小柴胡汤治疗子宫内膜异位症的实验研究

目的探讨小柴胡汤对子宫内膜异位症(内异症)大鼠异位内膜的影响及其作用机制。方法将内异症模型大鼠,分为5组,小柴胡汤低剂量组(5g·kg~(-1)·d~(-1),n=10)、小柴胡汤中剂量组(10g·kg~(-1)·d~(-1),n=10)、小柴胡汤高剂量组(15g·kg~(-1)·d~(-1),n=10)、丹那唑组(0．1g·kg~(-1)·d~(-1),n=9)及模型对照组(20ml·kg~(-1)·d~(-1)蒸馏水,n=10),连续给药4周后,利用透射电镜技术及免疫组化的方法,观察小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜的影响；分析异位内膜Fas及Caspase-3蛋白的表达。结果小柴胡汤各组异位内膜生长明显受抑制(P＜0．05,P＜0．01)；异位内膜Fas蛋白、Caspase-3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜。结论小柴胡汤能抑制内异症大鼠异位内膜的生长,其作用机制可能是通过上调Fas蛋白的表达,促进异位内膜细胞的凋亡而实现的。     

小柴胡汤诱导内异症异位内膜细胞凋亡的研究

目的探讨小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜细胞凋亡的影响。方法建立大鼠内异症模型,采用透射电镜技术及免疫组化方法,观察小柴胡汤对异位内膜细胞形态结构和Fas及Caspase-3蛋白表达的影响。结果中、高剂量小柴胡汤(10,15 g.kg-1.d-1)治疗后,异位内膜有较多腺上皮细胞出现凋亡的特征,表现为细胞体积变小,核固缩,胞浆和核染色质凝集,密度增高,细胞间凋亡小体,同时间质细胞中可见一些坏死细胞;异位内膜Fas蛋白、Caspase-3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜。结论小柴胡汤可通过上调Fas蛋白的表达,诱导异位内膜细胞的凋亡。     

小柴胡汤治疗大鼠内异症的实验研究

目的探讨小柴胡汤对子宫内膜异位症大鼠异位内膜的影响及其作用机制。方法建立内异症大鼠动物模型,利用透射电镜技术及免疫组化的方法,观察XCHT对内异症大鼠异位内膜的影响;分析异位内膜Fas及Caspase-3蛋白的表达。结果内异症大鼠给予5g·kg-1·d-1、10g·kg-1·d-1或15g·kg-1·d-1XCHT,连续给药四周后,观察到异位内膜生长明显受抑制;异位内膜Fas蛋白、Caspase-3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜。结论XCHT抑制内异症大鼠异位内膜的生长,其作用机制可能是通过上调Fas蛋白的表达,促进异位内膜细胞的凋亡而实现的。     

小柴胡汤对大鼠子宫内膜异位症COX-2表达的影响

目的探讨小柴胡汤治疗大鼠子宫内膜异位症的作用机制。方法建立大鼠内异症动物模型,将成模鼠随机分为对照组、小柴胡汤组、丹那唑组及联合用药组(小柴胡汤 丹那唑),分别给药进行治疗。采用免疫组化方法,观察分析各用药组在位、异位内膜环氧合酶-2(COX-2)的表达。结果小柴胡汤组和联合用药组大鼠异位内膜COX-2的表达水平明显低于其在位内膜,丹那唑组和对照组则正好相反,异位内膜COX-2的表达明显高于在位内膜。结论小柴胡汤治疗大鼠子宫内膜异位症的作用机制可能是通过下调异位内膜COX-2的表达,从而减少前列腺素的产生而实现的。     

中药异位宁对子宫内膜异位症大鼠Bcl-2、Fas、Caspase-3信号传导通路的影响

目的:通过对比异位宁治疗前后子宫内膜异位症(EM)模型大鼠异位病灶中Bcl-2、Fas、Caspase-3蛋白表达变化,探讨中药异位宁疗效及作用机制。方法:建立EM大鼠模型,采用免疫组化、蛋白印记法,检测大鼠异位病灶内膜中Bcl-2、Fas、Caspase-3含量。结果:异位宁高剂量组及低剂量组Bcl-2阳性表达率较模型组显著降低(P0.01);Fas、Caspese-3阳性表达率较模型组显著增高(P0.01);西药组(达那唑组)与模型组相比(P0.01),亦可降低Bcl-2表达,增加Fas、Caspase-3表达,但疗效低于异位宁高、低剂量组(P0.01)。结论:异位宁可通过降低抗凋亡基因Bcl-2的表达,同时增加促凋亡基因Fas、Caspase-3的表达,增强异位内膜细胞的凋亡能力,使病灶萎缩,从而达到治疗目的。     

小柴胡汤对内异症模型鼠子宫内膜形态学变化的影响

目的:探讨小柴胡汤对子宫内膜异位症(内异症)子宫内膜的影响。方法:采用大鼠内异症动物模型,通过透射电镜技术观察小柴胡汤对子宫内膜细胞结构的影响。结果:中、高剂量(500g/L、750g/L)小柴胡汤对异位内膜生长有明显抑制作用、异位内膜体积明显减小(P<0.01),低剂量(250g/L)小柴胡汤组异位内膜体积也有减小(P<0.05),而对照组体积无明显变化(P>0.05);透射电镜下可见中、高剂量小柴胡汤组治疗后腺上皮细胞出现凋亡特征,表现为细胞体积变小、核固缩、胞浆和核染色质凝集、密度增高、细胞间凋亡小体,同时间质细胞中也可见一些坏死细胞。结论:小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜生长有明显抑制作用,其作用机制可能是通过调整宿主局部环境中的免疫状态和功能,从而诱导细胞的凋亡和坏死。     

复方莪术散对子宫内膜异位症患者异位和在位内膜中VEGF表达的影响

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在内异症患者异位和在位子宫内膜中的表达变化及意义.研究复方莪术散对内异症患者异位和在位子宫内膜中VEGF表达的影响,从而探讨其临床治疗内异症的作用机制.方法:采用免疫组化SP法分别检测2009年7月至2011年1月我院妇科因卵巢型内异症行腹腔镜手术治疗的患者23例术前予复方莪术散治疗3个月的内异症患者(治疗组)、30例未经治疗的内异症患者(内异症组),了解异位和在位子宫内膜及30例子宫肌瘤患者(对照组)的子宫内膜中VEGF的表达水平.结果:内异症患者在位内膜中VEGF的表达水平(0.3263 ±0.0285)显著高于对照组子宫内膜(0.1730 ±0.0143)(P ＜0.05),异位内膜中VEGF的表达水平(0.2258 ±0.0093)明显低于在位内膜(P＜0.01),而高于对照组子宫内膜(P＜0.05),差异均有统计学意义.复方莪术散治疗组异位、在位内膜中VEGF的表达水平(0.1820±0.0056,0.2587 ±0.0091)明显降低,与内异症组比较,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论:内异症患者异位和在位内膜中VEGF的表达明显增强,与内异症的发生、发展密切相关.复方莪术散可下调内异症患者异位、在位内膜中VEGF的表达水平,从而可能在抑制内膜组织新生血管形成方面发挥治疗作用.     

莪术散对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜组织Cyclin A及P21表达的影响

目的:探讨子宫内膜异位症(内异症)大鼠在位和异位组织中细胞周期蛋白A(Cyclin A)及P21表达的差异,从细胞周期调控的角度探讨莪术散治疗子宫内膜异位症的相关机制,以及对其调节作用。方法:用自体移植法建立内异症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分成复方莪术散高、低剂量组,孕三烯酮对照组,模型对照组和空白对照组,共5组,以1 mL/100 g灌胃给药。采用免疫组化法测定给药后大鼠在位以及异位内膜组织中Cyclin A及P21的表达。结果:Cyclin A在子宫内膜异位症组中其阳性表达率较其在正常子宫内膜组织中增高,P21蛋白在子宫内膜异位症组中其阳性表达率较其在正常子宫内膜组织中明显降低,Cyclin A与P21蛋白在子宫内膜异位症组中的表达呈负相关;复方莪术散在一定剂量关系上能显著抑制异位组织的生长,缩小异位病灶体积,抑制Cyclin A的表达,提高P21蛋白的表达,与模型对照组比较有统计学差异(P0.05)。结论:莪术散可抑制Cyclin A的表达,提高P21蛋白的表达,从细胞周期调控的角度证实复方莪术散对子宫内膜异位症具有调节作用,这可能是其治疗子宫内膜异位症的机制之一。     

复宫宁对子宫内膜异位症大鼠异位内膜雌、孕激素受体表达和动情周期的影响

目的 探讨复宫宁治疗子宫内膜异位症(内异症)的作用机理.方法 建立大鼠内异症动物模型,采用免疫组化SP法检测异位内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达和阴道涂片法观察动情周期.结果 复宫宁高、中、低剂量组能显著降低异位内膜ER、PR的表达并显著改善内异症大鼠的动情周期(P<0.05).结论 复宫宁可能通过抑制异位内膜细胞ER、PR的合成而发挥治疗作用,并具有整体调节作用.     

少腹逐瘀汤对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜HIF-1α表达的影响

目的观察少腹逐瘀汤对子宫内膜异位症模型大鼠异位病灶中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨少腹逐瘀汤治疗内异症的机制。方法 48只动情周期正常的SD雌性大鼠采用自体移植法建立EMT大鼠模型,造模成功的38只大鼠随机分为模型组及治疗组,治疗组给予少腹逐瘀汤灌胃,给药4周。测量治疗前后子宫内膜异位病灶体积,HE染色观察异位内膜组织形态,western blot法检测HIF-1α蛋白表达。结果治疗前模型组与治疗组异位病灶体积差异无统计学意义(P0.05);治疗后,模型组异位病灶体积较治疗前增大(P0.05),治疗组异位病灶体积较治疗前缩小(P0.01),治疗组异位病灶体积小于模型组(P0.01)。治疗组异位病灶中HIF-1α蛋白表达明显低于模型组(P0.05)。结论少腹逐瘀汤能够明显缩小内异症模型大鼠异位病灶体积,可能与减少了HIF-1α的蛋白表达有关。     

消癥注射液对大鼠子宫内膜异位囊肿的治疗机理初探

目的:探讨消癥注射液治疗子宫内膜异位症的作用机制。方法:采用大鼠自体子宫内膜移植术建立实验性子宫内膜异位囊肿模型,采用囊肿腔内注射给药方式,分别观察消癥注射液和无水酒精对模型鼠外周血清、在位内膜组织、异位内膜组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。结果:消癥注射液对上述组织中VEGF均有不同的下调或抑制作用,与模型组相比有显著性差异(P<0.05),消癥注射液高浓度组、低浓度组与无水酒精相比无显著性差异(P>0.05),但是消癥注射液低浓度组几组数值更接近正常组,以它效果最好。结论:消癥注射液对实验性异位症有显著的治疗效果,其中抗血管生成可能是其作用机理之一。     

蓬甲饮治疗子宫内膜异位症SD大鼠的作用机制探讨

目的探讨蓬甲饮治疗子宫内膜异位症的作用机理。方法建立子宫内膜异位症大鼠模型,应用免疫组化法检测凋亡调节蛋白Caspase-3、Survivin在诱发性子宫内膜异位症动物模型的异位、在位内膜中的表达,从免疫的角度研究蓬甲饮、乌丹丸治疗子宫内膜异位症的作用机制。同时,用TUNEL法检测出细胞的凋亡率。结果与空白组比较,蓬甲饮低、中、高剂量组及乌丹丸组Caspase-3的表达增加(P<0.05),与空白组比较,蓬甲饮中、高剂量组及乌丹丸组Survivin的表达减少(P<0.05)。结论蓬甲饮和乌丹丸均增加Caspase-3的表达,降低Survivin的表达,促进细胞凋亡。     

复方莪术散对子宫内膜异位症患者RANTES表达的影响

目的探讨复方莪术散对子宫内膜异位症(内异症)患者异位和在位子宫内膜中T淋巴细胞分泌的受激活调节因子(RANTES)表达的影响,为复方莪术散临床应用寻找理论依据。方法选择卵巢型内异症行腹腔镜手术治疗的患者53例,术前予复方莪术散治疗3个月的23例内异症患者作为A组,术前未经治疗的30例内异症患者作为B组,另选择同期行腹腔镜手术的30例子宫肌瘤患者作为C组,采用免疫组化SP法检测A组和B组患者异位和在位子宫内膜及C组子宫内膜中RANTES的表达水平。结果内异症患者在位子宫内膜中RANTES的表达水平显著高于C组(P均<0.05),异位内膜中RANTES表达水平明显高于在位内膜(P<0.001)。A组异位、在位内膜中RANTES的表达水平明显低于B组(P均<0.05)。结论内异症患者异位和在位内膜中RANTES的表达明显增强,与内异症的发生、发展密切相关。复方莪术散能够下调内异症患者异位、在位内膜中RANTES的表达水平,从而干预在位内膜的生物学特性,在抑制炎性免疫反应方面发挥治疗作用。     

小柴胡汤中柴胡不同剂量对正常大鼠胃窦组织MTL,AChE,NO含量的影响

目的:观察小柴胡汤中柴胡不同剂量对正常大鼠胃窦组织胃动素(MTL)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、一氧化氮(NO)的影响,并探讨其作用机制.方法:40只大鼠随机分为4组:正常对照组、小柴胡汤组[柴胡高剂量组(高)、柴胡中剂量组(中)、柴胡低剂量组(低)].每天ig给予相应的小柴胡汤水煎液药液浓缩剂(高、中、低剂量分别为13,10,9.1 g·kg-1)或等容积生理盐水ig,连续3d.末次给药后,ELISA法测定胃窦组织MTL,AChE,NO的含量.结果:与正常对照组比较,柴胡剂量最高的小柴胡汤组(高)胃窦组织MTL,AChE的含量升高(P＜0.05),而胃窦组织NO的含量则无统计学差异;小柴胡汤组(中)、(低)的胃窦组织MTL,AChE,NO与正常组比均无统计学差异.结论:应用高剂量柴胡的小柴胡汤促进胃动力的作用机制,可能与增加胃窦组织MTL,AChE的含量有关.     

内异康复栓对子宫内膜异位症大鼠异位和在位内膜雌、孕激素受体的影响

目的观察内异康复栓直肠给药对子宫内膜异位症大鼠异位和在位内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的不同影响,探讨其作用机理。方法将子宫内膜异位症大鼠随机分为内异康复栓高、中剂量组及丹那唑组、丹莪妇康煎膏组、模型组、空白组,采用免疫组化SP法检测ER、PR的表达。结果内异康复栓高、中剂量组能显著降低异位内膜ER、PR的表达(P<0.05),并对在位内膜下降的ER、PR水平有上调作用(P>0.05)。结论内异康复栓可能通过抑制异位内膜细胞内ER、PR的合成而发挥治疗作用,且对在位内膜异常的ER、PR表达有一定的调节作用。     

血管内皮生长因子在子宫内膜异位症发生中的作用探讨

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）在子宫内膜异位症（EM）发生发展中的作用。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定EM组及对照组腹腔液及血清VEGF含量,采用免疫组织化学SP法检测异位内膜、在位内膜和正常子宫内膜组织中VEGF的表达。结果：EM组腹腔液及血清VEGF含量明显高于对照组,2组比较有极显著性差异（P〈0.01）;VEGF在异位内膜组、在位内膜组和对照组均有表达,阳性表达率分别为63.33%、46.00%、23.33%,表达强度依次减弱,3组阳性构成比差异有统计学意义,3组中任何2组之间差异均有统计学意义（P〈0.01）。异位内膜组和在位内膜组VEGF表达分泌期强于增生期,差异有显著性（P〈0.05）;对照组增生期和分泌期表达强度均较弱,差异无显著性意义（P〉0.05）。结论：VEGF在EM发生发展中发挥重要作用。     

COX-2、NFP在子宫内膜异位症不同证候的表达研究＊

目的 探讨神经丝蛋白（NFP）及环氧化酶2（COX-2）在子宫内膜异位症（EMT）及其两种中医证候（气滞血瘀证、肾虚血瘀证）中的表达，以及二者在EMT子宫内膜中表达的相关性。方法 取气滞血瘀证、肾虚血瘀证各6例EMT患者的在位和异位子宫内膜及6例正常妇女的在位子宫内膜，共5组，30例标本。使用免疫组织化学S-p法观察各组标本中NFP、COX-2的表达情况。结果 ①NFP在气滞血瘀证在位内膜组和肾虚血瘀证在位内膜组的表达与对照组比较，有显著性差异（P < 0.01）；在气滞血瘀证异位内膜组和肾虚血瘀证异位内膜组的表达与对照组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）；两证候组在位内膜组间比较，有显著性差异（P < 0.01）；两证候组异位内膜组间比较，结果无统计学差异（P > 0.05）。②COX-2在气滞血瘀证在位内膜组和肾虚血瘀证在位、异位内膜组的表达与对照组相比，均有显著性差异（P < 0.01）；气滞血瘀证异位内膜组的表达与对照组相比，差异有统计学意义（P < 0.05）；两证候组在位内膜组间比较及异位内膜组间比较，均无统计学差异（P > 0.05）。③NFP和COX-2在所有EMT患者在位内膜组的表达相关性检验，无统计学意义（P > 0.05）；在所有异位内膜组的表达相关性检验，无统计学意义（P > 0.05）。结论 NFP及COX-2在EMT的发生、发展中起到了一定作用，可能成为EMT的诊断标志物，为其治疗提供了潜在的新靶点。其中NFP在EMT不同证候在位内膜组的表达差异具有显著性，可能作为EMT不同证候的特异性蛋白。NFP和COX-2在EMT患者内膜组织中的表达无相关性。     

柴越汤对抑郁症模型大鼠行为学和脑内单胺类神经递质影响的实验研究

目的:拟探讨柴越汤对慢性应激抑郁模型大鼠行为学和脑内单胺类神经递质影响,进而探讨其可能的作用及其机理。方法:采用孤养结合慢性轻度不可预见性应激复合造模法制备抑郁症模型,将60只雄性Wistar大鼠随机分成空白对照组、抑郁模型组、西药对照组、柴越汤组、小柴胡汤组和越鞠丸组。通过体重变化、糖水消耗和敞箱实验进行行为学评价,酶联免疫法测大鼠下丘脑神经递质5-HT和NE的变化,观察柴越汤对抑郁模型大鼠上述指标的影响。结果:21d造模和用药后发现模型组体重增长缓慢,治疗组体重较模型组体重明显增加(P0.001);在敞箱实验中造模前各组大鼠行为学得分和糖水消耗百分比均无明显差异,造模和用药后发现模型组水平运动和垂直运动明显减少,治疗组能明显增加抑郁模型大鼠行为学得分和糖水消耗百分比与模型组比较均有统计学意义(P0.001)。酶联免疫法检测结果显示,与正常组比较模型组大鼠脑内5-HT、NE均明显下降有统计学意义(P0.001),治疗组大鼠5-HT、NE均大于模型组,其中西药对照组、柴越汤组和越鞠丸组大鼠脑内5-HT、NE含量高于小柴胡汤组,有统计学意义(P0.01)。结论:柴越汤、小柴胡汤与越鞠丸对抑郁症具有良好的疗效,拆方后,小柴胡汤组、越鞠丸治疗抑郁症疗效较柴越汤略有下降。其作用机理可能与增加脑内5-HT、NE的含量,协调多种神经递质的失衡等有关。