免疫组织化学检测P-糖蛋白（P-gp）的表达,MTT法确定耐药细胞的耐药指数;不同质量浓度的GAs作用于耐药细胞及亲本细胞,通过MTT法检测对它们的增殖抑制效应,确定GAs的无细胞毒性质量浓度并观察GAs对耐药细胞的逆转作用;GAs与耐药细胞联用诱导细胞一段时间后,再次通过MTT法检测其耐药指数。结果免疫组织化学结果显示,耐药细胞的P-gp阳性表达率明显高于亲本细胞,MTT法确定GAs的无细胞毒性质量浓度为10 μg·mL-1;GAs对Tca8113/CBP和Tca8113/PYM细胞的逆转倍数分别是2.94和2.43,与GAs联用前Tca8113/CBP和Tca8113/PYM细胞的耐药指数分别是3.24和11.9,联用后的耐药指数分别是2.18和4.43。结论本实验成功诱导出了耐药细胞株Tca8113/CBP和Tca8113/PYM,并将银杏酸与化疗药物联用,进一步证实了两者的共用能够增强对Tca8113/CBP和Tca8113/PYM细胞的增殖抑制作用,无细胞毒质量浓度的GAs对Tca8113/CBP和Tca8113/PYM细胞的耐药性有部分逆转作用,且共用一段时间后耐药细胞的MDR水平有所下降。     

腺病毒介导HSV-TK/GCV系统治疗舌癌的实验研究

目的　探讨腺病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (herpessimplexvirusthymidinekinase,HSV TK) /丙氧鸟苷 (ganciclovir,GCV)自杀基因系统对舌鳞癌细胞系的治疗作用。方法　RT PCR检测重组腺病毒感染Tca8113舌鳞癌细胞系后TK基因的表达情况 ;MTT法检测HSV TK/GCV系统对舌癌细胞的杀伤作用及旁观者效应。结果　AdCMVHSV TK可在舌癌细胞中表达TK基因并具有高转染率 ;HSV TK/GCV系统对舌癌细胞具有杀伤作用 ,杀伤呈时间和剂量依赖性 ;但该系统的旁观者效应差。结论　HSV TK/GCV自杀基因系统对舌鳞癌细胞系具有一定的杀伤作用     

Survivin基因在顺铂诱导Tca8113舌鳞癌细胞凋亡中的作用

目的体外观察顺铂（DDP）诱导Tca8113舌鳞癌细胞株凋亡的作用, 同时检测在此过程中凋亡蛋白抑制因子Survivin mRNA表达和蛋白表达的变化。方法将人Tca8113舌鳞癌细胞株进行传代培养,MTT法检测顺铂不同浓度和不同时间对Tca8113舌鳞癌细胞生长的抑制作用,通过RT- PCR检测凋亡过程中Survivin基因mRNA的表达,免疫细胞化学观察Survivin基因的蛋白表达,以及流式细胞术观察顺铂诱导各组Tca8113细胞的凋亡率。结果顺铂可明显抑制Tca8113舌鳞癌细胞的增殖, 其增殖抑制率呈浓度和时间依赖性,细胞凋亡率也呈同样的趋势,最高可达34.1%。1.0 μg/mL DDP处理Tca8113舌鳞癌细胞,Survivin mRNA和蛋白表达水平随时间的增加而降低,在24h达到最低,随后又升高。结论抗凋亡蛋白Survivin在Tca8113舌鳞癌细胞高表达,顺铂可有效诱导Tca8113舌鳞癌细胞凋亡, Survivin mRNA表达在化疗早期随作用时间的延长而降低,Survivin基因的抑制在顺铂诱导的Tca8113舌鳞癌细胞的细胞凋亡中起着重要的作用。     

OK-432���˿�ǻ�۰�ϸ��ϵTca8113��BcaCD885ҩ���������о�

??Objective    To study the cytotoxic effects of OK-432 on the two human oral squamous cell carcinoma Tca8113 and BcaCD885 cell lines. Methods    The inhibitory effects and the 50% inhibition concentration values??IC50??of OK-432 against Tca8113 and BcaCD885 with different drug concentration were evaluated by methyl thiazolyl tetrazolium??MTT??. The time-dependent cytotoxic effects of OK-432 were in 1-5 days??and the dose-effect relationship was investigated at the 4th day. Results    OK-432 had high anticancer effects on Tca8113 and BcaCD885??and compared with the control group they were significantly higher??P < 0.05????and the cytotoxic effects were dose-dependent. Conclusion        OK-432 significantly inhibits the proliferation of  Tca8113 and BcaCD885 cell??and the inhibition on Tca8113 is stronger than on BcaCD885.     

淋巴靶向平阳霉素-活性炭纳米微粒的研制

目的　制备淋巴结靶向性抗癌纳米微粒---平阳霉素-活性炭纳米微粒,用于治疗口腔癌颈淋巴结转移灶。方法　制备活性炭纳米微粒(CH-NP),选择对口腔癌高度敏感的平阳霉素(PYM)为模型药物,考察活性炭纳米微粒对平阳霉素吸附效率。结果　活性炭纳米微粒的粒径分布为136~540 nm,平均粒径为178 nm,活性炭纳米微粒投入比例的增高,对平阳霉素的吸附率相应增高,10∶1质量比下可达到99·38%的吸附。结论　活性炭纳米微粒对平阳霉素的吸附率高,制备PYM-CH-NP行口腔癌周局部注射可使靶向淋巴结转移灶获得有效治疗效果。     

羟基喜树碱纳米微球抑制舌鳞癌Tca8113细胞的实验研究

目的探讨改良闭环羟基喜树碱（HCPT）药用剂型体外抑制口腔鳞癌细胞株的疗效。方法透析法制备载闭环羟基喜树碱/聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯（HCPT/PEG-PBLG）纳米微球,与HCPT羧酸钠盐分别作用于Tca8113细胞,对比观察细胞形态学改变,MTT检测细胞毒作用,流式细胞仪、DNA凝胶电泳检测细胞周期变化及细胞凋亡。结果成功制备HCPT/PEG-PBLG纳米微球,包封率56.8%;载药率7.5%。Tca8113细胞经HCPT和HCPT/PEG-PBLG分别作用后,显微镜形态学观察见细胞凋亡、生长抑制。MTT检测显示HCPT呈现明显细胞毒作用;HCPT纳米微球剂型组48h时生长抑制率低于HCPT普通剂型组（P≤0.01）,至96h时则与HCPT普通剂型组差异已无统计学意义（P〉0.05）。流式细胞仪、DNA凝胶电泳检测细胞周期发生变化：HCPT阻抑细胞于S期,同时诱导细胞凋亡;HCPT/PEG-PBLG组细胞周期与HCPT组改变类似,但S期阻抑增加速度平缓,慢于后者。结论HCPT对Tca8113细胞具有较强的抑瘤作用,阻抑细胞周期于S期并诱导细胞凋亡。HCPT纳米微球剂型具有药物缓释优点,体外实验作用平缓,终末抑瘤效果与HCPT羧酸钠盐剂型持平。     

口腔颌面部肿瘤化疗方案药物敏感性试验

尊文以人舌鳞癌细胞系Ｔｃａ８１１３为对象，利用ＭＴＴ法对口腔颌面部肿瘤化疗常用的八种药物和七种方案进行了药敏试验，ＡＤＭ、５－Ｆｕ、ＣＤＤＰ等抗肿瘤作用较强；而ＰＹＭ、ＭＴＸ、ＶＣＲ单用对Ｔｃａ８１１３细胞无明显作用。化疗方案中以ＭＭＢＤ、ＰＦ、ＰＶＰ方案为佳，卡铂与顺铂在此疗方案中的作用无明显差异。实验结果提示：肿瘤化疗不能只凭经验用药，应注意化疗的耐药性问题。