葛根素对体外破骨细胞性骨吸收的影响

目的研究葛根素对体外破骨细胞性骨吸收的影响.方法分离破骨细胞,与牛骨磨片共培养,分别加入10-8、10-7、10-6 mol/L的葛根素,以17β-雌二醇10-8 mol/L为阳性对照药,利用相差倒置显微镜观察破骨细胞吸收牛骨磨片的情况.于培养3、5、7 d计数各组骨吸收陷窝数目的变化,并进行显微摄片和图像分析.结果与正常对照组相比,葛根素10-8、10-7、10-6 mol/L及17β-雌二醇10-8 mol/L能使体外培养破骨细胞性骨吸收数目和吸收陷窝面积呈剂量依赖性减少.结论葛根素在体外能直接抑制破骨细胞性骨吸收.     

低氧/低氧诱导因子-1α通路对成骨细胞与破骨细胞耦联的调控作用

目的 探讨低氧/低氧诱导因子(HIF) -1α通路对成骨细胞与破骨细胞耦联的调控作用.方法 取出生2～3d条件性基因敲除小鼠颅盖骨的成骨细胞与4～8周龄C57BL/6小鼠股骨破骨细胞的前体细胞,建立基因敲除小鼠成骨细胞与破骨细胞前体细胞共培养体系(野生型、HIF-1α-/-、Vhl-/-、HIF - 1α-/-/Vhl -/-共培养).采用RT-PCR技术检测成骨细胞中核因子κB受体活化因子配体(RANKL) mRNA和骨保护素(OPG) mRNA的表达以及破骨细胞中标志酶基因TRAP mRNA的表达,甲苯胺蓝染色观察破骨细胞溶骨形成的骨陷窝.结果 RT-PCR检测结果显示:与野生型共培养比较,HIF-1α-/-共培养的成骨细胞中RANKL mRNA表达上调、OPG mRNA表达下调(均P＜0.05),破骨细胞TRAP mRNA表达上调;Vhl-/-共培养和HIF-1α-/-/Vhl-/-共培养的成骨细胞中RANKL mRNA表达下调、OPG mRNA表达显著上调(均P＜0.05),破骨细胞TRAP mRNA表达下调;随着共培养时间的延长,成骨细胞中RANKL mRNA和OPG mRNA表达均逐渐减少,而破骨细胞TRAP mRNA表达均逐渐增加.甲苯胺蓝染色倒置显微镜观察显示:共培养第9天,破骨细胞骨吸收陷窝出现;随着共培养时间的延长,骨吸收陷窝面积和深度逐渐增加;与野生型共培养比较,HIF-1α-/-共培养的破骨细胞骨吸收陷窝较大且较深,Vhl-/-和HIF-1α-/-/Vhl-/-共培养的破骨细胞骨吸收陷窝较小且较浅.结论 低氧/HIF-1α通路激活后,成骨细胞抑制破骨细胞的分化功能;低氧/HIF-1α通路阻断后,成骨细胞促进破骨细胞的分化功能.     

IL-11与成骨细胞和破骨细胞的关系研究进展

<正>成骨细胞成骨和破骨细胞骨吸收在骨代谢平衡中起着重要作用。骨形成和骨吸收之间的失衡会导致多种疾病,如原发性骨质疏松症、风湿性关节炎等。成骨细胞和破骨细胞受多种因素调控:全身因素[如甲状旁腺素(PTH)、1,25(OH)_2D_3、降钙素、性激素等]骨局部因子[如白介素1,4,6,11,18、肿瘤坏死因子(TNF)、转化生长因子β(TGF_β)等]和遗传因素(如维生素D受体基因多态性、胶原基因变异、胶原酶基因变异等)。近年来的研究表明,许多全身性激素对骨代谢的影响需要骨局部因子参与或介导,因此骨局部因子在成骨细胞和破骨细胞生长、代谢方面起着十分重要的调控作用。IL-11是新近发现对成骨细胞和破骨细胞有重要作用的细胞因子。     

整合素αVβ3在人胆管癌组织中的表达及其临床意义

目的研究整合素αVβ3在人胆管癌组织中的表达及其与胆管癌的临床病理关系.方法采用免疫组织化学方法检测47例人胆管癌组织及正常癌旁胆管组织中整合素αVβ3的表达.结果整合素αVβ3表达于人胆管癌细胞及胆管癌组织中的新生血管细胞,47例标本均呈阳性表达,其表达强度与是否伴有肿瘤转移有显著差异(P<0.05),而与性别、癌组织分化程度无关.结论整合素αVβ3可能在胆管癌细胞的恶性生物学行为中具有重要的作用,检测整合素αVβ3表达可以作为胆管癌预后判断的依据之一.     

小檗碱对大鼠骨髓源性破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响

目的：研究小檗碱对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响,探讨小檗碱抑制骨吸收的细胞学基础。 方法：采用原代培养的成骨细胞和骨髓单核细胞联合培养的方法,在1,25-（OH）2维生素D3和地塞米松作用下,使骨髓单核细胞分化形成破骨细胞。通过相差显微镜观察细胞形态,通过抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate—resistant acid phosphatase,TRAP）染色和观察骨片上骨吸收陷窝的形成鉴定破骨细胞。磷酸苯二钠法测定破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,计算机图像分析技术测定骨片上破骨性骨吸收陷窝的面积。 结果：小檗碱在0．1～10μmol／L范围内,浓度依赖性地抑制TRAP阳性多核破骨细胞的形成和TRAP活性,减少破骨性骨吸收陷窝的面积;在10μmol／L浓度下,对破骨细胞的抑制作用最强,对TRAP阳性多核破骨细胞的形成和TRAP活性的抑制率分别达到了60．45％和42．12％,骨吸收陷窝面积减少72．69％。 结论：小檗碱通过抑制破骨细胞的形成、分化和骨吸收功能减少骨质的丢失。     

肝细胞生长因子对体外培养的人子宫内膜细胞增殖的影响

目的观察肝细胞生长因子对体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞的影响及其最佳剂量,并检测该因子对子宫内膜细胞白血病抑制因子、整合素αVβ3表达的影响。方法用MTT法检测肝细胞生长因子对腺上皮细胞的增殖影响,并用免疫组化方法检测白血病抑制因子,整合素αVβ3的表达。结果肝细胞生长因子能促进体外培养的腺上皮细胞增殖,在浓度为20 ng/mL时为峰值。且加药组白血病抑制因子,整合素αVβ3的表达为强阳性。结论 10 ng/mL的HBF即能促进腺上皮细胞的增殖,20 ng/mL时增殖水平较对照组上调3.1倍,用免疫组化检测加药组白血病抑制因子,整合素αVβ3的表达呈强阳性。     

破骨细胞对成骨细胞作用的研究

目的：探讨破骨细胞及其亚细胞结构对成骨细胞生长和功能的影响。方法：在获取大量破骨细胞的基础上，以细胞生物学方法探讨破骨细胞及其产生骨吸收后，破骨细胞、细胞培养基和亚细胞结构对成骨细胞生长和功能、成骨细胞核结合因子Cbfα1表这的影响。结果：破骨细胞及破骨细胞产生骨吸收后，破骨细胞、细胞培养基和亚细胞成分对成骨细胞的生长和功能均有促进作用，可使成骨细胞的Cbfα1mRNA的表达明显增强。     

二磷酸盐对破骨细胞的影响

二磷酸盐自30多年前被发现对破骨细胞有抑制作用以来,已成为临床上重要抗骨吸收药物。二磷酸盐分为含氮二磷酸盐和不含氮二磷酸盐两类。含氮二磷酸盐对抑制破骨细胞骨吸收机制是通过抑制甲羟戊酸途径实现的,而不含氮二磷酸盐则通过竞争性抑制ADT/ATP移位酶而发挥作用。同时二磷酸盐对成骨细胞与破骨细胞间信号的调节也有重要作用,但其对破骨细胞的具体调节机制尚存在较大争议,仍有待进一步研究。     

IL—1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究

目的：比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法：体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察ＩＬ－１α对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果：ＩＬ－１α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加；其作用随剂量增加而增强；ＩＬ－１α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论：ＩＬ－１α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。     

牙周炎动物模型的研究

目的 :建立一种典型、稳定的牙周炎动物模型。方法 :将 2 4只健康大耳白兔随机分为 4组 ,磨牙颈部结扎钢丝 ,在兔的牙周组织注射 IL - 1-β、TNF-α,以生理盐水为对照 ,分不同时期取材做组织学观察和评价。结果 :实验组 15 d后牙龈组织血管扩张充血 ,牙槽骨改建活跃 ,有大量的骨吸收陷窝及破骨细胞 ,并有新骨形成和成骨细胞出现 ,30 d后仅表现为大量的骨吸收陷窝及破骨细胞 ,无成骨现象 ,且以联合应用 IL - 1-β、TNF-α组最为显著。结论 :IL - 1-β、TNF-α在建立牙周炎动物模型中有重要作用。     

槲皮素通过干扰破骨细胞的分化和活性抑制骨吸收

为探讨槲皮素抑制骨吸收的靶细胞和作用机理,作者研究了该化合物对破骨细胞分化和活性的作用。 1)槲皮素抑制破骨细胞样多核细胞(OCL)的作用。在1α,25-二羟基维生素D_3存在情况下,将鼠脾细胞和ST2细胞与槲皮素共同培育8天,显示槲皮素可以剂量相关方式抑制OCL的形成,IC_(50)约3μmol/L,5     

白细胞介素1刺激破骨细胞性骨吸收作用的实验研究

目的：了解白细胞介素1β（IL－1β）在破骨细胞性骨吸收中的刺激作用及其相应的作用机制。方法：分别将新生大鼠破骨细胞单独以及和成骨细胞联合接种于预置象牙片的培养板中。24h后培养液中加入不同浓度的IL－1β。继续培养48h,然后取出象牙片,超声处理后行甲苯胺蓝染色,光镜下观察骨吸收陷窝的数目并计算其部面积。结果：IL－1β能够明显增加坡骨细胞和成骨细胞联合培养组象牙片上吸收陷窝的数目和面前,且刺激作用呈剂量依赖性,但对单独培养的破骨细胞无明显刺激作用。结论：IL－1β的刺激骨吸收作用由成骨细胞所介导,而非直接作用于破骨细胞。     

上皮钠离子通道对大鼠破骨细胞分化和骨吸收功能的影响

目的本文探讨上皮钠离子通道（ENaC）对破骨细胞功能和活性的影响。方法采用大鼠巨噬细胞集落刺激因子和核转录 因子-κB受体活化因子配体诱导大鼠骨髓单核细胞使其分化为破骨细胞。以1.5×104密度接种到12孔板,查随机表分3孔为1 组,分为4组：Control组和不同浓度阿米洛利（Ami, ENaC的抑制剂）组。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色进行阳性破骨细胞 鉴定;将破骨细胞和骨片共同培养,测定骨吸收陷窝的数目;用RT-PCR技术分析破骨细胞标志酶基因组织蛋白酶K（CK）的表 达。结果不同浓度的Ami处理破骨细胞后,TRAP染色阳性破骨细胞减少,抑制破骨细胞的形成和骨吸收,而且降低破骨细胞 特异性基因CK的表达。结论本次实验在细胞水平证明ENaC在破骨细胞上的表达并且调控破骨细胞的分化和骨吸收,说明 ENaC可能参与破骨细胞的功能调节,提示破骨细胞可能存在一个与ENaC相关调节的新途径,为骨代谢的研究提供了一个新 思路。     

钛离子对破骨细胞形成及功能的影响*

目的 研究钛离子对破骨细胞的影响,初步探讨钛离子与种植体周无菌性骨吸收的关系.方法 分别用常规培养基和加入钛离子的培养基诱导破骨细胞,并与破骨细胞在牙本质磨片上联合培养48 h,检测钛离子对破骨细胞形成的影响,并检测破骨细胞在牙本质磨片上的骨吸收陷窝.结果常规培养基和钛离子培养基诱导的破骨细胞数目分别为5.4±1.9和 11.6±2.7,而在牙本质上的骨吸收险窝面积百分比分别为(12.6±2.9)%和(41.2±4.0)%.结论钛离子可促进破骨细胞形成,并增强了其骨吸收功能.     

饲补肾中药大鼠血清对成骨细胞-破骨细胞共育系中破骨细胞功能的影响

目的探讨喂饲补肾中药大鼠血清在成骨细胞-破骨细胞培养体系中对破骨细胞骨吸收功能的影响。方法取SD大鼠的胎鼠颅骨与四肢骨分别分离、培养成骨细胞和破骨细胞,利用共育系使二者生活在同一环境中,施加高、中、低剂量的饲补肾中药大鼠血清,并与对照组及单独培养的破骨细胞进行比较,酶动力学法测定培养上清中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的活性,利用甲苯胺蓝对骨吸收陷窝染色并在Leica Quantimet 500图像分析仪下测定骨吸收陷窝的面积和数目。结果共育系中对TRACP活力的抑制及骨陷窝面积与数目的减少以中剂量组作用最为明显(与对照组比较P<0.01),单独培养3个剂量组与对照组比较均有显著性差异(P<0.05),以中剂量组作用最为明显(P<0.01)。结论饲补肾中药大鼠血清可以抑制共育系中破骨细胞的骨吸收功能。     

体外破骨细胞性骨吸收陷窝的动态观察

动态观察破骨细胞的功能及药物的作用。采用体外破骨细胞培养法、显微摄影、显微光密度仪及图像分析等技术。结果表明，破骨细胞具有不规则的移行性，在一定时间范围内，随着培养时间的延长，破骨细胞性骨吸收陷窝不断增多与增大，并呈不规则形状。国产帕屈磷酸钠（ＡＰＤ）可直接抑制骨吸收陷窝的数目及表面积。提示动态观察体外破骨细胞性骨吸收陷窝形态变化的方法是一种直观、简便、稳定和能反映药物作用的方法。     

机械牵张力对破骨细胞的影响

骨的生长或吸收由成骨细胞及破骨细胞共同控制,而破骨细胞在骨的吸收过程中起主要的作用;破骨细胞的增多与减少与机械牵张力的作用密切相关,改变不同机械牵张力,包括机械振动、压载荷、力学拉伸力和流体剪切力等,对破骨细胞作用的时间、强度等,即可改变破骨细胞的相应特性,从而改变破骨细胞的功能活性。研究牵张力与破骨细胞的关系,将使牵张力在临床工作中的治疗作用得到重视。     

IL-1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究

目的：比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法：体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察ＩＬ１α（５０μｇ／Ｌ，１００μｇ／Ｌ）对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果：ＩＬ１α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加；其作用随剂量增加而增强；ＩＬ１α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论：ＩＬ１α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。     

整合素αVβ5在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义

目的：探讨整合素αVβ5在卵巢上皮性癌中的表达及其与微血管密度(microvessel density,MVD)和临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学PV两步法,分别测定15例正常卵巢组织、15例良性卵巢上皮性肿瘤、10例交界性卵巢上皮性肿瘤、57例卵巢上皮性癌组织中整合素αVβ5的表达及MVD。结果：(1)卵巢上皮性癌中整合素αVβ5的阳性率及MVD值高于正常卵巢组织、良性卵巢上皮性肿瘤和交界性卵巢上皮性肿瘤(P＜0.01);(2)卵巢上皮性癌中整合素αVβ5的阳性率及MVD值随临床分期、组织分级的升高而增加(P＜0.05);(3)卵巢上皮性癌中整合素αVβ5的表达强度与MVD值之间呈正相关(r=0.545,P＜0.05);(4)卵巢上皮性癌中整合素αVβ5表达阳性组患者的生存率明显低于整合素αVβ5表达阴性组(P＜0.05)。结论：整合素αVβ5可能通过介导血管新生参与卵巢上皮性癌的发生、发展、侵袭和转移,整合素αVβ5是卵巢上皮性癌患者的不良预后指标。     

二磷酸盐在抑制聚乙烯微粒刺激破骨细胞骨吸收中的作用

目的:研究帕米磷酸钠对聚乙烯微粒刺激破骨细胞功能的影响,探讨帕米磷酸钠防治人工关节无菌性松动的可能性.方法:分离新生新西兰兔长骨中的破骨细胞与骨片共同培养.观察帕米磷酸钠、聚乙烯微粒对破骨细胞功能的影响.观察不同剂量的聚乙烯微粒对破骨细胞的影响;观察聚乙烯微粒与帕米磷酸钠共同培养对破骨细胞的作用.结果:三种浓度的微粒(103/ml、106/ml和109/ml)与破骨细胞共培养后都能够刺激破骨细胞的骨吸收,10μg/ml的帕米磷酸钠可以抑制聚乙烯微粒对破骨细胞骨吸收的增强作用.结论:帕米磷酸钠可以抑制聚乙烯微粒对破骨细胞的刺激作用,可能用于防治人工关节无菌性松动.