皮肤切片制作的体会

<正>皮肤是最大的器官。被覆于人体或动物的全身表面,它由上皮性的表皮及其下结缔组织性真皮组成。表皮和真皮内含有丰富的感觉神经末梢,皮肤及皮下组织内有许多附属器(毛发、皮脂腺和汗腺),因为皮肤组织的组织结构复杂、硬     

为什么人上年纪皱纹多?

皮肤由表及里分为表皮、真皮和皮下组织“等三层组织(见图9)。真皮是纤维性结缔组织,含有较多的胶原纤维、弹性纤维和肌纤维等。皮下组织含有大量的脂肪细胞,其厚度因年龄、性别和营养状况等不同而有很大差别。当真皮内的纤维发生退化、萎缩及皮下组织中脂肪有所减少时,皮肤将失去弹性,变得松弛,产生折痕,这就是所说的皱纹。     

中医外治法浅说（四）

四、药物外治的吸收及机理药物外治的方法种类繁多,其吸收途径归纳不外皮肤(俞穴)和粘膜两条途径。(一) 皮肤透入:中药经皮肤透入吸收的方法甚多,如敷、贴、涂、擦、熏、蒸、洗、浴等。皮肤是由表皮、真皮、皮下组织三层组成。一般药物若能透过表皮屏障,都容易从真皮吸收到人的身体里。因为真皮有90％是血管丰富的结缔组织,药物通过活跃的血液     

皮肤切片制作的体会

皮肤是最大的器官，被覆于人体或动物的全身表面，它由上皮性的表皮及其下结缔组织性真皮组成。表皮和真皮内含有丰富的感觉神经末梢，皮肤及皮下组织内有许多附属器（毛发、皮脂腺和汗腺），因为皮肤组织的组织结构复杂、硬度不一、韧性较大等特点，在切片中常会出现有皱褶、易脱片等现象。皮肤较为坚硬不易切片，在制作切片过程中有一定的难度。本文根据我们长期做皮肤切片的经验，谈谈我们在制作皮肤切片方面的一些体会。     

原发性皮肤印戒细胞癌表达细胞角蛋白20的免疫反应性

原发性皮肤印戒细胞癌(PCSRCC)是一种非常罕见但有特殊临床病理学表现的疾病,与转移性腺癌不易区别。其定义为局限于真皮和皮下组织、不累及表皮的一种播散性恶性上皮瘤,表现为不等量的印戒细胞,不伴内脏腺癌。作者报道2例PCRSCC,分别累及眼睑和腋窝。系统检查后,无1例患者证实     

重建毛囊的组织学研究

目的：观察毛囊真皮鞘成分和上皮成分细胞间的相互作用和相互影响。方法：采用细胞三维培养技术将分段毛囊上皮细胞分别与毛乳头细胞、真皮鞘细胞及真皮成纤维细胞进行器官型培养来重建表皮和毛囊。结果：在真皮成纤维细胞凝胶上培养的毛囊间表皮细胞、上段、下段和球部细胞重建出了表皮，而上段细胞形成的表皮最厚，球部细胞形成的表皮最薄；在毛囊真皮鞘细胞胶原凝胶上时上段和下段细胞重建出了毛囊结构。结论：首次成功地证明毛囊     

表皮干细胞的研究现况

皮肤是人体面积最大的器官，由表皮和真皮构成，借皮下组织与深层组织相连。皮肤与外界直接接触，能阻挡异物和病原体侵入，防止体液丢失，具有重要的屏障保护作用。皮肤是再生能力较强的组织，皮肤的最外层表皮，主要是由角质形成细胞组成。表皮的基底层由位于基底膜上的基底细胞组成，是表皮角质形成细胞的生发层。基底层的角质形成细胞经过棘细胞层和颗粒细胞层逐步分化成熟并不断从角质层的表面脱落，丢失的细胞由基底层的增殖细胞补充。     

颈部受压皮肤组织病理切片染色法--Poley''''s改良法

在制作颈部受压皮肤组织病理切片时,传统上常采用Mallory's法[1]和Ogata's[2].但这两种方法只靠真皮结缔组织的变色反应为鉴定依据,而表皮的正常部与受压部对比不明显.在有些案例中,真皮结缔组织用Mallory's法和Ogata's法确实有呈阴性者,而poley's改良法[3]可使受压的表皮染粉红色,而正常表皮染淡绿色,其颜色对比很清晰,可作为重要的鉴定依据.现将Poley's改良法介绍如下.     

以表皮细胞及脱细胞真皮构建组织工程皮肤

目的 体外扩增培养表皮细胞，复合脱细胞真皮构建组织工程皮肤，以促进其进一步临床应用。方法 将人表皮细胞进行体外培养扩增后，以生长良好的表皮细胞接种于制备好的异种（猪）无细胞真皮支架上，行气液界面联合体外培养，构建组织工程皮肤。观察细胞生长情况及复合皮结构。结果 培养的表皮细胞扩增良好，脱细胞真皮支架去细胞完全，表皮细胞在脱细胞真皮上可以生长，可体外构建复合皮肤。结论 利用体外扩增的表皮细胞及制备的脱细胞真皮可体外联合构建具有复层结构的组织工程皮肤。     

第二代细胞活能rhbFGF在切开法重睑术中的应用体会

第二代细胞活能rhbFGF即“基因重组人碱性成纤维细胞生长因子”,是人体的一种极微量的细胞调节蛋白,能促进多种细胞增殖分化,促进细胞基质分泌,促进毛细血管生成,促进神经细胞生长和神经纤维再生,并能改变细胞的趋化性,诱导细胞迁移.其主要作用于起源于中胚层和外胚层的组织细胞,而构成皮肤的三层组织—表皮来自外胚层,真皮及皮下组织来自于中胚层,均为rhbFGF所作用的靶细胞.因此,合理外用     

低氧环境对创面修复主要效应细胞表达MMP-9的作用

目的 探讨低氧(2％O2)对创面修复主要效应细胞(表皮细胞及真皮成纤维细胞)表达MMP-9的影响.方法 常规培养人表皮细胞及人真皮成纤维细胞,分为常氧组和低氧组(设低氧培养3h和6h两个组),采用Western blot、明胶酶谱法和荧光定量PCR法检测人表皮细胞和真皮成纤维细胞MMP-9细胞蛋白表达、MMP-9细胞外分泌和MMP-9转录水平变化.结果 常氧培养的表皮细胞中,MMP-9呈一定程度的基础表达和细胞外分泌.与常氧组比较,低氧能明显促进表皮细胞MMP-9的蛋白表达(6h时增强约20％,P＜0.01)和MMP-9的细胞外分泌[(44.03±3.00)vs(60.64±3.77),P＜0.01].常氧与低氧条件下真皮成纤维细胞极少表达和分泌MMP-9.荧光实时定量PCR结果显示,低氧培养条件下表皮细胞MMP-9 mRNA水平显著增高,常氧对照组为(1.67±0.69),低氧6h组为(5.47 ±0.51),两者比较差异有统计学意义(P =0.002).结论 低氧刺激能显著诱导表皮细胞,而非真皮成纤维细胞,表达和分泌MMP-9,这一作用可能与低氧刺激促进MMP-9的转录有关.     

皮肤T细胞淋巴瘤14例报告

本文报告一组原发于皮肤的T细胞淋巴瘤,蕈样肉芽肿(MF)8例及Sézary综合征例;另一组非MF的皮肤T细胞淋巴瘤5例。前组患者以非特异性皮损起病,病程缓慢全身症状及器宫累及少。肿瘤细胞核呈脑回状,浸润真皮浅层并掺入表皮。后组患者以特异性皮损起病,全身症状明显,器官累及多见。肿瘤细胞呈曲核型或原幼淋巴细胞样,肿瘤细胞浸润真皮及皮下组织。免疫标记检查结合细胞化学染色证实所有患者的肿瘤细胞均具有T淋巴细胞膜的表面标记。     

巴马香猪无细胞真皮制备及其生物学特性

目的制备来源于巴马香猪皮肤的无细胞真皮，研究其生物学特性，为其异种无细胞真皮应用于烧伤及创伤修复临床形成积累基础研究资料。方法研究两种不同的酶（0．1％dispaseII和0．25％胰蛋白酶）处理去表皮，结合去污剂0．5％Triton X-100处理不同时间制作无细胞真皮的方法，随后对不同方法制作的无细胞真皮进行常规石蜡切片，显微镜下观察其结构，并进行微生物检测和细胞毒性检测。结果胰蛋白酶法去除表皮彻底，且基底膜保留完整，dispaseII也能完整地去除表皮，但对基底膜有破坏；0．5％Triton X-100室温下振荡处理24h能完全去除真皮中的细胞成分及皮肤附属器且对皮肤胶原结构没有破坏；在所用试剂中加入0．02％的NaN3能够起到完全抑菌的作用；制作的无细胞真皮无细胞毒性。结论无细胞真皮内已经完全没有细胞成分及皮肤附属器，抗原性显著降低，无细胞无毒性，可替代异体无细胞真皮基质作为创伤修复的真皮支架。     

尖锐湿疣与假性湿疣组织病理和超微结构的鉴别研究

对６５例尖锐湿疣及２７例假性湿疣进行组织病理及超微结构观察。尖锐湿疣的组织病理特征为表皮角化过度伴角化不全，棘层肥厚，表皮突延长，表皮内散在或群集的空泡细胞，真皮乳头部毛细血管增生、扩张，其周围有淋巴细胞及组织细胞浸润；假性湿疣外型呈乳头瘤样突起，其粘膜上皮与正常粘膜相似，呈分布均匀、大小一致的空泡样，无异形性，粘膜上皮包绕的疏松结缔组织中毛细血管扩张。尖锐湿疣的超微结构特征为表皮各层细胞核增大、肿胀，有些增生的核中可见１～３个核内小体及染色质间颗粒和染色质周围颗粒；假性湿疣未见核内小体，亦未见染色质间颗粒和染色质周围颗粒，结缔组织中毛细血管扩张。以上不同点有助于尖锐湿疣与假性湿疣的鉴别诊断。     

表皮细胞和真皮微粒皮片混合移植的体会

为了寻找一种理想的扩大自体皮的移植方法,我们根据体外培养表皮细胞用胶原作底物有促进细胞贴壁和增殖的作用,取病人自体皮,胰酶消化,分离出表皮和真皮,表皮用DMEM液制成细胞悬液,真皮剪成微粒与表皮细胞充分混合后供切痂的创面自体移植,其上覆盖异体皮。皮片扩大倍数10～20     

C_(57)BL/6无毛小鼠皮肤组织学研究

目的：观察Ｃ５７ＢＬ／６无毛小鼠皮肤组织学结构。方法：１０％甲醛固定,行石蜡切片,ＨＥ染色。结果：动物表皮有一层角化过度的角质层,毛干消失,毛球结构不正常,毛囊内为一些角化物质,有的变为空囊腔。真皮深层及皮下组织内含有大量黑色素细胞,并有树突状突起。结论：Ｃ５７ＢＬ／６无毛小鼠真皮深层及皮下组织内含有大量黑色素细胞,可用于黑色素沉着疾病及黑色素瘤的研究。     

组织工程皮肤修复动物皮肤缺损的实验研究

目的利用表皮细胞复合脱细胞真皮构建组织工程皮肤，探讨其用于修复动物皮肤缺损的可行性。方法将扩增的人表皮细胞复合异种（猪）脱细胞真皮支架构建组织工程皮肤，将制备的人工皮肤移植于裸鼠全层皮肤缺损，观察创面愈合情况并进行直接免疫荧光鉴定。结果构建的组织工程皮肤可用于修复裸鼠全层皮肤缺损，创面愈合良好，新生的表皮由移植的人表皮细胞增殖形成。结论利用表皮细胞复合脱细胞真皮构建的组织工程皮肤可用于修复动物全层皮肤缺损。     

SD大鼠皮肤组织病理学观察

目的观察不同日龄SD大鼠皮肤组织学结构。方法10％甲醛固定，行石蜡切片，HE染色。结果新生大鼠皮肤较薄，透明层缺乏，皮脂腺发育良好。6月龄时表皮、真皮和皮下组织明显增厚，毛囊增粗，生长旺盛，毛囊深入皮下脂肪层。24月龄时，大鼠皮脂腺及汗腺萎缩，表皮变薄，真皮成纤维细胞、血管数量减少，弹力纤维变细。结论不同日龄SD大鼠皮肤组织学结构有差异。     

银屑病皮损表皮真皮的分离与培养

银屑病皮损表皮真皮的分离与培养张泰山，王刚，刘玉峰，李承新（西京医院皮肤科，海军总医院皮肤科）关键词　银屑病，表皮，真皮，细胞培养中图法分类号　Ｒ７５８．６３为了深入研究银屑病表皮和真皮组织细胞的生物学特性，我们用胰酶消化的方法分离表皮和真皮并对其角...     

激光微孔脱细胞猪真皮支架对Ⅲ度皮肤烧伤血管化的影响

目的: 探讨新的脱细胞方法配合激光打孔制备的激光微孔脱细胞猪真皮支架对大鼠Ⅲ度皮肤烧伤创面血管化的影响。方法: 将激光微孔脱细胞猪真皮(A组)、普通打孔脱细胞猪真皮（B组）两种真皮支架分别移植至Ⅲ度皮肤烧伤清创后创面,另设无真皮支架对照创面（C组）,1周后加植表皮,大体观察植入真皮支架1、2、3周创面的修复情况,并通过HE染色和免疫组化标记创面中CD31、α-SMA表达阳性血管并计数。结果: 制备的脱细胞猪真皮呈瓷白色,有光泽,柔软;显微镜下未见细胞残留。加植表皮后,A组较B组存活率高。两组支架植入后及无支架对照组1～3周创面中CD31、α-SMA表达阳性血管数持续增加,其中两组真皮支架均较无支架组多,差异有统计学意义(P<0.05); A组显著高于B、C组(P<0.05)。结论:该方法制备的激光微孔脱细胞猪真皮基质能快速血管化,提高表皮存活率,为一种较理想的真皮替代物。